D-三七素的制備方法及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物化學(xué)和治療學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種D-三七素（S卩β-Ν-乙二?；鵢 D-α，β-二氨基丙酸)的制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 血小板減少癥是指血小板數(shù)低于正常范圍所引起的病癥，血小板減少癥可能源于 血小板產(chǎn)生不足，脾臟對(duì)血小板的阻留，血小板破壞或利用增加以及被稀釋，無(wú)論何種原因 所致的嚴(yán)重血小板減少，都可引起典型的出血:多發(fā)性瘀斑，最常見(jiàn)于小腿;或在受輕微外 傷的部位出現(xiàn)小的散在性瘀斑;粘膜出血，鼻出血，胃腸道和泌尿生殖道和陰道出血，和手 術(shù)后大量出血，胃腸道大量出血和中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)出血可危及生命。
[0003]目前臨床上常見(jiàn)的治療血小板減少藥物主要有利可君片、肌苷注射液、重組人白 細(xì)胞介素-11等。不過(guò)這些藥物，在臨床用途中或作用效果不明顯或者出現(xiàn)種種不盡人意的 副作用，如白介素-11就存在諸如水腫、注射處疼痛、紅腫、硬結(jié)、結(jié)膜充血等副作用。因此尋 找療效顯著、安全可靠的治療血小板減少癥藥物是醫(yī)藥工作者值得長(zhǎng)期研究的課題。
[0004] 五加科人參屬名貴中藥材三七有"止血之神藥"之稱，自古以來(lái)為傷科要藥，三七 中所含有的主要單體止血活性物質(zhì)為L(zhǎng)-三七素。L-三七素在大量使用的情況下，將顯示神 經(jīng)毒性，而在少量使用時(shí)，則不顯示神經(jīng)毒的作用而顯示出強(qiáng)力的止血及血小板增加作用， 使用l-2mg即可充分顯示治療效果。三七素有兩個(gè)手性異構(gòu)體，但是從天然植物中分離得到 的均為L(zhǎng)構(gòu)型。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提出一種D-三七素（S卩β-Ν-乙二?；?D-a，β-二氨基 丙酸）的制備方法及其用途，以尚效地制備D-二七素。
[0006]本發(fā)明提供的D-三七素的制備方法，包括以下步驟：
[0007] 1)對(duì)D-天冬酰胺的氨基進(jìn)行Fmoc保護(hù)，得到第一中間體；
[0008] 2)對(duì)所述第一中間體進(jìn)行Hoffman降解反應(yīng)，得到第二中間體；
[0009] 3)在有機(jī)堿的作用下，將所述第二中間體脫去Fmoc保護(hù)，得到第三中間體；
[0010] 4)在強(qiáng)堿條件下，將所述第三中間體與草酸單鉀酯進(jìn)行縮合反應(yīng)，得到所述D-三 七素。
[0011] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，采用9-芴甲基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯對(duì)D-天冬酰胺 的氨基進(jìn)行Fmoc保護(hù)。
[0012] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，采用[雙(三氟乙酰氧基)碘]苯對(duì)所述第一中間體進(jìn)行 Hoffman降解反應(yīng)，得到第二中間體。
[0013] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述有機(jī)堿選自二乙胺或哌啶。
[0014]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述強(qiáng)堿選自氫氧化鋰。
[0015]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述第一中間體的制備方法包括以下步驟：
[0016]將碳酸氫鈉加入到D-天冬酰胺中，將9-芴甲基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯溶于丙酮 中；
[0017]將所述9-芴甲基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯的丙酮溶液緩慢滴加入到碳酸氫鈉、D-天冬酰胺的混合溶液中，于20_30°C下反應(yīng)；
[0018] 采用酸液調(diào)節(jié)產(chǎn)物溶液的pH值至2-4,然后抽濾該產(chǎn)物溶液，得到白色固體，即為 所述第一中間體。
[0019]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述第二中間體的制備方法包括以下步驟：
[0020] 將[雙(三氟乙酰氧基)碘]苯溶于乙腈中，將所述第一中間體溶于N，N-二甲基甲酰 胺中，將所述溶解有第一中間體的N，N-二甲基甲酰胺加入到乙腈溶液中；
[0021] 繼續(xù)向乙腈溶液加入水，然后再繼續(xù)向乙腈溶液加入吡啶，于20-30°C下反應(yīng)；
[0022] 反應(yīng)結(jié)束后，蒸除溶劑，然后加入水，采用酸液調(diào)節(jié)產(chǎn)物溶液的pH值至1-3;
[0023]接著，采用乙醚進(jìn)行萃取，水層采用堿液調(diào)pH值至5-7,冷藏后抽濾得到白色固體， 即為所述第二中間體。
[0024]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述第三中間體的制備方法包括以下步驟：
[0025]將所述第二中間體溶于乙醇中，再繼續(xù)加入有機(jī)堿，20_30°C下反應(yīng)；
