本發(fā)明屬于有機(jī)合成技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一類(lèi)羅丹明熒光染料及其制備方法。

背景技術(shù)：

羅丹明類(lèi)化合物是以氧雜蒽為母體的堿性呫噸染料，由于特殊的結(jié)構(gòu)及相應(yīng)的熒光特性，使羅丹明類(lèi)熒光染料成為化學(xué)和生物分析領(lǐng)域中研究較為廣泛的課題。有關(guān)羅丹明類(lèi)熒光染料的合成、離子化及結(jié)構(gòu)、光學(xué)特性及分析等方面的報(bào)道已有很多。與其它常用的熒光染料相比，羅丹明類(lèi)熒光染料具有光穩(wěn)定性好、對(duì)ph不敏感、較寬的波長(zhǎng)范圍和較高的熒光量子產(chǎn)率等優(yōu)點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用在藥理學(xué)、生理學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子遺傳學(xué)、環(huán)境化學(xué)、單個(gè)分子檢測(cè)、信息科學(xué)、熒光標(biāo)記、激光染料等方面，是分析化學(xué)和生物醫(yī)藥科學(xué)等生物技術(shù)領(lǐng)域中最常用的熒光染料。

羅丹明衍生物是有機(jī)小分子探針領(lǐng)域中應(yīng)用最廣泛的一類(lèi)染料，羅丹明6g和羅丹明b具有摩爾吸光系數(shù)大、熒光量子產(chǎn)率高以及光穩(wěn)定性較好等優(yōu)點(diǎn)目標(biāo)物與羅丹明類(lèi)熒光探針的特異性反應(yīng)或非共價(jià)結(jié)合可誘導(dǎo)羅丹明內(nèi)酰胺螺環(huán)的開(kāi)關(guān)，引起熒光信號(hào)的off-on變化，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)物的熒光檢測(cè)，該機(jī)理已廣泛應(yīng)用于羅丹明類(lèi)小分子熒光探針的設(shè)計(jì)。利用該原理構(gòu)建熒光探針成為傳感領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

隨著應(yīng)用范圍越來(lái)越廣泛，羅丹明類(lèi)熒光染料的研究發(fā)展迅速且受到了更多的重視，大量文獻(xiàn)報(bào)道了基于羅丹明螺環(huán)衍生物的熒光探針用于多種目標(biāo)物的檢測(cè)，如金屬離子(cu²⁺、hg²⁺、fe³⁺、zn²⁺、cr³⁺、ag⁺、au⁺、pb²⁺和pd²⁺)、陰離子(ocl^－、cn^－和p2o7^4-)、活性氧簇/活性氮簇、硫醇類(lèi)化合物、ph值以及溫度等等?；诹_丹明熒光染料廣闊的研究空間和應(yīng)用價(jià)值，設(shè)計(jì)合成一系列新型羅丹明類(lèi)熒光染料很有必要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供了一類(lèi)新型羅丹明熒光染料，具有更大的光量子產(chǎn)率和適中的斯托克斯位移，本發(fā)明還提供了該類(lèi)羅丹明熒光染料的制備方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一類(lèi)羅丹明熒光染料，該類(lèi)熒光染料為染料1、染料2和染料3中的任意一種，其中染料1、染料2、染料3的結(jié)構(gòu)式分別如下：

上述羅丹明熒光染料的制備方法，包括以下步驟：

(1)間苯二酚與鄰苯二甲酸酐反應(yīng)得到化合物1；3-羥基-n，n-二乙基苯胺與鄰苯二甲酸酐反應(yīng)得到化合物2；間氨基酚與1-溴-3-氯丙烷反應(yīng)得化合物3，化合物3與鄰苯二甲酸酐反應(yīng)得到化合物4；化合物1、化合物2、化合物3及化合物4的化學(xué)式如下：

(2)以甲磺酸為催化劑、甲苯為反應(yīng)溶劑，由苊酚分別化合物1、化合物2及化合物4反應(yīng)，得到染料1、染料2及染料3。

優(yōu)選地，步驟(1)中化合物1的制備方法具體為：將間苯二酚及鄰苯二甲酸酐溶解于甲苯中，攪拌回流至生成固體，抽濾取固體，用甲醇重結(jié)晶，即得；其中，甲苯中間苯二酚的投加量為2～3mol/l，間苯二酚與鄰苯二甲酸酐的摩爾比為1：1。

