2Hz,lH),5.44(dd ,J = 8.1, 4.0Hz,lH),5.33(d,J=3.8Hz,lH),4.07(s,lH),3.10-3.16(m,6H),2.38-2.42(m,2H), 2.29-2.33(m,2H),2.27(s,9H),2.20(s,9H),1.60-1.64(m,6H),1.53(s,3H),1.37-1.43(m, 9H);HRMS(ESI)計(jì)算值 C63H7iN7Na〇22S(M+Na)+:1332.4265,實(shí)測(cè)值 1332.4279 ;HPLC 保留時(shí)間 5.30min〇
[0126] 苯基甘氨酰胺綴合物SI。
[0127]
[0128]向酸9(38mg，0 · 039mmol)的溶液和N_甲基嗎琳（4 · 5yL，0 · 041 mmol)的 1 · 5mL無水 THF溶液(冷卻至0°C)中加入氯甲酸異丁酯(5.2yL，0.040mmol)且將混合物在此溫度下攪拌 1小時(shí)。加入D-苯基甘氨酰胺(8·6mg，0·057mmol)溶液和Et 3N( 10yL)的lmL THF/H20(4:1)溶 液且將混合物在〇°C下攪拌lh并在室溫下攪拌lh。在真空下除去THF后，將殘余物懸浮于H 20 (5mL)中并用Et0Ac(5mLX3)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)Na2S〇4干燥并過濾。在真空下除去溶劑 并將殘余物在硅膠柱(含5_8%Me0H的CH 2C12)上通過層析法純化以得到呈白色固體的綴合 物匪R(600MHz，DMS0-d 6)S8.41((1, J = 7.9Hz, 1H) ,8.31 (t，J = 5.3Hz， 3H),7.65(br.s. ,lH),7.25-7.45(m,14H),7.13^P7.12(2Xs,2H),5.36(d,J = 8.2Hz,lH), 3.11-3.17(m,6H),2.35-2.48(m,2H),2.30-2.34(m,2H),2.28(s,9H),2.21(s,9H),1.58-1.67(111，6!1)，1.37-1.44(111，6!1) ;!11?^^51)計(jì)算值〇551163他〇18(]\?1) + :1095.4193，實(shí)測(cè)值 1095.4203。
[0129] 實(shí)施例2.抗生素測(cè)定
[0130] -般材料和方法。所有液體和培養(yǎng)基在使用前通過高壓滅菌法（12 l°C，15min)進(jìn) 行滅菌。所有水溶液和培養(yǎng)基使用蒸餾、去離子和過濾水(Mi 11 ipore Mi 11 i-Q Advantage AlOWater Purification System)制備。Luria肉湯（LB)購自WHueller-Hinton Νο·2肉 湯(MHII肉湯;經(jīng)陽離子調(diào)節(jié))購自 Sigma_Aldrich(St .Louis，M0)。通過將0.8mLlmg/mL的2， 2 ' -聯(lián)吡啶無菌水溶液加入到49.2mL MHII肉湯中制備缺鐵（-Fe )MHI I肉湯。通過將 0.8mLlmg/mL的FeCl3無菌水溶液加入到49.2mL MHII肉湯中制備富鐵（+Fe)MHII肉湯。 Mueller-Hinton No · 2瓊脂（MHII瓊脂；HiMedia Laboratories)購自 VWR。通過在緩慢攬摔 下將0.5mL lmg/mL的2，2 '-聯(lián)吡啶無菌水溶液加入到34mL熔化的MHII瓊脂中制備缺鐵(-Fe)MHII瓊脂。通過在緩慢攪拌下將0.5mLlmg/mL的FeCl 3無菌水溶液加入到34mL熔化的 MHI I瓊脂中制備富鐵（+Fe)MHI I瓊脂。相關(guān)技術(shù)另見Wencewicz，T . A. Dissertation， University of Notre Dame,Notre Dame, IN,2011〇
[0131] 通過瓊脂擴(kuò)散測(cè)定進(jìn)行抗細(xì)菌敏感性測(cè)試。所述化合物的抗細(xì)菌活性通過改進(jìn)的 Kirby-Bauer瓊脂擴(kuò)散測(cè)定來確定。過夜培養(yǎng)的測(cè)試微生物在LB肉湯中生長(zhǎng)18-24h并根據(jù) 0.5BaS〇4McFarland標(biāo)準(zhǔn)在鹽水溶液(0.9%NaCl)中制備1.5 X 106CFU/mL標(biāo)準(zhǔn)混懸液。將該 標(biāo)準(zhǔn)化混懸液(O.lmL)加入到34mL無菌、熔化的瓊脂(_Fe或+Fe)(調(diào)節(jié)至47-50°C)中。在緩 慢攪拌后，將接種的瓊脂培養(yǎng)基倒入無菌塑料皮氏培養(yǎng)皿(petri dish) (145mm X 20mm)中 并在火焰旁將蓋子半開使其凝固約30min。從所述皮氏培養(yǎng)皿瓊脂中剪下直徑為9.0mm的孔 并精確填充50此樣本溶液。將皮氏培養(yǎng)皿在37°C下孵育18-24h并在24h后用電子卡尺測(cè)量 抑制區(qū)域直徑(mm) 〇
