1Η) ，6. 73 (d, 1H)，5. 69 (S, 1H)，5. 39 (S, 1H)，4. 00 (t, 2H)，3. 93 (S, 3H)，2. 38 (q, 2H)，1. 99-2. 06 (m，2H);EI-MS:m/z:335.9[]\Hl]。
[0285] 實(shí)施例58、巧)-3-氯-1-(3-化5-二甲氧基-4-(2-嗎晰己氧基）苯基）丙帰醜 基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0286]
[0287]將70mg巧)-3-氯-1- (3- (4-居基-3, 5-二甲氧基苯基）帰丙醜基）-6, 7-二 氨-1H-氮雜-2巧H)-麗、105mgΗ苯基麟、52. 5mgN-嗎啡晰基己醇混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加 入8mL無水四氨巧喃，冷卻到(TC，滴加83mgDIAD。升溫至室溫，攬拌反應(yīng)過夜，濃縮，柱純 化得 44mg黃色固體，收率 44. 2%。電NMR(CDCl3,600MHz)δ:7. 73化 1H)，7. 36化 1H)，6. 7 7-6. 80 (m, 3H), 4. 14 (t, 2H), 4. 00 (t, 2H), 3.86(s,6H), 3. 75-3. 76 (m, 4H), 2. 81 (t, 2H), 2. 61 -2. 64 (m, 4H)，2. 35-2. 39 (m, 2H)，2. 00-2. 03 (m, 2H) ;EI-MS:m/z:465.8[Μ+ΗΓ。
[028引實(shí)施例59、巧)-3-氯-1- (3-化5-二甲氧基-4- (3- (N，N-二甲基氨基）丙氧基） 苯基）丙帰醜基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0289]
[0290] 按照實(shí)施例58的方法，W3-(N，N-二甲基）丙醇代替N-嗎啡晰基己醇為原料，可 得±黃色固體，收率 37.6%。咱NMR(CDCl3,600MHz)δ:7. 69化 1H)，7. 35化 1H)，6. 77 扣 1 H),6. 75 (s, 2H), 4. 05 (t, 2H), 3. 97 (t, 2H), 3. 84 (s,6H), 3. 36 (t, 2H), 2. 83 (s,6H), 2. 34-2. 3 6(m, 2H), 2. 24-2. 27(m, 2H), 1. 97-2. 00(m, 2H) ;EI-MS:m/z:437.6[Μ+ΗΓ。
[02川 實(shí)施例60、巧)-3-氯-1-(3-化5-二甲氧基-4-(2-(4-甲基脈嗦-1-基）己氧 基）苯基）丙帰醜基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0292]
[029引按照實(shí)施例58的方法，W2- (4-甲基脈嗦）己醇代替N-嗎啡晰基己醇為原料，可 得±黃色固體，收率 23. 5%。電NMR(CDCl3,600MHz)δ:7. 72化 1H)，7. 38化 1H)，6. 79(s，2 Η),6. 73 (t,IH), 4. 14-4. 17 (m, 2H), 4. 00-4. 02 (m, 2H), 3.86(s,6H), 2. 93-3. 02 (m,lOH), 2.8 2(s, 3H), 2. 36-2. 41(m, 2H), 1. 98-2. 10(m, 2H) ;EI-MS:m/z:478. 3[Μ+ΗΓ。
[0294] 實(shí)施例61、巧)-3-氯-1-(3-化5-二甲氧基-4-(2-脈巧己氧基）苯基）丙帰醜 基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0295]
[0296] 按照實(shí)施例58的方法，WN-脈巧己醇代替N-嗎啡晰基己醇為原料，可得±黃色 固體，收率 23. 9%。電NMR(CDCl3,600MHz)δ:7. 72化 1H，），7. 39化 1H)，6. 80(t, 1H)，6. 78 (s, 2H), 4. 43 (t, 2H), 4. 00 (t, 2H), 3.88(s,6H), 3. 33-3. 36 (m, 2H), 2. 36-2. 40 (m, 2H), 2. 08-2. 11 (m，4H), 1.99-2. 02 (m，2H), 1.65-1.68(m，6H) ;EI-MS:m/z:463. 3 [Μ+ΗΓ。
[0297] 實(shí)施例62、似-3-氯-1-(3-化5-二甲氧基-4-(2-(1-甲基化咯焼-2-基）丙帰 醜基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0298]
