一種苯酚茶酸素及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種苯酚茶酸素及其制備方法，可用于阿爾茨海默氏癥(也阿爾茨海 默癥)癡呆癥及其它神經(jīng)/神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)行性退化病變的治療藥物。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前全世界有3600萬(wàn)人生活在阿爾茨海默氏癥的痛苦當(dāng)中。世界上有九分之一年 齡在65歲以上的人有癡呆癥狀，在2013年，與阿爾茨海默癡呆癥有關(guān)的社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)超過(guò) 二萬(wàn)二千億美金，阿爾茨海默癡呆癥是最常見(jiàn)的癡呆癥，占總的癡呆癥的50%至75%，隨著 年齡的增加比例也增加。根據(jù)世界衛(wèi)生組織2013報(bào)告，全世界有超過(guò)25%-50%的85歲老人 患阿爾茨海默癡呆癥。人超過(guò)60歲，老年癡呆癥(主要含阿爾茨海默氏癥)在低/中收入地區(qū) 的人數(shù)是高收入地區(qū)的兩倍。這些阿爾茨海默癡呆癥目前在世界上所構(gòu)成的社會(huì)負(fù)擔(dān)的經(jīng) 濟(jì)成本超過(guò)每年兩千零四億美金。在高收入國(guó)家，非正式護(hù)理（45%)和正式的社會(huì)護(hù)理 (40%)占大多數(shù)的成本，而直接醫(yī)療費(fèi)用占（15%)，主要是由于沒(méi)有有效的藥物。在低收入 和中等偏低收入國(guó)家，患有老年癡呆癥是得不到護(hù)理的，老年癡呆癥患者是沒(méi)有希望的，而 且無(wú)法生存。中國(guó)人口占世界總?cè)丝诘乃姆种?，是一個(gè)中等收入國(guó)家。是繼美國(guó)之后的第 二大老齡化國(guó)家。因此，整個(gè)中國(guó)需要抗阿爾茨海默氏癥/老年癡呆癥的產(chǎn)品是當(dāng)務(wù)之急。 世界衛(wèi)生組織報(bào)告說(shuō)，到2050年，阿爾茨海默癡呆癥人數(shù)的增長(zhǎng)將是現(xiàn)在的雙倍。在低/中 收入國(guó)家有71 %的65歲以上的人將會(huì)生活在阿爾茨海默氏癥痛苦中。此外，癡呆癥研究小 組對(duì)拉丁美洲，亞洲和加勒比海的20個(gè)低或中等收入國(guó)家的衰老狀況的研究表明，有三分 之二的癡呆癥病例發(fā)生在這些發(fā)展中國(guó)家，但目前的數(shù)據(jù)只有10%是在這些國(guó)家和地區(qū)產(chǎn) 生的。事實(shí)上在低收入國(guó)家中，估計(jì)有更高的老年癡呆癥的發(fā)生率。根據(jù)美國(guó)疾病控制中心 (2013)的報(bào)告，相比于糖尿病，癌癥，心臟病和中風(fēng)的死亡率的下降，阿爾茨海默癡呆癥的 死亡率卻顯著增加，原因是由于缺乏有效的藥物治療。因此，阿爾茨海默癡呆癥目前被認(rèn)定 為"世紀(jì)疾病"。低收入國(guó)家更為需要阿爾茨海默癡呆癥的藥物。世界各國(guó)已經(jīng)組織研究，為 能找到一種可對(duì)抗阿爾茨海默癡呆癥治療方法。截至2012年，超過(guò)1000個(gè)單位組織的臨床 試驗(yàn)已經(jīng)或正在開(kāi)展，以尋找方法來(lái)治療阿爾茨海默癡呆癥，但結(jié)果是不理想的和未知的。 到目前為止，現(xiàn)有的治療方法只能暫時(shí)改善癥狀，但都不能逆轉(zhuǎn)疾病的進(jìn)展和預(yù)防阿爾茨 海默癡呆癥的發(fā)生。最近的研究發(fā)現(xiàn)，各種對(duì)抗阿爾茨海默癡呆癥藥物的開(kāi)發(fā)主要集中在 減少過(guò)度的的定粉狀蛋白沉淀(AP)，而降低的定粉狀蛋白沉淀的治療的臨床實(shí)驗(yàn)都失敗了。 這說(shuō)明了過(guò)度的N定粉狀蛋白沉淀只是阿爾茨海默癡呆癥的病理改變中的一種現(xiàn)象，它不 是產(chǎn)生、治療效果的關(guān)鍵靶點(diǎn)。而導(dǎo)致阿爾茨海默癡呆癥進(jìn)展的機(jī)理還是未知的。淀粉狀 蛋白沉淀"是阿爾茨海默癡呆癥發(fā)病原因或僅僅是阿爾茨海默癡呆癥的一個(gè)副產(chǎn)品是不清 楚的。
