銀杏內(nèi)酯k晶k型及制備方法和其組合物與用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及發(fā)現(xiàn)了銀杏內(nèi)酯Κ在固體狀態(tài)下存在的晶Κ型狀態(tài)形式;涉及發(fā)明了晶 Κ型的制備方法;涉及發(fā)明了含有銀杏內(nèi)酯Κ晶Κ型及含任意非零比例晶Κ型的混合晶型的藥 物組合物;本發(fā)明還涉及銀杏內(nèi)酯Κ晶Κ型作為藥物有效成分，在制備各種心腦血管疾病、糖 尿病、免疫系統(tǒng)疾病及神經(jīng)系統(tǒng)疾病防治藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 銀杏內(nèi)酯Κ屬于銀杏二萜內(nèi)酯，其結(jié)構(gòu)式如下所示，該化合物為天然PAF受體拮抗 劑。其對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、缺血損傷具有保護(hù)作用，可用于治療缺血性腦血管疾病及相關(guān)疾 病。
[0004] 銀杏內(nèi)酯Κ的分子結(jié)構(gòu)式
[0005] 在中國(guó)專利CN101824041(公開號(hào)）[1]中，記載了廣東省中藥研究院發(fā)明的"一種銀 杏內(nèi)酯Κ的制備方法"，其中涉及了利用銀杏內(nèi)酯Β加酸脫水濃縮后使用乙醇或甲醇溶液進(jìn) 行重結(jié)晶，制得銀杏內(nèi)酯Κ。
[0006] 在中國(guó)專利CN102002052(公開號(hào)）[2]中，記載了江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司發(fā)明 的"銀杏內(nèi)酯K及其復(fù)合物及其制備方法與用途"，其中涉及了銀杏內(nèi)酯B的溶解，轉(zhuǎn)化，加酸 沉淀或濃縮析晶及將沉淀物或結(jié)晶進(jìn)行重結(jié)晶的步驟。其中將沉淀物或結(jié)晶用乙醇、甲醇、 丙酮或正丁醇溶液重結(jié)晶可制得銀杏內(nèi)酯K。
[0007] 在中國(guó)專利CN101747338(公開號(hào)）[3]中，記載了廣州艾格生物科技有限公司發(fā)明 的"一種銀杏內(nèi)酯類化合物制備方法"，其中涉及了銀杏內(nèi)酯K的提取、柱層析、濃縮及重結(jié) 晶步驟。其中使用95%甲醇溶液重結(jié)晶可制得銀杏內(nèi)酯K。
[0008] 在中國(guó)專利CN1424315(公開號(hào)）[4]中，記載了江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司發(fā)明的 "銀杏內(nèi)酯化合物及其制備方法和含有該化合物的藥物組合物"，其中涉及了分離純化銀杏 內(nèi)酯K的方法。將銀杏內(nèi)酯粗品經(jīng)乙酸乙酯或丙酮溶液進(jìn)行回流提取，經(jīng)柱層析純化，用石 油醚-乙酸乙酯洗脫后合并濃縮洗脫液，放置出現(xiàn)沉淀，將沉淀用丙酮溶解以制備型高效液 相純化，可得銀杏內(nèi)酯K。
[0009] 文獻(xiàn)《銀杏萜內(nèi)酯的分離、純化和結(jié)構(gòu)鑒定》[5]中用采用銀杏葉的乙酸乙酯回流 液，柱層析純化后，用CH 2Cl2-MeOH洗脫，收集銀杏內(nèi)酯粗品洗脫液，重結(jié)晶后經(jīng)過(guò)制備型RP- HPLC純化，制得銀杏內(nèi)酯K純品。
[0010] 《Determination of the derivative from ginkgolide Β》等文獻(xiàn)中[6-7]涉及了 將銀杏內(nèi)酯B用甲醇溶液溶解后使用RP-HPLC/UV法在半制備色譜柱上進(jìn)行分離，流動(dòng)相為 甲醇-水，檢測(cè)波長(zhǎng)為216nm，得到了一種銀杏內(nèi)酯B的衍生物即為銀杏內(nèi)酯K。
[0011]《銀杏內(nèi)酯提取物中微量成分的LC/DAD/ESI/MS分析及結(jié)構(gòu)鑒定》中使用70%丙酮 溶液將銀杏內(nèi)酯提取物完全溶解，后經(jīng)過(guò)制備分離方法得到銀杏內(nèi)酯K純品[8]。