優(yōu)選地，步驟(1)中化合物2的制備方法具體為：將3-羥基-n，n-二乙基苯胺及鄰苯二甲酸酐溶解于甲苯中，攪拌回流至生成固體，抽濾取固體，用甲醇重結(jié)晶，即得；其中，甲苯中3-羥基-n，n-二乙基苯胺的投加量為2～3mol/l，3-羥基-n，n-二乙基苯胺與鄰苯二甲酸酐的摩爾比為1：1。

優(yōu)選地，步驟(1)中化合物3的制備方法具體為：向二甲基甲酰胺中加入間氨基酚、碳酸氫鈉及1-溴-3-氯丙烷，攪拌混勻，并于65～75℃繼續(xù)攪拌，薄層層析檢測(cè)反應(yīng)已生成化合物3，再采用柱色譜進(jìn)一步分離，即得；二甲基甲酰胺中間氨基酚的投加量為1.5～2.5mol/l，間氨基酚、碳酸氫鈉及1-溴-3-氯丙烷的摩爾比為1：3～3.5：2.5～3，柱色譜分離時(shí)洗脫劑采用石油醚：乙酸乙酯＝20：1。

優(yōu)選地，步驟(1)中化合物4的制備方法具體為：將化合物3及鄰苯二甲酸酐溶解于甲苯中，攪拌回流至生成固體，抽濾取固體，用甲醇重結(jié)晶，即得；其中，甲苯中化合物3的投加量為2～3mol/l，化合物3與鄰苯二甲酸酐的摩爾比為1：1。

優(yōu)選地，步驟(2)中苊酚的制備方法包括以下步驟：

(1)向苊中依次加入三氯氧磷及n，n-二甲基甲酰胺，攪拌混勻后升溫至90～95℃，繼續(xù)攪拌2.5～3.5小時(shí)，得到反應(yīng)液；將反應(yīng)液加入冰水混合物中，生成粘稠固體，經(jīng)抽濾及真空干燥，得到5-苊醛粗品；其中，苊、三氯氧磷及n，n-二甲基甲酰胺的摩爾比為1：2～2.5：5～6；

(2)將步驟(1)所得5-苊醛粗品采用柱色譜分離，真空干燥，得到5-苊醛純品；其中，柱色譜分離時(shí)洗脫劑為石油醚：乙酸乙酯＝38～42：1；

(3)向二氯甲烷中加入5-苊醛純品、二氧化硒、過(guò)氧化氫及冰乙酸，于20～30℃攪拌35～40小時(shí)，過(guò)濾取濾液、靜置分層后，取有機(jī)層蒸發(fā)掉溶劑，并于冰浴環(huán)境溶于氫氧化鉀的甲醇溶液中，再置于室溫下水解2.5～3.5小時(shí)后，加入鹽酸酸化，再用乙酸乙酯萃取，水洗乙酸乙酯萃取相、干燥，得到苊酚粗品；其中，二氯甲烷中5-苊醛純品的投加量為80～100g/l、二氧化硒的投加量為2～3g/l、過(guò)氧化氫的投加量為1.6～2mol/l、冰乙酸的投加量為0.29～0.35mol/l，所述氫氧化鉀的甲醇溶液中氫氧化鉀的濃度為0.13～0.16g/ml；

(4)將步驟(3)所得苊酚粗品采用柱色譜分離，真空干燥，即得苊酚純品；其中，洗脫劑為石油醚：乙酸乙酯＝28～32：1。

優(yōu)選地，步驟(2)中染料1的制備方法具體為：向甲苯中加入化合物1、苊酚及甲磺酸，于60～70℃繼續(xù)攪拌25～35分鐘，將反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取，再水洗乙酸乙酯萃取相、干燥，得到染料1粗品；將染料1粗品進(jìn)一步用柱色譜分離，真空干燥，得到染料1純品；其中，甲苯中化合物1的投加量為0.09～1.0mol/l，化合物1、苊酚及甲磺酸的摩爾比為1：1：26～27，柱色譜分離時(shí)洗脫劑采用二氯甲烷：甲醇＝48～52：1。