[0003] 除了過(guò)度的財(cái)定粉狀蛋白沉淀的發(fā)病理論之外，乙酰膽堿理論，鈣代謝理論，過(guò)氧 化理論等及與其相關(guān)的藥物使用，都沒(méi)有得到臨床認(rèn)可的結(jié)果。中利凡斯的明，膽堿酯酶抑 制劑，和伐尼克蘭的煙堿型乙酰膽堿受體a4P2亞型，在阿爾茨海默癡呆癥患者的給藥研究 中與安慰劑相比，給藥患者的日常活動(dòng)和認(rèn)知能力表現(xiàn)有輕度改善或無(wú)改善。在美金剛的 安全性的系統(tǒng)評(píng)價(jià)中，試用美金剛?cè)ブ委煱柎暮ＤV呆癥的輕度認(rèn)知功能障礙，但結(jié)果 顯示和安慰劑比較，美金剛并沒(méi)有改善患者的輕度認(rèn)知功能障礙和認(rèn)知功能，而且它會(huì)有 增加胃腸道損害的風(fēng)險(xiǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種苯酚茶酸素及其制備方法，用于阿爾茨海默氏癥(也阿 爾茨海默癥)癡呆癥及其它神經(jīng)/神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)行性退化病變的治療藥物。
[0005] 本發(fā)明所述的苯酚茶酸素(PDT0P)，是合成出來(lái)的黃酮類(lèi)化合物。又名苯酚二氫黃 酉同酉享，英文:piper idinium2，3_dihydroxy-5-( (2R，3R) -3，5，7_tr ihydroxy-4-oxochroman-2-yl)phendate)
[0007] 本發(fā)明所述的苯酚茶酸素的制備方法：
[0008] 將五毫摩爾（5mmol，1.6g)二氫楊梅素加入到20毫升甲醇溶解30分鐘，將溶解的溶 液放置入冰槽，用5.5毫摩爾的哌啶，在-10°C的氬氣存在下滴定入二氫
[0010] 楊梅素甲醇液，放置20分鐘使其反應(yīng)完全，然后，在低壓真空情況下濃縮反應(yīng)液， 過(guò)濾后，用甲醇洗三遍即可獲得苯酚茶酸素(~2g)。
[0011] 二氫楊梅素的制備方法：
[0012] 紫杉葉素二氫橡黃素在黃酮羥化酶和黃酮單氧化酶存在下常溫反應(yīng)，成為二氫楊 梅素。
[0013] 苯酚茶酸素的制備：
[0015] 二氫楊梅素屬黃酮類(lèi)化合物，存在于許多植物的花、葉、果實(shí)中，多以苷的形式存 在，如蘆丁 (蕓香苷），槲皮苷，金絲桃苷等。
[0016] 二氫楊梅素的來(lái)源可以是從枳具子，藤茶，杜鵑科花類(lèi)，和松類(lèi)葉/籽的自然產(chǎn)物 中提取，也可以是合成。兩種方法在中國(guó)已經(jīng)形成大規(guī)模生產(chǎn)模式。但是由于對(duì)光照的易感 性和溶解度低的特點(diǎn)，使得二氫楊梅素在使用上受到了局限，藥用效果也會(huì)存在不穩(wěn)定。
[0017] 阿爾茨海默氏癡呆癥(AD)是神經(jīng)進(jìn)行性退化疾病變，阿爾茨海默癥的病患除了認(rèn) 知/學(xué)習(xí)能力減退，精神神經(jīng)癥狀，如焦慮和癲癇發(fā)作都分別在阿爾茨海默癡呆癥患者中看 到高達(dá)70 %和17 %，這表明中樞抑制神經(jīng)一伽馬氨基丁酸(GABARs)神經(jīng)間的傳遞功能障 礙，而且這也是伽馬氨基丁酸參與阿爾茨海默癡呆癥的發(fā)病的機(jī)制的證據(jù)。苯酚茶酸素是 一種合成的苯酚黃酮物，是伽馬氨基丁酸的調(diào)節(jié)劑。苯酚茶酸素的效果和目前二氫楊梅素 和臨床上使用的美金剛(30毫克/公斤/天)的效果進(jìn)行比較，對(duì)阿爾茨海默氏癡呆癥的基因 改造(Tg2576)四月齡小鼠給與苯酚茶酸素(0.5毫克/公斤/天)3個(gè)月口服治療。這種阿爾茨 海默氏癡呆癥樣病變小鼠已經(jīng)被證明，在成年(6月齡）以后，會(huì)逐漸產(chǎn)生阿爾茨海默氏癡呆 癥具有的腦神經(jīng)內(nèi)的定粉狀蛋白沉淀(AP)，認(rèn)知能力和學(xué)習(xí)能力障礙等阿爾茨海默氏癡呆 癥樣病理生理改變。開(kāi)始給藥以后每月進(jìn)行一次測(cè)試，以隨時(shí)觀察苯酚茶酸素對(duì)阿爾茨海 默氏癡呆癥發(fā)病的預(yù)防和治療作用。