[0012] 上述專利與文獻(xiàn)公開的銀杏內(nèi)酯K固體樣品，經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)均為銀杏內(nèi)酯K的不同溶 劑合物。經(jīng)國(guó)內(nèi)外專利與文獻(xiàn)檢索，未發(fā)現(xiàn)有關(guān)銀杏內(nèi)酯K的其它晶型專利或文獻(xiàn)報(bào)道。
[0013] 本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了與上述專利或文獻(xiàn)研究報(bào)道內(nèi)容不同的一種新的銀杏內(nèi)酯K固體物 質(zhì)存在狀態(tài)，即銀杏內(nèi)酯K的晶K型，其含有一分子結(jié)晶水，發(fā)現(xiàn)了該晶K型的制備方法，以及 其安全性與穩(wěn)定性方面的優(yōu)勢(shì)特征。
[0014] 本發(fā)明的研究目的是從銀杏內(nèi)酯K的晶型固體物質(zhì)存在狀態(tài)研究入手，通過(guò)晶型 篩選技術(shù)、晶型生物活性評(píng)價(jià)技術(shù)，在藥物的有效成分原料層面上尋找、發(fā)現(xiàn)晶型固體物質(zhì) 存在種類與狀態(tài)特征，將晶型物質(zhì)與藥效學(xué)研究相結(jié)合，為尋找、發(fā)現(xiàn)、開發(fā)具有最佳臨床 療效的銀杏內(nèi)酯K的優(yōu)勢(shì)藥用晶型固體物質(zhì)提供基礎(chǔ)科學(xué)數(shù)據(jù)；同時(shí)，也為從銀杏內(nèi)酯K固 體藥物原料物質(zhì)基礎(chǔ)上申請(qǐng)國(guó)家或國(guó)際的知識(shí)產(chǎn)權(quán)發(fā)明專利保護(hù)提供科學(xué)依據(jù)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0015] 本發(fā)明目的之一:提供銀杏內(nèi)酯K晶K型的存在狀態(tài)和描述方式。
[0016]本發(fā)明目的之二:提供銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法。
[0017]本發(fā)明目的之三:提供含有銀杏內(nèi)酯K晶K型純品、或含有任意非零比例晶K型的混 合晶型的固體藥物及其組合物。
[0018]本發(fā)明目的之四：提供使用銀杏內(nèi)酯K晶K型作為藥物活性成分的藥物組合物，其 每日用藥劑量在50yg~100mg范圍內(nèi)。
[0019]本發(fā)明目的之五:提供使用銀杏內(nèi)酯K晶K型作為藥物活性成分原料而制備開發(fā)出 供臨床使用的片劑、膠囊、丸劑、針劑、緩釋或控釋制劑藥物。
[0020] 本發(fā)明目的之六:提供銀杏內(nèi)酯K晶K型在安全性及穩(wěn)定性方面的優(yōu)勢(shì)特征。
[0021] 本發(fā)明目的之七:提供使用銀杏內(nèi)酯K晶K型作為活性成分，在制備各種心腦血管 疾病、糖尿病、免疫系統(tǒng)疾病及神經(jīng)系統(tǒng)疾病防治藥物中的應(yīng)用。
[0022] 本發(fā)明提供了銀杏內(nèi)酯K在固體狀態(tài)下的晶K型形式，晶K型樣品的制備方法;發(fā)現(xiàn) 使用銀杏內(nèi)酯K的晶K型作為活性成分制備開發(fā)出的藥物及其組合物用于制備各種心腦血 管疾病、糖尿病、免疫系統(tǒng)疾病及神經(jīng)系統(tǒng)疾病防治藥物中的應(yīng)用。
[0023] 技術(shù)特征
[0024] 1.銀杏內(nèi)酯K晶A型固體物質(zhì)形態(tài)特征：
[0025] 1.1本發(fā)明涉及的銀杏內(nèi)酯K晶K型，其特征在于，含有一分子結(jié)晶水，當(dāng)使用粉末X 射線衍射分析采用CuKa輻射實(shí)驗(yàn)條件時(shí)，表現(xiàn)為衍射峰位置:2-Theta值(°)或d值（A)和衍 射峰相對(duì)強(qiáng)度：峰高值(H e i g h t % )或峰面積值(A r e a % )具有如下特征峰值時(shí)的固體物質(zhì) (表1，圖1):
