HILIC/陰離子交換/陽(yáng)離子交換多模式介質(zhì)發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及可用作色譜應(yīng)用固定相的組合物以及制造和在多模式分離中使用這些組合物的方法。發(fā)明背景主要受柱化學(xué)過(guò)程支配的選擇性是HPLC分離中的關(guān)鍵。盡管反相柱（例如，C18）最常用于藥物應(yīng)用中，但它們通常無(wú)法保留高度極性分子（例如，抗衡離子），并且提供有限的選擇性。離子交換（IEX）色譜被用以分離離子型或可電離的分子。然而，它由于不充分的疏水性保留而在小分子分離中具有有限的用途。離子配對(duì)色譜可以幫助克服上述困難，但它通常需要延長(zhǎng)的平衡時(shí)間、與MS不相容的一個(gè)復(fù)雜流動(dòng)相以及一個(gè)專用柱。混合模式色譜通過(guò)使用反相和離子交換保留機(jī)制提供了對(duì)這些挑戰(zhàn)的一種可行解決方法。這種方法的一個(gè)主要優(yōu)點(diǎn)在于柱選擇性可以通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相離子強(qiáng)度、pH值和/或有機(jī)溶劑濃度而容易地改進(jìn)。因此，不僅一個(gè)混合模式柱的選擇性與反相柱的選擇性互補(bǔ)，而且允許開發(fā)對(duì)一個(gè)既定的柱在不同適當(dāng)條件下的多種互補(bǔ)選擇性?；旌夏Ｊ缴V非常適于保留疏水性（例如，萘普生（Naproxen））或親水性（例如，Na+和Cl-離子）的離子分析物，并且在該方法中不需要離子配對(duì)試劑，由此顯著改善MS相容性。這種技術(shù)已經(jīng)由于其優(yōu)于常規(guī)色譜的優(yōu)勢(shì)（諸如其高分辨率、可調(diào)節(jié)的選擇性、高樣品負(fù)載以及無(wú)需離子配對(duì)試劑）而迅速發(fā)展。在一個(gè)混合模式柱上容易解決對(duì)于一個(gè)C18柱成問(wèn)題的、涉及親水性可電離化合物的多種應(yīng)用?；旌夏Ｊ浇橘|(zhì)可以被分類成四種一般的類別。近來(lái)，基于至少兩種相互作用模式（在大多數(shù)情況下是離子交換和疏水性相互作用）的混合模式色譜已經(jīng)變得更流行，因?yàn)榭雌饋?lái)所達(dá)到的分辨率通常勝過(guò)相應(yīng)的分開的個(gè)別的單一模式色譜分離的分辨率。所述混合模式色譜可以許多不同變化形式進(jìn)行，這些變化形式已經(jīng)由L.W.麥克勞克林（L.W.McLaughlin）(1989)化學(xué)評(píng)論（Chem.Rev.）89，第309-319頁(yè)綜述：類別1利用填充有不同個(gè)別的單一模式分離物質(zhì)的柱的在線聯(lián)用。舉例來(lái)說(shuō)，一個(gè)反相柱可以與一個(gè)離子交換柱在線聯(lián)用。類別2是基于混合床柱的使用。這些柱包括在一個(gè)單一HPLC柱中的相異分離物質(zhì)（諸如離子交換和反相顆粒）的一種摻混物。在一個(gè)單一柱中摻混兩種類型的不同物質(zhì)（諸如RP顆粒和陰離子交換劑（例如，強(qiáng)陰離子交換劑顆粒））已經(jīng)被用作組合不同保留機(jī)制的一種方法，并且所述柱是可商購(gòu)的。類別3物質(zhì)包括在該分離物質(zhì)的不同組分上的相異（distinct）相互作用官能團(tuán)，諸如一個(gè)離子交換部分和疏水性部分。舉例來(lái)說(shuō)，一個(gè)分離部分可以位于專用色譜配體上，并且另一分離部分位于載體上。這些不同相互作用部分是空間上分隔的。類別4混合模式色譜物質(zhì)在一個(gè)單一色譜配體上具有兩個(gè)（或更多個(gè)）相異相互作用位點(diǎn)。示例性混合模式介質(zhì)是基于在鍵結(jié)步驟中由RP和IEX配體兩者的一種混合物改性的鍵結(jié)二氧化硅。盡管這些物質(zhì)似乎合成起來(lái)是直接的，但其在多種應(yīng)用中的用途受選擇性偏移的限制。這種偏移主要是由于RP與IEX配體鍵結(jié)位點(diǎn)之間的水解穩(wěn)定性差異而導(dǎo)致。較新的混合模式介質(zhì)使用包含RP和IEX官能團(tuán)的官能性硅烷基配體以共價(jià)改性二氧化硅顆粒。雖然RP與IEX鍵結(jié)位點(diǎn)之間的恒定比率極大地進(jìn)行了改善，但兩種相互作用位點(diǎn)之間存在顯著的選擇性差異。已經(jīng)產(chǎn)生了可用于色譜分離的組合物以及制造和使用這些組合物的方法，并且在此進(jìn)行描述。發(fā)明概述本發(fā)明提供了可用作固定相用于多種色譜應(yīng)用（諸如液相色譜（LC）（例如，高效液相色譜（HPLC））和固相萃?。⊿PE））的組合物。在不同實(shí)施例中，本發(fā)明涉及用于液相色譜（LC）和相關(guān)應(yīng)用的新穎填充物質(zhì)。更確切地說(shuō)，它涉及通過(guò)用具有相對(duì)電荷的納米尺寸的顆粒涂布一個(gè)親水性帶電的基質(zhì)表面通過(guò)靜電相互作用來(lái)制備新穎多模式陰離子交換（AEX）/陽(yáng)離子交換（CEX）/親水性相互作用（HILIC）多模式介質(zhì)。產(chǎn)生的介質(zhì)具有AEX、CEX以及HILIC混合模式性質(zhì)，并且對(duì)于色譜分離展現(xiàn)獨(dú)特和所希望的選擇性。本發(fā)明的多模式組合物在同一色譜物質(zhì)內(nèi)包括陰離子交換、陽(yáng)離子交換親水性相互作用（HILIC）能力。當(dāng)選擇適當(dāng)流動(dòng)相時(shí)，這些組合物同時(shí)提供HILIC陰離子交換和陽(yáng)離子交換能力。這因?yàn)橄喈?dāng)大數(shù)目的陰離子交換基團(tuán)（例如，堿性基團(tuán)）與相當(dāng)大數(shù)目的陽(yáng)離子交換基團(tuán)（例如，酸性基團(tuán)）彼此物理地分隔、從而預(yù)防其之間的相互作用（例如，鹽橋形成、電荷中和）而變得可能。在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明提供了一種組合物，包括一種固體載體（例如，無(wú)機(jī)固體載體，諸如硅膠或二氧化硅單塊；或一種有機(jī)聚合固體載體，諸如一種聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物）和結(jié)合到該固體載體的納米顆粒（例如乳膠顆粒）。在不同實(shí)例中，該組合物包括陽(yáng)離子交換基團(tuán)、陰離子交換基團(tuán)和HILIC部分，其中相當(dāng)大比例（例如，大多數(shù)）的陽(yáng)離子交換與陰離子交換基團(tuán)彼此充分地隔開以基本上避免其之間的相互作用。在一個(gè)實(shí)例中，這些HILIC部分由共價(jià)鍵聯(lián)到該固體載體的有機(jī)配體提供。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種組合物，包括具有一個(gè)外表面和由內(nèi)壁界定的內(nèi)部孔隙的一種多孔固體載體（例如，無(wú)機(jī)固體載體，諸如硅膠或二氧化硅單塊；或一種有機(jī)聚合固體載體，諸如聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物）。這些孔隙延伸到該外表面中的開口。該組合物進(jìn)一步包括了共價(jià)結(jié)合到該固體載體的有機(jī)配體（例如，經(jīng)由該固體載體和/或該配體表面上的反應(yīng)性官能團(tuán)）。這些配體結(jié)合到這些孔隙的內(nèi)壁和該載體的外表面。在不同實(shí)施例中，這些配體是中性的。在不同實(shí)例中，這些配體包括了具有一種第一電荷（選自正和負(fù)）的至少一個(gè)離子交換基團(tuán)。該組合物進(jìn)一步包括了納米顆粒（例如，乳膠顆粒），這些納米顆粒包括了具有一種第二電荷（選自正和負(fù)）的離子交換基團(tuán)，其中該第二電荷與該第一電荷相反。這些納米顆粒直接或間接（例如，經(jīng)由另一個(gè)納米顆粒層）結(jié)合（例如，不可逆）到該固體載體的外表面（例如，經(jīng)由靜電力）。在某些實(shí)施例中，這些納米顆粒的平均直徑等于或大于這些孔隙的平均直徑，以便這些納米顆粒中大多數(shù)結(jié)合到該外表面。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種本發(fā)明的組合物，在一種流通床中適合用作一種色譜介質(zhì)。另外，本發(fā)明提供了一種色譜柱，包括一種本發(fā)明的組合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種色譜柱，填充有包括一種本發(fā)明的組合物的一種分離介質(zhì)。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種用于制造本發(fā)明的組合物的方法，例如用于分離一種液體樣品中的諸種分析物。該方法包括了：(a)提供一種多孔固體載體（例如，無(wú)機(jī)固體載體，諸如硅膠或二氧化硅單塊；或一種有機(jī)聚合固體載體，諸如聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物），具有一個(gè)外表面和延伸到該外表面中的開口的內(nèi)壁界定內(nèi)部孔隙；(b)例如經(jīng)由該固體載體和/或該配體表面上的反應(yīng)性官能團(tuán)使有機(jī)配體共價(jià)鍵結(jié)到這些內(nèi)壁和該外表面。這些配體是不帶電荷的，或包括了具有一種第一電荷（選自正和負(fù)）的至少一個(gè)離子交換基團(tuán)。該方法進(jìn)一步包括了(c)使納米顆粒（例如，乳膠顆粒）直接或間接（例如，經(jīng)由另一個(gè)納米顆粒層）鍵結(jié)到該固體載體的外表面（例如，經(jīng)由靜電力）。這些納米顆粒包括了具有選自正和負(fù)的一種第二電荷的離子交換基團(tuán)。