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      制造高度富含玉米黃質(zhì)和/或其酯的萃取物的方法與流程

      文檔序號:11780439閱讀:287來源:國知局
      制造高度富含玉米黃質(zhì)和/或其酯的萃取物的方法枸杞(商業(yè)上被稱為枸杞子)是兩個非常密切相關(guān)的物種的果實的通用名,所述物種是寧夏枸杞(Lyciumbarbarum)和中華枸杞(Lyciumchinese),它們是枸杞屬(boxthorn)的兩個物種。由于LyciumbarbarumL.是唯一被批準(zhǔn)在中國使用的物種,因此本發(fā)明尤其涉及LyciumbarbarumL.的果實-“枸杞子”。在所有已知的食物來源中,枸杞子的玉米黃質(zhì)含量最高。枸杞子在中國的栽培已有幾十年,其被用作食物并在傳統(tǒng)中醫(yī)中使用。枸杞子中類胡蘿卜素的含量為600-900ppm。其中主要的類胡蘿卜素是玉米黃質(zhì),所述玉米黃質(zhì)以其天然酯的形式存在。本發(fā)明的發(fā)明人現(xiàn)已成功研發(fā)出一種用親脂性溶劑萃取干燥枸杞子的方法,并以高產(chǎn)率獲得了富含玉米黃質(zhì)(含量為2-11重量-%)的油質(zhì)的油性樹脂。可通過從溶劑(例如乙醇)中結(jié)晶來進(jìn)一步純化該油性樹脂,從而產(chǎn)生橙紅色的粉末,其中玉米黃質(zhì)二棕櫚酸酯的含量是15-60重量-%,相當(dāng)于玉米黃質(zhì)的含量是9-34重量-%。此外,可以處理含有玉米黃質(zhì)二棕櫚酸酯的油性樹脂以裂解該酯,從而產(chǎn)生玉米黃質(zhì)的含量為30-95重量%的粉末(產(chǎn)率為30-95%)。因此,本發(fā)明涉及制造含有玉米黃質(zhì)和/或其酯的枸杞子萃取物的方法,所述方法包括以下步驟:a)獲取干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和b)用堿性溶液處理上述干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和c)用溶劑萃取在步驟b)中獲得的干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片,其中所述溶劑選自乙酸乙酯、己烷、庚烷、石油醚、丙酮、丁烷、甲基乙基甲酮、甲醇、異丙醇及其混合物;和d)從在步驟c)中獲得的萃取物除去溶劑;和e)任選地,裂解在步驟d)中獲得的干燥萃取物中的酯;和f)任選地,在脂肪族直鏈或支鏈的C1-4醇中結(jié)晶在步驟d)或步驟e)中獲得的干燥萃取物。任何本領(lǐng)域的技術(shù)人員都應(yīng)該明白,步驟e)和步驟f)是任選的,因此在根據(jù)本發(fā)明所述的方法中它們可以被執(zhí)行,也可以不被執(zhí)行。優(yōu)選地,根據(jù)本發(fā)明所述的方法僅由步驟a)至步驟f)組成,而不包括任何額外的步驟。根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式涉及制造含有玉米黃質(zhì)(二)酯的枸杞子萃取物的方法,所述方法包括以下步驟:a)獲取干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和b)用堿性溶液處理上述干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和c)用溶劑萃取在步驟b)中獲得的干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片,其中所述溶劑選自乙酸乙酯、己烷、庚烷、石油醚、丙酮、丁烷、甲基乙基甲酮、甲醇、異丙醇及其混合物;和d)從在步驟c)中獲得的萃取物除去溶劑;和f)任選地,在脂肪族直鏈或支鏈的C1-4醇中結(jié)晶在步驟d)中獲得的干燥萃取物。