一種提取及保存核酸的試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本實(shí)用新型涉及生物檢測(cè)領(lǐng)域，具體地，本實(shí)用新型提供了一種能夠用于提取和 保存核酸的試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002] 基因是所有生物體內(nèi)的信息貯存物質(zhì)，這些信息包括生物體的基本特征、生物體 的組成成分和組成方式等。由于生物體的生命活動(dòng)是組成生物體的各種物質(zhì)相互作用的結(jié) 果，因此，基因信息也包含了生物體生命活動(dòng)形式和方式的信息?；驒z測(cè)就是通過(guò)實(shí)驗(yàn)顯 示出基因的信息，通過(guò)基因檢測(cè)可進(jìn)行引起疾病的微生物種類分析、身份鑒定、臨床病理診 斷、生理病理特征分析。
[0003] 基因檢測(cè)的質(zhì)量和水平主要由樣品處理、信息量及分析技術(shù)來(lái)決定，檢測(cè)的樣品 可以是血液、唾液、口腔黏膜、體液、頭發(fā)根部、組織等，對(duì)這些生物樣本進(jìn)行樣本處理分離 核酸是分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的必經(jīng)步驟。
[0004] 采集的血液或其他生物樣本通常會(huì)送到實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行核酸提取，由于這些生物樣 本是潛在的病毒及細(xì)菌感染源，轉(zhuǎn)運(yùn)或處理這些生物樣品給操作人員生命健康帶來(lái)威脅； 同時(shí)，樣本通常需要在低溫存儲(chǔ)及運(yùn)輸，不正確的生物樣本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)及處理過(guò)程常常導(dǎo)致 核酸物質(zhì)降解、從而導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
[0005] 磁珠核酸純化方法將DNA結(jié)合到氧化硅等磁性載體上，而雜質(zhì)被選擇性洗脫掉正 在實(shí)驗(yàn)室中得到了廣泛應(yīng)用。然而，現(xiàn)有的磁珠核酸分離技術(shù)仍存在一些不足：如復(fù)雜的樣 品處理過(guò)程：需進(jìn)行蛋白酶消化過(guò)程、需要溫度控制等，；這些問(wèn)題對(duì)快速核酸樣本處理帶 來(lái)不利影響，特別是阻礙了其在大量核酸樣本安全采集及檢測(cè)中的應(yīng)用。
[0006] 因此，需要一種能結(jié)合、保存及轉(zhuǎn)運(yùn)生物樣本中核酸，同時(shí)安全便捷地進(jìn)行后續(xù)基 因檢測(cè)的方法和試劑。 【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0007] 本實(shí)用新型的目的是提供一種能結(jié)合、保存及轉(zhuǎn)運(yùn)生物樣本中核酸，同時(shí)安全便 捷地進(jìn)行后續(xù)基因檢測(cè)的核酸提取試劑盒。
[0008] 本實(shí)用新型的第一方面，提供了一種用于提取及保存核酸的試劑盒，所述的試劑 盒包括：
[0009] 一個(gè)或多個(gè)儲(chǔ)存容器，所述的儲(chǔ)存容器中包括：
[0010] 核酸結(jié)合相，所述的核酸結(jié)合相用于吸附和/或結(jié)合待純化的核酸；
[0011] 裂解-結(jié)合液，所述的裂解-結(jié)合液用于裂解細(xì)胞膜，釋放待純化核酸，并促使待 純化的核酸結(jié)合于所述的核酸結(jié)合相；
[0012] 且所述的核酸結(jié)合相具有：（1)磁性內(nèi)核；（2)位于所述內(nèi)核上的氧化硅層；（3) 位于所述氧化硅層表面的羧基修飾層。
[0013] 在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)胞裂解結(jié)合液含有以下組分：（i)chaotropic鹽，濃度 為3-6M ;(ii)鹽溶液（包括一價(jià)鹽、二價(jià)鹽），濃度為0. 1-1. 5M 表面活性劑，濃度為 2-5% (v/v) ;(iv)螯合劑，濃度為 0-100mM;和（v)醇，濃度為 20-60% (v/v)。
[0014] 在另一優(yōu)選例中，所述核酸結(jié)合相的磁性內(nèi)核選自下組：聚合物材料內(nèi)核、多糖類 材料內(nèi)核、無(wú)機(jī)載體材料內(nèi)核，或其組合。
[0015] 在另一優(yōu)選例中，所述的裂解結(jié)合液中含高濃度鹽溶液，且所述的鹽為單價(jià)鹽、二 價(jià)鹽、銨鹽，或其組合，其濃度為〇. 1-1. 5M。
[0016] 在另一優(yōu)選例中，所述的儲(chǔ)存容器選自下組：試管、離心管、印pendorf管、培養(yǎng) 瓶。
[0017] 在另一優(yōu)選例中，所述的儲(chǔ)存容器為一次性容器。
[0018] 在另一優(yōu)選例中，所述的儲(chǔ)存容器為帶刻度塑料容器。
[0019] 在另一優(yōu)選例中，所述的儲(chǔ)存容器為預(yù)先裝有定量液體的塑料容器。
[0020] 在另一優(yōu)選例中，所述的儲(chǔ)存容器還具有一密封蓋，且所述的密封蓋可以被注射 器或毛細(xì)管扎入。
