純化水中，充 分溶解，經(jīng)過滅菌處理。
[0072] 所述的灌裝過程包括:將滅菌后的吸附樹脂等量分裝到已制備好傳感器的培養(yǎng)瓶 內(nèi)。
[0073] 所述的灌裝過程還包括:將過濾除菌后的液體培養(yǎng)基添加到已制備好傳感器的培 養(yǎng)瓶內(nèi)。
[0074] 所述的密封過程包括:將滅菌后的下基膠塞置于灌裝好吸附樹脂和液體培養(yǎng)基的 培養(yǎng)瓶上方，通過灌裝-加塞-壓蓋機(jī)對(duì)培養(yǎng)瓶內(nèi)部填充氣體。
[0075] 所述的密封過程還包括:將滅菌后的下基膠塞置于灌裝好吸附樹脂和液體培養(yǎng)基 的培養(yǎng)瓶上方，通過灌裝-加塞-壓蓋機(jī)對(duì)培養(yǎng)瓶內(nèi)部施加真空，形成負(fù)壓。
[0076] 所述的密封過程還包括:將侶塑蓋壓在已注入內(nèi)部填充氣體形成負(fù)壓的培養(yǎng)瓶瓶 口，壓實(shí)密封。
[0077] 所述的滅菌過程為福照滅菌。
[0078] 本發(fā)明的體液增菌培養(yǎng)瓶，不僅能進(jìn)行血液培養(yǎng)，還可W對(duì)臨床其他體液樣本進(jìn) 行培養(yǎng)，如胸水、腹水、腦脊液等。
[0079] 具體地說，所述的培養(yǎng)瓶瓶體為雙層塑料瓶1，無色透明不透氣的圓柱體型，內(nèi)部 為無菌負(fù)壓環(huán)境，使樣本順利注入培養(yǎng)瓶內(nèi)，免除污染風(fēng)險(xiǎn)。瓶塞3為彈性下基膠塞，與瓶口 緊密貼合保證培養(yǎng)瓶的氣密性。瓶蓋2為雙層的侶塑蓋，使用時(shí)將表層的塑料帽8去除，使用 前塑料帽將保持膠塞的密封和無菌。培養(yǎng)瓶內(nèi)配置的液體培養(yǎng)基4為絕大多數(shù)微生物生長 需要的膜酶大豆肉湯、腦屯、浸液、酵母提取物、糖類等培養(yǎng)基組分，并添加適當(dāng)對(duì)微生物細(xì) 胞其修復(fù)作用的維生素，使微生物快速繁殖，并能修復(fù)受到樣本中干擾物質(zhì)（例如抗生素） 損傷的微生物，提高檢出幾率。液體培養(yǎng)基中添加有括抗作用的物質(zhì)，如乙二胺四乙酸鹽、 對(duì)氨基苯甲酸、聚茵香橫酸鋼、葡萄糖氧化酶、氯化血紅素中的一種或多種，能夠促進(jìn)微生 物的生長和快速繁殖。液體培養(yǎng)基中添加有吸附樹脂5,吸附樹脂為一種或多種非離子吸附 樹脂和陽離子交換樹脂，吸附樹脂懸浮于液體培養(yǎng)基中，用于吸附樣本中含有的抗生素等 物質(zhì)，降低抗生素等物質(zhì)對(duì)體液培養(yǎng)的干擾，提高檢出率。體液增菌培養(yǎng)瓶內(nèi)含有內(nèi)置氣 體，提供微生物生長的必要條件。體液增菌培養(yǎng)瓶的瓶底，注入傳感器6，傳感器為選擇性半 透膜，采用高分子娃橡膠材料制備，其能透過非極性分子而阻擋極性分子，保證二氧化碳能 夠透過半透膜而阻擋培養(yǎng)基中的其他分子和/或離子，使傳感器的顏色變化只由樣本中微 生物生長產(chǎn)生的二氧化碳的濃度引起，而免除其他離子和/或分子的干擾，進(jìn)而提高設(shè)備檢 測的準(zhǔn)確率。傳感器中含有催化劑，能夠使傳感器材料引入培養(yǎng)瓶內(nèi)后快速固化，縮短固化 時(shí)間。傳感器中含有酸堿指示劑和巧光指示劑，當(dāng)瓶內(nèi)微生物生長產(chǎn)生二氧化碳時(shí)，引起酸 堿指示劑顏色變化和巧光指示劑巧光物質(zhì)變化。體液增菌培養(yǎng)瓶內(nèi)含有內(nèi)置填充氣體7,包 括氮?dú)狻⒀鯕?、氨氣、二氧化碳、空氣中的一種或多種，滿足不同類微生物的生長需求，促進(jìn) 微生物的生長。
[0080] 如圖2所示，本發(fā)明的體液增菌培養(yǎng)瓶的生產(chǎn)工藝過程，需要7個(gè)步驟，具體描述如 下：
[0081] 步驟1雙層塑料瓶體制備:首先使用型巧模具鑄造型巧內(nèi)層，在120-150°C條件下 將聚碳酸醋注入模具，冷卻后依此型巧外層模具的內(nèi)忍鑄造型巧外層，在70-100°C條件下 將聚糞二甲酸乙二醇醋注入型巧模具，冷卻后脫巧，然后轉(zhuǎn)入雙層瓶模具，在高溫條件下吹 塑成型。