優(yōu)選地，步驟(2)中染料2的制備方法具體為：向甲苯中加入化合物2、苊酚及甲磺酸，于60～70℃繼續(xù)攪拌25～35分鐘，將反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取，再水洗乙酸乙酯萃取相、干燥，得到染料2粗品；將染料2粗品進(jìn)一步用柱色譜分離，真空干燥，得到染料2純品；其中，甲苯中化合物2的投加量為0.18～0.19mol/l，化合物2、苊酚及甲磺酸的摩爾比為1：1.0～1.1：8～9，柱色譜分離時(shí)洗脫劑采用二氯甲烷：甲醇＝38～42：1。

優(yōu)選地，步驟(2)中染料3的制備方法具體為：向甲苯中加入化合物4、苊酚及甲磺酸，于60～70℃繼續(xù)攪拌25～35分鐘，將反應(yīng)液用二氯甲烷萃取，再水洗二氯甲烷萃取相、干燥，得到染料3粗品；將染料3粗品進(jìn)一步用柱色譜分離，真空干燥，得到染料3純品；其中，甲苯中化合物4的投加量為0.035～0.045mol/l，化合物4、苊酚及甲磺酸的摩爾比為1：2～3：64～66，柱色譜分離時(shí)洗脫劑采用二氯甲烷：甲醇＝78～82：1。

上述羅丹明熒光染料在熒光檢測(cè)及ph探針中的應(yīng)用。

上述苊酚的合成路線如下：

上述羅丹明類(lèi)熒光染料的合成路線如下：

本發(fā)明中所使用的各種原料均為普通市售產(chǎn)品，或者通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法或現(xiàn)有技術(shù)中公開(kāi)的方法獲得。

本發(fā)明相比于經(jīng)典羅丹明染料，上述三種新型羅丹明類(lèi)染料具有更優(yōu)良的性能：(1)更多的反應(yīng)位點(diǎn)，使后續(xù)反應(yīng)更加便利；(2)更大的發(fā)射波長(zhǎng)，染料三的熒光發(fā)射波長(zhǎng)在606nm，屬于近紅外區(qū)，可極好的應(yīng)用于活體細(xì)胞的染色、分析；(3)更大的光量子產(chǎn)率，繼承和發(fā)展了羅丹明類(lèi)熒光染料光量子產(chǎn)率高的特點(diǎn)；(4)適中的斯托克斯位移，可在后續(xù)熒光檢測(cè)中摒除激發(fā)波長(zhǎng)的干擾，使分析結(jié)果更加準(zhǔn)確。

附圖說(shuō)明

圖1是染料1的核磁氫譜圖；

圖2是染料1的核磁碳譜圖；

圖3是染料1的質(zhì)譜圖；

圖4是染料2的核磁氫譜圖；

圖5是染料2的核磁碳譜圖；

圖6是染料2的質(zhì)譜圖；

圖7是染料3的核磁氫譜圖；

圖8是染料3的質(zhì)譜圖；

圖9是染料1、染料2及染料3的紫外-可見(jiàn)吸收光譜及其日光下所示顏色的照片；

圖10是染料1、染料2及染料3的熒光光譜及其365nm紫外燈下下所示顏色的照片；

圖11是染料1在不同ph下的紫外可見(jiàn)光譜及熒光光譜；

圖12是染料2在不同ph下的紫外可見(jiàn)光譜及熒光光譜；

圖13是染料3在不同ph下的紫外可見(jiàn)光譜及熒光光譜。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)優(yōu)選實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此。

實(shí)施例1

(1)苊酚的制備

向100ml的三口燒瓶中加入5.0g(32mmol)苊，然后將6.5ml三氯氧磷(pocl3)用恒壓漏斗緩慢加入三口燒瓶中(15分鐘內(nèi)滴加完畢)，再加入13.5mln，n-二甲基甲酰胺(dmf)，攪拌5分鐘后緩慢升溫至90～95℃，繼續(xù)攪拌3小時(shí)，得到反應(yīng)液；將反應(yīng)液加入270ml冰水混合物中，攪拌出現(xiàn)大量粘稠固體，經(jīng)減壓抽濾及真空干燥，得到苊醛粗品；然后采用柱色譜分離，洗脫劑為石油醚：乙酸乙酯＝40：1，真空干燥，得到2.759g淺黃色針狀固體，即5-苊醛純品，收率為46.74％。

