71.6mg/L CaC03)，實驗動物使用許可證號為：SYXK(浙）2012-0171。飼養(yǎng)管理符合國際 AAALAC認證的要求。
[0099] 實驗藥物
[0100]實施例1制備得到的Μ型-S0D，白色粉末，臨用時用超純水配制成濃度為20mg/mL的 母液，現(xiàn)用現(xiàn)配。
[0101] 潑尼松，白色粉末，批號為28778,臨用時用100%DMS0配制濃度15mg/mL母液，由上 海晶純實業(yè)有限公司提供。
[0102] 三硝基苯磺酸（以下簡稱TNBS)，棕色液體，批號為D1326018,由上海晶純實業(yè)有限 公司提供。
[0103] 所用儀器
[0104] 解剖顯微鏡（32乂7,01^?1^，如?&11);電動聚焦連續(xù)變倍熒光顯微鏡以2100，附1?)11 公司）；6孔板(Nest Biotech);甲基纖維素(Aladdin,中國上海）。
[0105] 模型建立
[0106]模型1:將受精后3天的野生型AB系斑馬魚在含有終濃度為4.5μΜ TNBS的養(yǎng)魚水中 培養(yǎng)48h后即可建立斑馬魚結(jié)腸炎模型。（具體過程參考A. Jemal，R. Siegel，J.Xu，et al .Ward · Clinicians，2010，277-300，以及 Intestinal Upregulation of Melanin-Concentrating Hormone in TNBS-Induced Enterocolitis in Adult Zebrafish.Plos One ,2013,8(12) :1524-1528)。建模的結(jié)果顯示:模型對照組腸腔面積（197660)與正常對照 組（130711)相比p〈0.001，表明模型建立成功，其用于下述實驗1。
[0107]模型2:將受精后3天的轉(zhuǎn)基因中性粒細胞熒光斑馬魚在含有終濃度為4.5μΜ TNBS 的養(yǎng)魚水中培養(yǎng)48h后即可建立斑馬魚結(jié)腸炎模型，操作方法同上。結(jié)果顯示:模型對照組 斑馬魚腸道處中性粒細胞個數(shù)(9.4)與正常對照組（1.6)相比p〈0.001，表明模型建立成功， 其用于下述實驗2。
[0108]實驗1M型-S0D對結(jié)腸炎的治療作用 [0109]實驗方法
[0110] (1)確定Μ型-S0D的最大非致死濃度(MNLC)
[0111] 用Μ型-S0D處理斑馬魚(處理48小時），M型-S0D設(shè)置多個不同的濃度；
[0112] Μ 型-S0D 的 5 個初始檢測濃度分別為：150yg/mL、200yg/mL、333yg/mL、1000yg/mL 和 2000yg/mL；
[0113] 每個實驗組均處理30尾斑馬魚；
[0114] 在實驗過程中，每天對死亡的斑馬魚計數(shù)并移除死亡的斑馬魚；
[0115] Μ型-S0D處理結(jié)束后，統(tǒng)計各實驗組的斑馬魚死亡數(shù)量，確定MNLC。
[0116] 實驗結(jié)果：
[0117] 根據(jù)濃度-致死數(shù)據(jù)表1知，Μ型-S0D的MNLC為150yg/mL，藥效學評價實驗選取15μ g/mL、50yg/mL 和 150yg/mL 三個濃度。
[0118] 表1M型-SOD濃度-致死數(shù)據(jù)表
[0119]
[0120] (2)評價Μ型-S0D對結(jié)腸炎的治療作用
[0121 ]模型對照組:用TNBS誘發(fā)的結(jié)腸炎斑馬魚模型(模型1);
[0122] 陽性對照組:按照終濃度為15yg/mL向養(yǎng)魚水中加入潑尼松；
[0123] 治療組:選取3個終濃度向養(yǎng)魚水中加入Μ型-S0D，其終濃度分別為1MNLC、1/3MNLC 和1/10MNLC;
[0124] 正常對照組或溶劑組在上下文中指代相同，具體為未經(jīng)任何處理的受精后3天的 野生型AB系斑馬魚；