[0299] 按照實(shí)施例58的方法，W2-(1-甲基化咯焼2-基）己醇代替N-嗎啡晰基己醇 為原料，可得±黃色固體，收率 17. 3%/HNMR(CDCl3, 300MHz)δ:7.68化 1H), 7. 35化 1H) ，6. 77 (t, 1Η)，6. 74 (S, 2Η)，4. 18-4. 24 (m, 2Η)，3. 96 (t, 2Η)，3. 83 (S,細(xì)），2.82(3,3巧，2.44-2. 47 (m, 3田，2. 20-2. 31 (m, 2H)，2. 03-2. 10 (m, 2H)，1. 91-2. 00 (m, 2H)，1. 20-1. 30 (m, 4H);EI-MS:m/z:463. 5[M+H]+。
[0300] 實(shí)施例63、3-漠-1-(1- 了基-6-居基-5, 7-二甲氧基-IH-日引Π朵-2-撰 基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0301]
[0302] 按照實(shí)施例56的方法，W3-漠-1-(1- 了基-5,6, 7-二甲氧基-1H-日引巧-2-撰 基）-6,7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗代替巧)-3-氯-1-(3-化4, 5-Η甲氧基苯基） 丙帰醜基）-6, 7-二氨-1Η-氮雜卓-2巧Η)-麗為原料，可得±黃色固體，收率48. 3 %， 'HNMR(CDCl3, 300MHz)δ：7. 17 (t,IH),6. 72 (s,IH),6. 62 (s,IH), 4. 57-4. 62 (m, 2H), 4. 02 (s, 3H)，3. 95 (t, 2H)，3. 90 (s, 3H)，3. 85 (s, 3H)，2. 56-2. 63 (m, 2H)，2. 02-2. 10 (m, 2H,邸2)，1. 77 -1.88(m, 2H)，1. 32-1. 44 (m, 2H)，0. 95 (t, 3H) ;EI-MS:m/z: 467.8[M+H] +。
[0303] 實(shí)施例64、巧)-4- (3- (6-氯-7-氧代-2, 3, 4, 7-四氨-IH-氮雜卓-1-基）-3-氧 代丙-1-帰基）-2,6-二甲氧基苯基己酸醋的制備
[0304]
[0305] 將70mg巧)-3-氯-1- (3- (4-居基-3, 5-二甲氧基苯基）帰丙醜基）-6, 7-二 氨-1H-氮雜-2巧H)-麗溶解在10血二氯甲焼中，加入22mgΗ己胺，冷卻到0°C。然后滴 加17. 3mg己醜氯,室溫攬拌反應(yīng)1小時。加入20血水，分貿(mào)有機(jī)層，水層_氯甲焼華·取2 次。合并有機(jī)層，鹽洗，無水硫酸鋼干燥，濃縮，柱純化得46mg白色固體，收率58.3%。古 NMR(CDCI3, 300MHz)δ： 7. 75 (d,IH), 7. 4 (d,IH),6. 78-6. 82 (m, 3H), 4. 02 (t, 2H), 3. 87 (s,6H )，2. 36-2. 41 (m, 5H)，2. 00-2. 05 (m, 2H) ;EI-MS:m/z: 394. 1 [M+H] +。
[0306] 實(shí)施例65、3-氯-1-(哇晰-3-撰基）-6, 7-二氨-IH-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0307]
[030引按照實(shí)施例3的方法，W哇晰-3-駿酸代替3,4,5-Η甲氧基肉桂酸為原料，得 120. 9mg淺黃色固體，收率 80. 4%/ΗNMR:(CDCl3,300MHz)δ:8. 95(d，lH)，8. 40(d，lH)，8. 15 (d,IH)，7. 91 (d,IH)，7. 79-7. 85 (m，IH)，7. 60-7. 65 (m,IH)，6. 97 (t,IH)，4. 14 (t, 2H)，2.6 2-2. 70(m, 2H), 2. 10-2. 19(m, 2H) ;EI-MS:m/z:301. 27[M+田+。
[0309] 實(shí)施例66、3-漠-1-(哇晰-3-撰基）-6, 7-二氨-IH-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0310]
[031。 按照實(shí)施例3的方法，W3-漠-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗和哇晰-3-駿酸 替代3-氯-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗和3, 4, 5-Η甲氧基肉桂酸為原料，得138. 2mg淺黃色固體，收率80. 1%/HNMR: (CDCl3,300MHz)δ:8. 94(d, 1H)，8. 40(d, 1H)，8. 14(d, 1H) ,7. 81 (d,IH), 7. 59-7. 64 (m,IH), 7. 18 (t,IH), 4. 12 (t, 2H), 2. 57-2. 64 (m, 2H), 2. 10-2. 17(m，2H) ;EI-MS:m/z:：M5. 4[Μ+ΗΓ。