[0082] 步驟2傳感器材料制備:稱取羅丹明B 0.0496g，溶解在，lOmL純化水中，稱取漠百 里酪藍(lán)0.345g，溶解在15mL純化水中，稱取鋒白3.472g加入到10血純化水中，將W上配好溶 液，與495.9mL娃橡膠基本成分和49.6mL固化劑混合，用純化水定容到600mL，在真空條件下 攬拌脫泡15min，攬拌均勻的同時(shí)完成脫泡工作。
[0083] 步驟3傳感器添加:使用均勻分裝設(shè)備將傳感器材料引入到瓶體內(nèi)，在底部鋪平， 形成2-10mm厚度的傳感器。
[0084] 步驟4傳感器固化:將引入傳感器材料的瓶體在溫度45-85°C環(huán)境下固化，娃橡膠 中含有的固化劑和銷系催化劑起到促進(jìn)固化作用，在1-2小時(shí)內(nèi)完成固化，傳感器制備工作 完成。
[0085] 步驟5液體培養(yǎng)基制備:稱取膜酶大豆肉湯90g，腦屯、浸液6g，酵母提取物6g，葡萄 糖30g，氯化鋼15g，聚茵香橫酸鋼0.03g，組合維生素0.03g，氯化血紅素0.003g，生長因子 0.003g，將W上液體培養(yǎng)基組分添加到3000mL純化水中，溶解，攬拌均勻，過濾除菌。
[0086] 步驟6灌裝:將滅菌的液體培養(yǎng)基和滅菌的吸附樹脂通過灌裝-加塞-壓蓋機(jī)灌裝 到含有傳感器的瓶體內(nèi)，每瓶30mL。
[0087] 步驟7密封:將滅菌的膠塞附著到瓶口上方，通過灌裝-加塞-壓蓋機(jī)填充氣體，并 形成真空，然后將膠塞壓實(shí)，最后通過灌裝-加塞-壓蓋機(jī)將侶塑蓋附著到瓶口上方，然后壓 實(shí)。
[0088] 步驟8滅菌:將W密封好，各組件裝置好的培養(yǎng)瓶進(jìn)行福照滅菌(2化Gy)，最終形成 密封的無菌的體液增菌培養(yǎng)瓶產(chǎn)品。
[0089] 下面就一些關(guān)鍵步驟通過一些實(shí)施例來進(jìn)行進(jìn)一步的描述。
[0090] 在一個(gè)實(shí)施例中，傳感器的材料包括： Sylgard 184健橡膠基本組分 84,巧從 固化劑 8.48% 裘百里釀藍(lán) 1. 69%
[0091] 辭白 0.85% 羅丹明B 0. 85% 其化 3.:38%
[0092] 其中Sylgard 184娃橡膠基本組分包括聚甲基硅氧烷和銷系催化劑。 在另一個(gè)實(shí)施例中，傳感器的材料包括. Sylgard 184珪橡膠基本組分 82. 64% 固化劑 8.2食％
[0093] 藥百里醜藍(lán) 2. 48% 舞白 1,65% 羅丹明B 1.65% 其他 3.絲％
[0094] 在又一個(gè)實(shí)施例中，傳感器的材料包括： Sylgard 184娃橡膠基本組分 76. 33% 固化劑 7.自3% 澳百里固分藍(lán) 1 8擲
[0095] 辭白 1齡％ 羅丹明B L 11% 其他 3. 06%
[0096] -個(gè)實(shí)施例中，傳感器的材料包括： Sv 1 gard 184裡橡膠基本組分 巧.36跑
[0097] 固化劑 7.94端 襲百里驗(yàn)藍(lán) 5. 56% 辭白 2. 38%
[009引 羅丹明B 化40% 其他 4.絲％
[0099] 又一個(gè)實(shí)施例中，傳感器的材料包括： Sylgard 184毯橡膠基本組分 77. 52% 固化劑 7.75% 裘百里目分藍(lán) 5. 3:8%
[0100] 摔白 4.61% 酸牲紅 1. 5韻 其他 3. 19%
[0101 ]本發(fā)明中傳感器材料配方的范圍： Sylgard 184娃橡膠基本組分 70%-90菊 固化劑 7%-9% 桌百里驗(yàn)藍(lán) 化騎
[0102] 辭白 化1始-9% 羅丹明B 化騎 其他 1%-9%
[0103] W上所述的為體積比例，其中漠百里酪藍(lán)為濃度0.1%-10%(w/w)的水溶液，鋒白 為濃度10 %-80 % o/w)的懸濁液，羅丹明B為濃度0.1-10 % o/w)的水溶液，其他成分為水 或乙醇等。
[0104] 在一個(gè)實(shí)施例中，液體培養(yǎng)基的制備方法為，將下列組分按比例稱取，然后溶解到 純化水中，加熱使其充分溶解。 腹酶大至巧游 1-2々衙 腦心'浸液 0.1-5%