6%，制得的固定化葡萄糖氧化酶中葡萄糖氧化酶的負(fù)載量為247.6mg酶/g載體。
[0058]實施例4
[0059](I)稱取2.43g FeCl3.6H2O和0.9g FeCl2.4H20溶解在300mL蒸餾水中，向溶液中滴加氨水，調(diào)節(jié)溶液PH為10，將混合溶液在30 0C下反應(yīng)Ih，得到納米Fe3O4 ；制得的納米Fe3O4可保存在pH=7的Tris-HCl的緩沖溶液中；
[0060](2)稱取1mg微晶纖維素，-12°C條件下溶解在含有質(zhì)量百分比為7%Na0H與12%Urea的NaOH-Urea水溶液中，其中，NaOH-Urea溶液和纖維素的質(zhì)量比是1: 0.05;在磁力攪拌條件下加入20mg的Fe3O4,然后向混合溶液中加水使纖維素再生，用磁鐵將其分離，并用蒸餾水洗滌三次，得到磁性纖維素納米晶；
[0061 ] (3)取23.799mg六水合硝酸鋅溶解在2mL蒸餾水中，與30mg步驟(I)制得的磁性纖維素納米晶混合攪拌20min，攪拌速度為300rpm ；得到混合溶液；
[0062](4)將26.272mg的2-甲基咪唑溶解在2mL蒸餾水中，加入步驟(3)制得的混合溶液中，攪拌條件(攪拌速度為300rpm)下反應(yīng)Ih;將所得產(chǎn)物用蒸餾水洗滌，冷凍干燥后得到磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽；
[0063](5)將葡萄糖氧化酶粗酶粉溶解在水中，過濾除去不溶性雜質(zhì)，取ImL酶液(酶含量1mg)與步驟(3)制得的載體磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽混合，25°C攪拌條件下進(jìn)行固定化6h，然后用蒸餾水洗滌未固定化到載體上的酶，得到固定化葡萄糖氧化酶；
[0064]本實施例固定化酶效率為92.6%,酶活回收率為79.4%,制得的固定化葡萄糖氧化酶中葡萄糖氧化酶的負(fù)載量為286.7mg酶/g載體。
[0065]實施例5
[0066](I)稱取2.43g FeCl3.6H2O和0.9g FeCl2.4H20溶解在300mL蒸餾水中，向溶液中滴加氨水，調(diào)節(jié)溶液PH為10，將混合溶液在30 0C下反應(yīng)Ih，得到納米Fe3O4 ；制得的納米Fe3O4可保存在pH=7的Tris-HCl的緩沖溶液中；
[0067](2)稱取1mg微晶纖維素，_12°C條件下溶解在含有質(zhì)量百分比為7%Na0H與12%Urea的NaOH-Urea水溶液中，其中，NaOH-Urea溶液和纖維素的質(zhì)量比是1: 0.02;在磁力攪拌條件下加入30mg的Fe3O4,然后向混合溶液中加水使纖維素再生，用磁鐵將其分離，并用蒸餾水洗滌三次，得到磁性纖維素納米晶；
[0068](3)取23.799mg六水合硝酸鋅溶解在2mL蒸餾水中，與40mg步驟(I)制得的磁性纖維素納米晶混合攪拌20min，攪拌速度為10rpm，得到混合溶液；
[0069](4)將26.272mg的2-甲基咪唑溶解在2mL蒸餾水中，加入步驟(3)制得的混合溶液中，攪拌條件(攪拌速度為10rpm)下反應(yīng)30min;將所得產(chǎn)物用蒸餾水洗滌，冷凍干燥后得到磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽。
[0070](5)將葡萄糖氧化酶粗酶粉溶解在水中，過濾除去不溶性雜質(zhì)，取ImL酶液(酶含量1mg)與步驟(3)制得的載體磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽混合，25°C攪拌條件下進(jìn)行固定化應(yīng)12h，用蒸餾水洗滌未固定化到載體上的酶，得到固定化葡萄糖氧化酶；
[0071 ]本實施例固定化酶效率為84.7%,酶活回收率為86.9%,制得的固定化葡萄糖氧化酶中葡萄糖氧化酶的負(fù)載量為275.8mg酶/g載體。
[0072]實施例6
[0073](I)稱取2.43g FeCl3.6H2O和0.9g FeCl2.4H20溶解在300mL蒸餾水中，向溶液中滴加氨水，調(diào)節(jié)溶液PH為10，將混合溶液在30 0C下反應(yīng)Ih，得到納米Fe3O4 ；制得的納米Fe3O4可保存在pH=7的Tris-HCl的緩沖溶液中；