該第二電荷優(yōu)選地與該第一電荷相反。在某些實(shí)施例中，這些納米顆粒的平均直徑等于或大于這些孔隙的平均直徑。本發(fā)明進(jìn)一步提供了通過(guò)以上方法制造的一種組合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種色譜方法（例如，用于分離一種液體樣品中的諸種分析物），該方法包括使一種液體流動(dòng)通過(guò)包括本發(fā)明的組合物的一種分離介質(zhì)的一個(gè)床（例如，填充床或單塊）。在一個(gè)實(shí)例中，該液體（即流動(dòng)相）是一種主要含水的介質(zhì)，任選地包括一種有機(jī)溶劑。還提供了并有本發(fā)明的介質(zhì)的色譜裝置和并有這些裝置的系統(tǒng)。在此描述的一種或多種發(fā)明的益處包括了獨(dú)特選擇性；柔性化學(xué)性質(zhì)；并且易于合成。取決于具體分離需求，可以使用在此描述的方法開發(fā)不同混合模式介質(zhì)，諸如HILIC/陰離子交換混合模式介質(zhì)、HILIC/陽(yáng)離子交換混合模式介質(zhì)以及HILIC/兩性離子混合模式介質(zhì)。另外的實(shí)施例、目標(biāo)以及優(yōu)勢(shì)在以下的詳細(xì)說(shuō)明中顯而易見。附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明圖1.HILIC/陽(yáng)離子交換/陰離子交換多模式相的通用結(jié)構(gòu)。固體基質(zhì)=SiO2、TiO2、Al2O3、ZrO2或聚合物；完全多孔、表面上多孔或無(wú)孔；微?；騿螇K的。帶電的功能層=來(lái)自單一類型的硅烷基配體的共價(jià)鍵結(jié)層；來(lái)自兩種或更多種類型的硅烷基配體的一種混合物的共價(jià)鍵結(jié)層；來(lái)自多步驟轉(zhuǎn)化的多步驟共價(jià)鍵結(jié)層；通過(guò)聚合物封裝的功能層。納米尺寸的帶電聚合物顆粒=WAX（伯、仲或叔氨基）、SAX（季氨基）、WCX（羧基）或SCX（磺酸基）；任何類型的有機(jī)聚合物基質(zhì)，包括基于PS-DVB的、基于聚甲基丙烯酸酯的以及DVB-甲基丙烯酸酯共聚物；粒度：30-1,000nm。圖2.使用一種單一類型的硅烷基配體制備弱陽(yáng)離子交換（WCX）/HILIC鍵結(jié)相。圖3.使用兩種類型的硅烷基配體的一種混合物制備弱陰離子交換（WAX）/HILIC鍵結(jié)相。圖4.通過(guò)使環(huán)氧乙烷鍵結(jié)相季銨化制備強(qiáng)陰離子交換（SAX）/HILIC鍵結(jié)相。圖5.通過(guò)聚合物封裝制備弱陽(yáng)離子交換（WCX）/HILIC鍵結(jié)相。圖6是保留行為（有機(jī)溶劑作用）的一個(gè)圖。柱，相30，3μm；尺寸，3.0×50mm；流動(dòng)相，不同比率的乙腈和100mMNH4OFm，pH3.65緩沖液；溫度，30℃；流動(dòng)速率，0.6mL/min；注射體積，1μL；檢測(cè)，254nm下的UV和電霧式檢測(cè)器（CAD）；樣品，氯化鈉、山梨糖醇以及萘（1mg/mL于流動(dòng)相中）。圖7是保留行為（緩沖液濃度作用）的一個(gè)圖。柱，相30，3μm；尺寸，3.0×50mm；流動(dòng)相，乙腈/NH4OFm，pH3.65緩沖液v/v80/20在不同緩沖液濃度下；溫度，30℃；流動(dòng)速率，0.6mL/min；注射體積，1μL；檢測(cè)，254nm下的UV和電霧式檢測(cè)器（CAD）；樣品，氯化鈉、山梨糖醇以及萘（1mg/mL于流動(dòng)相中）。圖8.是保留行為（pH值作用）的一個(gè)圖。柱，相30，3μm；尺寸，3.0×50mm；流動(dòng)相，不同pH值水平的乙腈/10mMNH4OFm緩沖液v/v80/20；溫度，30℃；流動(dòng)速率，0.6mL/min；注射體積，1μL；檢測(cè)，254nm下的UV和電霧式檢測(cè)器（CAD）；樣品，氯化鈉、山梨糖醇以及萘（1mg/mL于流動(dòng)相中）。圖9是AEX/CEX/HILIC多模式相（30）與AEX/CEX/RP多模式相（AcclaimTrinityP1）之間的一個(gè)比較。柱，相30和AcclaimTrinityP1，3μm；尺寸，3.0×50mm；流動(dòng)相，MeCN/100mMNH4OFm，pH3.65v/v80/20；溫度，30℃；流動(dòng)速率，0.50mL/min；注射體積，2.5μL；檢測(cè)，電霧式檢測(cè)器（CAD）；峰，（各自0.3mg/mL于流動(dòng)相中）：1.內(nèi)消旋-赤藻糖醇；2.氨基丁三醇（Tris）；3.甘油酸。圖10是一個(gè)色譜圖，展示陰離子與陽(yáng)離子在相30上的分離。柱，相30，3μm；尺寸，3.0×50mm；流動(dòng)相，去離子水和100mMNH4OFm，pH3.65梯度；溫度，30℃；流動(dòng)速率，0.60mL/min；注射體積，5μL；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器（ELSD）；樣品，各自0.05-0.10mg/mL于去離子水中。梯度：時(shí)間（min）H2O0.1M甲酸銨，pH3.65-1090100901019010110100200100圖11是一個(gè)色譜圖，展示諸種糖在相30上的分離。柱，相30，3μm；尺寸，3.0×50mm；流動(dòng)相，MeCN/100mMNH4OFm，pH3.65v/v80/20；溫度，60℃；流動(dòng)速率，0.50mL/min；注射體積，2μL；檢測(cè)，電霧式檢測(cè)器（CAD）；樣品，各自1mg/mL于流動(dòng)相中。圖12是一個(gè)色譜圖，展示青霉素G與鉀在相30上的分離。柱，相30，3μm；尺寸，3.0×50mm；流動(dòng)相，MeCN/去離子水/100mMNH4OFm，pH3.65v/v/v25/50/25；溫度，30℃；流動(dòng)速率，0.50mL/min；注射體積，1μL；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器（ELSD）；樣品，各自1mg/mL于流動(dòng)相中。峰：1.青霉素G；2.鉀。圖13是一個(gè)色譜圖，展示二甲雙胍與氯離子在相30上的分離。柱，相30，3μm；尺寸，3.0×50mm；流動(dòng)相，MeCN/100mMNH4OFm，pH3.65v/v50/50；溫度，30℃；流動(dòng)速率，0.50mL/min；注射體積，1μL；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器（ELSD）；樣品，各自1mg/mL于流動(dòng)相中。峰：1.氯離子；2.二甲雙胍。圖14是一個(gè)色譜圖，展示二甲雙胍與氯離子在相33上的分離。柱，相33，3μm；尺寸，3.0×50mm；流動(dòng)相，MeCN/100mMNH4OAc，pH5.2v/v90/10；溫度，30℃；流動(dòng)速率，0.425mL/min；注射體積，1μL；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器（ELSD）；樣品，各自1mg/mL于流動(dòng)相中。峰：1.氯離子；2.二甲雙胍。圖15.磺化二氧化硅顆粒（相21）的結(jié)構(gòu)。圖16.HILIC/CEX/AEX多模式相的實(shí)例。類似參考數(shù)字指代貫穿圖式的若干視圖的相對(duì)應(yīng)部分。發(fā)明詳細(xì)說(shuō)明I.定義在取代基通過(guò)其從左向右所書寫的常規(guī)化學(xué)式來(lái)說(shuō)明時(shí)，它們?nèi)芜x地同樣涵蓋將因從右向左書寫該結(jié)構(gòu)而產(chǎn)生的化學(xué)上相同的取代基，例如，-CH2O-旨在還敘述-OCH2-。除非另外陳述，否則術(shù)語(yǔ)“烷基”獨(dú)自或作為另一個(gè)取代基的一部分意指一個(gè)直鏈或分支鏈或環(huán)烴基或其組合，它可以是完全飽和的、單或多不飽和的，并且可以包括具有指定的碳原子數(shù)目的二和多價(jià)基團(tuán)（即C1-C10意指一到十個(gè)碳）。飽和烴基的實(shí)例包括（但不限于）如下基團(tuán)：諸如甲基、乙基、正丙基（例如，-CH2-CH2-CH3、-CH2-CH2-CH2-）、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、仲丁基、環(huán)己基、(環(huán)己基)甲基、環(huán)丙基甲基，例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物和異構(gòu)體。一個(gè)不飽和烷基是具有一個(gè)或多個(gè)雙鍵或三鍵的基團(tuán)。不飽和烷基的實(shí)例包括（但不限于）乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-異戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)、乙炔基、1-丙炔基和3-丙炔基、3-丁炔基以及高級(jí)同系物和異構(gòu)體。除非另外陳述，否則術(shù)語(yǔ)“烷基”還意在包括下文更詳細(xì)定義的那些烷基衍生物，諸如“雜烷基”。限于烴基的烷基被稱為“同烷基（homoalkyl）”。術(shù)語(yǔ)“烷基”還可以在烷基是一個(gè)二價(jià)基團(tuán)的那些情況下意指“亞烷基”或“烷二基”以及次烷基。術(shù)語(yǔ)“亞烷基”或“烷二基”獨(dú)自或作為另一個(gè)取代基的一部分意指衍生自一個(gè)烷基的一個(gè)二價(jià)基團(tuán)，如由（但不限于）-CH2CH2CH2-（亞丙基或丙烷-1,3-二基）所舉例說(shuō)明，并且進(jìn)一步包括以下描述為“雜亞烷基”的那些基團(tuán)。