一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置及其方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于實驗設(shè)備領(lǐng)域，具體涉及一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置及其方法。
【背景技術(shù)】
[0002]微生物廣泛存在于地球生態(tài)系統(tǒng)，與人類的生存、健康息息相關(guān)。通過分離純化，獲得微生物純種，有助于認識微生物并掌控微生物生活規(guī)律。然而限于知識和技術(shù)水平，目前已分離研究的菌種數(shù)量僅占地球微生物總數(shù)量的I %，亟待發(fā)明新型分離技術(shù)和方法加以解決。
[0003]難培養(yǎng)微生物可分為兩類，一類是生長因子匱乏型，另一類是代時過長型。生長因子匱乏型難培養(yǎng)微生物是指在原位生境中生長良好，但無法在實驗室獲得純培的微生物。例如，某菌株生長需以其它菌株的代謝產(chǎn)物作為生長因子，而人們不知或無法提供此類生長因子，導(dǎo)致該菌株不能純培。代時過長型難培養(yǎng)微生物是指生長緩慢，代時較長的微生物。以傳統(tǒng)微生物分離法(如平板劃線法)分離該類微生物時，由于微生物代時長，在微生物形成菌落之前固體培養(yǎng)基即已干枯，導(dǎo)致分離工作失敗。例如，厭氧氨氧化菌的代時為11天，形成肉眼可見的菌落，至少需要半年時間，而固體瓊脂培養(yǎng)基至多可保鮮10天。
[0004]針對上述問題，本發(fā)明設(shè)計了一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置，并建立了相應(yīng)的分離培養(yǎng)方法，通過設(shè)置營養(yǎng)托盤，利用固態(tài)瓊脂的屏障作用和毛細作用，使擬分離微生物從營養(yǎng)托盤內(nèi)營養(yǎng)液中獲取生長所必需的生長因子和營養(yǎng)物質(zhì)，有效解決了生長因子匱乏型和代時過長型難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)難題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有微生物分離技術(shù)存在的問題，提供一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置，利用固態(tài)瓊脂的屏障作用和毛細作用，避免目標菌遭受雜菌污染，按需添加營養(yǎng)物質(zhì)，保證目標菌長期獲得養(yǎng)分，實現(xiàn)難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)。
[0006]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的具體技術(shù)方案如下:
[0007]—種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置，裝置分為培養(yǎng)皿蓋，培養(yǎng)皿板和營養(yǎng)托盤三部分。正置時，培養(yǎng)皿板置于營養(yǎng)托盤內(nèi)，培養(yǎng)皿蓋將培養(yǎng)皿板蓋住。營養(yǎng)托盤內(nèi)底面依壁均勻設(shè)置三個卡位，卡位與營養(yǎng)托盤粘連;培養(yǎng)皿板底板中空，設(shè)置接觸圓面，可與營養(yǎng)托盤內(nèi)底面相貼，培養(yǎng)皿板側(cè)邊外壁上設(shè)置上刻度線和下刻度線，培養(yǎng)皿板外底面邊緣均勻設(shè)置三個卡槽。
[0008]作為優(yōu)選，所述的培養(yǎng)皿蓋內(nèi)徑為85mm，內(nèi)深5mm，壁厚為lmm;培養(yǎng)皿板內(nèi)徑為82mm,內(nèi)深10mm，壁厚為lmm;營養(yǎng)托盤內(nèi)徑為92mm，內(nèi)深10mm，壁厚為lmm。
[0009]作為優(yōu)選，所述的卡位剖面成直角三角形，直角底邊長7.3mm，直角垂邊長2.9mm;卡位厚度為lmm;卡位均勾分布于營養(yǎng)托盤內(nèi)底面，相互之間角度α為120°。
[0010]作為優(yōu)選，所述的培養(yǎng)皿板底部接觸圓面內(nèi)徑為74mm。