根據(jù)本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式涉及制造含有玉米黃質(zhì)的枸杞子萃取物的方法,所述方法由以下步驟組成:a)獲取干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和b)用堿性溶液處理上述干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和c)用溶劑萃取在步驟b)中獲得的干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片,其中所述溶劑選自乙酸乙酯、己烷、庚烷、石油醚、丙酮、丁烷、甲基乙基甲酮、甲醇、異丙醇及其混合物;和d)從在步驟c)中獲得的萃取物除去溶劑;和e)裂解在步驟d)中獲得的干燥萃取物中的酯;和f)任選地,在脂肪族直鏈或支鏈的C1-4醇中結(jié)晶在步驟e)中獲得的干燥萃取物。獲得玉米黃質(zhì)的方法在現(xiàn)有技術(shù)中是已知的,但其存在一些缺點。例如,CN-A1158263中使用含水的萃取劑,因此漿果中所含的糖也 被萃取出來了。根據(jù)CN-A1086730所述的方法著重于保存枸杞子的天然營養(yǎng)成分和特殊風(fēng)味。US2007/0161826的方法需要使用極性溶劑(例如乙醇-水或丙酮-水的混合物)的洗滌步驟(參見第2頁的第[0021]和[0024]段以及實施例3)。US2005/0038271的方法涉及使用四氫呋喃(在反應(yīng)條件下容易形成過氧化物)的萃取步驟(參見實施例2和實施例3)或者在水中進(jìn)行的結(jié)晶步驟(參見實施例4),其中水比本發(fā)明的方法的步驟e)中使用的脂肪族直鏈或支鏈的C1-4醇要難去除得多。根據(jù)WO97/23436的實施例3所述,首先將漿果放入水中,在除去糖之后,然后再進(jìn)行干燥。US6,191,293中還描述了用水預(yù)萃取中華枸杞以除去水溶性樹膠的方法(參見實施例4)。US2008/0124416的方法(參見實施例)的目的是獲得富含多糖和類胡蘿卜素的萃取物,因此使用水的萃取步驟是必須的;然而,本發(fā)明的目的是獲得高度富含玉米黃質(zhì)的萃取物,并且所述萃取物優(yōu)選的形式是粉末而非糊狀物,因為粉末的管理要容易得多。本發(fā)明的另一個優(yōu)勢在于本發(fā)明的方法成本效益高、產(chǎn)率高并且能夠在工業(yè)規(guī)模上使用以獲取大量(尤其是數(shù)噸)天然的玉米黃質(zhì)和/或其酯(尤其是其二棕櫚酸酯)?,F(xiàn)在對本發(fā)明的方法進(jìn)行更詳細(xì)的描述。優(yōu)選地,根據(jù)本發(fā)明所述的方法的步驟a)到步驟f)都在惰性氣體環(huán)境(例如在氮氣或氬氣或其混合物)中執(zhí)行。枸杞子可以是寧夏枸杞和/或中華枸杞,優(yōu)選的是LyciumbarbarumL.。術(shù)語“玉米黃質(zhì)酯”包含玉米黃質(zhì)單酯和玉米黃質(zhì)二酯。在枸杞子中發(fā)現(xiàn)的玉米黃質(zhì)酯主要是玉米黃質(zhì)的二棕櫚酸二酯形式。當(dāng)僅執(zhí)行根據(jù)本發(fā)明所述的方法的步驟a)、b)、c)和d)時,得到的是所謂的“油性樹脂”。所述油性樹脂在室溫下的稠度是漿糊狀的,其 主要是由親脂性化合物(例如脂肪)組成。在這種油性樹脂中,以玉米黃質(zhì)酯的形式存在的玉米黃質(zhì)的含量通常為3-20重量-%(基于油性樹脂的總重量)。當(dāng)僅執(zhí)行根據(jù)本發(fā)明所述的方法的步驟a)、b)、c)、d)和f)時,獲得的是玉米黃質(zhì)(二)酯的含量為15-60重量-%(基于萃取物的總重量)的萃取物。該萃取物是粉狀的,這使得對其操作非常容易。