一種利用環(huán)糊精從槐米中提取槲皮素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物提取工藝研究領(lǐng)域，具體涉及一種利用環(huán)糊精從槐米中提取槲皮 素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 環(huán)糊精是直鏈淀粉在由芽孢桿菌產(chǎn)生的環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶作用下生成的一 系列環(huán)狀低聚糖的總稱，通常含有6~12個(gè)D-吡喃葡萄糖單元。其中研究得較多并且具 有重要實(shí)際意義的是含有6、7、8個(gè)葡萄糖單元的分子，分別稱為alpha-、beta_和gama-環(huán) 糊精。根據(jù)X-線晶體衍射、紅外光譜和核磁共振波譜分析的結(jié)果，確定構(gòu)成環(huán)糊精分子的 每個(gè)D(+)_吡喃葡萄糖都是椅式構(gòu)象，各葡萄糖單元均以1，4-糖苷鍵結(jié)合成環(huán)，由于連 接葡萄糖單元的糖苷鍵不能自由旋轉(zhuǎn)，環(huán)糊精不是圓筒狀分子而是略呈錐形的圓環(huán)，尤以 β -環(huán)糊精最為常用，β -環(huán)糊精結(jié)構(gòu)成環(huán)狀中空筒狀，環(huán)筒外部是親水性的表面，內(nèi)部的 非極性基團(tuán)形成一個(gè)具有一定尺寸的疏水空腔，當(dāng)β -環(huán)糊精上每個(gè)葡萄糖殘基的2_，3_， 6-位羥基中的氫原子被羥丙基取代時(shí)，形成了羥丙基β-環(huán)糊精，羥丙基β-環(huán)糊精在醫(yī)藥 領(lǐng)域的主要應(yīng)用體現(xiàn)在（1)增加難溶性藥物的水溶性；(2)增加藥物穩(wěn)定性、提高藥物生物 利用度；⑶降低藥物的毒副作用；同時(shí)，羥丙基-β -環(huán)糊精可用于口服藥物、注射劑、粘膜 給藥系統(tǒng)（包括鼻粘膜、直腸、角膜等）、透皮吸收給藥系統(tǒng)、親脂性靶向藥物的載體，還可 用做蛋白質(zhì)的保護(hù)劑和穩(wěn)定劑。
[0003] 槲皮素，又名櫟精，槲皮黃素，溶于冰醋酸，堿性水溶液呈黃色，幾乎不溶于水，乙 醇溶液味很苦?？勺鳛樗幤?，具有較好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。此外還有 降低血壓、增強(qiáng)毛細(xì)血管抵抗力、減少毛細(xì)血管脆性、降血脂、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈血流 量等作用。用于治療慢性支氣管炎。對(duì)冠心病及高血壓患者也有輔助治療作用。由于槲皮 素在冷水中幾乎不溶，在沸水中極微溶解，在沸乙醇中溶解，在氫氧化鈉溶液中易溶，傳統(tǒng) 的對(duì)槲皮素的提取工藝多采取堿溶酸沉法，同時(shí)也有通過(guò)醇提法進(jìn)行槲皮素的提取研究， 在申請(qǐng)?zhí)?01210424952. 7的公開(kāi)文件中，同樣采用了堿溶酸沉法的制備過(guò)程，而且在實(shí)驗(yàn) 的過(guò)程中采取了利用了反應(yīng)釜的方式，同樣存在操作不方便，資源浪費(fèi)等問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)了一種利用環(huán)糊精從槐米中提取槲皮素的方法，目的是解決槲皮 素在水溶液條件下提取過(guò)程中能源浪費(fèi)，操作不便，提取效率低等問(wèn)題，通過(guò)利用羥丙基 β -環(huán)糊精與槲皮素的包合作用，使水溶液下的槐米中的槲皮素能夠高效提取，同時(shí)，也利 用了羥丙基β -環(huán)糊精具有溶血性低，安全性高，增加難溶性藥物穩(wěn)定性等特點(diǎn)，使羥丙基 β-環(huán)糊精能夠高效可靠的用于本發(fā)明中。