[0125] 說明：每個實驗組均處理30尾斑馬魚（處理時間均為48小時）；Μ型-S0D處理結(jié)束 后，每組隨機取15尾斑馬魚在顯微鏡下觀察、拍照并保存圖片；用圖像分析軟件進行圖像分 析，計算斑馬魚腸腔面積，并進行定量分析，統(tǒng)計學處理結(jié)果用X ± SE表示；
[0126] Μ型-S0D對結(jié)腸炎的治療作用計算公式如下：
[0127]
[0128] 陽性對照組的治療效率通過將上式中的治療組替換成陽性對照組計算獲得；
[0129] 用方差分析和Dunnett ' s T-檢驗進行統(tǒng)計學分析，p〈0.05表明具有顯著性差異；
[0130] 提供具有代表性的實驗圖譜。
[0131] 實驗結(jié)果
[0132] 模型對照組腸腔面積（197660)與正常對照組（130711)比較p〈0.001，表明模型建 立非常成功；陽性對照藥潑尼松腸腔面積（147876)與模型對照組相比p〈0.001，其對斑馬魚 結(jié)腸炎的治療效率為74 %。濃度為15yg/mL、50yg/mL和150yg/mL的Μ型-S0D對結(jié)腸炎的治療 效率分別為66 %、82 %和84%，各組與模型對照組相比p〈0.001，提示Μ型-S0D對結(jié)腸炎具有 顯著的治療作用。詳見表2、圖5、圖6、圖7和圖8。
[0133] 表2M型-S0D對結(jié)腸炎的治療作用定量結(jié)果(η = 15)
[0134]
[0135] 與模型對照組相比，*#ρ〈0 · 001
[0136] 實驗2Μ型-SOD對結(jié)腸炎炎癥消退的影響
[0137] 實驗方法：
[0138] Μ型-S0D選取3個濃度進行檢測（按15yg/mL、50yg/mL和150yg/mL的終濃度向向養(yǎng) 魚水中加入）；
[0139] 模型對照組:用TNBS誘發(fā)結(jié)腸炎模型(結(jié)腸炎模型斑馬魚，模型2);
[0140] 治療組:用Μ型-S0D處理結(jié)腸炎模型斑馬魚；
[0141] 陽性對照組:按照終濃度為15yg/mL向結(jié)腸炎模型斑馬魚的養(yǎng)魚水中加入潑尼松；
[0142] 正常對照組或溶劑組在上下文中指代相同，具體為未經(jīng)任何處理的轉(zhuǎn)基因中性粒 細胞熒光斑馬魚；
[0143] 每個實驗組均處理30尾轉(zhuǎn)基因中性粒細胞熒光斑馬魚，處理時間為48小時；
[0144] Μ型-S0D處理結(jié)束后，每組隨機取12尾斑馬魚在熒光顯微鏡下觀察、拍照并保存圖 片；
[0145] 用圖像分析軟件對中性粒細胞在結(jié)腸炎組織中的分布進行定量，統(tǒng)計學處理結(jié)果 用SE表示Μ型-S0D對結(jié)腸炎炎癥消退的藥效學計算公式如下：
[0146]
[0147] 陽性對照組的治療效率通過將上式中的治療組替換成陽性對照組計算獲得；
[0148] 用方差分析和Dunnett ' s T-檢驗進行統(tǒng)計學分析，p〈0.05表明具有顯著性差異；
[0149] 提供具有代表性的實驗圖譜。
[0150] 實驗結(jié)果
[0151] 模型對照組斑馬魚腸道處中性粒細胞個數(shù)（9.4)與正常對照組（1.6)相比p〈 0.001，表明模型建立成功；陽性對照藥潑尼松中性粒細胞個數(shù)(3.8)與模型對照組相比p〈 0.001，提示潑尼松具有促進結(jié)腸炎炎癥消退的作用，其炎癥消退促進率為71%。濃度為15μ g/mL、50yg/mL和150yg/mL的Μ型-SOD對結(jié)腸炎的炎癥消退促進率分別為34%、49%和74%， 各組與模型對照組相比P〈〇. 05&p〈0.01&p〈0.001，提示Μ型-S0D對結(jié)腸炎炎癥消退具有顯著 的促進作用。詳見表3、圖9、圖10和圖11。
[0152] 表3M型-S0D對結(jié)腸炎炎癥消退的促進作用定量結(jié)果(η = 12)
[0153]
[0155] 與模型對照組相比，*p〈0 · 05**p〈0 · 01***p〈0 · 001