[0132] 通過肉湯微稀釋法測(cè)定確定MIC9Q值。所述化合物的抗細(xì)菌活性根據(jù)臨床和實(shí)驗(yàn)室 標(biāo)準(zhǔn)研究所(CLSI，前身為NCCLS)指南通過使用肉湯微稀釋法測(cè)量其最小抑制濃度(MIC 90' s)來確定。在96-孔微量滴定板的每個(gè)孔中填充50yL無菌肉湯培養(yǎng)基(-Fe或+Fe)。將每個(gè)測(cè) 試化合物溶于DMS0制成20mM溶液，然后用無菌肉湯介質(zhì)（_Fe或+Fe)稀釋至400或800μΜ。將 精確50yL所述化合物溶液加入微量滴定板的第一個(gè)孔中并沿板的每一排進(jìn)行2倍連續(xù)稀 釋。然后將精確50yL細(xì)菌接種物(5 X 105CFU/mL的肉湯培養(yǎng)基)加入到每個(gè)孔中得到lOOyL/ 孔的總體積。將板在37°C下孵育20h然后檢查每個(gè)孔的細(xì)菌生長(zhǎng)。通過培養(yǎng)基相對(duì)于填充 DMS0標(biāo)準(zhǔn)物的一排孔的濁度所判斷記錄作為抑制90%細(xì)菌生長(zhǎng)所需的最低化合物濃度(μ Μ)的 MIC9〇。
[0133] 實(shí)施例3.藥物劑型
[0134] 下列制劑舉例說明可用于本文描述的式的化合物、本文明確公開的化合物或其藥 學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物（以下稱為'化合物X'）的治療性或預(yù)防性施用的代表性藥物劑 型：
[0135]
[0136]
[0137]
[0138]
[0139]
[0140]
[0141]
[0142]
[0143]
[0144]
[0145]
[0146]
[0147]
[0148]
[0149]
[0150]
[0151] 這些制劑可通過藥學(xué)領(lǐng)域熟知的常規(guī)程序制備。應(yīng)當(dāng)理解上述藥物組合物可以根 據(jù)熟知的制藥技術(shù)進(jìn)行改變以便適應(yīng)不同的量和類型的活性成分"組合物X"。氣溶膠制劑 (vi)可以與一種標(biāo)準(zhǔn)的、計(jì)量的氣溶膠分配器結(jié)合使用。另外，這些具體的成分和比例是用 于說明目的。根據(jù)感興趣的劑型的希望特性，成分可以換成適合的等效物并且可以改變比 例。
[0152] 雖然以上關(guān)于所披露的實(shí)施方案和實(shí)例描述了具體的實(shí)施方案，但這些實(shí)施方案 和實(shí)例僅是說明性的并且不限制本發(fā)明的范圍?？梢愿鶕?jù)本領(lǐng)域的普通技術(shù)來進(jìn)行改變和 變更，而不背離本發(fā)明如在以下權(quán)利要求書中限定的較寬方面。
[0153] 所有出版物、專利和專利文件均通過引用并入本文，如同通過引用單獨(dú)地并入一 般。由此將理解沒有與本公開不一致的限制。已經(jīng)關(guān)于各種具體和優(yōu)選的實(shí)施方案以及技 術(shù)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述。然而，應(yīng)理解可在保持處于本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)的同時(shí)作出許 多變化和修改。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種式(I)的化合物： 其中X為通過酯鍵或酰胺鍵共價(jià)連接到式(I)所示結(jié)構(gòu)上的抗生素； m為 0 或 1-11; 每個(gè)R1獨(dú)立地為H、-C( =0)烷基、-C( =0)芳基或-C( =0)0-烷基； 每個(gè)R2獨(dú)立地為Η、烷基、烷氧基、羥基、羧基、鹵基、硝基、氨基或氰基;且 每個(gè)η獨(dú)立地為1、2或3; 或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中每個(gè)R1為乙?；?、丙?；虮郊柞；?。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中每個(gè)R2為Η、烷基、烷氧基或羥基。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中每個(gè)R2為Η。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中每個(gè)η為1。