一種人egfr基因突變檢測(cè)試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本實(shí)用新型涉及一種人EGFR基因突變檢測(cè)試劑盒，屬于生物醫(yī)藥輔助檢測(cè)設(shè)備
技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 肺癌是全世界公認(rèn)的惡性腫瘤之一，其中非小細(xì)胞肺癌占肺癌總量的75%~85%。 近年來(lái)隨著分子生物學(xué)機(jī)制的研究，非小細(xì)胞肺癌分子靶向治療取得了很大進(jìn)展。EGFR 是（HER-1/ErbBl) -種TK受體蛋白，屬于ErbB家族，此受體蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮 著主要的功能。在癌細(xì)胞表面，EGFR的活化啟動(dòng)了RAS-抗凋亡反應(yīng)，細(xì)胞生長(zhǎng)，存活，細(xì) 胞周期的進(jìn)展，分化及血管生成的活化。肺腺癌患者中，EGFR突變集中在為18，19,20,21 號(hào)外顯子，有缺失，點(diǎn)突變等。以表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR)為靶標(biāo)的酪氨酸激酶抑制劑 (tyrosinekinaseinhibitor，TKI)如吉非替尼、厄洛替尼在治療晚期非小細(xì)胞肺癌中受到 普遍關(guān)注，臨床研究發(fā)現(xiàn)，攜帶EGFR基因突變的患者對(duì)KTIs更為敏感，總生存期和無(wú)進(jìn)展 生存期較無(wú)EGFR基因突變的患者顯著增加。因此，對(duì)肺癌患者進(jìn)行基因檢測(cè)，是應(yīng)用KTIs 治療的重要前提。
[0003] 現(xiàn)有的EGFR突變檢測(cè)試劑盒，存在檢測(cè)試劑原料配備較多，實(shí)驗(yàn)過(guò)程加樣環(huán)節(jié)繁 瑣，耗時(shí)較長(zhǎng)，容易污染，另外冷凍的試劑反復(fù)凍融多次會(huì)造成試劑失效，所以探索一種檢 測(cè)EGFR基因快速可靠的方法已經(jīng)成為臨床實(shí)驗(yàn)迫切需要解決的問(wèn)題。 【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0004] 針對(duì)上述問(wèn)題，本實(shí)用新型提供了一種人EGFR基因突變檢測(cè)試劑盒，其目的在 于：實(shí)現(xiàn)EGFR基因檢測(cè)快速可靠。
[0005] 本實(shí)用新型的技術(shù)解決方案：
[0006]-種人EGFR基因突變檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括：1個(gè)帶盒蓋的盒體、1個(gè)長(zhǎng)隔 板、1個(gè)短隔板、2個(gè)海綿襯底、2個(gè)裝有無(wú)核酸水的試管、2個(gè)裝有PCR反應(yīng)預(yù)混液的試管、 2個(gè)裝有陽(yáng)性質(zhì)控物試管、2個(gè)八連管架，12個(gè)帶蓋八連管；所述的八連管，自上而下依次為 裝有18號(hào)外顯子檢測(cè)引物及探針溶液的管孔、裝有19號(hào)外顯子檢測(cè)引物及探針溶液的管 孔、裝有20號(hào)外顯子插入型突變的引物及探針溶液的管孔、裝有S768I檢測(cè)引物及探針溶 液的管孔、裝有T790M檢測(cè)引物及探針溶液的管孔、裝有L861Q檢測(cè)引物及探針溶液的管 孔、裝有L858R檢測(cè)引物及探針溶液的管孔、裝有內(nèi)參檢測(cè)引物及探針溶液的管孔。
[0007]其中，所述長(zhǎng)隔板置于盒體內(nèi)，將盒體分成兩部分；所述的短隔板將盒體中空間較 小的隔間再隔開(kāi)；所述的2個(gè)海綿襯底置于短隔板的兩側(cè)，每個(gè)海綿底襯上打有容器孔；所 述的2個(gè)裝有無(wú)核酸水的試管、2個(gè)裝有PCR反應(yīng)預(yù)混液的試管、2個(gè)裝有陽(yáng)性質(zhì)控物的試 管分別置于2個(gè)海綿襯底的容器孔中。
[0008] 進(jìn)一步，所述的2個(gè)海綿襯底，優(yōu)選使用不同顏色，例如紅色和藍(lán)色。
[0009] 進(jìn)一步，所述的2個(gè)裝有無(wú)核酸水的試管、2個(gè)裝有PCR反應(yīng)預(yù)混液的試管、2個(gè)陽(yáng) 性質(zhì)控物試管，優(yōu)選與海綿襯底顏色一致的試管。
[0010] 進(jìn)一步，八連管架優(yōu)選采用6排式，即每個(gè)八連管架上可放置6個(gè)八連管，優(yōu)選的， 每個(gè)試劑盒中放置2個(gè)八連管架。