[031引實(shí)施例67、3-氯-1-(2-苯基環(huán)丙基撰基）-6, 7-二氨-IH-氮雜卓-2巧Η) -麗的 制備
[031 引
[0314] 按照實(shí)施例3的方法，W2-苯基環(huán)丙基駿酸代替3,4, 5-Η甲氧基肉桂酸為 原料，得 101. 7mg類白色固體，收率 70. 2%/ΗNMR(300MHz，CDCl3)δ:7. 26-7. 32(2H，m ),7. 16-7. 21 (3H,m),6. 77 (t,IH), 3. 90-3. 96 (m, 2H), 3. 10-3. 16 (m,IH), 2. 65-2. 72 (m, 1 田；2. 33-2. 41(m, 2H), 1. 93-2. 02(m, 2H), 1. 76-1. 80(m,IH), 1. 39-1. 46(m,IH) ;EI-MS:m/ z:316.1[M+H20]。
[031引實(shí)施例68、巧)-3-氯-1-(3-(化巧-3-基）丙帰醜基）-6,7-二氨-IH-氮雜 卓-2巧H)-麗的制備
[0316]
[0317] 按照實(shí)施例3的方法，W1-(3-化巧基）丙帰酸代替3,4,5-H甲氧基肉桂酸為原 料，得 98.7111邑±黃色固體，收率 71.3%/HNMR(300MHz，CDCl3)δ:8.78(s,lH)，8.62(d, 1H) ,7. 94 (d,IH), 7. 73 (d,IH), 7. 54 (d,IH), 7. 33-7. 37 (m,IH),6. 82 (t,IH), 4. 02 (t, 2H), 2. 39 (q, 2H), 1. 99-2. 08(m, 2H) ;EI-MS:m/z:277. 4[Μ+ΗΓ。
[0318] 實(shí)施例69、巧)-1-(3-(3, 4, 5-H甲氧基苯基）丙帰醜基）-6,7-二氨-IH-氮雜 卓-2巧H)-麗的制備
[0319]
[0320] 按照實(shí)施例3的方法，W6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗代替 3-氯-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗為原料，得112. 9mg±黃色固體，收率67.8%， 'HNMR: (CDCI3, 300MHz)δ：7. 71 (d,IH), 7. 39 (d,IH),6. 81 (s, 2H,Ph),6. 54-6. 58 (m,IH),6. 13 (d,IH)，4. 01 (t, 2H)，3. 90 (s,細(xì)），3. 89 (s, 3H)，2. 43 (q, 2H)，1. 98-2. 06 (m, 2H).EI-MS:m/ z:332. 1[M+H]\
[0321] 實(shí)施例70、3-漠-1- (1- 了基-6-居基-5, 7-二甲氧基-6- (2- (4-甲基脈嗦-1-己 氧基）-1H-日引巧-2-撰基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0322]
[0323] 按照實(shí)施例58的方法，W3-漠-1-(1- 了基-6-居基-5, 7-二甲氧基-1H-剛 巧-2-撰基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2 05H)-麗和2-(4-甲基脈嗦）己醇代替 巧)-3-氯-1- (3- (4-居基-3, 5-二甲氧基苯基）帰丙醜基）-6, 7-二氨-1H-氮雜-2巧H)-麗 和N-嗎啡晰基己醇為原料，可得±黃色固體，收率17. 9%，iHNMR(CDCl3,300MHz)δ:7. 17(t ，IH)，6. 72 (s,IH)，6. 62 (s,IH)，4. 57-4. 62 (m, 2H)，4. 02 (s, 3H)，3. 95-4. 12 (m, 4H)，3. 90 (s, 3H), 3. 85 (s, 3H), 2. 93-3. 02 (m,lOH), 2. 56-2. 63 (m, 2H), 2. 36-2. 41 (m, 2H), 2. 02-2. 10 (m, 2 H,邸2)，1. 77-1.88(m, 2H)，1. 32-1. 44 (m, 2H)，0. 95 (t, 3H)。
[0324] 實(shí)施例71、3-漠-1- (1- 了基-6-居基-5, 7-二甲氧基-6- (3- (N，N-二甲基氨基） 丙氧基）-1H-日引巧-2-撰基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[0325]