當(dāng)執(zhí)行根據(jù)本發(fā)明所述的方法的步驟a)、b)、c)、d)和e)時,獲得的是玉米黃質(zhì)(以游離玉米黃質(zhì)的形式存在)的含量為30-95重量-%(基于萃取物的總重量)的萃取物。該萃取物是粉狀的,這使得對其操作也非常容易。根據(jù)本發(fā)明所述的方法獲得的萃取物能被用作食品補(bǔ)充劑,例如用于眼睛健康。此外,所述萃取物和含有它們的食品補(bǔ)充劑可以用作抗氧化劑和/或藍(lán)光吸收劑?,F(xiàn)在將在下面對根據(jù)本發(fā)明所述的方法的單個步驟進(jìn)行更詳細(xì)的描述。步驟a):獲取干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片干燥的枸杞子通??梢栽谑袌錾腺I到。在市場上買到的干燥的枸杞子可以直接用于本發(fā)明。任選地,可以減小干燥的枸杞子的尺寸。已發(fā)現(xiàn),如果在萃取前減小干燥的枸杞子的尺寸,那么在步驟c)(如下文所述)中萃取出的萃取物中玉米黃質(zhì)的濃度會更高??梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法完成尺寸的減小。優(yōu)選的方法是機(jī)械減小,例如壓碎、粉碎、切碎和磨碎,其中壓碎和磨碎及其組合是優(yōu)選的。本發(fā)明優(yōu)選的實施方式也是以上列出的步驟a)的若干優(yōu)選實施方式相組合的實施方式。步驟b):用堿性溶液處理在步驟b)中,用堿性溶液處理在步驟a)中獲得的干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片。在步驟b)中使用的堿性溶液可以是任何本領(lǐng)域已知的pH<12的堿性溶液。這類堿性溶液的實例包括但不局限于Na2CO3、K2CO3、Ca(OH)2、NaHCO3和KHCO3的水溶液,氨水和NH3等。根據(jù)本發(fā)明所述的優(yōu)選的堿性溶液是Na2CO3水溶液,例如0.3mol/L-0.5mol/L的Na2CO3水溶液??杉尤氲膲A性溶液的量是1-5升,優(yōu)選的是1-4升,更優(yōu)選的是1-3升,甚至更優(yōu)選的是1.5-2.5升,最優(yōu)選的是2升,其中所述量是相對于每1kg在步驟a)中獲得的干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片的量。所述處理被執(zhí)行一次或多次,例如1次、2次或3次。每次處理可持續(xù)至少10分鐘,優(yōu)選的是20分鐘-1小時,最優(yōu)選的是30分鐘。處理后,可向含有干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片的混合物中加入酸以中和。這種中和不是必須進(jìn)行的,因此根據(jù)本發(fā)明它可以被執(zhí)行,也可以不被執(zhí)行。然而,已發(fā)現(xiàn)所添加的用于中和的酸增加了在步驟c)(如下文所述)中獲得的萃取物中玉米黃質(zhì)的含量和產(chǎn)率。本領(lǐng)域的任何技術(shù)人員都能夠理解,本領(lǐng)域已知的任何酸都可用于此目的。在該步驟中優(yōu)選使用的酸是無機(jī)酸,例如HCl。優(yōu)選地,含有干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片的混合物被中和至pH為7-8,更優(yōu)選的pH為7.5。處理后,可以從混合物中濾出枸杞子或其尺寸減小的碎片,然后將其直接或干燥后用于下一步。優(yōu)選地,步驟b)在10℃-30℃下執(zhí)行,更優(yōu)選地在15℃-25℃下執(zhí)行,最優(yōu)選地在室溫下執(zhí)行。