一種木脂素類化合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別設(shè)及一種新化合物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 熱毒寧注射液（國藥準(zhǔn)字Z20050217)為江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司自主研發(fā)的原 中藥二類新藥，屬中藥復(fù)方注射劑，由金銀花、檐子和青葛=味中藥精制而成，具有清熱、疏 風(fēng)、解毒的功效，臨床上主要用于治療外感風(fēng)熱所致的感冒、咳嗽、上呼吸道感染、急性支氣 管炎等癥，其臨床療效確切、效果顯著。
[0003] 前期對熱毒寧注射液中的化學(xué)成分已進(jìn)行了深入的研究，但主要發(fā)現(xiàn)的是咖啡酷 奎寧酸類成分和環(huán)締酸祗類成分，通過體內(nèi)外實驗證實了咖啡酷奎寧酸類成分具有較好抗 病毒作用，但是本專利公開的新化合物W及抑制單純瘤疹病毒等多種病毒的作用還未見諸 報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的首要目的在于提供一種新的木脂素類成分。
[0005] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種制備上述新的木脂素類化合物的方法。
[0006] 本發(fā)明的再一目的在于提供上述新的木脂素類成分作為制備抗病毒藥物的用途。
[0007] 本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn):一種新的木脂素類化合物，其結(jié)構(gòu)如式I所 示： (I)。
[000引本發(fā)明所述的木脂素類化合物是研究人員在熱毒寧注射液中發(fā)現(xiàn)的新化學(xué)成分， 并且發(fā)現(xiàn)此化合物在各批次的熱毒寧注射液中均穩(wěn)定存在。經(jīng)查閱文獻(xiàn)得知，運是首次在 熱毒寧注射液中發(fā)現(xiàn)并鑒定出的新的化學(xué)成分，并經(jīng)過Scifinder scholar檢索發(fā)現(xiàn)該化 合物為新化合物。
[0009]本發(fā)明還提供了上述木脂素類化合物的制備方法，包括如下步驟： (1) 取熱毒寧注射液成品，經(jīng)HP-20大孔吸附樹脂色譜柱分離，依次W水、25~35%乙醇、 90~100%乙醇梯度洗脫，分別收集各洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得到水洗脫部位、25~ 35%乙醇洗脫部位、90~100%乙醇洗脫部位； (2) 取步驟（1)的90~100%乙醇洗脫部位，經(jīng)硅膠柱色譜分離，用氯仿-甲醇梯度洗脫， 收集氯仿-甲醇比例為9:1的饋分C，饋分C經(jīng)ODS柱色譜分離，用甲醇-水梯度洗脫，收集甲 醇-水比例為4:6的饋分D，饋分D經(jīng)半制備液相HPLC分離，得到結(jié)構(gòu)如式I所示的本發(fā)明化合 物。
[0010]上述制備方法中，步驟(2)所述半制備液相色譜，優(yōu)選W比例為45:55的甲醇-水為 流動相，檢測波長為254 nm，流速4 mL/min，在半制備液相上的保留時間為14.4 min。
[00川發(fā)明人通過理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜學(xué)手段(UV、IR、MS、iH-NMR、i3C-NM^P2D-NMRWf 上述方法分離得到的化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，證實其為結(jié)構(gòu)如式(I)所示的新化合物。
[0012]本發(fā)明的另一個目的在于提供一種式（I)所示化合物在制備治療單純瘤疹病毒1 型化SV-1)、腸道病毒71型(EV71)和呼吸道合胞病毒(RSV)感染藥物中的應(yīng)用。發(fā)明人發(fā) 現(xiàn)本發(fā)明化合物對單純瘤疹病毒1型化SV-I )、腸道病毒71型（EV71)和呼吸道合胞病毒 (RSV)有一定的抑制作用。
[001引本發(fā)明還提供了一種用于治療單純瘤疹病毒1型（HSV-I)、腸道病毒71型(EV71) 和呼吸道合胞病毒(RSV)感染的藥物，包括式(I)所示化合物。
[0014] 本發(fā)明還提供了一種單純瘤疹病毒1型化SV-I )、腸道病毒71型(EV71)和呼吸道 合胞病毒(RSV)感染的藥物組合物，含有治療有效量的上述式(I)化合物W及一種或多種藥 學(xué)上可接受的載體。
[0015] 所述的藥物組合物是藥劑學(xué)上所說的任何一種劑型，包括片劑、膠囊劑、軟膠囊、 凝膠劑、口服劑、混懸劑、沖劑、貼劑、軟膏、丸劑、散劑、注射劑、輸液劑、凍干注射劑、靜脈乳 劑、脂質(zhì)體注射劑、栓劑、緩釋制劑或控釋制劑。
[0016] 上文所述藥學(xué)上可接受的載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，例如:稀釋劑、賦形 劑和水等，填充劑如淀粉、薦糖，乳糖、微晶纖維素等;粘合劑如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠 和聚乙締化咯燒酬;潤濕劑如甘油；崩解劑如簇甲基淀粉鋼，徑丙纖維素，交聯(lián)簇甲基纖維 素，瓊脂、碳酸巧和碳酸氨鋼;吸收促進(jìn)劑如季錠化合物;表面活性劑如十六燒醇，十二烷基 硫酸鋼;吸附載體如高齡±和皂粘上;潤滑劑如滑石粉、硬脂酸巧和儀、微粉硅膠和聚乙二 醇等。另外還可W在組合物中加入其它輔劑如香味劑、甜味劑等。