典型地，一個(gè)烷基（或亞烷基）將具有從1個(gè)到約30個(gè)碳原子、優(yōu)選地是從1個(gè)到約25個(gè)碳原子、更優(yōu)選地是從1個(gè)到約20個(gè)碳原子、甚至更優(yōu)選地是從1個(gè)到約15個(gè)碳原子并且最優(yōu)選地是從1個(gè)到約10個(gè)碳原子。一個(gè)“低級(jí)烷基”、“低級(jí)亞烷基”或“低級(jí)烷二基”是一般具有約10個(gè)或更少碳原子、約8個(gè)或更少碳原子、約6個(gè)或更少碳原子或約4個(gè)或更少碳原子的一個(gè)較短鏈烷基、亞烷基或烷二基。術(shù)語(yǔ)“次烷基”獨(dú)自或作為另一個(gè)取代基的一部分意指衍生自一個(gè)烷基的一個(gè)二價(jià)基團(tuán)，如由（但不限于）CH3CH2CH2=（亞丙基）所舉例說(shuō)明。典型地，一個(gè)次烷基將具有從1個(gè)到約30個(gè)碳原子、優(yōu)選地是從1個(gè)到約25個(gè)碳原子、更優(yōu)選地是從1個(gè)到約20個(gè)碳原子、甚至更優(yōu)選地是從1個(gè)到約15個(gè)碳原子并且最優(yōu)選地是從1個(gè)到約10個(gè)碳原子。一個(gè)“低級(jí)烷基”或“低級(jí)次烷基”是一般具有約10個(gè)或更少碳原子、約8個(gè)或更少碳原子、約6個(gè)或更少碳原子或約4個(gè)或更少碳原子的一個(gè)較短鏈烷基或次烷基。術(shù)語(yǔ)“烷氧基”、“烷氨基”以及“烷硫基”（或硫烷氧基）以其常規(guī)意義使用，并且指代對(duì)應(yīng)地經(jīng)由一個(gè)氧原子、一個(gè)氨基或一個(gè)硫原子連接到分子的其余部分的那些烷基。除非另外陳述，否則術(shù)語(yǔ)“雜烷基”獨(dú)自或與另一個(gè)術(shù)語(yǔ)組合意指由所述數(shù)目的碳原子和至少一個(gè)選自由O、N、Si、S以及B組成的群組的雜原子組成的一個(gè)穩(wěn)定直鏈或分支鏈或環(huán)烴基或其組合，并且其中氮和硫原子可以任選地被氧化并且氮雜原子可以任選地被季銨化。該一個(gè)或多個(gè)雜原子O、N、B、S以及Si可以被放置在雜烷基的任何內(nèi)部位置處，或在該烷基與分子的其余部分相連接的位置處。實(shí)例包括（但不限于）-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N(CH3)-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH=CH-O-CH3、-Si(CH3)3、-CH2-CH=N-OCH3以及-CH=CH-N(CH3)-CH3。最多兩個(gè)雜原子可以是連續(xù)的，諸如例如-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3)3。類似地，術(shù)語(yǔ)“雜亞烷基”獨(dú)自或作為另一個(gè)取代基的一部分意指衍生自雜烷基的一個(gè)二價(jià)基團(tuán)，如由（但不限于）-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-所舉例說(shuō)明。對(duì)于雜亞烷基，雜原子還可以占據(jù)鏈末端的任何一端或兩端（例如，亞烷基氧基、亞烷基二氧基、亞烷基氨基、亞烷基二氨基等）。更進(jìn)一步，對(duì)于亞烷基和雜亞烷基鍵聯(lián)基團(tuán)，鍵聯(lián)基團(tuán)的取向并非由書寫該鍵聯(lián)基團(tuán)的化學(xué)式的方向所暗示。舉例來(lái)講，化學(xué)式-CO2R’-代表-C(O)OR’和-OC(O)R’。除非另外陳述，否則術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”和“雜環(huán)烷基”單獨(dú)或與其他術(shù)語(yǔ)組合對(duì)應(yīng)地表示“烷基”和“雜烷基”的環(huán)型式。另外，對(duì)于雜環(huán)烷基，一個(gè)雜原子可以占據(jù)該雜環(huán)與分子的其余部分相連接的位置。環(huán)烷基的實(shí)例包括（但不限于）環(huán)戊基、環(huán)己基、1-環(huán)己烯基、3-環(huán)己烯基、環(huán)庚基等。雜環(huán)烷基的實(shí)例包括（但不限于）1-(1,2,5,6-四氫吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-嗎啉基、3-嗎啉基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫噻吩-2-基、四氫噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等。除非另外陳述，否則術(shù)語(yǔ)“鹵基”或“鹵素”單獨(dú)或作為另一個(gè)取代基的一部分意指一個(gè)氟、氯、溴或碘原子。另外，諸如“鹵烷基”的術(shù)語(yǔ)意在包括單鹵烷基和多鹵烷基。舉例來(lái)說(shuō)，術(shù)語(yǔ)“鹵基(C1-C4)烷基”意在包括（但不限于）三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。除非另外陳述，否則術(shù)語(yǔ)“芳基”意指可以是一個(gè)單環(huán)或稠合在一起或共價(jià)鍵聯(lián)的多個(gè)環(huán)（優(yōu)選地是從1到3個(gè)環(huán)）的一個(gè)多不飽和芳香族取代基。術(shù)語(yǔ)“雜芳基”指代包含選自N、O、S、Si以及B的從一到四個(gè)雜原子的芳基（或環(huán)），其中氮和硫原子任選地被氧化，并且一個(gè)或多個(gè)氮原子任選地被季銨化。一個(gè)雜芳基可以通過(guò)一個(gè)雜原子連接到分子的其余部分。芳基和雜芳基的非限制性實(shí)例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-聯(lián)苯、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-噁唑基、4-噁唑基、2-苯基-4-噁唑基、5-噁唑基、3-異噁唑基、4-異噁唑基、5-異噁唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基以及6-喹啉基。上述芳基和雜芳基環(huán)系統(tǒng)中的每一個(gè)的取代基選自以下所描述的可接受取代基的群組。為了簡(jiǎn)便起見，術(shù)語(yǔ)“芳基”當(dāng)與其他術(shù)語(yǔ)（例如，芳氧基、芳基硫氧基、芳烷基）組合使用時(shí)包括如上文所定義的芳基和雜芳基環(huán)。因此，術(shù)語(yǔ)“芳烷基”意在包括一個(gè)芳基與一個(gè)烷基連接的那些基團(tuán)（例如，苯甲基、苯乙基、吡啶基甲基等），包括一個(gè)碳原子（例如，一個(gè)亞甲基）已經(jīng)被例如一個(gè)氧原子置換的那些烷基（例如苯氧基甲基、2-吡啶氧基甲基、3-(1-萘氧基)丙基等）。以上術(shù)語(yǔ)（例如，“烷基”、“雜烷基”、“芳基”以及“雜芳基”）中的每一個(gè)都意在包括所指示基團(tuán)的被取代和未被取代形式。每種類型的基團(tuán)的示例性取代基提供如下。烷基和雜烷基（包括通常被稱為亞烷基、烯基、雜亞烷基、雜烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基以及雜環(huán)烯基的那些基團(tuán)）的取代基一般被稱為“烷基取代基”，并且它們可以是選自（但不限于）以下的多種基團(tuán)中的一種或多種：被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的雜環(huán)烷基、-OR'、=O、=NR'、=N-OR'、-NR'R"、-SR'、-鹵素、-SiR'R"R"'、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-CONR'R"、-OC(O)NR'R"、-NR"C(O)R'、-NR'-C(O)NR"R"'、-NR"C(O)2R'、-NR-C(NR'R"R'")=NR""、-NR-C(NR'R")=NR'"、-S(O)R'、-S(O)2R'、-OS(O)2R'、-S(O)2NR'R"、-NRSO2R'、-CN以及-NO2，數(shù)目范圍是從零個(gè)到（2m'+1）個(gè)，其中m'是所述基團(tuán)中碳原子的總數(shù)。R'、R"、R"'以及R""各自優(yōu)選地獨(dú)立地指代氫、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基（例如，被1-3個(gè)鹵素取代的芳基）、被取代或未被取代的烷基、烷氧基或硫烷氧基、或芳烷基。當(dāng)一種本發(fā)明的化合物包括超過(guò)一個(gè)R基團(tuán)時(shí)，例如，每一個(gè)R基團(tuán)獨(dú)立地被選擇，當(dāng)存在R'、R"、R'"以及R""基團(tuán)中的超過(guò)一個(gè)時(shí)，這些基團(tuán)中的每一個(gè)也同樣如此。當(dāng)R'和R"被連接到同一個(gè)氮原子時(shí)，它們可以與該氮原子組合形成5-、6-或7-元環(huán)。舉例來(lái)說(shuō)，-NR'R"意在包括（但不限于）1-吡咯烷基和4-嗎啉基。根據(jù)以上對(duì)取代基的論述，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解，術(shù)語(yǔ)“烷基”意在包括包含與不同于氫基團(tuán)的基團(tuán)結(jié)合的碳原子的基團(tuán)，諸如鹵烷基（例如，-CF3和-CH2CF3）和?；ɡ?，-C(O)CH3、-C(O)CF3、-C(O)CH2OCH3等）。與關(guān)于烷基所描述的取代基類似，芳基和雜芳基的取代基一般被稱為“芳基取代基”。