本發(fā)明屬于發(fā)光碳納米粒子技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種可控發(fā)光碳納米粒子及制備方法和應(yīng)用。

技術(shù)背景

隨著納米技術(shù)的產(chǎn)生與發(fā)展，碳材料大家庭不斷壯大。碳納米粒子作為碳材料大家庭中的新成員，是一種性質(zhì)獨(dú)特的發(fā)光納米材料，因其具有粒徑小(尺寸小于10nm)，毒性低，水溶性好，熒光性能優(yōu)異和光穩(wěn)定性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)而備受研究者的關(guān)注。碳納米粒子(carbonnanoparticles,cnps)自2004年首次發(fā)現(xiàn)以來(lái)，一直受到科研工作者的青睞，相對(duì)于傳統(tǒng)的量子點(diǎn)(qds)及熒光小分子體現(xiàn)出了一些特有的優(yōu)勢(shì)，包括：與qds相比，cds具有較好的生物相容性和環(huán)境友好性；相比于有機(jī)熒光染料，cds具有熒光穩(wěn)定、激發(fā)波譜寬和成本低等優(yōu)點(diǎn)。

目前，很多合成方法和材料可以用于碳納米粒子的制備，但仍有一些問(wèn)題存在，如有些方法步驟過(guò)于繁瑣，有的碳納米粒子的量子產(chǎn)率不高，有的制備方法需要添加有毒化學(xué)試劑，發(fā)光集中在短波長(zhǎng)，可控合成的局限性，這限制了碳納米粒子在實(shí)際檢測(cè)中的應(yīng)用。因此，發(fā)展簡(jiǎn)單、快速、綠色和低損耗以及可控其性質(zhì)的碳納米粒子合成方法是十分必要的。

目前碳納米粒子的研究尚處于起步階段，還有許多實(shí)驗(yàn)和理論方面的問(wèn)題值得探索和解決。例如尋找更綠色環(huán)保的碳源，通過(guò)更簡(jiǎn)單安全、易操作的方法來(lái)合成性能更好，可控制備不同發(fā)光的熒光碳納米粒子，碳納米粒子作為新型熒光探針在生物標(biāo)記以及離子、ph檢測(cè)上有更深入的應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種簡(jiǎn)單、快速的方法用于可控?zé)晒馓技{米粒子發(fā)光的制備，碳納米粒子制備方法簡(jiǎn)便、設(shè)備簡(jiǎn)單、碳源低廉且綠色環(huán)保、反應(yīng)時(shí)間短，可控合成不同發(fā)光碳納米粒子；所制備的碳納米粒子可應(yīng)用于金屬離子檢測(cè)、ph的檢測(cè)以及細(xì)胞成像等方面，檢測(cè)靈敏度、檢出限以及細(xì)胞成像效果均優(yōu)于當(dāng)前文獻(xiàn)報(bào)道，對(duì)碳納米粒子在實(shí)際樣品、生物學(xué)以及醫(yī)學(xué)應(yīng)用有重要的指導(dǎo)意義。

本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的而采取的技術(shù)方案為：

一種可控發(fā)光碳納米粒子，通過(guò)以下步驟制成：

(1)將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1-2g于小燒杯中并加入去離子水10ml然后通過(guò)加入0-3gnaoh固體攪拌使其充分溶解，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱150-250℃高溫反應(yīng)3-5小時(shí)；

(2)反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到棕色或深棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕黃色或棕色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

(3)將步驟(2)中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕黃色或棕色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出強(qiáng)藍(lán)色或者綠色熒光。

本發(fā)明可控發(fā)光碳納米粒子的制備方法，包括以下步驟：

(1)將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1-2g于小燒杯中并加入去離子水10ml然后通過(guò)加入0-3gnaoh固體攪拌使其充分溶解，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱150-250℃高溫反應(yīng)3-5小時(shí)；

(2)反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到棕色或深棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕黃色或棕色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

(3)將步驟(2)中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕黃色或棕色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出強(qiáng)藍(lán)色或者綠色熒光。

本發(fā)明可控發(fā)光碳納米粒子的應(yīng)用，作為熒光探針用于檢測(cè)水溶液中的fe³⁺濃度和水溶液的ph值或者通過(guò)活細(xì)胞熒光成像檢測(cè)活細(xì)胞中的fe³⁺濃度和活細(xì)胞的ph值。