向50ml的圓底燒瓶中加入11ml二氯甲烷和1.0g5-苊醛，再加入30mg二氧化硒(seo2)及2ml30％過(guò)氧化氫(h2o2)，然后滴加4滴冰乙酸(約0.2ml)，于25℃水浴攪拌38小時(shí)，過(guò)濾取濾液、靜置分層后，取有機(jī)層旋蒸掉溶劑，并于冰浴環(huán)境溶于氫氧化鉀的甲醇溶液(由0.85g氫氧化鉀溶于6ml甲醇制得)中，再置于室溫下水解3小時(shí)后，加入5ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10％的稀鹽酸酸化，再用乙酸乙酯萃取，用去離子水洗滌乙酸乙酯萃取相2次，然后用適量無(wú)水硫酸鈉干燥30分鐘，得到苊酚粗品；將苊酚粗品采用柱色譜分離，洗脫劑為石油醚：乙酸乙酯＝30：1，真空干燥，得到573mg淺黃色針狀固體，即苊酚純品，收率為61.3％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.72(d,j＝8.3hz,1h),7.46–7.40(m,1h),7.28(d,j＝6.8hz,1h),7.08(d,j＝7.3hz,1h),6.79(d,j＝7.3hz,1h),5.08(s,1h),3.43–3.38(m,2h),3.31(dd,j＝8.2,5.0hz,2h)。

合成路線如下：

(2)化合物1的制備

向150ml圓底燒瓶中加入40ml甲苯(phme)，再加入間苯二酚11.0g(0.1mol)及鄰苯二甲酸酐14.8g(0.1mol)，攪拌溶解，攪拌回流5小時(shí)，逐漸生成固體，抽濾去固體，用甲醇重結(jié)晶，得橙色固體。

合成路線如下：

(3)染料1的制備

向50ml圓底燒瓶中加入3ml甲苯，再中加入75mg(0.29mol)化合物1、50mg(0.29mol)苊酚純品及0.5ml甲磺酸(meso3h)，于65℃油浴加熱，攪拌30分鐘，將反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取，再水洗乙酸乙酯萃取相2次、用無(wú)水na2so4干燥，得到染料1粗品；將染料1粗品進(jìn)一步用柱色譜分離，洗脫劑為二氯甲烷：甲醇(dcm：meoh)＝50：1，旋蒸出溶劑，真空干燥，得到85mg暗紅色固體(yield,74％)，即染料1純品。

合成路線如下：

染料1的核磁共振氫譜圖如圖1所示，¹hnmrδh(400mhz,cdcl3)8.11(1h,d,j8.2),8.07(1h,dd,j6.3,1.8),7.68–7.62(2h,m),7.62–7.56(1h,m),7.41(1h,d,j6.8),7.14(1h,dd,j6.2,1.5),6.92(1h,d,j2.5),6.73(1h,d,j8.6),6.58(1h,dd,j8.6,2.5),6.51(1h,s),3.38(2h,dd,j11.7,5.3),3.24–3.17(2h,m)；染料1的核磁共振碳譜圖如圖2所示，δc(101mhz,cdcl3)169.79,157.27,154.22,152.10,145.66,140.92,135.10,129.65,128.46,126.48,125.04,124.02,121.60,117.89,116.49,113.98,112.31,111.36,103.14,30.84,29.62。對(duì)染料1純品進(jìn)行質(zhì)譜分析，結(jié)果如圖3所示，說(shuō)明合成了染料1。

(4)化合物2的制備

向150ml圓底燒瓶中加入40ml甲苯，再加入3-羥基-n，n-二乙基苯胺16.5g(0.1mol)、鄰苯二甲酸酐14.8g(0.1mol)，攪拌溶解，攪拌回流5小時(shí)，逐漸生成固體，抽濾去固體，用甲醇重結(jié)晶，得橙色固體。