這些取代基選自例如：被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的雜環(huán)烷基、-OR'、=O、=NR'、=N-OR'、-NR'R"、-SR'、-鹵素、-SiR'R"R"'、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-CONR'R"、-OC(O)NR'R"、-NR"C(O)R'、-NR'-C(O)NR"R"'、-NR"C(O)2R'、-NR-C(NR'R"R'")=NR""、-NR-C(NR'R")=NR'"、-S(O)R'、-S(O)2R'、-S(O)2NR'R"、-NRSO2R'、-CN和-NO2、-R'、-N3、-CH(Ph)2、氟(C1-C4)烷氧基以及氟(C1-C4)烷基，數(shù)目范圍是從零個(gè)到芳香族環(huán)系統(tǒng)上的開放價(jià)態(tài)的總數(shù)；并且其中R'、R"、R"'以及R""優(yōu)選地獨(dú)立地選自氫、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基以及被取代或未被取代的雜芳基。當(dāng)一種本發(fā)明的化合物包括超過(guò)一個(gè)R基團(tuán)時(shí)，例如，每一個(gè)R基團(tuán)獨(dú)立地被選擇，當(dāng)存在R'、R"、R'"以及R""基團(tuán)中的超過(guò)一個(gè)時(shí)，這些基團(tuán)中的每一個(gè)也同樣如此。芳基或雜芳基環(huán)的相鄰原子上的取代基中的兩個(gè)可以任選地被式-T-C(O)-(CRR')q-U-的一個(gè)取代基置換，其中T和U獨(dú)立地是-NR-、-O-、-CRR'-或一個(gè)單鍵，并且q是從0到3的一個(gè)整數(shù)?？商娲兀蓟螂s芳基環(huán)的相鄰原子上的取代基中的兩個(gè)可以任選地被式-A-(CH2)r-B-的一個(gè)取代基置換，其中A和B獨(dú)立地是-CRR'-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2NR'-或一個(gè)單鍵，并且r是從1到4的一個(gè)整數(shù)。如此所形成的新環(huán)的這些單鍵中的一個(gè)可以任選地被一個(gè)雙鍵置換。可替代地，芳基或雜芳基環(huán)的相鄰原子上的取代基中的兩個(gè)可以任選地被式-(CRR')s-X-(CR"R"')d-的一個(gè)取代基置換，其中s和d獨(dú)立地是從0到3的整數(shù)，并且X是-O-、-NR'-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-S(O)2NR'-。取代基R、R'、R"以及R"'優(yōu)選地獨(dú)立地選自氫或被取代或未被取代的(C1-C6)烷基。如在此所使用，術(shù)語(yǔ)“硅烷基取代基”可以是選自（但不限于）以下的多種基團(tuán)中的一種或多種：被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的雜環(huán)烷基、酰基、-OR’、-NR’R”、-SR’、-鹵素、-SiR’R”R”’、-OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、-NR’-C(O)NR”R”’、-NR”C(O)2R’、-NR-C(NR’R”R’”)=NR””、-NR-C(NR’R”)=NR’”、-S(O)R’、-S(O)2R’、-OS(O)2R’、-S(O)2NR’R”、-NRSO2R’、-CN以及-NO2。R'、R"、R"'以及R""各自優(yōu)選地獨(dú)立地指代氫、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基（例如，被1-3個(gè)鹵素取代的芳基）、被取代或未被取代的烷基、烷氧基或硫烷氧基、或芳烷基。當(dāng)一種本發(fā)明的化合物包括超過(guò)一個(gè)R基團(tuán)時(shí)，例如，每一個(gè)R基團(tuán)獨(dú)立地被選擇，當(dāng)存在R'、R"、R'"以及R""基團(tuán)中的超過(guò)一個(gè)時(shí)，這些基團(tuán)中的每一個(gè)也同樣如此。當(dāng)R'和R"被連接到同一個(gè)氮原子時(shí)，它們可以與該氮原子組合形成5-、6-或7-元環(huán)。舉例來(lái)說(shuō)，-NR'R"意在包括（但不限于）1-吡咯烷基和4-嗎啉基。根據(jù)以上對(duì)取代基的論述，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解，術(shù)語(yǔ)“烷基”意在包括包含與不同于氫基團(tuán)的基團(tuán)結(jié)合的碳原子的基團(tuán)，諸如鹵烷基（例如，-CF3和-CH2CF3）和?；ɡ?，-C(O)CH3、-C(O)CF3、-C(O)CH2OCH3等）。如在此所使用，術(shù)語(yǔ)“非反應(yīng)性硅烷基取代基”意指不與一種本發(fā)明的基質(zhì)反應(yīng)在該硅烷基取代基與該基質(zhì)之間形成一個(gè)共價(jià)鍵或不充當(dāng)該配體（例如，式1）與該基質(zhì)之間的一個(gè)反應(yīng)中的一個(gè)離去基的一個(gè)“硅烷基取代基”。示例性“非反應(yīng)性硅烷基取代基”包括烷基（例如，甲基、乙基、丙基、丁基以及其他低級(jí)烷基）或芳基（例如，苯基和噻吩基）。如在此所使用，術(shù)語(yǔ)“反應(yīng)性硅烷基取代基”意指能夠與一種本發(fā)明的基質(zhì)反應(yīng)在該硅烷基取代基與該基質(zhì)之間形成一個(gè)共價(jià)鍵或充當(dāng)該配體（例如，1）與該基質(zhì)之間的一個(gè)反應(yīng)中的一個(gè)離去基的一個(gè)“硅烷基取代基”。示例性“反應(yīng)性硅烷基取代基”包括常規(guī)地定義為離去基的那些基團(tuán)，諸如鹵素（例如，Cl和Br）。其他示例性“反應(yīng)性硅烷基取代基”包括烷氧基（例如，甲氧基或乙氧基）和伯和仲氨基。如在此所使用，術(shù)語(yǔ)“?；泵枋隽税粋€(gè)羰基殘基C(O)R的一個(gè)取代基。R的示例性種類包括H、鹵素、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。如在此所使用，術(shù)語(yǔ)“稠合環(huán)系統(tǒng)”意指至少兩個(gè)環(huán)，其中每個(gè)環(huán)具有與另一個(gè)環(huán)共同的至少2個(gè)原子?！俺砗檄h(huán)系統(tǒng)”可以包括芳環(huán)以及非芳環(huán)。“稠合環(huán)系統(tǒng)”的實(shí)例是萘、吲哚、喹啉、色烯等。如在此所使用，術(shù)語(yǔ)“雜原子”包括氧（O）、氮（N）、硫（S）以及硅（Si）。符號(hào)“R”是代表選自以下的一個(gè)取代基的一個(gè)通用縮寫：被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。當(dāng)本發(fā)明的化合物包含相對(duì)堿性或酸性官能團(tuán)時(shí)，所述化合物的鹽包括于本發(fā)明的范圍中。鹽可以通過(guò)使所述化合物的中性形式與足夠量的所希望的酸或堿純凈地或于一種適合惰性溶劑中接觸來(lái)獲得。本發(fā)明的相對(duì)酸性化合物的鹽的實(shí)例包括鈉、鉀、鈣、銨、有機(jī)氨基或鎂鹽或類似鹽。當(dāng)本發(fā)明的化合物包含相對(duì)堿性官能團(tuán)時(shí)，酸加成鹽可以通過(guò)使所述化合物的中性形式與足夠量的所希望的酸純凈地或于一種適合惰性溶劑中接觸來(lái)獲得。酸加成鹽的實(shí)例包括衍生自如下無(wú)機(jī)酸的那些，如鹽酸、氫溴酸、硝酸、碳酸、一氫碳酸、磷酸、一氫磷酸、二氫磷酸、硫酸、一氫硫酸、氫碘酸或亞磷酸等；以及衍生自如下有機(jī)酸的鹽，如乙酸、丙酸、異丁酸、順丁烯二酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、杏仁酸、鄰苯二甲酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、檸檬酸、酒石酸、甲磺酸等。還包括氨基酸的鹽，諸如精氨酸鹽等；和如下有機(jī)酸的鹽，如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等（參看例如伯奇（Berge）等人，藥物科學(xué)雜志（JournalofPharmaceuticalScience）1977,66:1-19）。某些具體的本發(fā)明化合物包含允許這些化合物轉(zhuǎn)化為堿或酸加成鹽的堿性和酸性官能團(tuán)。這些化合物的中性形式優(yōu)選地通過(guò)使該鹽與一種堿或酸接觸并且以常規(guī)方式分離母體化合物來(lái)再生。該化合物的母體形式在某些物理性質(zhì)方面（諸如于極性溶劑中的溶解度）不同于不同鹽形式，但這些鹽以另外的方式等效于該化合物的母體形式用于本發(fā)明之目的。某些本發(fā)明的化合物可以非溶劑化形式以及溶劑化形式（包括水合形式）存在。一般來(lái)說(shuō)，這些溶劑化形式等效于非溶劑化形式，并且涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。某些本發(fā)明的化合物可以按多種結(jié)晶或無(wú)定形形式存在。一般來(lái)說(shuō)，所有物理形式對(duì)于由本發(fā)明涵蓋的用途都等效并且旨在屬于本發(fā)明的范圍內(nèi)。“化合物或化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物”預(yù)期“或”的包括性含義，以便涵蓋為鹽和溶劑化物的一種物質(zhì)。某些本發(fā)明的化合物擁有不對(duì)稱碳原子（光學(xué)中心）或雙鍵；外消旋物、非對(duì)映異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體以及個(gè)別異構(gòu)體涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。