[0005] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：
[0006] -種利用環(huán)糊精從槐米中提取槲皮素的方法，包括如下步驟：
[0007] 步驟一：稱取待實(shí)驗(yàn)槐米1. 5g，將待實(shí)驗(yàn)槐米研磨至25目~100目槐米粗品；
[0008] 步驟二：將所述槐米粗品加入到環(huán)糊精溶液中浸泡4h~6h，同時(shí)調(diào)節(jié)溶液pH至 2. 5~3. 0 ;其中，環(huán)糊精的質(zhì)量占所述槐米粗品質(zhì)量的5%~20%，所述槐米粗品的質(zhì)量與 水溶液的體積的料液比為1 : 100~1 : 300 ;
[0009] 步驟三：將所述槐米粗品和所述環(huán)糊精溶液的混合液回流提取4~12h，回流提取 結(jié)束后，混合液自然冷卻至室溫；
[0010] 步驟四：計(jì)算出槲皮素的轉(zhuǎn)移提取率。
[0011] 優(yōu)選的是，所述環(huán)糊精為羥丙基β -環(huán)糊精。
[0012] 優(yōu)選的是，所述步驟一中，將所述待實(shí)驗(yàn)槐米研磨至50~100目的顆粒。
[0013] 優(yōu)選的是，所述步驟一中，所述槐米粗品質(zhì)量為0. 5g。
[0014] 優(yōu)選的是，所述步驟二中，所述環(huán)糊精的質(zhì)量占所述槐米粗品質(zhì)量的10 %~ 17. 5%。
[0015] 優(yōu)選的是，所述步驟二中，所述槐米粗品的質(zhì)量與所述水溶液的體積的料液比為 1 : 150 ~1 : 250。
[0016] 優(yōu)選的是，所述步驟二中，調(diào)節(jié)溶液pH為2. 8。
[0017] 優(yōu)選的是，所述步驟三中，所述混合液回流提取6~10h。
[0018] 優(yōu)選的是，所述步驟四中，計(jì)算槲皮素的轉(zhuǎn)移提取率的方法為：提取轉(zhuǎn) 移率其中，c為提取液中懈皮素濃度；V為提取液體積；m為提取時(shí)稱得的槐米 實(shí)際質(zhì)量;w為槐米中槲皮素含量。
[0019] 本發(fā)明所述的有益效果：
[0020] 1、羥丙基β-環(huán)糊精能夠有效增加槲皮素在水中的溶解度，有效提高其穩(wěn)定性， 從而有效的提高水溶液下槲皮素從槐米中的轉(zhuǎn)移提取率；
[0021] 2、實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單，操作方便，只需水提取即可，節(jié)約能耗，沒(méi)有污染物的產(chǎn)生。
【附圖說(shuō)明】
[0022] 圖1為本發(fā)明所述的槲皮素對(duì)照品及所述的槐米中槲皮素的示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書(shū)文 字能夠據(jù)以實(shí)施。
[0024] 本發(fā)明提供一種利用環(huán)糊精從槐米中提取槲皮素的方法，包括如下步驟：
[0025] 步驟一：首先粗略稱取待實(shí)驗(yàn)槐米1. 5g，將待實(shí)驗(yàn)槐米研磨至25目~100目槐米 粗品，取等質(zhì)量的槐米粗品樣品數(shù)份；
[0026] 步驟二：將稱好的槐米粗品加入到環(huán)糊精溶液中浸泡4h~6h，同時(shí)通過(guò)緩沖鹽調(diào) 節(jié)溶液pH至2. 5~3. 0 ;其中，環(huán)糊精的質(zhì)量占槐米粗品質(zhì)量量的5%~20%，槐米粗品的 質(zhì)量與水溶液的體積的料液比為1 : 100~1 : 300, g/mL ;