[0074](2)稱取1mg微晶纖維素，_12°C條件下溶解在含有質(zhì)量百分比為7%Na0H與12%Urea的NaOH-Urea水溶液中，其中，NaOH-Urea溶液和纖維素的質(zhì)量比是1: 0.02;在磁力攪拌條件下加入15mg的Fe3O4,然后向混合溶液中加水使纖維素再生，用磁鐵將其分離，并用蒸餾水洗滌三次，得到磁性纖維素納米晶；
[0075](3)取23.799mg六水合硝酸鋅溶解在2mL蒸餾水中，與25mg步驟(I)制得的磁性纖維素納米晶混合攪拌20min，攪拌速度為300rpm，得到混合溶液；
[0076](4)將26.272mg的2-甲基咪唑溶解在2mL蒸餾水中，加入步驟(3)制得的混合溶液中，攪拌條件(攪拌速度為300rpm)下反應(yīng)24h;將所得產(chǎn)物用蒸餾水洗滌，冷凍干燥后得到磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽。
[0077]實施例7
[0078](I)稱取2.43g FeCl3.6H2O和0.9g FeCl2.4H20溶解在300mL蒸餾水中，向溶液中滴加氨水，調(diào)節(jié)溶液PH為10，將混合溶液在30 0C下反應(yīng)Ih，得到納米Fe3O4 ；制得的納米Fe3O4可保存在pH=7的Tris-HCl的緩沖溶液中；
[0079](2)稱取10mg微晶纖維素，_12°C條件下溶解在含有質(zhì)量百分比為7%Na0H與12%Urea的NaOH-Urea水溶液中，其中，NaOH-Urea溶液和纖維素的質(zhì)量比是1: 0.02;在磁力攪拌條件下加入150mg的Fe3O4,然后向混合溶液中加水使纖維素再生，用磁鐵將其分離，并用蒸餾水洗滌三次，得到磁性纖維素納米晶；
[0080](3)取23.799mg六水合硝酸鋅溶解在2mL蒸餾水中，與25mg步驟(I)制得的磁性纖維素納米晶混合攪拌20min，攪拌速度為300rpm，得到混合溶液；
[0081 ] (4)將26.272mg的2-甲基咪唑溶解在2mL蒸餾水中，加入步驟(3)制得的混合溶液中，攪拌條件(攪拌速度為300rpm)下反應(yīng)12h;將所得產(chǎn)物用蒸餾水洗滌，冷凍干燥后得到磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽。
[0082]實施例8
[0083](I)稱取2.43g FeCl3.6H2O和0.9g FeCl2.4H20溶解在300mL蒸餾水中，向溶液中滴加氨水，調(diào)節(jié)溶液PH為9，將混合溶液在30 °C下反應(yīng)Ih，得到納米Fe3O4 ；制得的納米Fe3O4可保存在pH=7的Tris-HCl的緩沖溶液中；
[0084](2)稱取1mg微晶纖維素，_12°C條件下溶解在含有質(zhì)量百分比為7%Na0H與12%Urea的NaOH-Urea水溶液中，其中，NaOH-Urea溶液和纖維素的質(zhì)量比是1: 0.02;在磁力攪拌條件下加入15mg的Fe3O4,然后向混合溶液中加水使纖維素再生，用磁鐵將其分離，并用蒸餾水洗滌三次，得到磁性纖維素納米晶；
[0085](3)取23.799mg六水合硝酸鋅溶解在2mL蒸餾水中，與25mg步驟(I)制得的磁性纖維素納米晶混合攪拌20min，攪拌速度為300rpm，得到混合溶液；
[0086](4)將26.272mg的2-甲基咪唑溶解在2mL蒸餾水中，加入步驟(3)制得的混合溶液中，攪拌條件下反應(yīng)24h，攪拌速度為300rpm;將所得產(chǎn)物用蒸餾水洗滌，冷凍干燥后得到磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽。
[0087]效果實施例
[0088]對實施例1?5制得的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽分別進(jìn)行紅外光譜和X-射線衍射檢測;結(jié)果見圖1和圖2。
[0089]從圖1可以看出，實施例1?3制得的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽在3440和3370cm—1處峰分別反映纖維素分子內(nèi)和分子間氫鍵的峰。594cm—1處有很強(qiáng)的吸收峰，是Fe304特征吸附峰。