光學(xué)活性的(R)-和(S)-異構(gòu)體可以使用手性合成子或手性試劑制備，或使用常規(guī)技術(shù)拆分。當(dāng)在此所述的化合物包含烯系雙鍵或其他幾何不對(duì)稱中心時(shí)，并且除非另外指明，否則預(yù)期這些化合物包括E和Z兩種幾何異構(gòu)體。同樣地，還旨在包括所有互變異構(gòu)形式。在此所使用的外消旋、雙外消旋（ambiscalemic）和非外消旋或?qū)τ钞悩?gòu)性純化合物的圖解圖示從邁爾（Maehr），化學(xué)教育雜志（J.Chem.Ed.），62:114-120(1985)獲得：實(shí)和虛楔形被用以表示一個(gè)手性元素的絕對(duì)構(gòu)型；波形線指示否認(rèn)它代表的鍵結(jié)可能產(chǎn)生的任何立體化學(xué)含意；實(shí)和虛粗線是幾何描述符號(hào)，指示所示相對(duì)構(gòu)型但不暗示任何絕對(duì)立體化學(xué)；并且楔形輪廓和點(diǎn)或虛線表示具有不定絕對(duì)構(gòu)型的對(duì)映異構(gòu)性純化合物。本發(fā)明的化合物還可以在構(gòu)成所述化合物的一個(gè)或多個(gè)原子上包含非天然比例的原子同位素。舉例來(lái)說(shuō)，這些化合物可以被如下放射性同位素放射性標(biāo)記：諸如例如氚（3H）、碘-125（125I）或碳-14（14C）。本發(fā)明的化合物的所有放射性或非放射性同位素變體都旨在涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。術(shù)語(yǔ)“平均顆粒直徑”、“粒度”、“平均粒度”、“中值粒度”或其任何語(yǔ)法變體都指代一種本發(fā)明的基質(zhì)（固體載體）的粒度規(guī)格。粒度典型地由制造商提供。粒度可以指代任何類型的顆粒，包括球形和不規(guī)則形狀的顆粒。“流動(dòng)相”與“洗脫劑”可互換地使用，指代使待分離的一種混合物的所溶解的組分（例如，一種聚糖）移動(dòng)通過(guò)一個(gè)色譜柱或其他分離裝置的一種液體。該流動(dòng)相通常包含超過(guò)一種化合物，并且是不同溶劑的一種混合物或鹽、酸、堿等的一種溶液。“溶劑”是一種液體有機(jī)化合物（例如，一種單一化合物）。一種示例性溶劑是至少部分水可混溶的。在不同實(shí)施例中，一種溶劑是完全水可混溶的。在不同實(shí)施例中，“溶劑”指代乙腈。如在此所使用，術(shù)語(yǔ)“具有一種電荷”、“帶電的”、“帶正電的”、“帶負(fù)電的”以及其任何語(yǔ)法變體結(jié)合本發(fā)明的基質(zhì)和納米顆粒指示該物質(zhì)包括離子交換基團(tuán)。如上文所描述，離子交換基團(tuán)可以是本質(zhì)上離子型或可電離的。因此，術(shù)語(yǔ)“帶電的”或“具有一種電荷”可以意指并有“離子型”或“可電離的”基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“基質(zhì)”與“載體”或“固體載體”可互換地使用。術(shù)語(yǔ)“基本上保留的”指代一種分析物（例如，一種離子、一種可電離化合物、一種不帶電荷的分子等），并且意指該分析物在空隙體積例如產(chǎn)生與溶劑峰基線分離的一個(gè)峰之后從分離介質(zhì)洗脫?！?COOH”意在任選地包括-C(O)O-和-C(O)O-X+，其中X+是一個(gè)陽(yáng)離子平衡離子。同樣地，具有式-N(R)(R)的一個(gè)取代基意在任選地包括-N+H(R)(R)和-N+H(R)(R)Y-，其中Y-代表一個(gè)陰離子平衡離子。本發(fā)明的示例性相包括一個(gè)質(zhì)子化的羧酸部分（COOH）作為HILIC的一個(gè)親水性部分。本發(fā)明的示例性相包括一個(gè)去質(zhì)子化的羧酸部分（COO-）作為一個(gè)離子交換部分。本發(fā)明的不同相包括一個(gè)質(zhì)子化的羧酸部分和一個(gè)去質(zhì)子化的羧酸部分，其中前者充當(dāng)一個(gè)HILIC部分并且后者充當(dāng)一個(gè)離子交換部分。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，在HPLC相關(guān)pH值條件下，兩個(gè)或更多個(gè)羧酸部分中僅一個(gè)被去質(zhì)子化。術(shù)語(yǔ)“平均孔隙直徑”、“平均孔隙開口直徑”或其任何語(yǔ)法變體指代一種基質(zhì)的孔隙尺寸規(guī)格?？讖匠叽绲湫偷赜梢环N色譜物質(zhì)（例如，硅膠）的制造商提供?？讖匠叽缈梢岳缡褂蔑@微術(shù)或孔隙率測(cè)定法來(lái)測(cè)定。術(shù)語(yǔ)“平均顆粒直徑”、“粒度”、“平均粒度”、“中值粒度”或其任何語(yǔ)法變體都指代一種本發(fā)明的基質(zhì)（固體載體）的粒度規(guī)格。粒度典型地由制造商提供。粒度可以指代任何類型的顆粒，包括球形和不規(guī)則形狀的顆粒。II.引言本發(fā)明提供了具有獨(dú)特和所希望的色譜特性的組合物，這些組合物可用作固定相用于多種色譜應(yīng)用，諸如高效液相色譜（HPLC）和固相萃取（SPE）。在某些實(shí)施例中，本發(fā)明的組合物在同一色譜物質(zhì)內(nèi)包括HILIC、陰離子交換以及陽(yáng)離子交換能力。在這些組合物中，陰離子交換基團(tuán)（例如，堿性基團(tuán)）與陽(yáng)離子交換基團(tuán)（例如，酸性基團(tuán)）從彼此物理地去除（即空間上分隔）以便最小化或預(yù)防其之間的相互作用（例如，鹽橋形成、靜電相互作用、電荷中和）。在一個(gè)實(shí)例中，陰離子交換與陽(yáng)離子交換基團(tuán)的空間分隔通過(guò)在一種多孔載體的孔隙內(nèi)或外表面上提供一種類型的離子交換基團(tuán)來(lái)實(shí)現(xiàn)，而其他類型的離子交換基團(tuán)在結(jié)合（例如，不可逆）到該固體載體的外表面的納米顆粒（例如，乳膠顆粒）上提供。這些組合物提供了獨(dú)特的選擇性。舉例來(lái)說(shuō)，這些組合物可以被用以在一個(gè)單一分析內(nèi)保留和分離陽(yáng)離子、陰離子以及中性分子（參看圖6-8）。這些組合物可以被用于對(duì)離子或可電離化合物進(jìn)行色譜分析（例如，保留）而不使用離子對(duì)試劑。這些當(dāng)前組合物的選擇性可以通過(guò)改變流動(dòng)相的化學(xué)組成來(lái)調(diào)節(jié)。該流動(dòng)相的可以被用于改進(jìn)固定相的選擇性的特性包括離子強(qiáng)度、pH值以及添加劑（諸如有機(jī)溶劑）。這些組合物與高度含水的條件（例如，對(duì)在100%含水條件下去濕具有抵抗性）以及高度有機(jī)溶劑條件相容。這些組合物特征在于一種多模式保留機(jī)制，它可以包括陰離子交換、陽(yáng)離子交換、反相、離子排除以及HILIC。這些組合物不僅可用于制造分析型分離柱，而且可用于研發(fā)新型固相萃?。⊿PE）應(yīng)用。這些組合物可以與其他色譜填充物質(zhì)相摻混，以產(chǎn)生用于分離和SPE柱的多種新穎填充物質(zhì)。這些組合物可以按一種通用、容易并且經(jīng)濟(jì)節(jié)約的方式來(lái)制備。陽(yáng)離子交換、陰離子交換以及親水性相互作用的比率可以通過(guò)使用具有不同表面積和粒度、不同乳膠化學(xué)過(guò)程和粒度和/或在該固體載體上形成帶電的層的不同表面化學(xué)過(guò)程的堿固體載體來(lái)綜合地調(diào)節(jié)。III.組合物在一個(gè)示例性實(shí)施例中，本發(fā)明提供了一種凝聚的多模式色譜介質(zhì)，具有親水性相互作用、陽(yáng)離子交換和陰離子交換特性。該介質(zhì)適合用作色譜填充物。一種示例性介質(zhì)包括(a)組分A，包括基質(zhì)顆粒，這些基質(zhì)顆粒用具有帶有一種電荷（正或負(fù)）的一個(gè)帶電離子交換基團(tuán)、結(jié)合到這些基質(zhì)顆粒的一種配體和包括一個(gè)不帶電荷的極性基團(tuán)的一種親水性配體官能化；和(b)組分B，包括一種第二基質(zhì)的顆粒，這些基質(zhì)顆粒具有電荷與該帶電離子交換配體的電荷相反的帶電外表面。組分A與組分B在復(fù)合物中通過(guò)組分A的帶電離子交換配體與組分B的帶電外表面之間的靜電力結(jié)合，形成一種凝聚的離子交換顆粒介質(zhì)。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，組分A的配體是一種帶負(fù)電的配體，并且組分B的配體是一種帶正電的配體。在不同實(shí)施例中，該親水性配體在該配體結(jié)構(gòu)內(nèi)部或在該配體的一個(gè)末端處包括至少一個(gè)不帶電荷的極性基團(tuán)（對(duì)應(yīng)地例如，ROR'、ROH）和不超過(guò)五個(gè)連續(xù)非芳香族碳（例如，少于6個(gè)、少于5個(gè)、少于4個(gè)、少于3個(gè)或少于1個(gè)碳原子）。在不同實(shí)施例中，該配體包括不超過(guò)五個(gè)連續(xù)亞烷基碳（例如，少于6個(gè)、少于5個(gè)、少于4個(gè)、少于3個(gè)或少于1個(gè)碳原子）。在不同實(shí)施例中，這些亞烷基碳是亞甲基碳。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該配體包括具有兩個(gè)或更多個(gè)羧酸取代基的一個(gè)苯基部分。在不同實(shí)施例中，該極性基團(tuán)能夠接受一個(gè)電荷，但由于與本發(fā)明得到一種示例性使用的HPLC分析有關(guān)的pH值條件而不如此。在不同實(shí)施例中，該親水性配體不包括一種氨基醇。在不同實(shí)施例中，本發(fā)明包括不同于一種氨基二醇的一種氨基醇。在不同實(shí)施例中，本發(fā)明包括不同于-N((CH2OH)n)2（其中n是從1到3的一個(gè)整數(shù)）的一種氨基二醇。在不同實(shí)施例中，離子交換色譜部分是不同于HILIC色譜部分的一種基團(tuán)。在不同實(shí)施例中，該HILIC色譜部分在HPLC相關(guān)pH值條件下并不帶電。