已發(fā)現(xiàn)步驟b)能除去枸杞子或其尺寸減小的碎片中多于70%的副產(chǎn)品,因此在步驟c)(如下文所述)中能夠很容易地萃取殘余物,而且所述處理能夠使萃取效率加倍并使在步驟c)中使用的溶劑減少70%。步驟c):萃取在步驟c)中,萃取在步驟b)中獲得的枸杞子或其尺寸減小的碎片。步驟c)中的萃取可被執(zhí)行多次,優(yōu)選的是3次。當(dāng)然,也可以只執(zhí)行1次或2次所述萃取,但萃取時間要長一些。通常每次萃取持續(xù)30分鐘-2小時,優(yōu)選的是45分鐘-1小時。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以很容易地找出萃取所需的最高效的時間。優(yōu)選地,在步驟c)中使用的萃取劑是乙酸乙酯和己烷的體積比為1∶1的混合物、單獨的乙酸乙酯和單獨的己烷。最優(yōu)選的萃取劑是乙酸乙酯。優(yōu)選地,在步驟c)中使用的溶劑的量是0.3-2升,更優(yōu)選的是0.3-1.2升,甚至更優(yōu)選的是0.3-0.6升,其中所述量是相對于每1kg在步驟a)中獲得的干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片的量。優(yōu)選地,步驟c)在20℃-80℃下執(zhí)行,更優(yōu)選地在30℃-70℃下執(zhí)行,甚至更優(yōu)選地在40℃-70℃下執(zhí)行,最優(yōu)選地在50℃-65℃下執(zhí)行。如果在步驟c)中獲得的萃取物含有不溶的部分,優(yōu)選地通過過濾將其除去。本發(fā)明優(yōu)選的實施方式也是以上列出的步驟c)的若干優(yōu)選實施方式相組合的實施方式。步驟d):除去溶劑在步驟d)中,在步驟c)中獲得的萃取物中的溶劑被除去以獲得“油性樹脂”??梢杂帽绢I(lǐng)域已知的任何方法從在步驟c)中獲得的萃取物除去溶劑,例如通過減壓蒸發(fā)。優(yōu)選地,去除溶劑在20℃-78℃下執(zhí)行,更優(yōu)選地在30℃-50℃下執(zhí)行,最優(yōu)選地在40℃-45℃下執(zhí)行??梢苑峙?、以串行方式或以連續(xù)的方式除去溶劑。本發(fā)明優(yōu)選的實施方式也是以上列出的步驟d)的若干優(yōu)選實施方式相組合的實施方式。步驟e):裂解酯存在于在步驟d)中獲得的油性樹脂中的玉米黃質(zhì)大多是酯化的,并主要以玉米黃質(zhì)二棕櫚酸酯的形式存在。為了獲得游離的玉米黃質(zhì),必須用堿(例如KOH和/或NaOH)處理油性樹脂以裂解酯。如果用堿水處理,將同時獲得玉米黃質(zhì)和脂肪酸鹽(皂化)。如果在脂肪族直鏈或支鏈的C1-4醇中用堿(例如用固體KOH和/或固體NaOH)處理,將同時獲得玉米黃質(zhì)和脂肪酸酯(酯交換)。任選地,在步驟d)中獲得的油性樹脂可經(jīng)歷皂化或酯交換的過程以獲得游離的玉米黃質(zhì)。優(yōu)選地,通過酯交換完成玉米黃質(zhì)酯的裂解。更優(yōu)選地,酯交換在20℃-120℃下執(zhí)行,優(yōu)選地在60℃-100℃下執(zhí)行,更優(yōu)選地在70℃-90℃下執(zhí)行。可以在環(huán)境壓力或更高的壓力下完成所述反應(yīng),這取決于所選擇的溫度。最優(yōu)選地,酯交換是通過在堿存在時,玉米黃質(zhì)酯和脂肪族直鏈或支鏈的C1-4醇的反應(yīng)完成的。脂肪族直鏈或支鏈的C1-4醇的實例是甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇、異丁醇和叔丁醇。優(yōu)選的醇是甲醇和乙醇及其任意的混合物。最優(yōu)選的醇是乙醇。優(yōu)選地,所述醇的量是2-12升(相對于每kg干燥的萃取物),更優(yōu)選的是4-10升(相對于每kg干燥的萃取物),最優(yōu)選的是5-8升(相對于每kg在步驟d)中獲得的油性樹脂)。堿的實例是堿金屬氫氧化物,例如KOH和NaOH及其任意的混合物。