[0026] 表1銀杏內(nèi)酯K晶K型的粉末X射線衍射峰值
[0029] 1.2本發(fā)明涉及的銀杏內(nèi)酯K晶K型，其特征在于，使用衰減全反射傅立葉紅外光譜 法進(jìn)行分析時(shí)，在 3565，3509，3143，2970，2951，2918，2867，1790，1762，1709，1629，1508， 1471，1442,1407,1379,1371，1360,1345,1311，1286,1264,1243,1235,1219,1189,1179， 1154，1129，1115，1081，1067，1043，1025，999，961，939，928，901，892,833，798,754,730， 721，696,655cm- 1處存在紅外光譜特征峰，其中紅外光譜特征峰的允許偏差為± 2cm-1(圖 2)〇
[0030] 1.3本發(fā)明涉及的銀杏內(nèi)酯K晶K型，其特征在于，使用差示掃描量熱技術(shù)分析時(shí)， 表現(xiàn)為在30~300°C范圍內(nèi)，當(dāng)升溫速率為每分鐘10°C的DSC圖譜中，分別在133°C±5°C及 293°C ±5°C溫度處存在2個(gè)吸熱峰（圖3)。
[0031] 1.4本發(fā)明涉及的銀杏內(nèi)酯K晶K型，其特征在于，使用熱重技術(shù)分析時(shí)，表現(xiàn)為在 30~200°C溫度范圍內(nèi)，升溫速率為每分鐘10°C的TG圖譜中，在80~200°C溫度范圍內(nèi)存在1 個(gè)溶劑成分失重臺(tái)階，失重比例為4% ±1% (圖4)。
[0032] 2.銀杏內(nèi)酯K晶K型固體物質(zhì)的制備方法特征：
[0033] 2.1本發(fā)明涉及的銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法，其特征在于，使用甲醇、乙醇、丙 酮、或四氫呋喃的單一溶劑，或由甲醇、乙醇、水、丙酮及四氫呋喃中任意兩種或多種經(jīng)不同 配比組合制成的混合溶劑，在20°C~60°C溫度下將銀杏內(nèi)酯K樣品完全溶解，經(jīng)環(huán)境溫度10 °〇~301，放置1至10天獲得。
[0034] 2.2本發(fā)明涉及的的銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法，其特征在于，使用銀杏內(nèi)酯K溶 劑合物，經(jīng)環(huán)境溫度l〇°C~30°C、環(huán)境相對(duì)濕度50%~95%、放置1至10天獲得。
[0035] 3.銀杏內(nèi)酯K的晶型成分、給藥劑量及藥物制劑組合物特征：
[0036] 3.1本發(fā)明涉及的銀杏內(nèi)酯K的混合晶型固體物質(zhì)，其特征在于，含有任意非零比 例的銀杏內(nèi)酯K晶K型。
[0037] 3.2本發(fā)明涉及的藥物組合物，其特征在于，含有銀杏內(nèi)酯K晶K型，或含有銀杏內(nèi) 酯K的混晶固體物質(zhì)和藥學(xué)上可接受的載體。
[0038] 3.3本發(fā)明涉及的藥物組合物，銀杏內(nèi)酯K的每日用藥劑量在50yg~100mg范圍內(nèi)。
[0039] 3.4本發(fā)明涉及的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物是片劑、膠囊、丸 劑、針劑、緩釋制劑或控釋制劑。
[0040] 3.5本發(fā)明涉及的銀杏內(nèi)酯K晶K型，或銀杏內(nèi)酯K的混合晶型固體物質(zhì)，或藥物組 合物在制備各種心腦血管疾病、糖尿病、免疫系統(tǒng)疾病及神經(jīng)系統(tǒng)疾病防治藥物中的應(yīng)用。 [0041 ] 4.銀杏內(nèi)酯K無(wú)溶劑合物成分口服給藥的優(yōu)勢(shì)吸收和血藥濃度特征：