在不同實(shí)施例中，該HILIC色譜部分與該離子交換部分在同一配體上，然而，該兩個(gè)部分是不同部分。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該HILIC部分是一個(gè)質(zhì)子化的羧基（COOH），并且該離子交換部分是一個(gè)未質(zhì)子化的羧基（COO-），并且這兩個(gè)基團(tuán)位于同一配體上。在一個(gè)實(shí)施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包括一種多孔固體載體（例如，硅膠、二氧化硅單塊或合成有機(jī)樹脂），具有一個(gè)外表面和由具有界定孔隙尺寸的一個(gè)內(nèi)徑的“內(nèi)壁”界定的孔徑開口?？紫洞蜷_到該基質(zhì)的外表面。該固體載體包括離子交換基團(tuán)，它們可以是帶正或負(fù)電的基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)例中，這些離子交換基團(tuán)由該載體自身例如通過(guò)將帶電單體并到一種合成樹脂聚合物中或由一種二氧化硅基質(zhì)表面上的可電離硅烷醇基團(tuán)提供。在另一個(gè)實(shí)例中，該固體載體（例如，硅膠、二氧化硅單塊）被有機(jī)離子交換配體（例如，硅烷基配體）共價(jià)改性（例如，在內(nèi)孔隙壁和任選地外表面旁邊）。這些配體并有至少一個(gè)離子交換基團(tuán)（例如，離子或可電離基團(tuán)）。該配體的離子性質(zhì)可以是正或負(fù)的。在另一個(gè)實(shí)施例中，該HILIC配體是中性的。示例性配體包括堿性和/或酸性離子交換基團(tuán)。示例性離子交換基團(tuán)包括陰離子交換基團(tuán)，諸如氨基（例如，伯、仲、叔或季胺）；或陽(yáng)離子交換基團(tuán)，諸如羧酸或磺酸基。在一個(gè)實(shí)例中，該配體包括陰離子交換和陽(yáng)離子交換基團(tuán)（即兩性離子或兩性配體）。這些配體包括另外的極性基團(tuán)（例如，醚、酰胺、醇、磺酰胺、脲或質(zhì)子化的羧酸基）。這些配體還可以包括親水性部分（例如，脲或羧酸，例如，質(zhì)子化的羧酸）。在一個(gè)實(shí)例中，所述親水性部分提供足夠親水性，以除了離子交換特征之外向該固定相賦予HILIC特征。在不同實(shí)施例中，組分A的離子交換配體與組分A的親水性配體是同一配體（即一個(gè)單一配體包括離子交換和HILIC色譜部分）。在這個(gè)實(shí)施例中，該配體除了一個(gè)或多個(gè)帶電離子交換基團(tuán)之外包括一個(gè)或多個(gè)不帶電荷的極性基團(tuán)。在不同實(shí)施例中，組分A的離子交換配體與組分A的親水性配體是獨(dú)立地連接到組分A的不同配體。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，選自該離子交換配體、該親水性配體以及其組合的一個(gè)成員通過(guò)一個(gè)或多個(gè)Si-O-Si或Si-O鍵結(jié)共價(jià)結(jié)合到所述基質(zhì)。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該離子交換配體、該親水性配體以及其組合中的至少一者具有下式：其中u和v是獨(dú)立地選自整數(shù)1、2、3、4、5、6、7、8、9以及10的整數(shù)。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該配體具有下式：如技術(shù)人員將理解，這種配體的Si原子被結(jié)合到該基質(zhì)的一個(gè)或多個(gè)氧原子或OH部分取代（足以滿足Si的價(jià)態(tài)）。在不同實(shí)施例中，組分A用一種配體官能化，該配體是選自以下的一個(gè)成員：和其組合，其中w和y是獨(dú)立地選自1、2、3、4、5、6、7、8、9以及10的整數(shù)。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，這些配體具有下式：如在此所示，這些配體中的硅原子結(jié)合到選自該基質(zhì)的一個(gè)氧原子和一個(gè)羥基部分的一個(gè)或多個(gè)部分（足以滿足Si的價(jià)態(tài)）。例如：在一個(gè)示例性實(shí)施例中，組分A配體聚合到所述組分A基質(zhì)顆粒上。在不同實(shí)施例中，配體當(dāng)場(chǎng)聚合到所述組分A基質(zhì)顆粒上。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該組分A配體是一種聚合配體，并且這些組分B顆粒被纏結(jié)在該聚合配體中。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，一種PS-DVB基質(zhì)用并有羧酸和/或磺酸基的陽(yáng)離子交換配體官能化，產(chǎn)生一種PS-DVB陽(yáng)離子交換基質(zhì)。并有伯、仲、叔或季氨基的乳膠顆粒結(jié)合到該P(yáng)S-DVB陽(yáng)離子交換基質(zhì)的外表面。根據(jù)這個(gè)實(shí)施例的一種示例性組合物列于圖16中。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)理解，圖16的表中這些組合物的示例性帶有羧酸或磺酸的配體/基質(zhì)可以被任何其他帶有羧酸或磺酸的配體/基質(zhì)（諸如在此描述并且通過(guò)引用結(jié)合在此的那些）取代。這些組合物進(jìn)一步包括納米顆粒，諸如基于乳膠的納米顆粒，它們結(jié)合到上文描述的離子交換基質(zhì)的外表面。舉例來(lái)說(shuō)，這些納米顆粒可以經(jīng)由靜電力（例如，在一種帶正電的載體與一種帶負(fù)電的納米顆粒之間）連接到該基質(zhì)的表面。這些納米顆粒并有具有與見于該載體上的電荷相反的一種電荷的離子交換基團(tuán)。示例性納米顆粒用氨基或磺酸基官能化。在另一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)的凈表面電荷與這些納米顆粒的凈表面電荷相反，從而提供一種色譜物質(zhì)，包括陰離子交換和陽(yáng)離子交換位點(diǎn)，其中這些陰離子交換與陽(yáng)離子交換位點(diǎn)彼此物理地/空間上分隔。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，組分B帶電的外表面包括選自以下的一個(gè)成員：一個(gè)磺酸根、一個(gè)羧酸根、一個(gè)磷酸根以及一個(gè)帶電的胺。在一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒具有一個(gè)尺寸，該尺寸足以使可以進(jìn)入該載體的孔隙的顆粒數(shù)目最小化，從而減少或基本上防止這些納米顆粒結(jié)合到這些孔隙的內(nèi)壁。如圖1中所展示，這些納米顆粒理想地結(jié)合到該基質(zhì)的外表面（外部結(jié)合）。因此，在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，這些納米顆粒具有等于或大于這些孔隙開口的平均直徑的一個(gè)平均直徑。舉例來(lái)說(shuō)，當(dāng)這些孔隙具有小于約30nm的一個(gè)平均直徑時(shí)，這些納米顆粒的平均直徑大于約50nm。因此，這些孔隙的內(nèi)壁在結(jié)合這些納米顆粒時(shí)完整無(wú)損并且保留其初始功能和特性。通過(guò)物理地分隔位于這些孔隙內(nèi)的這些離子交換基團(tuán)與位于這些納米顆粒的表面處的這些離子交換基團(tuán)，這些當(dāng)前組合物可以在同一固定相內(nèi)同時(shí)提供陰離子交換和陽(yáng)離子交換能力。不同離子交換基團(tuán)以這種方式的空間分隔防止相反地帶電的基團(tuán)之間的相互作用（例如，鹽橋形成）。舉例來(lái)說(shuō)，該基質(zhì)的表面（外表面和孔隙的內(nèi)壁）用具有陰離子交換（帶正電的）位點(diǎn)的一種有機(jī)配體衍生化。提供陽(yáng)離子交換（帶負(fù)電的）位點(diǎn)的納米顆粒結(jié)合到該外表面。這些納米顆粒“阻斷”該基質(zhì)的外表面上的這些帶正電的位點(diǎn)，用這些納米顆粒的表面上的這些帶負(fù)電的位點(diǎn)“置換”其。然而，因?yàn)檫@些納米顆粒太大以致無(wú)法進(jìn)入這些孔隙，所以這些孔隙的內(nèi)壁繼續(xù)提供帶正電的位點(diǎn)。該產(chǎn)生的組合物在這些孔隙內(nèi)部提供陰離子交換位點(diǎn)并且在這些納米顆粒的表面上提供陽(yáng)離子交換位點(diǎn)，兩者彼此分隔。本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)理解，以上策略可以被用以產(chǎn)生一種組合物，在這些孔隙內(nèi)具有陽(yáng)離子交換位點(diǎn)并且在這些納米顆粒的表面上具有陰離子交換位點(diǎn)。雖然這些孔隙對(duì)于這些納米顆粒穿透來(lái)說(shuō)基本上太小，但這些孔隙仍然可以由存在于一種色譜樣品中的分析物進(jìn)入。包含一種或多種分析物的一種液體樣品可以進(jìn)入這些孔隙和這些孔隙內(nèi)，這些分析物可以與結(jié)合到該固體載體的這些離子交換配體相互作用。因此，一種液體樣品內(nèi)的分析物可以與由這些孔隙內(nèi)的這些配體提供的這些離子交換位點(diǎn)和由這些納米顆粒提供的這些離子交換位點(diǎn)相互作用。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，組分A基質(zhì)的孔隙的直徑小于或等于約30nm，并且這些第二基質(zhì)顆粒的直徑大于或等于約50nm。通過(guò)物理地分隔位于這些孔隙內(nèi)的這些離子交換基團(tuán)與位于這些納米顆粒的表面處的這些離子交換基團(tuán)，這些當(dāng)前組合物在同一固定相內(nèi)同時(shí)提供陰離子交換和陽(yáng)離子交換能力。