優(yōu)選地,所述堿的量在化學(xué)計量量(stoichiometricalamount)或催化量的范圍內(nèi),例如25-40重量-%(基于在步驟d)中獲得的油性樹脂)的KOH。本發(fā)明優(yōu)選的實施方式也是以上列出的步驟e)的若干優(yōu)選實施方式相組合的實施方式。步驟f):結(jié)晶任選地,在步驟f)中,可以在脂肪族直鏈或支鏈的C1-4醇中結(jié)晶在步驟d)或步驟e)中獲得的油性樹脂以濃縮玉米黃質(zhì)或其酯。如果步驟e)是通過酯交換完成的,那么在步驟f)中使用的脂肪族直鏈或支鏈的C1-4醇與在步驟e)中使用的相同。在步驟e)中優(yōu)選使用的醇同樣適用于此處。因此,在步驟f)中最優(yōu)選使用的溶劑是乙醇。當(dāng)在乙醇中進(jìn)行結(jié)晶時,步驟f)優(yōu)選地在室溫-78℃下執(zhí)行,更優(yōu)選地在40℃-60℃下執(zhí)行,最優(yōu)選地在約50℃下執(zhí)行。當(dāng)沒有執(zhí)行步驟e)時,在步驟f)中使用的醇的量優(yōu)選的是1-10升, 更優(yōu)選的是2-7升,最優(yōu)選的是3-5升,其中所述量是相對于每1kg在步驟d)中獲得的油性樹脂的量。本發(fā)明優(yōu)選的實施方式也是以上列出的步驟f)的若干優(yōu)選實施方式相組合的實施方式。本發(fā)明更優(yōu)選的實施方式是以上列出的步驟a)和/或步驟b)和/或步驟c)和/或步驟d)和/或步驟e)和/或步驟f)的一個或多個優(yōu)選的實施方式相組合的實施方式。本發(fā)明最優(yōu)選的實施方式是制造含有玉米黃質(zhì)的枸杞子萃取物的方法,所述方法包括以下步驟:a)獲取干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和b)用Na2CO3溶液處理上述干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和c)在40℃-50℃下,用乙酸乙酯萃取在步驟b)中獲得的干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和d)從在步驟c)中獲得的萃取物除去溶劑;和f)在堿存在時,用乙醇通過酯交換裂解在步驟d)中獲得的干燥萃取物中的酯。本發(fā)明的另一個最優(yōu)選的實施方式是制造含有玉米黃質(zhì)(二)酯的枸杞子萃取物的方法,所述方法包括以下步驟:a)獲取干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和b)用Na2CO3溶液處理上述干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和c)在40℃-50℃下,用乙酸乙酯萃取在步驟b)中獲得的干燥的枸杞子或其尺寸減小的碎片;和d)從在步驟c)中獲得的萃取物除去溶劑;和e)在乙醇中結(jié)晶在步驟d)中獲得的干燥萃取物。現(xiàn)在將通過下列非限制性的實施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明。實施例為了分析的目的,獲得的所有產(chǎn)物的樣品都被皂化,因此其中所含的 玉米黃質(zhì)酯以游離的玉米黃質(zhì)的形式被測量。所以,下面給出的玉米黃質(zhì)的含量總是指游離的玉米黃質(zhì)而不是酯化的玉米黃質(zhì)。即使沒有明確提及,所有的實施例都在惰性氣體環(huán)境中執(zhí)行。實施例1:通過用Na2CO3/HCl處理和用乙酸乙酯萃取來制造油性樹脂干燥的枸杞子購于Zhaokang枸杞子有限公司(ZhaokangGoiiberryInc.,寧夏自治區(qū),中國)。粉碎100.28g枸杞子并用100mLNa2CO3(0.3mol/L)預(yù)處理,在室溫下攪拌30min,然后用1mol/LHCl調(diào)節(jié)pH至7.5。