[0090]從圖2可以看出，衍射角為12.4，20.2和22.2°的三個峰為再生纖維素衍射峰，在衍射角為30.24，35.60，43.24，和57.16°出現(xiàn)明顯的峰為Fe3O4的晶面衍射峰。并且隨著Fe3O4含量增多，其峰強(qiáng)度明顯增強(qiáng)。
[0091]上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽的制備方法，其特征在于包含如下步驟: (1)將纖維素溶解于NaOH-Urea水溶液中，在攪拌條件加入納米Fe3O4，加水再生，產(chǎn)物分離并洗滌，得到磁性纖維素； (2)將步驟(I)制得的磁性纖維素與硝酸鋅溶液混合攪拌5?30min，得到混合溶液； (3)在步驟(2)制得的混合溶液中加入2-甲基咪唑溶液，攪拌反應(yīng)0.5?24h，將所得固體磁性分離，洗滌，干燥，得到磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽的制備方法，其特征在于: 步驟(I)中所述的納米Fe304的制備方法，包含如下步驟: 將FeCl3.6H20和FeCl2.4H20溶解在水中，調(diào)節(jié)溶液pH為9?12;然后將混合溶液在30°C下反應(yīng)0.5?3h，得到納米Fe3〇4。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽的制備方法，其特征在于: 步驟(I)中所述的NaOH-Urea水溶液包含如下按質(zhì)量百分比計的組分:7%Na0H和12%Urea04.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽的制備方法，其特征在于: 步驟(I)中所述的溶解的溫度為_12°C以下。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽的制備方法，其特征在于: 步驟(I)中所述的纖維素與納米Fe3O4的質(zhì)量比為1:(0.1?3)。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽的制備方法，其特征在于: 步驟(2)中所述的硝酸鋅溶液中的硝酸鋅與磁性纖維素的質(zhì)量比為1:(0.5?2)。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽的制備方法，其特征在于: 步驟(3)中所述的2-甲基咪唑溶液中的2-甲基咪唑與步驟(2)中硝酸鋅溶液中的硝酸鋅的摩爾比為4:1。8.一種磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽，其特征在于:通過權(quán)利要求1?7任一項制備方法制備得到。9.權(quán)利要求8所述的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽在酶固定化領(lǐng)域中的應(yīng)用。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽在酶固定化領(lǐng)域中的應(yīng)用，其特征在于包含如下步驟: 將權(quán)利要求8所述的磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽作為載體與酶液混合，在O?25 0C的溫度下固定化I?12h，得到固定化酶。
【專利摘要】本發(fā)明屬于新功能材料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明將纖維素溶解于NaOH-Urea水溶液中，在攪拌條件加入納米Fe3O4，加水再生，產(chǎn)物分離并洗滌，得到磁性纖維素；將磁性纖維素與硝酸鋅溶液混合攪拌5～30min，然后加入2-甲基咪唑溶液，攪拌條件下反應(yīng)0.5～24h，將所得固體磁性分離，洗滌，干燥，得到磁性纖維素-二甲基咪唑鋅鹽；該產(chǎn)物能夠用作固定化酶的載體，能夠固定化脂肪酶、木瓜蛋白酶、綠豆環(huán)氧化物酶、過氧化物酶等一系列酶，具有作為蛋白質(zhì)藥物載體的潛質(zhì)。
【IPC分類】C08K5/3445, C08L1/04, C12N11/12, C08K3/22
【公開號】CN105622985
【申請?zhí)枴緾N201610111487
【發(fā)明人】婁文勇, 徐紅, 曹詩林, 宗敏華
【申請人】華南理工大學(xué)
【公開日】2016年6月1日
【申請日】2016年2月29日