舉例來(lái)說(shuō)，被用于色譜分離的流動(dòng)相的pH值和組成被選擇，以便這些陰離子交換基團(tuán)和這些陽(yáng)離子交換基團(tuán)是帶電的（例如，在大約中性pH值下），并且因此都可用于與一種分析物離子相互作用?？商娲兀摿鲃?dòng)相可以被選擇，以便該陰離子交換或該陽(yáng)離子交換能力占主要地位（即樹脂的凈電荷是正或負(fù)的）。典型地，所述條件對(duì)應(yīng)地將包括低于或高于流動(dòng)相的中性pH值。可以通過(guò)選擇適當(dāng)流動(dòng)相選擇性利用（例如，“接通”或“切斷”；“撥入”或“撥出”）的HILIC陰離子交換和陽(yáng)離子交換基團(tuán)的同時(shí)存在提供了具有獨(dú)特和所希望的特性的色譜固定相。舉例來(lái)說(shuō)，這些新穎固定相可以被用以同時(shí)分析陰離子和陽(yáng)離子，這些陰離子和陽(yáng)離子每一者可以是無(wú)機(jī)或有機(jī)的。因?yàn)檫@些新穎固定相可以被用作用于HILIC或其雜混物的陰離子交換樹脂、陽(yáng)離子交換樹脂載體，所以它們提供了例外的色譜通用性。另外，當(dāng)該多孔固體載體用并有親水性部分（例如，提供HILIC特征）的配體改性時(shí)，該產(chǎn)生的組合物可以組合陰離子交換、陽(yáng)離子交換以及HILIC功能（即，多模式相）。所述組合物可用于同時(shí)分析陰離子、陽(yáng)離子以及親水性分子。在一個(gè)實(shí)例中，具有HILIC功能的一種配體并有一個(gè)親水性部分（例如，具有五個(gè)或更少有序的碳原子的碳鏈）。在一個(gè)實(shí)例中，納米顆粒的另外的層可以連接到納米顆粒的以上第一層（例如，經(jīng)由靜電連接）。因此，提供這些所希望的離子交換特征的納米顆粒的外層可以經(jīng)由納米顆粒的一個(gè)或多個(gè)另外的層間接地連接到該固體載體。在一個(gè)實(shí)例中，帶正電的乳膠顆粒的一個(gè)第一層連接到該基質(zhì)的外表面。然后在乳膠顆粒的該第一層上添加帶負(fù)電的納米顆粒的一個(gè)第二層。在另一個(gè)實(shí)例中，帶負(fù)電的乳膠顆粒的一個(gè)第一層連接到該基質(zhì)的外表面。然后在該第一層上添加帶正電的納米顆粒的一個(gè)第二層。因此可以添加納米顆粒的第三層（和后續(xù)層）（例如，各自具有與先前層相反的一種電荷）。由本發(fā)明提供的示例性固定相的益處包括：本發(fā)明提供了一種組合物，包括：(a)一種多孔固體載體。該多孔固體載體具有一個(gè)外表面和由內(nèi)壁界定的內(nèi)部孔隙。這些孔隙延伸到該外表面中的開口。該組合物進(jìn)一步包括(b)有機(jī)配體（例如，中性或離子交換配體），共價(jià)結(jié)合到包括這些孔隙的內(nèi)壁的該固體載體。在不同實(shí)例中，這些配體包括任選地具有一種第一電荷（選自正和負(fù)）的離子交換基團(tuán)。該組合物進(jìn)一步包括(c)納米顆粒（例如，乳膠顆粒），包括任選地具有一種第二電荷（選自正或負(fù)）的離子交換基團(tuán)，其中該第二電荷與該第一電荷相反。納米顆粒直接地（參看例如，史蒂文斯（Stevens）等人的美國(guó)專利4,927,539、史蒂文斯等人的美國(guó)專利4,351,909、史蒂文斯等人的美國(guó)專利4,519,905、巴雷托（Barretto）等人的美國(guó)專利4,383,047和美國(guó)專利5,532,279，各自通過(guò)引用結(jié)合在此）或間接地（例如，經(jīng)由納米顆粒的另外的層或一種分散劑，參看例如，巴雷托等人的美國(guó)專利5,532,279，通過(guò)引用結(jié)合在此）結(jié)合（例如，經(jīng)由靜電引力）到該固體載體的外表面。在一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒以允許液體流動(dòng)到該固體載體的內(nèi)部孔隙中的方式結(jié)合到該外表面。在不同實(shí)施例中，這些納米顆粒的平均直徑等于或大于這些孔隙開口的平均直徑。因?yàn)檫@些孔隙開口一般小于這些納米顆粒，所以僅在這些孔隙外的區(qū)域典型地用這些納米顆粒（例如，乳膠顆粒）涂布。本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)理解，孔徑尺寸可以在不到和超過(guò)一個(gè)平均孔隙尺寸下顯著變化，并且因此將理解，該物質(zhì)可以包含具有結(jié)合到這些內(nèi)壁的納米顆粒的許多孔隙。然而，通過(guò)在孔隙尺寸與納米顆粒尺寸之間選擇一個(gè)適合比率，可以調(diào)節(jié)包含納米顆粒的孔隙的數(shù)目以產(chǎn)生具有優(yōu)化的功能的一種組合物。具有內(nèi)部納米顆粒的孔隙的一個(gè)小百分比甚至可能是令人希望的。因此，本發(fā)明涵蓋組合物，其中少量納米顆粒已經(jīng)穿透這些孔隙開口，只要這些納米顆粒中的大多數(shù)（例如，至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約98%或至少約99%）結(jié)合到該固體載體的外表面?？捎糜诒景l(fā)明的組合物和方法的其他示例性固體載體、有機(jī)配體以及納米顆粒在下文中描述。A.固體載體本發(fā)明的固體載體（基質(zhì)）可以是任何固體物質(zhì)，該固體物質(zhì)是無(wú)孔的或特征在于具有孔隙（例如，可用作一種固定相/填充物質(zhì)用于色譜的那些）。在一個(gè)實(shí)例中，該固體載體包括無(wú)機(jī)（例如，二氧化硅）材料。在另一個(gè)實(shí)例中，該固體載體包括有機(jī)（例如，聚合）材料（例如，合成樹脂）。在又另一個(gè)實(shí)例中，該固體載體包括一種雜混式無(wú)機(jī)-有機(jī)材料。該基質(zhì)優(yōu)選地在用于對(duì)應(yīng)的分離的溶劑系統(tǒng)中不可溶。在一個(gè)實(shí)施例中，該固體載體包括金屬氧化物或類金屬氧化物。示例性基質(zhì)包括基于二氧化硅（例如，氧化硅，SiO2）、基于二氧化鈦（例如，氧化鈦，TiO2）、基于鍺（例如，氧化鍺）、基于氧化鋯（例如，氧化鋯，ZrO2）、基于氧化鋁（例如，氧化鋁，Al2O3）的材料或其混合物。其他基質(zhì)包括交聯(lián)和非交聯(lián)的聚合物、碳化材料以及金屬?；|(zhì)還可以并有聚合網(wǎng)絡(luò)、溶膠-凝膠網(wǎng)絡(luò)或其雜混形式。在一個(gè)實(shí)施例中，該基質(zhì)是一種基于二氧化硅的基質(zhì)。示例性基于二氧化硅的基質(zhì)包括硅膠、玻璃、溶膠-凝膠、聚合物/溶膠-凝膠雜混物以及二氧化硅單塊材料?？捎米鞅景l(fā)明中的有機(jī)基質(zhì)的示例性合成樹脂描述于史蒂文斯等人的美國(guó)專利4,927,539、史蒂文斯等人的美國(guó)專利4,351,909、史蒂文斯等人的美國(guó)專利4,519,905、巴雷托等人的美國(guó)專利4,383,047和美國(guó)專利5,532,279中，這些美國(guó)專利的披露內(nèi)容各自通過(guò)引用結(jié)合在此用于所有目的。該固體載體可以由任何合成樹脂材料形成。示例性合成聚合物離子交換樹脂包括聚(苯酚-甲醛)、聚(丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸)、聚腈、胺-環(huán)氧氯丙烷共聚物、苯乙烯在聚乙烯或聚丙烯上的接枝聚合物、聚(2-氯甲基-1,3-丁二烯)、聚(乙烯基芳香族)樹脂（諸如衍生自苯乙烯、α-甲基苯乙烯、氯苯乙烯、氯甲基苯乙烯、乙烯基甲苯、乙烯基萘或乙烯基吡啶的那些）、丙烯酸和甲基丙烯酸的相應(yīng)酯、以及類似的不飽和單體、單亞乙烯基單體（包括包含單亞乙烯基環(huán)的氮雜環(huán)化合物）、以及以上樹脂的任何共聚物。另外的實(shí)例包括基于丙烯酸縮水甘油酯和基于甲基丙烯酸縮水甘油酯的材料（例如，甲基丙烯酸2-縮水甘油氧基乙酯、乙烯基苯甲基縮水甘油醚、2-(4-乙烯基苯甲氧基)乙基縮水甘油醚），以及衍生自乙烯基苯甲基氯化物、乙烯基苯甲醇、2-(4-乙烯基苯甲氧基)乙醇、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、聚乙烯甲酰胺的那些。以上材料中的任何一種可以任選地與并有離子或可電離（以及任選地反相）官能團(tuán)的單體進(jìn)行共聚。以上材料中的任何一種可以任選地用并有離子或可電離以及任選地反相官能團(tuán)的一種適合配體來(lái)官能化。在一個(gè)實(shí)施例中，該載體包括交聯(lián)的聚合物或共聚物。一種示例性共聚物是苯乙烯-二乙烯基苯共聚物（例如，PS-DVB）。在一個(gè)實(shí)例中，該苯乙烯-二乙烯基苯共聚物包含按重量計(jì)約0%到約100%之間的二乙烯基苯單體。在另一個(gè)實(shí)例中，該苯乙烯-二乙烯基苯共聚物包含按重量計(jì)約25%到約80%之間的二乙烯基苯單體。該共聚物可以例如根據(jù)筏（Ikada）等人，聚合物科學(xué)雜志（JournalofPolymerScience），第12卷，1829-1839(1974)的方法或如梅特茲南（Meitzner）等人的美國(guó)專利4,382,124中所述來(lái)制備。在一個(gè)實(shí)例中，該固體載體包括一種二氧化硅-、氧化鋁-、氧化鋯-或二氧化鈦-聚合樹脂雜混材料。示例性二氧化硅-有機(jī)雜混物描述于美國(guó)專利6,528,167和美國(guó)專利申請(qǐng)公布2006/0070937（申請(qǐng)序列號(hào)：11/240,695）中，這些文獻(xiàn)的披露內(nèi)容通過(guò)引用結(jié)合在此用于所有目的。在一個(gè)實(shí)例中，本發(fā)明的固體載體通過(guò)眾所周知的懸浮聚合技術(shù)來(lái)形成。在這個(gè)實(shí)例中，這些顆粒典型地衍生自一種單體混合物，該混合物在將與這些顆粒相接觸的溶劑中不可溶。