進(jìn)一步地，本發(fā)明用于檢測(cè)水溶液中的fe³⁺濃度和活細(xì)胞中的fe³⁺濃度時(shí)，在制備發(fā)光碳納米粒子的步驟(1)中naoh固體的加入量為0g；用于檢測(cè)水溶液的ph值和活細(xì)胞的ph值時(shí)，在制備發(fā)光碳納米粒子的步驟(1)中naoh固體的加入量為1-3g。

本發(fā)明采用上述技術(shù)方案，具有以下有益效果：

(1)本發(fā)明操作步驟簡(jiǎn)單，只需加入常規(guī)普通藥品就可調(diào)節(jié)碳納米粒子的發(fā)光，即發(fā)光可以向長(zhǎng)波長(zhǎng)移動(dòng)，對(duì)于在生物傳感應(yīng)用有很重要的價(jià)值，反應(yīng)物在同一體系中進(jìn)行，即可得到目標(biāo)碳納米粒子。

(2)原材料為丁香花，是很低廉的綠色原料，來(lái)源廣泛，經(jīng)濟(jì)環(huán)保。

(3)生產(chǎn)設(shè)備簡(jiǎn)單，成本低，反應(yīng)周期短，產(chǎn)量高。

(4)合成的碳納米粒子均有良好的水溶性，熒光產(chǎn)率高，生物相容性，良好的光穩(wěn)定性，適合量產(chǎn)。

(5)應(yīng)用價(jià)值高，制備碳納米粒子可應(yīng)用于金屬fe³⁺離子檢測(cè)，其檢測(cè)靈敏度高，檢出限在相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道中是最小的；通過(guò)簡(jiǎn)單調(diào)控制備的碳納米粒子還可應(yīng)用于溶液ph的檢測(cè)；所有制備的碳納米粒子都可成功應(yīng)用于生物標(biāo)記、活細(xì)胞中fe³⁺離子以及ph檢測(cè)，效果明顯，

總之，本發(fā)明合成工藝操作簡(jiǎn)單，原料來(lái)源廣泛且低廉環(huán)保，制備條件要求低且溫和，所得碳納米粒子產(chǎn)量高，解決了現(xiàn)有碳納米粒子制備方法因工藝和原料限制而無(wú)法規(guī)?；a(chǎn)問(wèn)題，該碳納米粒子可應(yīng)用于金屬離子檢測(cè)、生物標(biāo)記、生物影像、光電裝置以及防偽標(biāo)記等領(lǐng)域。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明將實(shí)施例1-8所得到的純凈碳納米粒子進(jìn)行熒光光譜測(cè)試，圖1a、b為實(shí)施例1-5的熒光譜圖，圖1c為實(shí)施例6-8的熒光光譜圖。

圖2是實(shí)施例2中制備的純凈碳納米粒子的紫外吸收光譜、最佳熒光激發(fā)和發(fā)射光譜。

圖3是實(shí)施例7中制備的純凈碳納米粒子的紫外吸收光譜、最佳熒光激發(fā)和發(fā)射光譜。

圖4是實(shí)施例2、實(shí)施例7制備的純凈碳納米粒子熒光發(fā)射光譜隨激發(fā)波長(zhǎng)變化的譜圖。

圖5是實(shí)施例2、實(shí)施例7制備的純凈碳納米粒子的紅外光譜圖。

圖6是實(shí)施例2、實(shí)施例7制備的純凈碳納米粒子的tem、hrtem以及粒徑分布圖。

圖7是實(shí)施例2、實(shí)施例7制備的純凈碳納米粒子的xps譜圖。

圖8是實(shí)施例2、實(shí)施例7制備的純凈碳納米粒子的xrd譜圖。

圖9是實(shí)施例2、實(shí)施例7制備的純凈碳納米粒子對(duì)金屬離子選擇以及實(shí)施例2制備的純凈碳納米粒子對(duì)鐵離子猝滅圖。

圖10是實(shí)施例7制備的純凈碳納米粒子在不同ph環(huán)境下的熒光圖以及不同循環(huán)次數(shù)下熒光變化圖。

圖11是實(shí)施例2、實(shí)施例7制備的純凈碳納米粒子對(duì)乳腺癌細(xì)胞mcf-7的細(xì)胞毒性mtt實(shí)驗(yàn)圖。

圖12是實(shí)施例2中制備的純凈碳納米粒子標(biāo)記乳腺癌細(xì)胞mcf-7以及檢測(cè)鐵離子的激光共聚焦圖。

圖13是實(shí)施例7中制備的純凈碳納米粒子標(biāo)記不同ph環(huán)境下乳腺癌細(xì)胞mcf-7激光共聚焦圖。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做詳細(xì)的說(shuō)明，具體的操作過(guò)程以及詳細(xì)的實(shí)施方式通過(guò)實(shí)施例給出，單本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于以下實(shí)施例。

