一種新的間苯三酚類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從苦蕎麥的干燥成熟種子中分離得到的一種 具有治療慢性粒細(xì)胞白血病作用的間苯三酚類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 寥科(Polygonacea)蕎麥屬Fagopyrum Mill.植物在全世界有15種，廣泛分布于亞 洲和歐洲，我國有10個種1個變種，有2個種為栽培種。常見的有蕎麥Fagopyrum esculentum Moench、苦養(yǎng)麥F· Tataricum(L· )Gaertn ·和金養(yǎng)麥F·Dibotrys(D·Don)Hara，前兩種主要作 為糧食作物，金蕎麥的根莖供藥用，具有清熱解毒、排膿祛瘀的功效。苦蕎麥又名野蕎麥、韃 靼蕎、萬年蕎、野南蕎，在我國西南、中南、華北等省區(qū)均有分布?？嗍w麥有悠久的入藥歷史。 《齊民要術(shù)》："頭風(fēng)畏冷者，以面湯和粉為餅，更令罨出汗，雖數(shù)十年亦愈"。《圖經(jīng)本草》："實(shí) 腸胃，益氣力"?！侗静菥V目》："降氣寬腸磨積滯，消熱腫風(fēng)痛。除白濁血滯，脾積泄瀉"。并記 載苦蕎麥味苦，性平、寒，有益氣力、續(xù)精神、利耳目、降氣寬腸，健胃的作用?！吨参锩麑?shí)圖 考》："性能消積，俗呼凈腸草"?！度珖胁菟巺R編》："理氣止痛，健脾利濕"。苦蕎麥還是當(dāng)今 世界上集營養(yǎng)、保健、醫(yī)療于一體的天然保健食品之一，被稱為"食藥兩用"的糧食珍品。
[0003] 苦蕎麥除了含有其他谷類所不具有的黃酮類成分外，還含有留體類、酚類、活性蛋 白、礦質(zhì)元素等物質(zhì)。近年來從苦蕎麥粉、種子、麩皮和芽中分離出的成分主要為黃酮類和 甾體類物質(zhì)。
[0004] 現(xiàn)代藥理研究表明，苦蕎麥具有降血糖、抗氧化、鎮(zhèn)痛抗炎、改善微循環(huán)等多種藥 理作用。對由腹腔注射四氧嘧啶高血糖模型的大鼠，通過灌胃苦蕎麥粉或者苦蕎麥膠囊可 明顯降低血糖濃度;苦蕎麥中的黃酮類物質(zhì)能降低血脂;苦蕎麥中的蘆丁、槲皮素等黃酮類 物質(zhì)可清除超氧陰離子、羥自由基等自由基;苦蕎麥中的黃酮化合物主要為蘆丁，具有軟化 血管、改善微循環(huán)、維持毛細(xì)血管的抵抗力、降低其通透性及脆性、促進(jìn)細(xì)胞增殖、防止血細(xì) 胞的凝集等作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從苦蕎麥的干燥成熟種子中分離得到的一種具有治療 慢性粒細(xì)胞白血病作用的間苯三酚類化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(I)，
[0009]所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將苦蕎麥的干燥成熟種子 粉碎，用80~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟 (a)中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用75%乙醇洗脫 10個柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟(b)中75%乙 醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、55 :1、30:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲 醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20: 1、15:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅 烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~10個柱體 積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I)。
[0010]進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0011] 進(jìn)一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為85%。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的載 體。
[0013] 所述的化合物(I)在制備治療慢性粒細(xì)胞白血病的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療慢性粒細(xì)胞白血病的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對 人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物(I)結(jié)構(gòu)式；
[0019 ]圖2為化合物（I)理論ECD值與實(shí)驗ECD值比較。
【具體實(shí)施方式】