[0021] 在另一優(yōu)選例中，所述的密封蓋為塑料密封蓋或橡膠密封蓋。
[0022] 在另一優(yōu)選例中，所述的密封蓋用于防止氧氣和/或水進(jìn)入儲(chǔ)存容器。
[0023] 在另一優(yōu)選例中，所述的儲(chǔ)存容器具有一內(nèi)管部分和一采樣管部分，且所述的內(nèi) 管部分位于采樣管部分內(nèi)。
[0024] 在另一優(yōu)選例中，所述的內(nèi)管含磁性內(nèi)核和裂解結(jié)合液，且所述的內(nèi)管下部可以 被塑料物體、注射器或毛細(xì)管扎入或穿刺。
[0025] 在另一優(yōu)選例中，所述的內(nèi)管為塑料內(nèi)管或橡膠內(nèi)管。
[0026] 在另一優(yōu)選例中，所述的內(nèi)管具有一可穿刺下部，所述的可穿刺下部可通過(guò)穿刺 破壞其結(jié)構(gòu)完整性。
[0027] 在另一優(yōu)選例中，所述的采樣管還具有一穿刺部分，且所述的穿刺部分用于扎入 或穿刺所述的內(nèi)管，從而破壞所述內(nèi)管的完整性。
[0028] 在另一優(yōu)選例中，所述的儲(chǔ)存容器的容量為1. 5_15ml。
[0029] 在另一優(yōu)選例中，所述的核酸結(jié)合相為磁性微球。
[0030] 在另一優(yōu)選例中，所述的磁性微球的粒徑為50納米-2微米，較佳地為300-1000 納米。
[0031] 在另一優(yōu)選例中，單個(gè)所述儲(chǔ)存容器中的所述核酸結(jié)合相為0. l-5mg。
[0032] 在另一優(yōu)選例中，所述的試劑盒還包括樣本采集裝置。
[0033] 在另一優(yōu)選例中，所述的樣本采集裝置是微量樣本采集裝置。
[0034] 在另一優(yōu)選例中，所述的微量指樣本的采集量為10ul_5ml液體樣本。
[0035] 在另一優(yōu)選例中，所述的微量指樣本的采集量< 2ml，較佳地為< 1ml，更佳地為 < 0. 5ml。
[0036] 在另一優(yōu)選例中，所述的樣本采集裝置與所述儲(chǔ)存容器相連。
[0037] 在另一優(yōu)選例中，所述的樣本采集裝置與所述的密封蓋相連。
[0038] 在另一優(yōu)選例中，所述的樣本采集裝置為采血裝置。
[0039] 在另一優(yōu)選例中，所述的試劑盒還包括抗凝血?jiǎng)?br>[0040] 在另一優(yōu)選例中，所述的采血裝置為指尖采血裝置，較佳地，所述的指尖采血裝置 選自下組：指尖采血針、拭子、吸水紙、涂片、毛細(xì)管、滴管。
[0041] 在另一優(yōu)選例中，所述的樣本采集裝置為采集口腔黏膜細(xì)胞的刮棒或唾液收集 器。
[0042] 在另一優(yōu)選例中，所述的試劑盒還包括洗滌液：所述的洗滌液用于從核酸結(jié)合相 上洗去非特異吸附組分；和/或
[0043] 所述的試劑盒還包括DNA洗脫液，所述的DNA洗脫液用于使核酸與所述核酸結(jié)合 相發(fā)生解離。
[0044] 在另一優(yōu)選例中，所述的非特異吸附組分選自下組：蛋白、多糖、脂類，或其組合。
[0045] 在另一優(yōu)選例中，所述的洗滌液位于第二儲(chǔ)存容器內(nèi)。
[0046] 在另一優(yōu)選例中，所述的DNA洗脫液選自下組：水、弱堿性溶液、生物緩沖液，或其 組合。
[0047] 在另一優(yōu)選例中，所述弱堿性溶液的pH值為7. 5-9。
[0048] 在另一優(yōu)選例中，所述的DNA洗脫液位于第三儲(chǔ)存容器內(nèi)。
[0049] 應(yīng)理解，在本實(shí)用新型范圍內(nèi)中，本實(shí)用新型的上述各技術(shù)特征和在下文（如實(shí) 施例）中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。 限于篇幅，在此不再一一累述。
【附圖說(shuō)明】
[0050] 圖1是本實(shí)用新型的一個(gè)優(yōu)選例中容器的示意圖；
[0051] 圖2是本實(shí)用新型的一個(gè)優(yōu)選例中試劑盒的示意圖；
[0052] 圖3是本實(shí)用新型的一個(gè)優(yōu)選例中試劑盒的示意圖；
[0053] 圖中，1為儲(chǔ)存容器、2為裂解結(jié)合液、3為核酸結(jié)合相、4為密封蓋、5為內(nèi)管、6為 采樣管。
【具體實(shí)施方式】
[0054] 本發(fā)明人經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期而深入的研宄，研制了一種能夠用于樣本采集、DNA提取以及保 存的試劑盒。所述的試劑盒不僅可以用于提取生物樣本中的DNA，還能夠穩(wěn)定保存提取完畢 的DNA樣品，因此適合用于大規(guī)模生物樣本采集及保存，例如普通實(shí)驗(yàn)室或野外樣本采集 等。
[0055] 磁性微球
[0056] 如本文所用，術(shù)語(yǔ)"磁性微球"、"磁珠"、"磁性顆粒"可互換使用，均指用于本實(shí)用 新型核酸分離的一種優(yōu)選核酸結(jié)合相。
[0057] 在本實(shí)用新型中，磁性微球的尺寸沒(méi)有特別限制，一般其粒徑為50納米-2微米， 較佳地為300-1000納米。
[0058] 在本實(shí)用新型中，磁性微球的材料沒(méi)有特別限制，可以含有或由各種磁性材料構(gòu) 成。
[0059] 在本實(shí)用新型中，