用200mL乙酸乙酯處理上述混合物3次,在50℃下攪拌1h。然后得到1.8861g油性樹脂。其中玉米黃質(zhì)的含量是5.11%,產(chǎn)率是90.50%。產(chǎn)率計算公式為:產(chǎn)率=((產(chǎn)物含量×產(chǎn)物重量)/(油性樹脂含量×油性樹脂重量))×100實施例2:通過用Na2CO3/H2O處理和用己烷萃取來制造油性樹脂干燥的枸杞子購于Zhaokang枸杞子有限公司(寧夏自治區(qū),中國)。將101.1g干燥的枸杞子粉末放入500mL的燒瓶中。加入200mL0.3MNa2CO3并在室溫下攪拌30min。在1.5bars下,用壓力式過濾器濾出固體,然后在45℃下用200mL乙酸乙酯攪拌萃取45min。重復(fù)萃取3次,然后合并萃取物。加入20gNa2SO4以脫去萃取物中的水,持續(xù)1h,然后濾出Na2SO4。在真空中使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去萃取物中的溶劑后,得到1.2681g深紅色的油性樹脂。其中玉米黃質(zhì)的產(chǎn)率是39.98%,含量是2.19%。產(chǎn)率計算公式為:產(chǎn)率=((產(chǎn)物含量×產(chǎn)物重量)/(油性樹脂含量×油性樹脂重量))×100實施例3:通過用少于實施例1中的乙酸乙酯萃取來制造油性樹脂干燥的枸杞子購于Zhaokang枸杞子有限公司(寧夏自治區(qū),中國)。將100.6g干燥的枸杞子粉末放入500mL的燒瓶中。加入200mL0.3MNa2CO3并在室溫下攪拌30min。小心地向燒瓶中加入1MHCl并保持晃動,直至混合物的pH被調(diào)節(jié)至7.5。在1.5bars下,用壓力式過濾器濾出固體,然后在45℃下用100mL乙酸乙酯攪拌萃取45min。重復(fù)萃取3次,然后合并萃取物。加入20gNa2SO4以脫去萃取物中的水,持續(xù)1h,然后濾出Na2SO4。在真空中使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去萃取物中的溶劑后,得到0.9365g深紅色的油性 樹脂。其中玉米黃質(zhì)的產(chǎn)率是77.51%,含量是5.72%。產(chǎn)率計算公式為:產(chǎn)率=((產(chǎn)物含量×產(chǎn)物重量)/(油性樹脂含量×油性樹脂重量))×100實施例4:通過在乙醇中結(jié)晶來純化油性樹脂以制造富含天然玉米黃質(zhì)的粉末將1.65g實施例1中的油性樹脂(玉米黃質(zhì)的含量為51.1g/kg)分至8ml乙醇中。在50℃下攪拌上述混合物30min,然后冷卻至室溫并保持2h。濾出形成的固體,用涼乙醇洗滌(4℃,5ml,3次)并在高真空中干燥。獲得了211.7mg產(chǎn)物。通過HPLC分析,玉米黃質(zhì)的含量是307.4g/Kg,產(chǎn)率是77.18%。產(chǎn)率計算公式為:產(chǎn)率=((產(chǎn)物含量×產(chǎn)物重量)/(油性樹脂含量×油性樹脂重量))×100實施例5:在油性樹脂中進(jìn)行玉米黃質(zhì)酯的酯交換以釋放玉米黃質(zhì)晶體將2.43g實施例1中的油性樹脂與29ml乙醇混合并加熱至回流(130℃油浴),然后在5min內(nèi)加入20mlKOH(0.32g)的乙醇溶液并回流20min。隨后,移除油浴鍋,在10min內(nèi)逐滴加入0.8ml乙酸,然后允許混合物冷卻至室溫并保持3h。用乙醇(20ml)、1∶1的乙醇:水(20ml)、水(40ml)和乙醇(20ml)洗滌形成的固體并在真空中干燥。得到53.5mg產(chǎn)物。其中游離的玉米黃質(zhì)的含量是182.6g/Kg,產(chǎn)率是13.14%。
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