一種食藥用真菌多糖低溫常壓等離子提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種食、藥用真菌中有效成分的提取方法，特別是一種食藥用真菌多糖低溫常壓等離子提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]食藥用真菌多糖一般指從食藥用真菌的子實(shí)體、菌絲體、發(fā)酵液中分離出的、由10個(gè)以上單糖單元構(gòu)成的高分子聚合物。在國際上，食藥用真菌多糖被稱為“生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑”(B1logical ResponseModifier,簡稱BRM)?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，它是一類具有抗感染、抗輻射、抗凝血、降血糖、預(yù)防和治療腫瘤、抗疲勞等多種生物學(xué)功能，是重要的天然藥用活性成分和保健食品。近年來隨著生物化學(xué)、生物工程、生物高分子研究這些新技術(shù)、新方法的不斷出現(xiàn)，使得國內(nèi)外對食藥用真菌多糖的研究迅速發(fā)展起來。從近年來國內(nèi)外有關(guān)藥用真菌多糖的研究報(bào)道看，目前的熱點(diǎn)主要集中在:藥用真菌的營養(yǎng)與生理學(xué)活性研究；藥用真菌多糖的結(jié)構(gòu)分析；藥用真菌的栽培技術(shù)；藥用真菌多糖的提取、純化工藝研究等。雖然人們已對真菌多糖的結(jié)構(gòu)、生物活性、藥理功能等方面進(jìn)行了較為廣泛和深入的研究，但如何高效提取各真菌多糖急需進(jìn)一步研究。
[0003]目前，天然真菌多糖類藥物的制備方法主要有熱水、酸、堿浸提取等方法。這些方法在生產(chǎn)過程中都會發(fā)生有機(jī)溶劑的不斷揮發(fā)，造成能源浪費(fèi)、資金浪費(fèi)和環(huán)境污染。近年來國內(nèi)也有報(bào)道采用離子交換層析分離純化真菌多糖，柱層析介質(zhì)多采用國產(chǎn)的大孔徑離子交換樹脂，其特點(diǎn)是動態(tài)分離效果好、連續(xù)化程度高、運(yùn)行周期短、樹脂可再生重復(fù)利用、設(shè)備簡單，是一經(jīng)濟(jì)有效的方法。
[0004]國家知識產(chǎn)權(quán)局于2009.8.26公開了一件申請?zhí)枮?00910010855.1，名稱為“連續(xù)ΡΒ0纖維增強(qiáng)雙馬來酰亞胺樹脂基復(fù)合材料的界面改性方法”的發(fā)明專利，該專利公開了一種連續(xù)ΡΒ0纖維增強(qiáng)熱固性BMI樹脂的界面改性方法，是為解決目前纖維增強(qiáng)樹脂基復(fù)合材料結(jié)構(gòu)表面光滑，活性基團(tuán)少，和樹脂基體的粘結(jié)性差等技術(shù)問題而設(shè)計(jì)的，其解決方案:ΡΒ0纖維在等離子體處理裝置中，采用低溫等離子體技術(shù)對纖維進(jìn)行表面改性，改性后的纖維與樹脂基體的粘結(jié)性得到很大改善，界面性能大大提高，復(fù)合材料層間剪切強(qiáng)度進(jìn)一步增強(qiáng)，力學(xué)性能優(yōu)異。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種食藥用真菌多糖低溫常壓等離子提取方法，提取周期縮短，溶劑用量少，生產(chǎn)效率高，節(jié)能降耗，提取純度較高。
[0006]本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn):
一種食藥用真菌多糖低溫常壓等離子提取方法，包括以下工藝步驟:
A、吸附樹脂預(yù)處理:
將1.6cmX 100cm的S5428陰離子樹脂用去離子水浸泡后，裝柱，用去離子水平衡樹月旨，直到流出的液體不渾濁； B、真菌多糖初步提取:
(1)原料粉碎與提取劑混合
將提取制備真菌多糖的原料洗凈、低溫干燥后，粉碎成70?6000u m的顆粒，將其與提取劑按質(zhì)量比1:3?1:10進(jìn)行混合均勻；
(2)提取
將上述原料與提取劑混合液在多功能多級溶媒循環(huán)動態(tài)熱回流提取器中進(jìn)行熱回流提取，提取溫度45?100°C，pH=5?8，溶劑回流率10?25%的條件下回流提取50?100分鐘，得提取液；
(3)過濾與濃縮
將上述提取一定時(shí)間的提取液通過二級絲網(wǎng)過濾器或離心過濾后直接真空輸送到外循環(huán)加熱式雙效真空濃縮器中，在真空度0.02-0.09MPa，溫度40?90°C條件下濃縮2?4小時(shí)，使?jié)饪s液的密度達(dá)1.1?1.40g/cm3 ;
(4)醇沉
將上述濃縮液栗入醇沉罐，按體積比加入3?5倍97%酒精攪拌均勻后靜置50?150分鐘，獲得醇沉提取物，所用的酒精為食用級以上；
C、低溫常壓等離子提取:
將步驟B(4)得到的醇沉提取物放入低溫常壓等離子處理裝置中，用以下工藝參數(shù)進(jìn)行處理，得到食藥用真菌多糖粗品:放電頻率為5?30KHz ;提取時(shí)間為5?13s ;放電氣體為氨氣，流速為0.5?5ml / min ；