[0026]反應(yīng)結(jié)束后，減壓濃縮產(chǎn)物溶液，采用乙醇洗滌；
[0027]向乙醇洗滌后的產(chǎn)物溶液加入甲醇和鹽酸甲醇溶液，當(dāng)有白色固體析出后，經(jīng)抽 濾、甲醇洗滌得到白色固體，即為所述第三中間體。
[0028]本發(fā)明還提供一種藥物組合物，其包括米用上述D-二七素的制備方法制得的D-二 七素。
[0029]本發(fā)明還提供一種上述藥物組合物在制備治療血小板減少癥藥物中的用途。
[0030] 從以上所述可以看出，本發(fā)明采用高效安全的制備方法合成得到D-三七素，制備 工藝簡(jiǎn)單，收率較高，通過(guò)本發(fā)明提供的方法制備得到的化合物D-三七素具有較好的治療 血小板減少癥作用，優(yōu)于臨床用藥白介素-11，可以成為治療血小板減少癥的候選藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0031] 為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā) 明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
[0032]本發(fā)明提供的D-三七素的制備方法包括以下步驟：
[0033] 1)對(duì)D-天冬酰胺的氨基進(jìn)行Fmoc保護(hù)，得到第一中間體S-D-1;
[0034] 2)對(duì)所述第一中間體S-D-1進(jìn)行Hoffman降解反應(yīng)，得到第二中間體S-D-2;
[0035] 3)在有機(jī)堿的作用下，將所述第二中間體S-D-2脫去Fmoc保護(hù)，得到第三中間體S- D-3；
[0036] 4)在強(qiáng)堿條件下，將所述第三中間體S-D-2與草酸單鉀酯進(jìn)行縮合反應(yīng)，得到目標(biāo) 產(chǎn)物D-三七素。
[0037]D-三七素的合成路線如下：
[0038]
[0039] 實(shí)施例1D-三七素的合成方法
[0040] 1)第一中間體S-D-1的合成：
[0041 ] 取0-天冬酰胺一水物(8.78,581111]1〇1)于圓底燒瓶中，加入蒸餾水3001111^，隨后加入 碳酸氫鈉（l〇.9g，130mmol)充分?jǐn)嚢?取9-荷甲基-N-琥?自酰亞胺基碳酸酯（20g，60mmol)溶 于150mL丙酮中，將所述9-芴甲基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯的丙酮溶液緩慢滴加入上述圓底 燒瓶中，于25°C下攪拌反應(yīng)4h;采用濃鹽酸調(diào)節(jié)產(chǎn)物溶液的pH值至3,再抽濾該產(chǎn)物溶液，得 至丨」19.58白色固體，即為第一中間體3-0-1，收率95%。
[0042] 2)第二中間體S-D-2的合成：
[0043] 取(24.9g，56mmol)[雙(三氟乙酰氧基)碘]苯(PIFA)于圓底燒瓶中，加入58mL乙腈 溶解；另取（19.2g，54.2mmol)S-D-1，溶于115mLDMF中，并緩慢滴加入所述圓底燒瓶中，劇 烈攪拌至反應(yīng)液澄清；隨后緩慢滴加蒸餾水58mL至所述圓底燒瓶中，攪拌20min后，緩慢滴 加吡啶4.6mL至所述圓底燒瓶中，并于26°C下攪拌反應(yīng)60h。通過(guò)TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全，蒸 除溶劑后，加入蒸餾水380mL攪拌均勻，6NHC1溶液調(diào)節(jié)溶液的pH值至2;再采用乙醚進(jìn)行萃 取，水層用4NNaOH溶液調(diào)pH值為6，4°C冰箱放置2h后，抽濾得到13.3g白色固體，即為第二 中間體5-0-2，收率75%。
[0044] 3)第三中間體S-D-3的合成：
[0045] 取S-D-2 (13.0g，40mmo1)于圓底燒瓶中，加入無(wú)水乙醇1OOOmL，隨后向反應(yīng)瓶中滴 加二乙胺200mL，于27°C下反應(yīng)過(guò)夜。TLC檢測(cè)反應(yīng)完全后，通過(guò)多次減壓濃縮乙醇，去除殘 留的乙二胺。加入無(wú)水甲醇1 〇〇mL攪拌溶解，滴加5mL鹽酸甲醇溶液，攪拌反應(yīng)4h后，有白色 固體析出，抽濾，甲醇洗，得到5.0g白色固體S-D-3，收率90 %。
[0046] 4)目標(biāo)產(chǎn)物D-三七素的合成：
[0047] 取S-D-3(5.3g，36mmol)于圓底燒瓶中，加入26.5mL50 %甲醇水溶液攪拌均勻，隨 后于冰浴下向反應(yīng)瓶中加入氫氧化鋰一水物（2.38,51!11111〇1)，攪拌反應(yīng)11 1;待反應(yīng)液溶解 后，緩慢滴加草酸單鉀酯(9.7g，65mmol)的32mL50 %甲醇水溶液，并于室溫下反應(yīng)24hJLC 監(jiān)測(cè)反應(yīng)完全后，抽濾產(chǎn)物溶液，將得到的白色固體溶于冰水中，采用2NHC1調(diào)pH值為2.1 ~2.2，使再次析出白色固體，將其于4°C冰箱放置2h后，抽濾，依次進(jìn)行冰水洗，甲醇洗，丙 酮洗后，烘干得4.6g白色固體D-三七素，收率73 %。
[0048]m·p·206°C。+1 8(C0.06，Η?.0)。
[0049] IR(KBr) :3503,3436,3386,3241,1671,1634,1517,550αιι_1〇
[0050] 4NMR(600MHz，D20)δ: 4 · 04(1Η，dd，J= 7 · 6Hz，3 · 6Hz，H00C-迎-ΝΗ2)，3 · 87(1Η，dd， J= 14 · 9Hz，3 · 7Hz，CH-CH2~NH)，3 · 74( 1H，dd，J= 14 · 8Hz，7 · 7Hz，CH-CH2~NH);13C匪R (150MHz,D20)δ: 177.8,166.1,165.5,54.7