[0017] 本發(fā)明相對現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點及有益效果：（1)提供了一種結(jié)構(gòu)新穎的木 脂素類化合物；（2)運用體外抗單純瘤疹病毒等活性篩選體系進(jìn)行活性評價，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的 化合物能有效地抑制單純瘤疹病毒1型化SV-1)、腸道病毒71型(EV71)和呼吸道合胞病毒 (RSV)，表明本發(fā)明化合物具有預(yù)防和治療單純瘤疹病毒等病毒感染的作用，具有良好的研 究開發(fā)前景。
【附圖說明】 [001 引 圖1為本發(fā)明化合物的HR-ESI-Q-TOF-MS; 圖2為本發(fā)明化合物的Ih-NMR譜； 圖3為本發(fā)明化合物的I3C-NMR譜與肥PT-135譜； 圖4為本發(fā)明化合物的HMB幻普； 圖5為本發(fā)明化合物的HSQ幻普； 圖6為本發(fā)明化合物的ROSEY譜； 圖7為本發(fā)明化合物的Hi-Hi COSY譜； 圖8位本發(fā)明化合物的主要HMBC相關(guān)和化合物編號。
【具體實施方式】
[0019] 為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合具體實施例對 本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0020] 實施例1，本發(fā)明化合物的制備 (1) 取熱毒寧注射液成品，經(jīng)HP-20大孔吸附樹脂色譜柱分離，依次W水、25~35%乙醇、 90~100%乙醇梯度洗脫，分別收集各洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得到水洗脫部位、25~30% 乙醇洗脫部位、90~100 %乙醇洗脫部位； (2) 取步驟(1)的90~100%乙醇洗脫部位，經(jīng)硅膠柱色譜分離，用氯仿-甲醇梯度洗脫，收 集氯仿-甲醇比例為9:1的饋分C 2.2 g，饋分C經(jīng)ODS柱色譜分離，用甲醇-水梯度洗脫，收集 甲醇-水比例為4:6的饋分D 105 mg，饋分D經(jīng)半制備液相HPLC分離，W比例為45:55的甲醇-水為流動相，檢測波長為254 nm，流速4mL/min，在半制備液相上的保留時間為14.4 min，分 離所得溶液干燥，得到本發(fā)明化合物9.6 mg。
[0021] 實施例2,取實施例1制得的本發(fā)明化合物，進(jìn)行如下結(jié)構(gòu)鑒定： 本化合物為黃色無定形粉末，ESI-MS m/z:377 [M+H] +，m/z 375 [M-H]-，提示相對分 子質(zhì)量為376。冊-651-9-1'0。-]?8(圖1)給出111八 377.1233[]\?1]+(計算值為377.1236)， 確定化合物分子式為Cl曲20〇8,不飽和度為10。
[0022] 本化合物的Ih-NMR (400 MHz, CD30D)譜中顯示了20個氨信號（見圖2)，其中4個 芳香質(zhì)子信號[S 6.69 (2H, S, H-2'，6'），7.59 (1H, brs, H-6), 7.63 (1H, brs, H-4)]，推測結(jié)構(gòu)中可能存在2個四取代苯環(huán)，3個甲氧基質(zhì)子信號[S 3.83 (6H，S，3'， 5'-0C出），3.92 (3H, S, 7-0CH3)];i3c-NMR (100 MHz, CD30D)結(jié)合DEPT圖譜顯示了 19個 碳信號（見圖3)，包括9個季碳信號[S 170.0 (C-8)，133.3(C-r)，145.9 (C-3'，5'）， 136.6 (C-4'），125.3(05)，145.l(C-7), 153.3 (C-7a), 130.2(C-3a)]，4個芳香次甲 基碳信號[S104.3 (C-2'，6'），115.5 (C-6)，120.7 (C-4)]，l個亞甲基碳信號[S 64.7 (C-9)]，2個亞甲基碳信號[S90.3 (C-2)，54.8 (C-3)] W及3個甲氧基碳信號[S 56.8 (3'，5'-0C出），56.7 (7-0C出）]。^上數(shù)據(jù)通過與文獻(xiàn)報道的已知木脂素類化合物的核磁 數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，掲示化合物8為C-3'，C-5'和C-7S甲氧基取代和C-8位氧化的苯并二氨巧喃 型木脂素。進(jìn)一步通過麗BC譜進(jìn)行驗證，在麗BC譜（見圖4)中可見Sh 3.83 (6H，S，3'， 5'-0CH3)與Sc 145.9 (C-3'，5'）相關(guān)，Sh 3.92 (3H, S, 7-0C曲）與Sc 145.UC-7)相 關(guān)，Sh 7.63 (1H, brs, H-4)與Sc 170.7 (C-8) / 115.5 (C-6) / 153.3(C-7a)相關(guān)，通 過主要的HMBC相關(guān)（見圖1)確定了化合物的平面結(jié)構(gòu)與文獻(xiàn)報道中的5-。曰'6〇義7-3-hydroxymethyl-2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl )-7-methoxycoum 曰 rin 相一至義。通過 禪合常數(shù)〇2,3=6.3 Hz)判斷化合物8的H-2與H-3處于反式。化合物8的CD譜中，220 ( A -6.21)顯示負(fù)的Cotton效應(yīng)，與文獻(xiàn)進(jìn)行對比，確定化合物8的絕對