D、大孔吸附樹脂提取
將步驟C得到的食藥用真菌多糖粗品加水，濕法上步驟A中的大孔吸附樹脂柱，依次用濃度為0.5、1.0、2.0、3.0mol /L和4.0 mol /L的NaCl溶液進(jìn)行洗脫，洗脫的速度為
2.0?10.0ml / min ;將洗脫液減壓濃縮，得到食藥用真菌多糖大孔吸附樹脂提取物；
E、醇沉
將步驟D得到的真菌多糖大孔吸附樹脂提取物栗入醇沉罐，按體積比加入2倍95%食用級以上酒精攪拌均勻后靜置30分鐘；
F、干燥
將步驟E醇沉物按質(zhì)量比加入3倍的蒸餾水或其它溶劑攪拌使其溶解，然后，在真空度0.01?0.090MPa，溫度60°C條件下真空干燥后，可得到得率達(dá)9.006%, 8.829%，8.985%，含糖量達(dá)12.87%，13.45%，13.64%的多糖產(chǎn)品。
[0007]所述提取制備真菌多糖的原料為香菇、猴頭菇、靈芝、黑木耳、灰樹花、銀耳、金針菇等含有多糖化合物的食、藥用真菌中的任意一種或幾種的組合。
[0008]所述提取劑是指水、乙醇、丙酮、乙醚、堿、酸、鹽等用于提取制備真菌多糖的物質(zhì)。
[0009]所述B(2)步驟中多級溶媒循環(huán)動態(tài)熱回流提取為根據(jù)需要1?3級任意可調(diào)，既可在提取時(shí)單獨(dú)進(jìn)行1級溶媒循環(huán)動態(tài)熱回流，又可在單效濃縮時(shí)進(jìn)行2級溶媒循環(huán)動態(tài)熱回流，還可在雙效濃縮時(shí)進(jìn)行3級溶媒循環(huán)動態(tài)熱回流。
[0010]所述(3)的步驟過濾與濃縮中的過濾是采用目數(shù)為60?200目的二級不銹鋼絲網(wǎng)過濾或管式或三足式離心機(jī)過濾。
[0011]所述(5)干燥步驟中冷凍真空干燥是在真空度25?lOOPa，溫度20?40°C條件下冷凍真空干燥；或真空干燥是在真空度0.01?0.085MPa，溫度45?75°C條件下的真空干燥。
[0012]本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明的一種食藥用真菌多糖低溫常壓等離子提取方法，提取周期縮短，溶劑用量少，生產(chǎn)效率高，節(jié)能降耗，提取純度較高的食藥用真菌多糖的大孔徑離子交換樹脂和一種低溫常壓等離子提取工藝相結(jié)合的提取方法。這里需要說明的是低溫常壓等離子處理工藝僅應(yīng)用于材料表面改性處理，在保證不會改變真菌多糖結(jié)構(gòu)和功效的同時(shí)，能夠高效的提取制備出純度高的食藥用真菌多糖。
【具體實(shí)施方式】
[0013]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所述描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。在這些實(shí)施例中所有原料比例均按質(zhì)量比計(jì)。
[0014]實(shí)施例1
一種食藥用真菌多糖低溫常壓等離子提取工藝，其特征在于:包括以下工藝步驟:
A、吸附樹脂預(yù)處理
將1.6 cmX10 cm的S5428樹脂用去離子水浸泡后，裝柱，用去離子水平衡樹脂，直到流出的液體不渾濁；
B、真菌多糖初步提取
(1)原料粉碎與提取劑混合
將提取制備真菌多糖的原料洗凈、低溫干燥，粉碎成100?10000 u m的顆粒，將其與提取劑按質(zhì)量比1:4?1:10進(jìn)行均勻混合；
(2)提取
將上述原料與提取劑混合液在多功能多級溶媒循環(huán)動態(tài)熱回流提取器中進(jìn)行熱回流提取，提取溫度65?110°C，pH=6?9，溶劑回流率10?25%的條件下回流提取70?120分鐘；
(3)過濾與濃縮
將上述提取液離心過濾后直接真空輸送到外循環(huán)加熱式雙效真空濃縮器中，在真空度0.03?0.08MPa，溫度50?95°C條件下濃縮2?4小時(shí)，使?jié)饪s液的密度達(dá)1.2?1.50g/cm3；
(4)一次醇沉
將上述濃縮液栗入醇沉罐，按體積比加入4?6倍97%酒精攪拌均勻后靜置90?180分鐘，獲得醇沉提取物，所用的酒精為食用級以上；
C、低溫常壓等離子提取
將步驟B(4)得到的醇沉提取物放入低溫常壓等離子處理裝置中，用以下工藝參數(shù)進(jìn)行處理:放電頻率為5?30KHz ;提取時(shí)間為5?13s ;放電氣體為氨氣，流速為0.5?5ml /min，獲得食藥用真菌多糖粗品；
D、大孔吸附樹脂提取
將步驟C得到的食藥用真菌多糖粗品加水，濕法上步驟A中的大孔吸附樹脂柱，依次用濃度為0.5、1.0、2.0、3.0mol /L和4.0 mol /L的NaCl溶液進(jìn)行洗脫，洗脫速度為2.0?10.0ml / min。將洗脫液減壓濃縮，得到食藥用真菌多糖大孔吸附樹脂提取物；
E、二次醇沉
將步驟D得到的真菌多糖大孔吸附樹脂提取物栗入醇沉罐，按體積比加入5倍97%食用級以上。酒精攪拌均勻后靜置100分鐘；
F、干燥
將步驟E醇沉物按質(zhì)量比加入3倍的蒸餾水或其它溶劑攪拌使其溶解，然后，在真空度0.03?0.09MPa，溫度60°C條件