[0011] 本實(shí)用新型的有益效果：
[0012] 本實(shí)用新型試劑盒結(jié)構(gòu)完全基于一種新的實(shí)驗(yàn)方法設(shè)計(jì)，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單合理、操作方 便，在檢測(cè)新鮮組織及石蠟組織切片樣品的EGFR基因突變時(shí)具有敏感性高、特異性強(qiáng)、耗 時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)；本試劑盒中設(shè)置的2個(gè)隔板，使得一個(gè)空間變?yōu)槿齻€(gè)空間，能有效防止試劑交 叉等引起的污染，將所有引物試劑分成兩管存儲(chǔ)，所用到的帶蓋的八連管內(nèi)已預(yù)裝有檢測(cè) 用引物和探針溶液，可以有效減少試劑反復(fù)凍融的風(fēng)險(xiǎn)，使得實(shí)驗(yàn)操作更為簡(jiǎn)單、更準(zhǔn)確。
【附圖說(shuō)明】
[0013] 圖1:本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)原理示意圖。
[0014] 圖2:本實(shí)用新型中八連管架部分示意圖。
[0015] 其中：1、盒體2、海綿底襯3、短隔板4、裝有無(wú)核酸水的試管5、裝有PCR Mix的試管6、裝有陽(yáng)性質(zhì)控物的試管7、容器孔8、長(zhǎng)隔板9、八連管架9-1、八連管 架9-2、帶蓋八連管9-3、八連管標(biāo)號(hào)9-4、裝有18號(hào)外顯子檢測(cè)引物及探針溶液的管 孔9-5、裝有19號(hào)外顯子檢測(cè)引物及探針溶液的管孔9-6、裝有20號(hào)外顯子插入型突變 的引物及探針溶液的管孔9-7、裝有S768I檢測(cè)引物及探針溶液的管孔9-8、裝有T790M 檢測(cè)引物及探針溶液的管孔 9-9、裝有L861Q檢測(cè)引物及探針溶液的管孔 9-10、裝有 L858R檢測(cè)引物及探針溶液的管孔9-11、裝有內(nèi)參檢測(cè)引物及探針溶液的管孔。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合附圖和實(shí)施例來(lái)對(duì)本實(shí)用新型做進(jìn)一步描述：
[0017] 如圖1至2所示的一種人EGFR基因突變檢測(cè)試劑盒，包括：1個(gè)帶盒蓋的盒體1、1 個(gè)長(zhǎng)隔板8、1個(gè)短隔板3、2個(gè)海綿襯底2、2個(gè)裝有無(wú)核酸水的試管、2個(gè)裝有PCR反應(yīng)預(yù)混 液的試管5、2個(gè)裝有陽(yáng)性質(zhì)控物試管6、2個(gè)八連管架9,12個(gè)帶蓋八連管9-2 ;所述的八連 管，自上而下依次為裝有18號(hào)外顯子檢測(cè)引物及探針溶液的管孔9-1、裝有19號(hào)外顯子檢 測(cè)引物及探針溶液的管孔9-5、裝有20號(hào)外顯子插入型突變的引物及探針溶液的管孔9-6、 裝有S768I檢測(cè)引物及探針溶液的管孔9-7、裝有T790M檢測(cè)引物及探針溶液的管孔9-8、 裝有L861Q檢測(cè)引物及探針溶液的管孔9-9、裝有L858R檢測(cè)引物及探針溶液的管孔9-10、 裝有內(nèi)參檢測(cè)引物及探針溶液的管孔9-11。
[0018] 其中，所述長(zhǎng)隔板8置于盒體1內(nèi)，將盒體1分成兩部分；所述的短隔板3將盒體 1中空間較小的隔間再隔開(kāi)；所述的2個(gè)海綿襯底2置于短隔板3的兩側(cè)，每個(gè)海綿底襯2 上打有容器孔；所述的2個(gè)裝有無(wú)核酸水的試管、2個(gè)裝有PCR反應(yīng)預(yù)混液的試管5、2個(gè)裝 有陽(yáng)性質(zhì)控物的試管6分別置于2個(gè)海綿襯底2的容器孔中。
[0019] 所述的2個(gè)海綿襯底2,優(yōu)選使用不同顏色，例如紅色和藍(lán)色。
[0020] 所述的2個(gè)裝有無(wú)核酸水的試管、2個(gè)裝有PCR反應(yīng)預(yù)混液的試管、2個(gè)陽(yáng)性質(zhì)控 物試管，優(yōu)選與海綿襯底2顏色一致的試管。
[0021] 八連管架9優(yōu)選采用6排式，即每個(gè)八連管架上可放置6個(gè)八連管，優(yōu)選的，每個(gè) 試劑盒中放置2個(gè)八連管架。
[0022] 實(shí)施例1
[0023] 如圖1所示，一種EGFR基因突變檢測(cè)試劑盒，包括盒體1、2個(gè)海綿底襯2、短隔板 3、 2個(gè)裝有無(wú)核酸水的試管4、2個(gè)裝有PCRMix的