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物其中m為0、1、2或3。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中X為阿米卡星、阿莫西林、氨芐西林、兩性霉素、氨 曲南、芽孢菌霉素、BAL30072、比阿培南、卡盧莫南、頭孢克洛、頭孢噻吩、氯霉素、氯四環(huán)素、 環(huán)丙沙星、克林霉素、磷酸克林霉素、環(huán)絲氨酸、達(dá)托霉素、地美環(huán)素、多利培南、多柔比星、 多西環(huán)素、厄他培南、紅霉素、乙胺丁醇、紅霉素、慶大霉素、亞胺培南、異煙肼、卡那霉素、林 可霉素、氯拉卡比、美羅培南、美他環(huán)素、莫匹羅星、新霉素、制霉菌素、氧四環(huán)素、帕尼培南、 吡咯尼群、利福平、羅利環(huán)素、鏈霉素、磺胺醋酰、磺胺苯酰、磺胺嘧啶、磺胺多辛、磺胺甲基 嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲噁唑、磺胺異噁唑、四環(huán)素或替吉莫南。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中X為氨芐西林或阿莫西林。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物為10. -種組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物和藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載 體。11. 一種治療革蘭氏陰性細(xì)菌感染的方法，其包括向有需要的受試者施用有效治療量 的根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，從而治療所述細(xì)菌感染。12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述細(xì)菌感染由抗生素抗性細(xì)菌引起。13. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述細(xì)菌感染由假單胞菌細(xì)菌引起。14. 一種治療革蘭氏陰性細(xì)菌感染的方法，其包括向有需要的受試者施用有效治療量 的根據(jù)權(quán)利要求10所述的組合物，從而治療所述細(xì)菌感染。15. -種殺傷或抑制革蘭氏陰性細(xì)菌生長(zhǎng)的方法，其包括使所述細(xì)菌與有效致死量或 抑制量的根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物接觸。16. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述細(xì)菌感染由抗生素抗性細(xì)菌引起。17. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述細(xì)菌感染由假單胞菌細(xì)菌引起。18. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述細(xì)菌感染由銅綠假單胞菌、大腸桿菌、鮑氏 不動(dòng)桿菌或鼠傷寒沙門氏菌引起。19. 一種殺傷或抑制革蘭氏陰性細(xì)菌生長(zhǎng)的方法，其包括使所述細(xì)菌與有效致死量或 抑制量的根據(jù)權(quán)利要求10所述的組合物接觸。
【專利摘要】合成了具有三腳架式主鏈的人造三兒茶酚鹽鐵載體及其與氨芐西林和阿莫西林的綴合物。與母體藥物相比，兩種綴合物均表現(xiàn)出顯著增強(qiáng)的針對(duì)革蘭氏陰性物種尤其是針對(duì)銅綠假單胞菌的體外抗細(xì)菌活性。所述綴合物似乎通過誘導(dǎo)的細(xì)菌鐵轉(zhuǎn)運(yùn)過程被同化，因?yàn)槠浠钚耘c鐵濃度反向相關(guān)。所述容易合成的三兒茶酚鹽鐵載體可與作為綴合物的多種藥物一起使用以靶向抗生素抗性革蘭氏陰性細(xì)菌。
【IPC分類】A61K31/43, C07D499/21, C07D499/68, A61P31/04
【公開號(hào)】CN105636966
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201380077567
【發(fā)明人】M·J·米勒, C·季, P·A·米勒
【申請(qǐng)人】圣母大學(xué)
【公開日】2016年6月1日
【申請(qǐng)日】2013年10月23日
【公告號(hào)】CA2909597A1, EP2986617A1, US9302012, US20130281424, WO2014171971A1