一種從柑橘小果、皮中提取橙皮苷和新橙皮苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物提取領(lǐng)域，尤其是一種從柑橘小果、皮中提取黃酮的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]柑橘是蕓香科柑橘屬重要的植物，主要是利用其果肉而很少對(duì)小果和果皮進(jìn)行綜合利用。橙皮苷(Hesperidin)是柑橘果皮中的天然黃酮類(lèi)化合物，采用堿浸酸析法從臍橙中提取出的橙皮苷純度為80.3%，得率為1.55%。新橙皮苷(Neohesperidin)是由橙皮素與新橙皮糖形成的糖苷，目前提取新橙皮苷的方法包括超聲輔助提取法、索氏提取法、和水浴回流提取法。辛弗林(Synephrine)是枳實(shí)生物堿類(lèi)物質(zhì)的主要成分，辛弗林的含量隨著柑橘果實(shí)的成熟而減少，因此一般選取未成熟的果實(shí)即落果來(lái)作為提取原料；辛弗林的提取方法有加熱回流法、超聲提取法和微波提取法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種高效從枳實(shí)小果和柑橘皮混合物中同時(shí)提取分離橙皮苷、新橙皮苷的方法，將柑橘皮和枳實(shí)小果干燥、粉碎，按2:1比例混合后，用水滲漉提?。蝗缓笕∷幵M(jìn)行橙皮苷提取，橙皮苷含量可達(dá)98%以上，收率為4.0%以上；取滲漉液進(jìn)行新橙皮苷提取，得到新橙皮苷提取物含量達(dá)88%以上，收率為2.2%以上。為了解決該技術(shù)問(wèn)題，本專(zhuān)利具體實(shí)施步驟如下:
一、柑橘皮、苦橙枳實(shí)小果前處理
收集柑橘皮、干燥、粉碎，過(guò)篩，備用；收集枳實(shí)小果干燥、粉碎，過(guò)篩，備用。將柑橘皮粉和枳實(shí)小果粉按質(zhì)量比2:1比例混合，置于提取罐中，按料液比1:(10-30)的比例，用0-30%的乙醇水溶液進(jìn)行滲漉提取，控制溫度40-45°C，滲漉提取10-12h ;過(guò)濾；然后往濾液中添加0.01-0.1%的果膠酶，50 °C下攪拌30min，然后將溫度調(diào)到70 °C，處理15_30min，將果膠酶殺滅；然后過(guò)濾，將藥渣和濾液分離；藥渣用于橙皮苷提取，濾液用于新橙皮苷提取。
[0004]所述過(guò)篩的篩網(wǎng)為10目、或者60目、或者100目；
所述滲漉提取可以進(jìn)行3次。
[0005]二、橙皮苷提取、分離、純化
將上述藥渣用pH值為10.0-11.0堿液浸泡，進(jìn)行提??；所得提取液用HC1調(diào)至pH值為2.0-3.0，放置，沉淀；將沉淀用水洗滌至中性，以料液比1: (50-60)g/mL加入甲醇，用稀NaOH溶液調(diào)體系pH為10.0-11.0，30°C下反應(yīng)30min，常壓過(guò)濾，再用稀鹽酸調(diào)濾液pH為3.0-5.0，在15°(:以下靜置1211重結(jié)晶；重結(jié)晶后的晶體即為橙皮苷產(chǎn)品。該產(chǎn)品中橙皮苷含量可達(dá)98.0%，橙皮苷收率為4.0%以上。
[0006]所述堿液為NaOH或者Ca (0H)2。
[0007]所述結(jié)晶和重結(jié)晶，溫度要控制在5-10°C，以確保橙皮苷收率和純度。