實(shí)施例1

步驟1、將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1g于小燒杯中并加入去離子水10ml，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱150℃高溫反應(yīng)4小時(shí)；

步驟2、反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕黃色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

步驟3、將步驟2中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕黃色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出藍(lán)色熒光；

步驟4、將上述熒光碳納米粒子水溶液冷凍干燥后得到熒光碳納米粒子，其相對(duì)量子產(chǎn)率(以硫酸奎寧為標(biāo)準(zhǔn))為5.8％。

實(shí)施例2

步驟1、將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1g于小燒杯中并加入去離子水10ml，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱200℃高溫反應(yīng)4小時(shí)；

步驟2、反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕黃色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

步驟3、將步驟2中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕黃色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出藍(lán)色熒光；

步驟4、將上述熒光碳納米粒子水溶液冷凍干燥后得到熒光碳納米粒子，其相對(duì)量子產(chǎn)率(以硫酸奎寧為標(biāo)準(zhǔn))為12.9％。

實(shí)施例3

步驟1、將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1g于小燒杯中并加入去離子水10ml，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱250℃高溫反應(yīng)4小時(shí)；

步驟2、反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕黃色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

步驟3將步驟2中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕黃色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出藍(lán)色熒光；

步驟4將上述熒光碳納米粒子水溶液冷凍干燥后得到熒光碳納米粒子，其相對(duì)量子產(chǎn)率(以硫酸奎寧為標(biāo)準(zhǔn))為6.8％。

實(shí)施例4

步驟1、將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1g于小燒杯中并加入去離子水10ml，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱200℃高溫反應(yīng)3小時(shí)；

步驟2、反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕黃色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

步驟3、將步驟2中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕黃色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出藍(lán)色熒光；

步驟4、將上述熒光碳納米粒子水溶液冷凍干燥后得到熒光碳納米粒子，其相對(duì)量子產(chǎn)率(以硫酸奎寧為標(biāo)準(zhǔn))為10.9％。

實(shí)施例5

步驟1、將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1g于小燒杯中并加入去離子水10ml，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱200℃高溫反應(yīng)5小時(shí)；

步驟2、反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕黃色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

步驟3、將步驟2中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕黃色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出藍(lán)色熒光；

步驟4、將上述熒光碳納米粒子水溶液冷凍干燥后得到熒光碳納米粒子，其相對(duì)量子產(chǎn)率(以硫酸奎寧為標(biāo)準(zhǔn))為7.2％。

實(shí)施例6

步驟1、將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1g于小燒杯中并加入去離子水10ml然后加入1gnaoh固體攪拌使其充分溶解，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱200℃高溫反應(yīng)4小時(shí)；

步驟2、反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到深棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

步驟3、將步驟2中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出綠色熒光；

步驟4、將上述熒光碳納米粒子水溶液冷凍干燥后得到熒光碳納米粒子，其相對(duì)量子產(chǎn)率(以羅丹明6g為標(biāo)準(zhǔn))為4.8％。

實(shí)施例7

步驟1、將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1g于小燒杯中并加入去離子水10ml然后加入2gnaoh固體攪拌使其充分溶解，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱200℃高溫反應(yīng)4小時(shí)；

步驟2、反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到深棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

步驟3、將步驟2中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出綠色熒光；

步驟4、將上述熒光碳納米粒子水溶液冷凍干燥后得到熒光碳納米粒子，其相對(duì)量子產(chǎn)率(以羅丹明6g為標(biāo)準(zhǔn))為8.9％。

實(shí)施例8

步驟1、將鮮丁香花瓣烘干，粉碎成粉末，稱取1g于小燒杯中并加入去離子水10ml然后加入3gnaoh固體攪拌使其充分溶解，加入到高壓反應(yīng)釜中，放入烘箱200℃高溫反應(yīng)4小時(shí)；