[0156] 實驗3腸道組織病理學分析
[0157] 組別:實驗1組正常對照組;實驗2組模型對照組;實驗3組陽性對照藥潑尼松15yg/ mL;實驗4組Μ型-SOD 15yg/mL;實驗5組Μ型-SOD 50yg/mL;實驗6組Μ型-SOD 150yg/mL。實驗 方法
[0158] Μ型-S0D處理組:處理方式、濃度組設(shè)置與實驗1相同；
[0159] 陽性對照組:潑尼松處理組(處理方式同上）；
[0160] 腸炎模型組:模型1;
[0161] 正常對照組，具體為未經(jīng)任何處理的受精后3天的野生型AB系斑馬魚；
[0162] 每個實驗組處理30尾斑馬魚，處理時間為48小時；
[0163] Μ型-S0D處理完成后，用4%多聚甲醛固定，固定后將斑馬魚轉(zhuǎn)移到70%乙醇中；
[0164] 將固定后的斑馬魚在顯微鏡下觀察腸腔組織，并拍照記錄，進行組織病理學分析， 如實驗結(jié)果所述。
[0165] 實驗結(jié)果
[0166] 正常對照組斑馬魚腸粘膜光滑、完整，腸褶皺明顯；模型對照組斑馬魚腸腔擴張， 腸粘膜變薄，腸褶皺消失，可見粘膜糜爛潰瘍；陽性對照藥潑尼松治療后，腸粘膜組織學明 顯改善。濃度為15yg/mL、50yg/mL和150yg/mL的Μ型-S0D處理后，腸腔面積和腸裙皺基本恢 復，腸粘膜炎癥顯著好轉(zhuǎn)，未見明顯的炎癥潰瘍。詳見圖12。
[0167] 實施例4本發(fā)明提供的Μ型-S0D對人腸炎的治療效果(臨床觀察）
[0168] 炎癥性腸?。↖nflammatory bowel disease, IBD)是一種常見疾病，克羅恩病 (Crohn's disease，⑶)和潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)常并稱為IBD?？肆_恩病 (又稱局限性腸炎、節(jié)段性腸炎或肉芽腫性小腸結(jié)腸炎。本病是一種原因不明的胃腸道慢性 肉芽腫性疾病，多見于回腸末端和臨近結(jié)腸，病變成階段性或跳躍式分布，為全層腸壁性炎 癥。潰瘍性結(jié)腸炎又稱非特異性潰瘍性結(jié)腸炎，是一種原因不明的直腸和結(jié)腸的慢性炎癥 性疾病。病變主要累及大腸粘膜和粘膜下層，直腸和遠端結(jié)腸是最常見的受累部位，但病變 嚴重時也可累及全結(jié)腸及末端回腸。它們的表現(xiàn)一般都是腹瀉、腹痛，甚至有些人可以有血 便。目前認為IBD發(fā)病機制可能為:某些遺傳決定因素使易感個體易于患病，在感染因子或 腸腔內(nèi)抗原的作用下刺激黏膜相關(guān)淋巴組織，引起上調(diào)的T細胞反應，由此激活各種細胞因 子的網(wǎng)絡(luò)，使局部組織發(fā)炎，并不斷放大和持續(xù)，引起腸壁的損傷和相應的臨床表現(xiàn)。治療 常采用糖皮質(zhì)類固醇(GCS)類藥物(潑尼松，腎上腺皮質(zhì)激素)和抗生素等。療效不佳，副作 用較大，且易產(chǎn)生抗藥性。我們嘗試以本發(fā)明制成片劑(每片含Μ型-S0D10000U)來驗證本發(fā) 明的治療效果，片劑制作方法如下。
[0169] Μ型-S0D片處方:Μ型-SOD 2g;乳糖40g;預膠化淀粉50g;聚維酮K306g;硬脂酸鎂 lg〇
[0170] 制備工藝：
[0171] 1、M型-S0D粉末過80目篩待用；
[0172] 2、粘合劑配制：稱取處方量聚維酮k30,加入到適量的75%乙醇（約60g)中，攪拌， 備用；
[0173] 3、稱取處方量預膠化淀粉、乳糖、處方量S0D混合均勻；
[0174] 4、制粒:將步驟2所得粘合劑加入上述混合粉體中制軟材后，用20目篩制粒；
[0175] 5、濕顆粒60±2°C干燥，至水分1 ·0%~3.5%，20目篩整粒；
[0176] 6、將處方量的硬脂酸鎂與干顆?；旌暇鶆?；
[0177] 7、壓片機壓片，每片含10000單位Μ型-S0D。
[0178] 本實施實例中共有志愿者63名試用本產(chǎn)品，其中男37例，女26例，其中年