合成路線如下：

(5)染料2的制備

向50ml圓底燒瓶中加入10ml甲苯，再中加入580mg(1.85mol)化合物2、341mg(2.0mol)苊酚純品及1.0ml甲磺酸，于65℃油浴加熱，攪拌30分鐘，將反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取，再水洗乙酸乙酯萃取相2次、用無(wú)水na2so4干燥，得到染料2粗品；將染料2粗品進(jìn)一步用柱色譜分離，洗脫劑：dcm：meoh＝40：1，旋蒸出溶劑，真空干燥，得到暗紅色固體305.7mg(yield,37％)，即染料2純品。

合成路線如下：

染料2的核磁共振氫譜圖如圖4所示，¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.17(d,j＝8.2hz,1h),8.05(dd,j＝6.5,1.4hz,1h),7.62(tdd,j＝19.1,10.1,4.8hz,3h),7.39(d,j＝6.8hz,1h),7.19–7.15(m,1h),6.63(dd,j＝8.1,5.7hz,2h),6.51(s,1h),6.41(dd,j＝8.9,2.6hz,1h),5.30(s,2h),3.47–3.28(m,6h),3.24–3.11(m,2h),1.21(t,j＝7.1hz,6h)；染料2的核磁共振碳譜圖如圖5所示，¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ169.55,164.04,154.11,151.75,151.45,145.67,144.42,141.24,140.38,135.20,133.26,129.81,129.21,128.59,127.59,126.16,125.12,124.11,121.85,121.70,117.84,117.47,116.39,116.31,113.84,110.38,83.42,77.34,77.23,77.02,76.70,30.84,29.64,22.70,14.85,14.21。對(duì)染料2純品進(jìn)行質(zhì)譜分析，結(jié)果如圖6所示，說(shuō)明合成了染料2。

(6)化合物3的制備

向100ml圓底燒瓶中加入6ml二甲基甲酰胺，再加入1.3g間氨基酚、3.2g碳酸氫鈉及3.4ml1-溴-3-氯丙烷，攪拌混勻，并于70℃攪拌，薄層層析檢測(cè)反應(yīng)已生成化合物3，再采用柱色譜進(jìn)一步分離，洗脫劑采用石油醚：乙酸乙酯＝20：1，得到化合物3。

合成路線如下：

(7)化合物4的制備

向150ml圓底燒瓶中加入40ml甲苯，再加入18.9g(0.1mol)化合物3、鄰苯二甲酸酐14.8g(0.1mol)，攪拌溶解，攪拌回流5小時(shí)，逐漸生成固體，抽濾去固體，用甲醇重結(jié)晶，得暗紅色固體。

合成路線如下：

(8)染料3的制備

向50ml圓底燒瓶中加入3ml甲苯，再中加入40mg(0.119mol)化合物4、50mg(0.29mol)苊酚純品及0.5ml甲磺酸，于65℃油浴加熱，攪拌30分鐘，將反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取，再水洗乙酸乙酯萃取相2次、用無(wú)水na2so4干燥，得到染料3粗品；將染料3粗品進(jìn)一步用柱色譜分離，洗脫劑：dcm：meoh＝80:1，旋蒸出溶劑，真空干燥，得到暗紅色固體50mg(yield,89.3％)，即染料3純品。

合成路線如下：

染料3的核磁共振碳譜圖如圖7所示，¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.23–8.19(m,1h),8.15(d,j＝8.2hz,1h),7.71–7.63(m,2h),7.63–7.58(m,1h),7.47(d,j＝6.9hz,1h),7.21–7.15(m,1h),6.64(s,1h),6.49(s,1h),3.46–3.30(m,6h),3.27–3.18(m,2h),3.14(t,j＝6.4hz,2h),2.69–2.56(m,3h),2.17–2.06(m,2h),1.93(dd,j＝11.9,5.9hz,2h)。對(duì)染料3純品進(jìn)行質(zhì)譜分析，結(jié)果如圖10所示，說(shuō)明合成了染料3。

物理性質(zhì)探究

(9)應(yīng)用試驗(yàn)