[0011]作為優(yōu)選，所述的培養(yǎng)皿板外壁上刻度線高出培養(yǎng)皿板內(nèi)底面6.5mm，指示培養(yǎng)基體積為35ml;下刻度線高出培養(yǎng)皿板內(nèi)底面4mm，指示培養(yǎng)基體積為20ml。
[0012]作為優(yōu)選，所述的卡槽剖面成直角三角形，直角底邊長3.2mm，直角垂邊長1.5mm;卡槽寬度為lmm;卡槽均勻分布于培養(yǎng)皿板外底面邊緣，相互之間角度β為120°。
[0013]本發(fā)明的另一目的在于提供一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)方法，步驟如下:
[0014]營養(yǎng)托盤正置，將培養(yǎng)皿板置于營養(yǎng)托盤內(nèi)，使卡位鍥入卡槽，培養(yǎng)皿板底部接觸圓面與營養(yǎng)托盤內(nèi)底面相貼;將溶解態(tài)固體瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿板，蓋上培養(yǎng)皿蓋;待瓊脂凝固后，拿開培養(yǎng)皿蓋，在瓊脂固體培養(yǎng)基表面進行劃線操作，蓋上培養(yǎng)皿蓋;輕抬起培養(yǎng)皿板，旋轉(zhuǎn)使卡槽與卡位錯開，此時培養(yǎng)皿板懸空置于營養(yǎng)托盤內(nèi)；向營養(yǎng)托盤內(nèi)注入菌株生長所需營養(yǎng)物質(zhì)，靜置培養(yǎng)。
[0015]培養(yǎng)皿板中倒入溶解態(tài)固體瓊脂培養(yǎng)基的最終液面處于下刻度線以上，保證瓊脂層具有一定厚度，避免培養(yǎng)過程中瓊脂層中心下陷;培養(yǎng)皿板中倒入培養(yǎng)基的最終液面處于上刻度線以下，保證瓊脂層厚度適宜，增強瓊脂層毛細作用，滿足微生物營養(yǎng)需要。
[0016]本發(fā)明的有益效果是:I)裝置構(gòu)造簡單，使用操作方便;2)針對生長因子匱乏型難培養(yǎng)微生物，可通過提供分離源浸提液，補給微生物生長因子;3)針對代時過長型難培養(yǎng)微生物，可通過補加培養(yǎng)基，保證微生物生長的營養(yǎng)物質(zhì)。
【附圖說明】
[0017]圖1是一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置剖面圖，卡位入卡槽，可倒入瓊脂培養(yǎng)基；
[0018]圖2是一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置剖面圖，卡位與卡槽錯位，用于靜置培養(yǎng)；
[0019]圖3是一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置俯視圖；
[0020]圖4是一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置培養(yǎng)皿板(2)正視圖；
[0021 ]圖5是一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置培養(yǎng)皿板(2)俯視圖；
[0022]圖中:培養(yǎng)皿蓋1、培養(yǎng)皿板2、營養(yǎng)托盤3、卡位4、接觸圓面5、上刻度線6、下刻度線
7、卡槽8。
【具體實施方式】
[0023]下面結(jié)合具體附圖和【具體實施方式】對本發(fā)明做進一步說明。若沒有特殊說明或沖突，各優(yōu)選實施方式可以任意組合。
[0024]如圖1、2、3、4、5所示，一種針對難培養(yǎng)微生物的分離培養(yǎng)裝置。裝置分為培養(yǎng)皿蓋I，培養(yǎng)皿板2和營養(yǎng)托盤3三部分。正置時，培養(yǎng)皿板2置于營養(yǎng)托盤3內(nèi)，培養(yǎng)皿蓋I將培養(yǎng)皿板2蓋住。營養(yǎng)托盤3內(nèi)底面依壁均勻設(shè)置三個卡位4，卡位4與營養(yǎng)托盤3粘連;培養(yǎng)皿板2底板中空，設(shè)置接觸圓面5，可與營養(yǎng)托盤3內(nèi)底面相貼，培養(yǎng)皿板2側(cè)邊外壁上設(shè)置上刻度線6和下刻度線7，培養(yǎng)皿板2外底面邊緣均勻設(shè)置三個卡槽8
[0025]上述各裝置的尺寸及比例可視實際情況進行設(shè)定。在本實施方式中，所述的培養(yǎng)皿蓋I內(nèi)徑為85mm，內(nèi)深5mm，壁厚為lmm;培養(yǎng)皿板2內(nèi)