比較與二氫楊梅素，行為實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果顯示，苯酚茶酸 素給藥的小鼠在有阿爾茨海默氏癡呆癥的基因改造的情況下沒(méi)有出現(xiàn)明顯的認(rèn)知能力改 變，沒(méi)有出現(xiàn)焦慮增加和癲癇發(fā)作的易感性。病理上，苯酚茶酸素明顯的降低腦神經(jīng)內(nèi)的定 粉狀蛋白沉淀。從阿爾茨海默氏癡呆癥小鼠（8月齡)海馬齒狀回神經(jīng)元的電生理(膜片鉗） 記錄顯示，伽馬氨基丁酸介導(dǎo)的抑制性突觸后自然電流釋放(mIPSC)的頻率和振幅減少，突 觸間維持抑制電流(synaptic tonic current)降低。而苯酸茶酸素的服用，阿爾茨海默氏 癡呆癥鼠海馬齒狀回神經(jīng)元上的伽馬氨基丁酸-介導(dǎo)的電流有效的得到恢復(fù)。定量分析顯 示，神經(jīng)受體支撐蛋白（gephyrin)，也是調(diào)節(jié)伽馬氨基丁酸受體突觸形成和伽馬氨基丁酸 受體突觸后可塑性的錨定蛋白，在阿爾茨海默氏癡呆癥鼠腦內(nèi)，支撐蛋白降低至50%以下， 特別是海馬和皮層。苯酚茶酸素的治療有效的恢復(fù)支撐蛋白gephyrin水平。并且，經(jīng)過(guò)苯酚 茶酸素的給與，腦神經(jīng)內(nèi)的定粉狀蛋白沉淀明顯減少。這些結(jié)果表明，苯酚茶酸素的給與不 僅可以改善技藝和認(rèn)知能力損傷，緩解憂郁，逆轉(zhuǎn)阿爾茨海默氏癡呆癥的病理改變包括減 少增加了的的定粉狀蛋白沉淀，及停止或逆轉(zhuǎn)漸進(jìn)的神經(jīng)病理變化，恢復(fù)gephyrin水平，及 恢復(fù)伽馬氨基丁酸系統(tǒng)的傳輸和功能性。更重要的是，苯酚茶酸素可以對(duì)有潛在阿爾茨海 默氏癡呆癥基因改變的生物體有預(yù)防作用。此項(xiàng)發(fā)明證明，苯酚茶酸素的作用靶點(diǎn)是神經(jīng) 系統(tǒng)內(nèi)起連結(jié)和修復(fù)作用的蛋白質(zhì)如gephyrin。苯酚茶酸素是一種很有潛力和前途的治療 阿爾茨海默氏癡呆癥的候選藥物。
[0018] 迄今為止，對(duì)阿爾茨海默氏病發(fā)病機(jī)理的研究具有建模的困難限制，不可能進(jìn)行 人體試驗(yàn)。轉(zhuǎn)基因小鼠模型是經(jīng)過(guò)技術(shù)改造，具有的定粉狀蛋白沉淀及攜帶一個(gè)或幾個(gè)突變 的家族性阿爾茨海默病基因的過(guò)度表達(dá)而產(chǎn)生的。雖然這些模型不能完全復(fù)制人類(lèi)的阿爾 茨海默氏病，但是已經(jīng)獲得科學(xué)界認(rèn)可，它們可以提供有價(jià)值的對(duì)于給出阿爾茨海默氏癡 呆癥的發(fā)病機(jī)制的證據(jù)，以及進(jìn)行藥物開(kāi)發(fā)的測(cè)試以檢測(cè)藥物的治療效果。
[0019] 人的研究表明，認(rèn)知/記憶和學(xué)習(xí)能力的喪失，伴有精神神經(jīng)癥狀，如焦慮和癲癇 等，在阿爾茨海默癡呆癥患者中分別高達(dá)70%和17%。這提示伽馬氨基丁酸能傳輸?shù)墓δ?障礙。伽馬氨基丁酸是至關(guān)重要的參與調(diào)節(jié)必要的正常認(rèn)知功能的神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)。其伽馬 氨基丁酸突觸的損失，和異常的伽馬氨基丁酸突觸活動(dòng)導(dǎo)致阿爾茨海默癡呆癥患者的認(rèn)知 缺陷有關(guān)。然而，發(fā)病機(jī)制尚不清楚。
[0020] Gephyrin是抑制性突觸后的關(guān)鍵的支撐蛋白。Gephyrin是一種多聚體支架蛋白， 功能為引導(dǎo)伽馬氨基丁酸受體在神經(jīng)突觸后形成簇狀抑制位點(diǎn)，并錨固伽馬氨基丁酸受體 在突觸后膜的位置。Gephyrin基因去除和去除實(shí)驗(yàn)表明伽馬氨基丁酸在突觸后膜聚集減 少，伴隨伽馬氨基丁酸突觸間傳導(dǎo)障礙。因此，正常質(zhì)量和數(shù)量的gephyrin對(duì)維持伽馬氨基 丁酸突觸間傳導(dǎo)的功能是至關(guān)重要的。然而，雖然有報(bào)告指出gephyrin在阿爾茨海