求1到11中任一權(quán)利要求所述的pH敏感性熒光染料化合物； 和 (b) 分析物， 其中所述一或多種pH敏感性熒光染料化合物以有效檢測(cè)所述樣品的pH的量存在。
14. 一種用于測(cè)定樣品pH的方法，所述方法包含： (a) 使所述樣品與一或多種根據(jù)權(quán)利要求1到11中任一權(quán)利要求所述的pH敏感性熒 光染料化合物接觸以形成接觸的樣品； (b) 使所述接觸的樣品培育適當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間以形成培育的樣品； (c) 用適當(dāng)波長(zhǎng)照射所述培育的樣品以形成照射的樣品；和 (d) 檢測(cè)來(lái)自所述照射的樣品的熒光發(fā)射； 其中所述熒光發(fā)射用于測(cè)定所述樣品的pH。
15. -種用于測(cè)定樣品pH的方法，所述方法包含： (a)使所述樣品與一或多種根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的組合物接觸以形成接觸的樣 品； (b)使所述接觸的樣品培育適當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間以形成培育的樣品； (C)用適當(dāng)波長(zhǎng)照射所述培育的樣品以形成照射的樣品；和 (d)檢測(cè)來(lái)自所述照射的樣品的熒光發(fā)射； 其中所述熒光發(fā)射用于測(cè)定所述樣品的pH。
16. -種用于監(jiān)測(cè)活細(xì)胞內(nèi)部的pH的方法，所述方法包含： (a) 使所述細(xì)胞與一或多種根據(jù)權(quán)利要求1到11中任一權(quán)利要求所述的pH敏感性熒 光染料化合物接觸以形成接觸的細(xì)胞； (b) 使所述接觸的細(xì)胞培育足以使所述染料化合物或組合物進(jìn)入所述細(xì)胞的時(shí)間長(zhǎng)度 以形成標(biāo)記的細(xì)胞； (c) 用適當(dāng)波長(zhǎng)照射所述標(biāo)記的細(xì)胞以形成照射的細(xì)胞；和 (d) 檢測(cè)來(lái)自所述照射的細(xì)胞的熒光發(fā)射； 其中所述熒光發(fā)射用于監(jiān)測(cè)所述細(xì)胞內(nèi)部的pH。
17. -種用于監(jiān)測(cè)活細(xì)胞內(nèi)部的pH的方法，所述方法包含： (a) 使所述細(xì)胞與一或多種根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的組合物接觸以形成接觸的細(xì) 胞； (b) 使所述接觸的細(xì)胞培育足以使所述染料化合物或組合物進(jìn)入所述細(xì)胞的時(shí)間長(zhǎng)度 以形成標(biāo)記的細(xì)胞； (c) 用適當(dāng)波長(zhǎng)照射所述標(biāo)記的細(xì)胞以形成照射的細(xì)胞；和 (d) 檢測(cè)來(lái)自所述照射的細(xì)胞的熒光發(fā)射； 其中所述熒光發(fā)射用于監(jiān)測(cè)所述細(xì)胞內(nèi)部的pH。
18. -種用于檢測(cè)溶液中載體分子的吞噬作用的方法，所述方法包含： (a) 使所述載體分子與一或多種根據(jù)權(quán)利要求1到11中任一權(quán)利要求所述的pH敏感 性熒光染料化合物結(jié)合以形成載體結(jié)合物； (b) 使所述載體結(jié)合物與細(xì)胞接觸以形成接觸的細(xì)胞； (c) 培育所述接觸的細(xì)胞以形成培育的溶液； (d) 照射所述培育的溶液以形成照射的溶液；和 (e) 檢測(cè)來(lái)自所述照射的溶液的熒光發(fā)射； 其中熒光發(fā)射指示所述載體分子的吞噬作用。
19. 一種用于檢測(cè)溶液中載體分子的吞噬作用的方法，所述方法包含： (a) 使所述載體分子與一或多種根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的組合物結(jié)合以形成載體 結(jié)合物； (b) 使所述載體結(jié)合物與細(xì)胞接觸以形成接觸的細(xì)胞； (c) 培育所述接觸的細(xì)胞以形成培育的溶液； (d) 照射所述培育的溶液以形成照射的溶液；和 (e) 檢測(cè)來(lái)自所述照射的溶液的熒光發(fā)射； 其中熒光發(fā)射指示所述載體分子的吞噬作用。
20. -種用于檢測(cè)pH相關(guān)的細(xì)胞內(nèi)過(guò)程的方法，所述方法包含： (a)使一或多種根據(jù)權(quán)利要求1到11中任一權(quán)利要求所述的pH敏感性熒光染料化合 物與細(xì)胞接觸以形成接觸的細(xì)胞； (b) 培育所述接觸的細(xì)胞以形成培育的溶液； (c) 照射所述培育的溶液以形成照射的溶液；和 (d) 檢測(cè)來(lái)自所述照射的溶液的熒光發(fā)射； 其中增加的熒光發(fā)射指示所述細(xì)胞內(nèi)過(guò)程的活化。
21. -種用于檢測(cè)pH相關(guān)的細(xì)胞內(nèi)過(guò)程的方法，所述方法包含： (a) 使一或多種根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的組合物與細(xì)胞接觸以形成接觸的細(xì)胞； (b) 培育所述接觸的細(xì)胞以形成培育的溶液； (c) 照射所述培育的溶液以形成照射的溶液；和 (d) 檢測(cè)來(lái)自所述照射的溶液的熒光發(fā)射； 其中增加的熒光發(fā)射指示所述細(xì)胞內(nèi)過(guò)程的活化。