1)檢測(cè)用儲(chǔ)備液的配置

a.染料1樣品溶液(1.00×10^-3mol·l^-1)的配制：取0.0039g(m＝392)染料1溶于10ml乙醇中，配成濃度為1.00×10^-3mol·l^-1的溶液。

b.染料2樣品溶液(1.00×10^-3mol·l^-1)的配制：取0.0045g(m＝448)染料2溶于10ml乙醇中，配成濃度為1.00×10^-3mol·l^-1的溶液。

c.染料3樣品溶液(1.00×10^-3mol·l^-1)的配制：取0.0047g(m＝472)染料3溶于10ml乙醇，配成濃度為1.00×10^-3mol·l^-1的溶液。

d.用37％的鹽酸配制ph＝1的溶液，用ph試紙確定酸堿度；用氫氧化鈉溶液配成ph＝14的溶液，用ph試紙確定酸堿度；在兩個(gè)溶液相互配比而得到ph由1到14的13種不同酸堿度梯度的溶液，用ph試紙確定酸堿度。

2)檢測(cè)分析

分別取30μl染料1樣品溶液、染料2樣品溶液及染料3樣品溶液，加入至裝有3ml去離子水的比色皿中，然后對(duì)其進(jìn)行紫外-可見(jiàn)分光光度測(cè)試以及熒光分光光度測(cè)試，結(jié)果分別如圖9及圖10所示。

從圖9及圖10中可以看出，染料1、染料2及染料3的物理性質(zhì)如表1所示(其中，stokes位移是最大發(fā)射波長(zhǎng)與最大吸收波長(zhǎng)的差值)。

表1染料1、染料2及染料3的物理性質(zhì)

取3mlph＝1的溶液，加入30μl染料1樣品溶液，放入紫外-可見(jiàn)光譜儀中檢測(cè)染料1在此ph條件下的吸光度變化，同樣檢測(cè)方法得到染料1于ph＝2～14的吸光度變化。

取3mlph＝1的溶液，加入30μl染料1樣品溶液，放入熒光光譜儀中檢測(cè)染料1在此ph條件下的吸光度變化，同樣檢測(cè)方法得到染料1于ph＝2～14的熒光強(qiáng)度變化。

結(jié)果為圖11所示((a)為紫外可見(jiàn)光譜，(b)為熒光光譜)，在ph＝4～14范圍內(nèi)，染料1的吸光度和熒光強(qiáng)度均隨ph的增大而逐漸變低。

取3mlph＝1的溶液，加入30μl染料2樣品溶液，放入紫外-可見(jiàn)光譜儀中檢測(cè)染料2在此ph條件下的吸光度變化，同樣檢測(cè)方法得到染料2于ph＝2～14的吸光度變化。

取3mlph＝1的溶液，加入30μl染料2樣品溶液，放入熒光光譜儀中檢測(cè)染料2在此ph條件下的吸光度變化，同樣檢測(cè)方法得到染料2于ph＝2～14的熒光強(qiáng)度變化。

結(jié)果為圖12所示((a)為紫外可見(jiàn)光譜，(b)為熒光光譜)，在ph＝2～14范圍內(nèi)，染料2的吸光度和熒光強(qiáng)度均隨ph的增大而逐漸變低。

取3mlph＝1的溶液，加入30μl染料3樣品溶液，放入紫外-可見(jiàn)光譜儀中檢測(cè)染料3在此ph條件下的吸光度變化，同樣檢測(cè)方法得到染料3于ph＝2～14的吸光度變化。

取3mlph＝1的溶液，加入30μl染料3樣品溶液，放入熒光光譜儀中檢測(cè)染料3在此ph條件下的吸光度變化，同樣檢測(cè)方法得到染料3于ph＝2～14的熒光強(qiáng)度變化。

結(jié)果為圖13所示((a)為紫外可見(jiàn)光譜，(b)為熒光光譜)，從紫外光譜中可以看出，在ph＝1～14范圍內(nèi)，染料3的吸光度隨著ph的增大而逐漸變低；從熒光光譜中可以看出在ph＝1～7范圍內(nèi)，染料3的熒光強(qiáng)度隨著ph的增大而逐漸變高，在ph＝8～14范圍內(nèi)，染料的熒光強(qiáng)度隨ph的增大而逐漸變低。