步驟2、反應(yīng)結(jié)束后冷卻得到深棕色溶液，通過(guò)離心，0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾，然后在500-1000d透析袋中透析3天，得到棕色液體即為純凈碳納米粒子溶液；

步驟3、將步驟2中的碳納米粒子溶液冷凍真空干燥得到棕色粉末，即為目的碳納米粒子，溶于水中發(fā)出綠色熒光；

步驟4、將上述熒光碳納米粒子水溶液冷凍干燥后得到熒光碳納米粒子，其相對(duì)量子產(chǎn)率(以羅丹明6g為標(biāo)準(zhǔn))為6.5％。

實(shí)施例9

將實(shí)施例1-5所得到的純凈碳納米粒子進(jìn)行熒光光譜測(cè)試，如圖1a、b為實(shí)施例1-5的熒光譜圖。將實(shí)施例6-8所得到的純凈碳納米粒子進(jìn)行熒光光譜測(cè)試，如圖1c為實(shí)施例6-8的熒光光譜圖。

實(shí)施例10

將藍(lán)色熒光量子產(chǎn)率最高的碳納米粒子，即實(shí)施例2中得到的碳納米粒子進(jìn)行紫外光譜測(cè)定，熒光激發(fā)譜、發(fā)射譜測(cè)定，如圖2；將綠色熒光量子產(chǎn)率最高的碳納米粒子，即實(shí)施例7中得到的碳納米粒子進(jìn)行紫外光譜測(cè)定，熒光激發(fā)譜、發(fā)射譜測(cè)定，如圖3。將實(shí)施例2中的碳納米粒子溶液在不同激發(fā)波長(zhǎng)下的熒光發(fā)射譜圖進(jìn)行測(cè)定，如圖4a，在佳發(fā)射波長(zhǎng)在450nm左右，屬于藍(lán)光范疇；將實(shí)施例2中的碳納米粒子溶液在不同激發(fā)波長(zhǎng)下的熒光發(fā)射譜圖進(jìn)行測(cè)定，如圖4b，在佳發(fā)射波長(zhǎng)在520nm左右，屬于綠光范疇。

將實(shí)施例2和實(shí)施例7中得到高純碳納米粒子進(jìn)行紅外，tem/hrtem，xps，xrd表征，如圖5-8得到本發(fā)明得到的高純碳納米粒子粒徑均小于10nm，發(fā)藍(lán)光的碳納米粒子含有羧基、羥基以及氨基等基團(tuán)，發(fā)綠光的碳納米粒子含有羧基、羥基等基團(tuán)，兩種碳納米粒子含有基團(tuán)略有區(qū)別。

實(shí)施例11

取實(shí)施例2制備的熒光碳納米粒子水溶液(2.8mg/ml)置于熒光比色皿中，分別加17種常見的金屬離子溶液(300mm)，充分混合均勻，在熒光光譜儀中掃描發(fā)射光譜(λex＝340nm，λem＝445nm)，并記錄加入每一種離子后的熒光強(qiáng)度，如圖9b所示，實(shí)施例2的碳納米粒子對(duì)fe³⁺有很好的選擇性，即fe³⁺可以使實(shí)施例2中的碳納米粒子的藍(lán)色熒光淬滅。為了計(jì)算碳納米粒子對(duì)fe³⁺的檢測(cè)范圍，取實(shí)施例2制備的熒光碳納米粒子水溶液(2.8mg/ml)置于熒光比色皿中，從低到高分別加入不同濃度的fe³⁺溶液，充分混合均勻，測(cè)定在不同濃度f(wàn)e³⁺下實(shí)施例2中熒光碳納米粒子的熒光，如圖9a，從圖中繼而得出對(duì)fe³⁺的檢出限為可達(dá)3.69×10^-7mol/l，檢出線性范圍0-150mol/l。而實(shí)施例7中的發(fā)綠光的熒光碳納米粒子沒有對(duì)某種金屬離子有很好的選擇，如圖9c。

實(shí)施例12

取實(shí)施例2制備的熒光碳納米粒子水溶液(2.8mg/ml)置于熒光比色皿中，通過(guò)利用不同濃度f(wàn)e³⁺滴定可以制得c(fe3+)與熒光強(qiáng)度的線性關(guān)系，從而可以測(cè)定實(shí)際水樣中(自來(lái)水中)fe³⁺的含量，所測(cè)定值與電感耦合等離子光譜發(fā)生儀(icp)測(cè)定的結(jié)果基本一致，見表1，確定我們的方法具有可靠性。