22. -種用于鑒別細(xì)胞群體中的目標(biāo)細(xì)胞的方法，其中所述目標(biāo)細(xì)胞相對(duì)于所述群體 內(nèi)的相鄰細(xì)胞經(jīng)差異性標(biāo)記，所述方法包含： (a) 使一或多種根據(jù)權(quán)利要求1到11中任一權(quán)利要求所述的pH敏感性染料化合物與 所述細(xì)胞群體接觸以形成接觸的細(xì)胞群體； (b) 使所述接觸的細(xì)胞群體培育足以使所述一或多種所述pH敏感性染料化合物進(jìn)入 所述目標(biāo)細(xì)胞的一段時(shí)間，由此形成培育的細(xì)胞群體；和 (c) 照射所述培育的細(xì)胞群體，其中所述目標(biāo)細(xì)胞通過(guò)相對(duì)于所述群體內(nèi)的相鄰細(xì)胞 的差異標(biāo)記來(lái)鑒別。
23. -種用于鑒別細(xì)胞群體中的目標(biāo)細(xì)胞的方法，其中所述目標(biāo)細(xì)胞相對(duì)于所述群體 內(nèi)的相鄰細(xì)胞經(jīng)差異性標(biāo)記，所述方法包含： (a) 使一或多種根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的組合物與所述細(xì)胞群體接觸以形成接觸 的細(xì)胞群體； (b) 使所述接觸的細(xì)胞群體培育足以使所述一或多種所述組合物進(jìn)入所述目標(biāo)細(xì)胞的 一段時(shí)間，由此形成培育的細(xì)胞群體；和 (c) 照射所述培育的細(xì)胞群體，其中所述目標(biāo)細(xì)胞通過(guò)相對(duì)于所述群體內(nèi)的相鄰細(xì)胞 的差異標(biāo)記來(lái)鑒別。
24. -種用于診斷或檢測(cè)受檢者疾病的方法，所述方法包含： (a) 使從懷疑患有所述疾病的受檢者獲得的樣品與一或多種根據(jù)權(quán)利要求1到11中任 一權(quán)利要求所述的pH敏感性染料化合物接觸以形成接觸的樣品； (b) 使所述接觸的樣品培育適當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間以形成培育的樣品； (c) 用適當(dāng)波長(zhǎng)照射所述培育的樣品以形成照射的樣品；和 (d) 檢測(cè)來(lái)自所述照射的樣品的熒光發(fā)射； 其中所述熒光發(fā)射用于診斷或檢測(cè)所述疾病。
25. -種用于診斷或檢測(cè)受檢者疾病的方法，所述方法包含： (a) 使從懷疑患有所述疾病的受檢者獲得的樣品與一或多種根據(jù)權(quán)利要求12或13所 述的組合物接觸以形成接觸的樣品； (b) 使所述接觸的樣品培育適當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間以形成培育的樣品； (c) 用適當(dāng)波長(zhǎng)照射所述培育的樣品以形成照射的樣品；和 (d) 檢測(cè)來(lái)自所述照射的樣品的熒光發(fā)射； 其中所述熒光發(fā)射用于診斷或檢測(cè)所述疾病。
26. 根據(jù)權(quán)利要求14或25所述的方法，其中所述疾病是選自癌癥、免疫相關(guān)疾病、氧化 應(yīng)激相關(guān)疾病和與中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的疾病。
27. -種用于測(cè)定樣品pH的試劑盒，其包含： (a) -或多種根據(jù)權(quán)利要求1到11中任一權(quán)利要求所述的pH敏感性染料化合物； (b) -或多個(gè)容器；和任選地， (c) 用于測(cè)定所述樣品的pH的說(shuō)明書(shū)。
28. -種用于測(cè)定樣品pH的試劑盒，其包含： (a) -或多種根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的組合物； (b) -或多個(gè)容器；和任選地， (c) 用于測(cè)定所述樣品的pH的說(shuō)明書(shū)。
29. -種合成結(jié)構(gòu)式（I)的化合物的方法，
所述方法包含： 使結(jié)構(gòu)式（ΠΙ)的化合物： w
V XJLJL β 與結(jié)構(gòu)式（IV)的化合物接觸： 以形成結(jié)構(gòu)式（I)的化合物，
其中R1、R2、R3、R4、R5、R 6、R7、R8、R9和R 1(1如權(quán)利要求1中所定義。
【專(zhuān)利摘要】本文揭示用于使用pH敏感性熒光染料來(lái)檢測(cè)樣品pH的化合物、組合物、方法和試劑盒。本文所揭示的化合物為包含具有一或多個(gè)給電子基團(tuán)的苯胺部分的新穎氧雜蒽衍生染料，所述染料是用于活體外或活體內(nèi)檢測(cè)樣品pH。本文還描述用于制備所述染料以供在所揭示的組合物、方法和試劑盒中使用的方法。
【IPC分類(lèi)】C09B11-24, G01N33-52, C07K1-13
【公開(kāi)號(hào)】CN104640933
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201380028391
【發(fā)明人】K.吉, U.辛赫, A.魯卡維什尼科夫, D.比查姆, S-J.黃, M.簡(jiǎn)斯, W.周
【申請(qǐng)人】生命科技公司
【公開(kāi)日】2015年5月20日
【申請(qǐng)日】2013年3月14日
【公告號(hào)】CN104470991A, EP2855596A1, EP2875075A1, US20150218379, US20150241438, WO2013180811A1, WO2013180813A1