[0008]三、新橙皮苷提取、分離、純化取步驟一所述的濾液過(guò)強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子柱，收集離子柱流出液，然后用水洗。將離子柱流出液和水洗液混合，進(jìn)大孔吸附樹(shù)脂，經(jīng)水洗后，先用30%低碳醇洗滌，再用70%低碳醇洗脫，將洗脫液濃縮，在5-10°C以下放置，用(NH4)2S04/NaCl助析，得新橙皮苷粗品；將新橙皮苷粗品用水洗滌至中性，以料液比1: (50-60) g/mL加入甲醇，用稀NaOH溶液調(diào)體系pH為10.0-11.0，30°C下反應(yīng)30min，常壓過(guò)濾，再用稀鹽酸調(diào)濾液pH為3.0，在5_10°C以下靜置12h重結(jié)晶；析出類(lèi)白色針狀晶體；抽濾，烘干，得新橙皮苷；用HPLC檢測(cè)，該產(chǎn)品中新橙皮苷含量可達(dá)88.0%以上，橙皮苷收率為2.2%以上。
[0009]所述強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子柱優(yōu)選001X7陽(yáng)離子柱；
所述大孔吸附樹(shù)脂優(yōu)選D101 ;
所述結(jié)晶和重結(jié)晶，溫度要控制在5-10°C以下，以確保新橙皮苷收率和純度。
[0010]所述的滲漉、提取、酶解、過(guò)濾、層析吸附、洗脫、結(jié)晶都為已知技術(shù)。
[0011]本發(fā)明具有下列優(yōu)點(diǎn)和特性:
1、將枳ic實(shí)小果和柑橘皮按2:1比例混合進(jìn)行滲漉提取，提取后的藥渣中提取橙皮苷，濾液中提取新橙皮苷，實(shí)現(xiàn)了橙皮苷、新橙皮苷同步綜合提取，枳實(shí)小果和柑橘皮資源得到綜合利用。
[0012]2、組合技術(shù)新穎。
[0013]通過(guò)本技術(shù)方案，將枳實(shí)小果、柑橘皮粉碎物按質(zhì)量比2:1比例混合，按料液比滲漉提取后，從藥渣中提取橙皮苷，從濾液中提取新橙皮苷，得到橙皮苷含量可達(dá)98.0%以上，收率為4.0%以上；得到新橙皮苷提取物含量可達(dá)88%以上，新橙皮苷收率為2.2%以上。尤其是橙皮苷和新橙皮苷提取同步提取，是利用滲漉濾液，新橙皮苷采用先陽(yáng)離子層析柱，再D101大孔樹(shù)脂柱，然后采用30%低碳醇洗滌，再用70%低碳醇洗滌，取洗液濃縮，用(NH4)2S04/NaCl助析，得粗晶；將粗晶用甲醇溶解，經(jīng)重結(jié)晶得到產(chǎn)品。所有結(jié)晶和重結(jié)晶步驟都是在15°C以下進(jìn)行。這些技術(shù)特征組合在一起，橙皮苷和新橙皮苷提取物在含量和收率2個(gè)指標(biāo)上產(chǎn)生了意想不到的效果。這些結(jié)果是技術(shù)組合方案種各技術(shù)特點(diǎn)互相支持、共同作用才實(shí)現(xiàn)的，已知技術(shù)沒(méi)有報(bào)道，也沒(méi)有該組合技術(shù)方案的技術(shù)啟示，不是簡(jiǎn)單的疊加，具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【具體實(shí)施方式】
[0014]以下所述實(shí)例詳細(xì)地說(shuō)明了本發(fā)明。
[0015]實(shí)施例1 前處理
將苦橙第三次生理落果的枳實(shí)小果作為提取原料，干燥，用高速多功能粉碎機(jī)粉碎，取粉碎物過(guò)10目的篩，備用。將苦橙皮干燥，粉碎，過(guò)10目篩，備用。準(zhǔn)確稱(chēng)取枳實(shí)小果粉碎物25.0g和苦橙皮粉碎物25.0g置于燒杯中，加入500mL 30%乙醇水溶液，放入水浴鍋中44°C下浸泡水浴提取10h，過(guò)濾，得提取液。往提取液中加入0.5g果膠酶處理，50°C下攪拌30min，然后將水浴鍋調(diào)至70°C，處理30min，將果膠酶充分滅活。待其冷卻后在紗布輔助下，用雙層濾紙抽濾，得濾液和濾渣，濾渣用于提取橙皮苷，濾液用于提取新橙皮苷。
[0016]橙皮苷提取
取上述濾渣100g，加2000ml的水，30°C下邊攪拌邊加入1.75g Ca (0H) 2，攪拌0.5h后過(guò)濾，取濾液加稀鹽酸調(diào)體系pH為3.0，控制溫度在在15°C