實(shí)施例13

將實(shí)施例7中制備的發(fā)綠光的碳納米粒子(1.6mg/ml)置于熒光比色皿中，加入不同ph的溶液(1.89-11.92)中測(cè)定其熒光，充分混合均勻，在熒光光譜儀中掃描發(fā)射光譜(λex＝450nm，λem＝520nm)，并記錄加入到每一種ph后的熒光強(qiáng)度，如圖10a所示，在1.89-8.95范圍內(nèi)呈線性，即ph越大熒光越強(qiáng)，在1.89和8.95不同重復(fù)變換后熒光不受影響，如圖10b，說(shuō)明實(shí)施例7制備的發(fā)綠光的熒光碳納米粒子對(duì)ph有很好的靈敏度。

實(shí)施例14

將實(shí)施例7中制備的發(fā)綠光的碳納米粒子(1.6mg/ml)置于熒光比色皿中，加入不同ph的溶液(1.89-8.95)中測(cè)定其熒光，得出溶液ph與熒光強(qiáng)度的線性關(guān)系，從而可以測(cè)定未知實(shí)際溶液中的ph，所測(cè)定值與商業(yè)ph測(cè)定儀測(cè)定值很接近，見表2。

實(shí)施例15

將實(shí)施例2、7中不同發(fā)光的碳納米粒子進(jìn)行細(xì)胞毒性測(cè)試，分別配制不同濃度的碳納米粒子溶液(0-50mg/ml)作用于人乳腺癌細(xì)胞mcf-7，即通過(guò)常規(guī)mtt實(shí)驗(yàn)進(jìn)行分析得出實(shí)施例2、7中制備的不同發(fā)光的碳納米粒子對(duì)細(xì)胞毒性很小，如圖11。

實(shí)施例16

將實(shí)施例2中制備的發(fā)射藍(lán)色熒光的碳納米粒子水溶液(6mg/ml)用于標(biāo)記人乳腺癌mcf-7細(xì)胞，如圖12，圖12a是只有實(shí)施例2中制備的碳納米粒子水溶液(6mg/ml)加入到培養(yǎng)mcf-7細(xì)胞中的dmem培養(yǎng)液中，共孵育10分鐘后的激光共聚焦成像(激發(fā)波長(zhǎng)是405nm，接收的發(fā)射波長(zhǎng)范圍是425-480nm)，顯示藍(lán)色熒光很強(qiáng)；圖12b-e是加入實(shí)施例2中制備的碳納米粒子水溶液(6mg/ml)加入到培養(yǎng)mcf-7細(xì)胞中的dmem培養(yǎng)液中，共孵育10分鐘后，立即加入fe³⁺(300mm)在不同時(shí)間的激光共聚焦成像，顯示隨著時(shí)間推移，熒光逐漸減弱；圖12f是加入fe³⁺在不同時(shí)間段的細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度圖，表明實(shí)施例2中制備的碳納米粒子可以在活細(xì)胞中檢測(cè)fe³⁺。

實(shí)施例17

將實(shí)施例7中制備的發(fā)射綠色熒光的碳納米粒子水溶液(5mg/ml)用于標(biāo)記人乳腺癌mcf-7細(xì)胞，如圖13，表示實(shí)施例7中制備的碳納米粒子水溶液(5mg/ml)加入到培養(yǎng)mcf-7細(xì)胞中的dmem培養(yǎng)液中，在不同ph環(huán)境中共孵育10分鐘后(激發(fā)波長(zhǎng)是405nm，接收的發(fā)射波長(zhǎng)范圍是480-545nm)的激光共聚焦成像，顯示在ph較小的酸性環(huán)境綠色熒光很弱，而在ph較大的中性和弱堿環(huán)境綠色熒光很強(qiáng)，表明實(shí)施例7制備的發(fā)射綠色熒光的碳納米粒子可以在活細(xì)胞中檢測(cè)酸堿性。

表1測(cè)定自來(lái)水中fe³⁺的含量(n＝3).

表2測(cè)定未知溶液ph值.

以上實(shí)施例描述了本發(fā)明的制備方法及應(yīng)用。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該知曉本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，在不脫離本發(fā)明實(shí)質(zhì)的范圍下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)均落入本發(fā)明保護(hù)的范圍內(nèi)。