[0042] 4.1銀杏內(nèi)酯K晶K型在高溫（60°C)，高濕（25°C，RH90 % ± 5 % )，光照（45001x 土 5001x)的條件下放置10天，均不發(fā)生轉(zhuǎn)晶現(xiàn)象，表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性。
[0043] 4.2銀杏內(nèi)酯K晶K型不含任何結(jié)晶溶劑，具有良好的安全性。
【附圖說(shuō)明】
[0044] 圖1銀杏內(nèi)酯K晶K型的粉末X射線衍射圖譜
[0045] 圖2銀杏內(nèi)酯K晶K型的紅外吸收光譜圖 [0046]圖3銀杏內(nèi)酯K晶K型的差示掃描量熱圖譜 [0047]圖4銀杏內(nèi)酯K晶K型的熱重圖譜
【具體實(shí)施方式】
[0048]為更好說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，特給出以下實(shí)施例，但本發(fā)明并不僅限于此。
[0049] 實(shí)施例1
[0050] 銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法1:
[0051] 使用四氫呋喃溶劑在20°C下將銀杏內(nèi)酯K樣品完全溶解，經(jīng)環(huán)境溫度20°C，放置2 天，重結(jié)晶獲得銀杏內(nèi)酯K固體物質(zhì)。對(duì)其進(jìn)行粉末X射線衍射分析，其衍射圖譜與圖1 一致， 表明所得樣品為銀杏內(nèi)酯K晶K型。
[0052] 銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法2:
[0053]使用丙酮溶劑在20°C下將銀杏內(nèi)酯K樣品完全溶解，經(jīng)環(huán)境溫度20°C，放置5天，重 結(jié)晶獲得銀杏內(nèi)酯K固體物質(zhì)。對(duì)其進(jìn)行粉末X射線衍射分析，其衍射圖譜與圖1 一致，表明 所得樣品為銀杏內(nèi)酯K晶K型。
[0054] 銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法3:
[0055] 使用乙醇溶劑在45°C下將銀杏內(nèi)酯K樣品完全溶解，經(jīng)環(huán)境溫度10°C，放置6天，重 結(jié)晶獲得銀杏內(nèi)酯K固體物質(zhì)。對(duì)其進(jìn)行粉末X射線衍射分析，其衍射圖譜與圖1 一致，表明 所得樣品為銀杏內(nèi)酯K晶K型。
[0056] 銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法4:
[0057]使用甲醇溶劑在40°C下將銀杏內(nèi)酯K樣品完全溶解，經(jīng)環(huán)境溫度10°C，放置8天，重 結(jié)晶獲得銀杏內(nèi)酯K固體物質(zhì)。對(duì)其進(jìn)行粉末X射線衍射分析，其衍射圖譜與圖1 一致，表明 所得樣品為銀杏內(nèi)酯K晶K型。
[0058]銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法5:
[0059] 使用甲醇-水(v/v = 2:1)混合溶劑在50°C下將銀杏內(nèi)酯K樣品完全溶解，經(jīng)環(huán)境溫 度l〇°C，放置10天，重結(jié)晶獲得銀杏內(nèi)酯K固體物質(zhì)。對(duì)其進(jìn)行粉末X射線衍射分析，其衍射 圖譜與圖1 一致，表明所得樣品為銀杏內(nèi)酯K晶K型。
[0060] 銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法6:
[0061] 使用甲醇-乙醇(v/v=l:l)混合溶劑在50°C下將銀杏內(nèi)酯K樣品完全溶解，經(jīng)環(huán)境 溫度l〇°C，放置8天，重結(jié)晶獲得銀杏內(nèi)酯K固體物質(zhì)。對(duì)其進(jìn)行粉末X射線衍射分析，其衍射 圖譜與圖1 一致，表明所得樣品為銀杏內(nèi)酯K晶K型。
[0062] 銀杏內(nèi)酯K晶K型的制備方法7: