一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆甾醇的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明公開了一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆留醇的制備方法，屬于留醇制造領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]留醇，是從玉米、大豆中經(jīng)過物理提純而得，具有營養(yǎng)價(jià)值高、生理活性強(qiáng)等特點(diǎn)。植物留醇可通過降低膽固醇減少心血管病的風(fēng)險(xiǎn)。其廣泛應(yīng)用在食品、醫(yī)藥、化妝品、動(dòng)物生長劑及紙張加工、印刷、紡織等領(lǐng)域，特別是在歐洲作為食品添加劑非常普遍。植物甾醇主要存在于植物油脂部分中，可以利用原料組成及理化特性方面的差異，提取植物留醇類物質(zhì)。常見的提取方法有:溶劑結(jié)晶法、皂化法、絡(luò)合法、酶法、超臨界co2萃取法、微波輔助提取法及超聲輔助提取法等。
[0003]植物留醇具有降低膽固醇、消炎、退熱、抗?jié)?、抗腫瘤及抑菌等作用。植物留醇是一種結(jié)構(gòu)和生化特性與膽固醇相似的留醇類物質(zhì)。這種“類脂肪”廣泛存在于植物的根、莖、葉和果實(shí)中，在人體內(nèi)不能合成，唯一的途徑是通過膳食攝取。其廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、工業(yè)、日化、農(nóng)業(yè)，是一種多用途純天然的物質(zhì)。
[0004]目前留醇及其衍生物在食品中的應(yīng)用多集中于食用油、黃油、人造奶油、肉制品等脂溶性食品中，主要是由于植物留醇具有一定的油溶性，并且絕大多數(shù)植物留醇衍生物改善的是植物留醇的親油性，而植物留醇的水不溶性，導(dǎo)致其在水基質(zhì)食品，應(yīng)用還受到很大限制，因此，改善植物留醇的水溶性非常必要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題:針對(duì)目前植物留醇的水不溶性和低油溶性，導(dǎo)致其在水基質(zhì)食品，應(yīng)用還受到很大限制，而且化學(xué)改性催化劑毒性較大，對(duì)環(huán)境污染大，反應(yīng)溫度高，反應(yīng)副產(chǎn)物多的問題，提供了一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆留醇的制備方法，本發(fā)明從大豆中用微波法提取留醇，并制得催化劑，將留醇和琥珀酸酐進(jìn)行酯化反應(yīng)，再用富含氨基酸的魚子醬進(jìn)行酯化產(chǎn)物進(jìn)行改性，即可得到水溶性好的留醇，本發(fā)明的改性大豆甾醇由于含有親水性基團(tuán)而改善了原本豆留醇的水不溶性，可以應(yīng)用在水基質(zhì)的食品中，而且改性反應(yīng)中加入的催化劑綠色無污染，反應(yīng)副產(chǎn)物少，制備成本低廉。
[0006]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
1.(1)取300?500g大豆油加工脫臭餾出物，按固液比為3:1向流出物中加入甲醋化試劑，放入微波提取儀中，以600W的功率在0.2?0.3MPa的壓力下微波輔助甲醋化反應(yīng)2?3min后，放入冰箱中，設(shè)置溫度為4?6°C，冰析結(jié)晶5?6h后過濾得粗大豆甾醇；
2.(2)稱取30?35g上述制得的粗大豆甾醇連同100?150mL環(huán)己酮一起倒入250mL燒杯中，移入水浴鍋中加熱至55?65°C，放置在高速攪拌機(jī)上，以800?900r/min的轉(zhuǎn)速攪拌直至粗大豆留醇完全溶解后，使其自然冷卻至室溫并過得到濾餅，再將濾餅按上述步驟反復(fù)操作3?5次后放入烘箱中干燥至恒重，備用； 3.(3)取3?5g十二烷基硫酸鈉放入研缽中，加入其體積2?3倍的濃度為0.0lmol/L的鹽酸溶液，在通風(fēng)櫥中研磨3?5min后放入馬弗爐，在300?400°C下煅燒1?2h制得十二烷基硫酸催化劑；
4.(4)取30?50g雷山魚醬放入500mL燒杯中，加入200?300mL溫度為40?50 °C的蒸餾水，用玻璃棒攪拌均勻后放入超聲振蕩儀中，以200?300W的功率超聲振蕩30?40min后放入螺旋離心機(jī)中，以7000?8000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理10?20min分離去除濾渣得上清液；
5.(5)將備用的濾餅和琥珀酸酐按摩爾比為1:1.5進(jìn)行混合后溶于兩者總質(zhì)量2?3倍的甲苯中，移入油浴鍋中加熱至110?120°C，保溫反應(yīng)10?20h，將反應(yīng)液過硅膠柱層析得到大豆留醇琥珀酸單酯；
6.(6)將400?500mL體積比為2:1的二氯甲烷和乙腈混合液裝入具塞錐形瓶中，再加入2?5g制得的十二烷基硫酸催化劑，移入冰水浴中，在2?4°C下加入40?50g大豆甾醇琥珀酸單酯，用玻璃棒緩慢攪拌并在攪拌狀態(tài)下分3?5次滴入30?50mL離心分離得到的上清液，控制滴加速度使其30?35min內(nèi)滴加完畢，繼續(xù)攪拌5?lOmin后，過濾去除濾渣將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，升溫至85?95°C，旋蒸去除溶劑后即得一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆甾醇。
[0007]所述的甲醋化試劑是由無水乙醇和甲苯按摩爾比為1:1混合后制得。
[0008]本發(fā)明的應(yīng)用方法:取20?30mL本發(fā)明制得的改性大豆甾醇在500ml容器中，再加入5?10mL花生油、3?5mL辛癸酸甘油酯，混合攪拌加熱至100?120°C，形成的透明溶液為油相，再將其倒入在1L的反應(yīng)容器中，并向其中加入100?150mL去離子水，加熱至80?82°C，以5000?6000r/min轉(zhuǎn)速下攪拌15?25min，攪拌后所得乳液用高壓均質(zhì)機(jī)以4000?4500psi的壓力處理1?3次，處理后將乳液降溫至20?25°C，之后按水性飲料總重量的0.6?1%添加到飲料中，即可制得植大豆留醇的水性飲料。
[0009]本發(fā)明的有益效果是:
(1)本發(fā)明的改性大豆留醇改善了原本豆留醇的水不溶性，可以應(yīng)用在水基質(zhì)的食品中；
(2)本發(fā)明加入的催化劑綠色無污染，反應(yīng)副產(chǎn)物少，制備成本低廉。
【具體實(shí)施方式】
[0010]首先取300?500g大豆油加工脫臭餾出物，按固液比為3:1向流出物中加入甲醋化試劑，放入微波提取儀中，以600W的功率在0.2?0.3MPa的壓力下微波輔助甲醋化反應(yīng)2?3min后，放入冰箱中，設(shè)置溫度為4?6°C，冰析結(jié)晶5?6h后過濾得粗大豆留醇；稱取30?35g上述制得的粗大豆留醇連同100?150mL環(huán)己酮一起倒入250mL燒杯中，移入水浴鍋中加熱至55?65°C，放置在高速攪拌機(jī)上，以800?900r/min的轉(zhuǎn)速攪拌直至粗大豆留醇完全溶解后，使其自然冷卻至室溫并過得到濾餅，再將濾餅按上述步驟反復(fù)操作3?5次后放入烘箱中干燥至恒重，備用；取3?5g十二烷基硫酸鈉放入研缽中，加入其體積2?3倍的濃度為0.01mol/L的鹽酸溶液，在通風(fēng)櫥中研磨3?5min后放入馬弗爐，在300?400 °C下煅燒1?2h制得十二烷基硫酸催化劑；取30?50g雷山魚醬放入500mL燒杯中，加入200?300mL溫度為40?50°C的蒸餾水，用玻璃棒攪拌均勻后放入超聲振蕩儀中，以200?300W的功率超聲振蕩30?40min后放入螺旋離心機(jī)中，以7000?8000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理10?20min分離去除濾渣得上清液；將備用的濾餅和琥珀酸酐按摩爾比為1:1.5進(jìn)行混合后溶于兩者總質(zhì)量2?3倍的甲苯中，移入油浴鍋中加熱至110?120°C，保溫反應(yīng)10?20h，將反應(yīng)液過硅膠柱層析得到大豆留醇琥珀酸單酯；將400?500mL體積比為2:1的二氯甲烷和乙腈混合液裝入具塞錐形瓶中，再加入2?5g制得的十二烷基硫酸催化劑，移入冰水浴中，在2?4°C下加入40?50g大豆留醇琥珀酸單酯，用玻璃棒緩慢攪拌并在攪拌狀態(tài)下分3?5次滴入30?50mL離心分離得到的上清液，控制滴加速度使其30?35min內(nèi)滴加完畢，繼續(xù)攪拌5?lOmin后，過濾去除濾渣將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，升溫至85?95°C，旋蒸去除溶劑后即得一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆甾醇。
[0011]所述的甲醋化試劑是由無水乙醇和甲苯按摩爾比為1:1混合后制得。
[0012]實(shí)例1
11.首先取300g大豆油加工脫臭餾出物，按固液比為3:1向流出物中加入甲醋化試劑，放入微波提取儀中，以600W的功率在0.2MPa的壓力下微波輔助甲醋化反應(yīng)2min后，放入冰箱中，設(shè)置溫度為4°C，冰析結(jié)晶5h后過濾得粗大豆留醇；稱取30g上述制得的粗大豆甾醇連同lOOmL環(huán)己酮一起倒入250mL燒杯中，移入水浴鍋中加熱至55°C，放置在高速攪拌機(jī)上，以800r/min的轉(zhuǎn)速攪拌直至粗大豆留醇完全溶解后，使其自然冷卻至室溫并過得到濾餅，再將濾餅按上述步驟反復(fù)操作3次后放入烘箱中干燥至恒重，備用；取3g十二烷基硫酸鈉放入研缽中，加入其體積2倍的濃度為0.01mol/L的鹽酸溶液，在通風(fēng)櫥中研磨3min后放入馬弗爐，在300°C下煅燒lh制得十二烷基硫酸催化劑；取30g雷山魚醬放入500mL燒杯中，加入200mL溫度為40°C的蒸餾水，用玻璃棒攪拌均勻后放入超聲振蕩儀中，以200W的功率超聲振蕩30min后放入螺旋離心機(jī)中，以7000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理lOmin分離去除濾渣得上清液；將備用的濾餅和琥珀酸酐按摩爾比為1:1.5進(jìn)行混合后溶于兩者總質(zhì)量2倍的甲苯中，移入油浴鍋中加熱至110°C，保溫反應(yīng)10h，將反應(yīng)液過硅膠柱層析得到大豆甾醇琥珀酸單酯d_400mL體積比為2:1的二氯甲烷和乙腈混合液裝入具塞錐形瓶中，再加入2g制得的十二烷基硫酸催化劑，移入冰水浴中，在2°C下