[0326] 按照實(shí)施例58的方法，W3-漠-1-(1- 了基-6-居基-5, 7-二甲氧基-1H-剛 巧-2-撰基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗和3-化N-二甲基）丙醇代替 巧)-3-氯-1-(3-(4-居基-3, 5-二甲氧基苯基）帰丙醜基）-6, 7-二氨-1H-氮雜-2巧H)-麗 和N-嗎啡晰基己醇為原料，可得±黃色固體，收率13. 3%，iHNMR(CDCl3,300MHz)δ:7. 17(t ,IH),6. 72 (s,IH),6. 62 (s,IH), 4. 57-4. 62 (m, 2H), 4. 02 (m, 5H), 3. 95 (t, 2H), 3. 90 (s, 3H), 3 .85 (s, 3H)，2. 83 (s,6H)，2. 56-2. 63 (m, 4H)，1. 97-2. 10 (m, 4H)，1. 77-1.88(m, 2H)，1. 32-1. 4 4 (m, 2H)，0. 95 (t, 3H)。
[0327] 實(shí)施例72、3-漠-1- (1- 了基-6-居基-5, 7-二甲氧基-6- (2-嗎晰己氧基）-IH-剛 巧-2-撰基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗的制備
[032引
[0329] 按照實(shí)施例58的方法，W3-漠-1-(1- 了基-6-居基-5, 7-二甲氧基-1H-剛 巧-2-撰基）-6, 7-二氨-1H-氮雜卓-2巧H)-麗代替巧)-3-氯-1- (3- (4-居基-3, 5-二 甲氧基苯基）帰丙醜基）-6, 7-二氨-1H-氮雜-2巧H)-麗為原料，可得±黃色固體，收率 21.2%/HNMR(CDCl3, 300MHz)δ：7. 17 (t,IH),6. 72 (s,IH),6. 62 (s,IH), 4. 57-4. 62 (m, 2H), 4. 14 (t, 2H)，4. 02 (s, 3H)，3. 95 (t, 2H)，3. 90 (s, 3H)，3. 75-3. 76 (m, 4H)，3. 85 (s, 3H)，2. 81(t ，2H)，2. 56-2. 63 (m,6H)，2. 02-2. 10 (m, 2H,邸2)，1. 77-1.88(m, 2H)，1. 32-1. 44 (m, 2H)，0. 95 a, 3H)。
[0330] 實(shí)施例73 ;本發(fā)明化合物的抗腫瘤活性試驗(yàn)
[0331] 對本發(fā)明的化合物進(jìn)行了腫瘤細(xì)胞增殖抑制試驗(yàn)，試驗(yàn)方法采用常規(guī)的Μ?Τ法 (如目秋軍主編《新藥藥理學(xué)研究方法》，2007 =242-243)。
[033引細(xì)胞株選用A549 (人肺癌細(xì)胞）、MDA-MB-231 (人乳腺癌細(xì)胞）、肥T116 (人腸癌細(xì) 胞）、化p3B(人肝癌細(xì)胞）、化pG2 (人肝癌細(xì)胞）、Saos-2 (人成骨肉瘤細(xì)胞）、U20S(人骨 肉瘤細(xì)胞）、SK-Hep-1 (人肝癌細(xì)胞）、化La(人宮頸癌細(xì)胞）、WI38 (人胚肺成纖維細(xì)胞）。 由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院藥理實(shí)驗(yàn)室凍存和傳代。培養(yǎng)液為RPMI1640+15%NBS+雙抗。
[0333] MTT溶液配制；稱取MTT0. 5克，溶于lOOmL的磯酸緩沖液（PB巧或無酪紅的培養(yǎng) 基中，用0.22μm濾膜過濾W除去溶液里的細(xì)菌，放4°C避光保存。
[0334] 樣品液配制；用DMS0 (Merck)溶解后，加入PBS(-)配成100μg/mL的溶液或均勻 的混懸液，然后用DMS0的PBS(-)稀釋，最終濃度分別為10μg/mL、lμg/mL、0. 1μg/mL、 0. 01μg/mL、0. 001μg/mL、0. 0001μg/mL。將已獲確認(rèn)的抗腫瘤化合物革拔醜胺（參照文 獻(xiàn)Design,synthesis曰ndbiologic曰1曰ctivityofpiperlonguminederiv曰tives曰s selectiveanticanceragents.E；urJMedQiem. 2014, 82:545-51 方法合成）W同樣的條 件配成對照品溶液。
[0335] MTT法；96孔板每孔加入濃度為4-6X104個/mL的細(xì)胞懸液100μ以置37 °C，5% C〇2培養(yǎng)箱內(nèi)。24h后，加入樣品液，10μL/孔