[0020]下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0021 ]實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0022] 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023]制備方法：（a)將苦蕎麥的干燥成熟種子(8kg)粉碎，用85 %乙醇熱回流提取(25L X3次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和 水飽和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(355g)和正丁醇 萃取物；（b)步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體 積，再用75%乙醇洗脫10個柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏 (136g);(c)步驟(b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1(8個柱體 積）、55:1 (8個柱體積）、30:1 (6個柱體積）、15 :1 (8個柱體積)和1:1 (5個柱體積）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟(c)中組分4(31g)用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用 體積比為20:1(8個柱體積）、15:1(10個柱體積)和10:1(6個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2(llg)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積 百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-10個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到 純的化合物（I)(228mg)。
[0024] 結(jié)構(gòu)確證：黃色膠狀物；冊43頂3顯示[1+似]+為111/2 505.2918，結(jié)合核磁特征可 得分子式為C3QH42〇5，不飽和度為10。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δ Η(ρρπι，DMS〇-d6，400MHz): H-7 (2.47，m)，H-7(2.05，dd，J=13.7,7.4)，H-8(1.84，m)，H-10(1.79，m)，H-10(1.41，m)，H-ll (2.06，m)，H-ll(1.73，m)，H-12(2.38，m)，H-14(2.84，d，J=14.3)，H-14(1.92，d，J=14.3)， H-15(1.35，s)，H-16(1.27，s)，H-17(2.89，m)，H-17(2.90，m)，H-18(5.13，t，J=7.5)，H-20 (1.55，s)，H-21(1.68，s)，H-22(2.62，dd，J=13.1，8.1)，H-22(2.41，dd，J=13.1，8.2)，H-23(4.78，t，J = 8.1)，H-25(1.46，s)，H-26(1.37，s)，H-28(3.72，m)，H-29(0.94，d，J = 6.8)， H-30(1.16，d，J = 6.8);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) δ。(ppm，DMS〇-d6，100MHz): 197 · 1 (C，1 -C)，111 · 3 (C，2-C)，197.2(C，3-C)，59.6(C，4-C)，208.5(C，5-C)，60.4(C，6-C)，26.9(CH2,7-C)，42.8 (CH，8-C)，78.3(C，9-C)，40.4(CH2，10-C)，22.6(CH2，11-C)，44.8(CH，12-C)，70.6(C，13-C)， 38.7(CH2，14-C)，27.8(CH 3，15-C)，23.6(CH3，16-C)，33.5(CH2，17-C)，118.3(CH，18-C)， 135.6(C，19-C)，25.7(CH 3,20-C)，17.8(CH3,2hC)，41.6(CH2,22-C)，116.2(CH，23-C)， 138.3(C，24-C)，25.5(CH 3,25-C)，17.5(CH3,26-C)，209.1(C，27-C)，35.8(CH，28-C)，18.1 (〇1 3,29-〇，19.7(〇13,3〇-〇;碳原子標(biāo)記參見圖1。1!1匪1?譜顯示八個甲基信號0!1〇.94， 1 · 16，1 · 27，1 · 35，1 · 37，1 · 46，1 · 55，1 · 68)，以及兩個烯屬次甲基質(zhì)子（δΗ4 · 78和5 · 13) </3C NMR譜顯示30個碳信號，包括八個甲基，六個亞甲基，五個次甲基(兩個烯屬次甲基），以及十 一個季碳(三個酮羰基，三個烯屬季碳，兩個含氧季碳，以及一個烯屬含氧季碳hHMBC譜中 H2-7和H2-14與C-3，C-4和C-5，Me-15與C-12，C-13和C-14，Me-16與C-8，C-9和C-10，以及H2- 17和H2-22與C-l，C-5和C-6的相關(guān)性表明該化合物為間苯三酚類化合物。HMBC譜中，H2-17和 H2-22與C-l，C-5和C-6，Me-20和Me-21 與C-19和C-18，以及Me-25和Me-26與C-24和C-23的相 關(guān)性表明〇6位連有兩個2-甲基-2-丁烯基團(tuán)。根據(jù)兩個含氧碳信號[3070.6((：-13)和78.3 (C-9)]，以及核磁數(shù)據(jù)和不飽和度，可知C-9和C-13之間存在一個氧橋。HMBC譜中，Me-29和 Me-30與C-27和C-28的相關(guān)性表明該化合物含有一個異丙基。NOESY譜中，Η-14β與H-12和H-7β的相關(guān)性表明Β環(huán)為椅式構(gòu)象。NOESY譜中Η-8與Me-16和H-12，Me-15與Η-12和Η-14β的相 關(guān)性表明H-8，Me-15和Me-16為β構(gòu)型。此外，Η-18與Η-7β，以及Η-23與Η-14β