[0027] 步驟三：將槐米粗品和環(huán)糊精溶液的混合液置于到圓底燒瓶中進(jìn)行回流提取實(shí) 驗(yàn)，提取時(shí)間為4~12h ;其中，當(dāng)冷凝管中有回流溶劑向圓底燒瓶滴下時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，實(shí)驗(yàn)完 成后提取液趁熱過(guò)濾，自然冷卻至室溫，量取提取液的體積；
[0028] 步驟四：移取lmL提取液置于lOmL容量瓶中，以純甲醇稀釋定容，超聲30min，稀 釋液離心（12000rpm，10min)后取上清液過(guò)濾（0. 22μηι)，續(xù)濾液進(jìn)樣分析，計(jì)算出槲皮素 濃度；其中，通過(guò)公式提取轉(zhuǎn)移率^計(jì)算提取轉(zhuǎn)移率，c為提取液中槲皮素濃度， mg/mL ;V為提取液體積，mL ;m為提取時(shí)稱得的槐米實(shí)際質(zhì)量，g ;w為槐米中懈皮素含量， mg/g〇
[0029] 在另一種實(shí)施例中，環(huán)糊精為羥丙基β -環(huán)糊精，由于羥丙基β -環(huán)糊精在醫(yī)藥領(lǐng) 域的具有以下幾種優(yōu)勢(shì)：（1)增加難溶性藥物的水溶性；（2)增加藥物穩(wěn)定性、提高藥物生 物利用度；⑶降低藥物的毒副作用；同時(shí)，羥丙基-β -環(huán)糊精可用于口服藥物、注射劑、粘 膜給藥系統(tǒng)（包括鼻粘膜、直腸、角膜等）、透皮吸收給藥系統(tǒng)、親脂性靶向藥物的載體，還 可用做蛋白質(zhì)的保護(hù)劑和穩(wěn)定劑，所以，在進(jìn)行本發(fā)明實(shí)驗(yàn)時(shí)，選擇羥丙基β-環(huán)糊精作為 一種優(yōu)選，進(jìn)行藥材有效成分的提取。
[0030] 在另一種實(shí)施例中，實(shí)驗(yàn)步驟一中，將待實(shí)驗(yàn)槐米進(jìn)一步研磨至50~100目的顆 粒，再進(jìn)行回流提取實(shí)驗(yàn)，能夠通過(guò)減小槐米的顆粒大小，從而增加與羥丙基β -環(huán)糊精的 接觸表面積，進(jìn)而增加提取轉(zhuǎn)移率。
[0031] 在另一種實(shí)施例中，實(shí)驗(yàn)步驟一中，作為一種優(yōu)選，將研磨后的槐米粗品質(zhì)量選擇 為0. 5g，在實(shí)驗(yàn)室的條件下，合理的選擇0. 5g作為實(shí)驗(yàn)室的提取質(zhì)量，能夠合理的去選擇 后續(xù)的實(shí)驗(yàn)條件。
[0032] 在另一種實(shí)施例中，實(shí)驗(yàn)步驟一中，羥丙基環(huán)糊精的質(zhì)量占待實(shí)驗(yàn)槐米質(zhì)量 的 10%~17. 5%〇
[0033] 在另一種實(shí)施例中，實(shí)驗(yàn)步驟二中，研磨后的槐米粗品質(zhì)量與加入水溶液的體積 比（料液比）為1 : 150~1 : 250, g/mL。
[0034] 在另一種實(shí)施例中，實(shí)驗(yàn)步驟二中，作為一種優(yōu)選，在提取瓶中加完水溶液后，通 過(guò)緩沖鹽調(diào)節(jié)水溶液pH為2. 8。
[0035] 在另一種實(shí)施例中，實(shí)驗(yàn)步驟二中，作為一種優(yōu)選，進(jìn)行回流提取實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)時(shí)間 選擇為6~10h。
[0036] 在本發(fā)明中，首先通過(guò)對(duì)料液比、提取方法、提取時(shí)間、槐米顆粒大小、羥丙基 β -環(huán)糊精用量等進(jìn)行單因素考察