示例性基質(zhì)通過(guò)在一種適合乳化劑存在下加熱并且攪拌諸種單體在一種適合溶劑中的懸浮液來(lái)形成?？商娲兀摼酆峡梢酝ㄟ^(guò)一種懸浮、本體或溶液方法來(lái)進(jìn)行，繼而通過(guò)機(jī)械構(gòu)件（例如，球磨機(jī)、棒磨機(jī)等）將樹脂研磨成所希望的尺寸。該固體載體可以具有任何形式，包括微粒（例如，球形、基本上球形；例如，樹脂珠粒）、碎片、大塊、塊料、單塊等。當(dāng)該基質(zhì)呈微粒形式時(shí)，這些顆粒（例如，不規(guī)則形狀或珠粒形狀，例如，基本上球形）具有中值粒度（即，直徑）。在一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)（例如，球形硅膠）的中值粒度在約0.1（例如，二氧化硅納米球）與約10,000μm（微米）之間。在一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)的中值粒度在約1與約5000微米之間、在約1與約1000微米之間、在約1與約500微米之間、在約1與約400微米之間、在約1與約300微米之間、在約1與約200微米之間或在約1與約100微米之間。在又另一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)的中值粒度在約1與約80微米之間、在約1與約70微米之間、在約1與約60微米之間、在約1與約50微米之間、在約1與約40微米之間、在約1與約30微米之間、在約1與約20微米之間或在約1與約10微米之間。在其他實(shí)例中，該基質(zhì)的中值粒度在約10與約100微米之間、在約10與約80微米之間、在約40與約200微米之間、在約40與約100微米之間、在約40與約80微米之間、在約60與約200微米之間、在約60與約100微米之間、在約70與約200微米之間、在約80與約200微米之間、在約100與約200微米之間、在約200與約600微米之間、在約200與約500微米之間或在約200與約400微米之間。在一個(gè)具體實(shí)例中，該基質(zhì)是基于二氧化硅（例如，硅膠）的、具有在約40與80微米之間的中值粒度。粒度還可以如泰勒等效物（TylerEquivalent）等級(jí)上定義以“篩目”測(cè)量（顆粒越小，篩目數(shù)越高）。典型的篩目特征在約10與600之間的范圍內(nèi)。一般來(lái)說(shuō)，可用于任何填充床色譜應(yīng)用（例如，LC、HPLC或超高壓色譜）的基質(zhì)顆粒適合用于本發(fā)明的組合物中。在不同實(shí)例中，該載體呈微粒形式，并且多個(gè)載體顆粒被安置在一個(gè)填充床中。舉例來(lái)說(shuō)，一個(gè)塑料或金屬柱用這些載體顆粒填充。在其他實(shí)例中，這些基質(zhì)顆粒是基本上“單分散”或基本上“均分散”的，這表明這些顆粒中大多數(shù)（例如，這些顆粒中的80%、90%或95%）的粒度不在低于或高于中值粒度（M）下實(shí)質(zhì)上變化（例如，不超過(guò)50%）。在一個(gè)示例性的單分散基質(zhì)顆粒群體中，這些顆粒中的90%具有約0.5xM與約1.5xM之間的平均粒度。在另一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)是一種無(wú)機(jī)或有機(jī)單塊。在一個(gè)實(shí)例中，該固體載體包括一種二氧化硅單塊。在另一個(gè)實(shí)例中，該固體載體包括一種氧化鋁單塊。在又另一個(gè)實(shí)例中，該固體載體包括一種氧化鋯單塊。在另一個(gè)實(shí)例中，該固體載體包括一種二氧化鈦單塊?；谟袡C(jī)組合物的示例性單塊材料和制備所述材料的方法描述于美國(guó)專利5,130,343、5,929,214、5,728,457、5,260,094、6,887,384、5,334,310、7,303,671、5,453,185以及7,074,331中，這些專利的披露內(nèi)容通過(guò)引用以其全文結(jié)合在此用于所有目的。該基質(zhì)的孔隙可以具有任何尺寸。在一種典型的基質(zhì)中，平均孔隙尺寸等于或小于在下文中描述的這些納米顆粒。標(biāo)稱孔隙尺寸典型地以埃（10-10m，）來(lái)測(cè)量。在一個(gè)實(shí)例中，這些基質(zhì)孔隙的平均直徑在約1與約之間。在另一個(gè)實(shí)例中，這些基質(zhì)孔隙的體積平均直徑在約10與約之間、在約10與約之間、在約10與約之間、在約10與約之間、在約10與約之間、在約10與約之間、在約10與約之間、在約10與約之間、在約10與約之間、在約10與約之間、在約20與約200之間、在約20與約之間、在約30與約之間、在約30與約之間、在約40與約之間、在約40與約之間、在約50與約之間、在約50與約之間、在約60與約之間、在約60與約之間、在約70與約之間、在約70與約之間、在約80與約之間、在約100與約之間、在約100與約之間、在約100與約之間、在約100與約之間、在約200與約之間或在約200與約之間。該基質(zhì)的比表面積典型地在約0.1與約2,000m2/g之間。舉例來(lái)說(shuō)，該基質(zhì)的比表面積在約1與約1,000m2/g樹脂之間、在約1與約800m2/g樹脂之間、在約1與約600m2/g樹脂之間、在約1與約400m2/g樹脂之間、在約1與約200m2/g樹脂之間或在約1與約100m2/g樹脂之間。在另一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)的比表面積在約3與約1,000m2/g樹脂之間、在約3與約800m2/g樹脂之間、在約3與約600m2/g樹脂之間、在約3與約400m2/g樹脂之間、在約3與約200m2/g樹脂之間或在約3與約100m2/g樹脂之間。在又另一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)的比表面積在約10與約1,000m2/g樹脂之間、在約10與約800m2/g樹脂之間、在約10與約600m2/g樹脂之間、在約10與約400m2/g樹脂之間、在約10與約200m2/g樹脂之間或在約10與約100m2/g樹脂之間。在一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)包括結(jié)合到該表面的負(fù)或正地可電離或帶負(fù)或正電的基團(tuán)。舉例來(lái)說(shuō)，硅膠在高于pH4下攜有負(fù)表面電荷，并且Al2O3可以在酸性條件下具有正表面電荷并且在堿性條件下具有負(fù)表面電荷。在另一個(gè)實(shí)例中，一種聚合有機(jī)基質(zhì)由在該基質(zhì)的表面上提供離子交換基團(tuán)和任選地親水性部分的單體制成。可以被用以制備具有離子交換基團(tuán)的聚合基質(zhì)或納米顆粒的一種單體是丙烯酸。一種示例性基質(zhì)是丙烯酸與一種或多種另外的單體的一種共聚物。該產(chǎn)生的聚合基質(zhì)將包括羧酸基（陽(yáng)離子交換基團(tuán)）。陰離子交換基團(tuán)，諸如胺（陰離子交換基團(tuán)）可以通過(guò)使用從活化丙烯酸（例如，酰氯）與一種二胺制備的單體被引入一種聚合基質(zhì)中。根據(jù)這個(gè)實(shí)例的示例性單體包括與N-(2-氨基乙基)丙烯酰胺和N-(2-氨基丙基)丙烯酰胺相關(guān)的單體。示例性單體包括N-(2-(二甲基氨基)乙基)丙烯酰胺和N-(2-(二甲基氨基)丙基)丙烯酰胺?？梢栽诰酆现盎蛑蟊贿M(jìn)一步改性以產(chǎn)生具有離子交換基團(tuán)的一種聚合物的其他單體包括丙烯酸縮水甘油酯、甲基丙烯酸縮水甘油酯、乙酸乙烯基苯甲酯和甲基丙烯酸2-縮水甘油氧基乙酯、丙烯酸甲酯、乙烯基苯甲氯、乙烯基苯甲醇、乙烯基苯甲基縮水甘油醚、2-(4-乙烯基苯甲氧基)乙醇、2-(4-乙烯基苯甲氧基)乙基縮水甘油醚。舉例來(lái)說(shuō)，丙烯酸甲酯的酯基可以在聚合之后被水解以獲得具有羧酸基的一種聚合物。在另一個(gè)實(shí)例中，以上所列出的單體的縮水甘油基可以通過(guò)與一種親核配體（諸如一種包含胺或硫氫基的配體）反應(yīng)來(lái)進(jìn)一步改性。用于對(duì)聚合基質(zhì)進(jìn)行改性的方法在下文中進(jìn)一步論述。在優(yōu)選實(shí)施例中，該基質(zhì)適合用于用一種有機(jī)配體化學(xué)改性。在一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)是一種有機(jī)聚合基質(zhì)。所述基質(zhì)可以通過(guò)利用該聚合物上存在的官能團(tuán)用一種有機(jī)配體來(lái)改性。在一個(gè)實(shí)例中，該聚合物是用并有一個(gè)氨基或一個(gè)羧酸基的一種配體官能化的苯乙烯與二乙烯基苯的一種共聚物（PS-DVB）。該配體可以衍生自一種包含硫醇基的前體。該硫醇類似物可以在一種自由基引發(fā)劑（諸如2,2'-偶氮雙(2-甲基丙腈)）存在下與該聚合物一起加熱。在另一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)是一種無(wú)機(jī)基質(zhì)，諸如二氧化硅。二氧化硅可以使用反應(yīng)性硅烷基配體來(lái)共價(jià)改性。示例性配體和其與該基質(zhì)的連接方法在下文中描述。B.配體在不同實(shí)例中，該組分A基質(zhì)（例如，當(dāng)組分A是多孔的時(shí)，至少這些基質(zhì)孔隙的內(nèi)襯）用至少兩種類型的、可以是相同或不同配體的有機(jī)配體（一種親水性配體和一種離子交換配體）來(lái)共價(jià)改性。在一個(gè)實(shí)例中，該配體包括至少一個(gè)離子交換基團(tuán)，例如，一個(gè)可電離或離子基團(tuán)。離子交換基團(tuán)在此描述，并且包括陰離子、陽(yáng)離子、兩性以及兩性離子基團(tuán)。陰離子交換基團(tuán)包括伯、仲、叔以及季胺，以及任何其他接受質(zhì)子的官能團(tuán)。陽(yáng)離子交換基團(tuán)包括磺酸根、硫酸根、羧酸根、膦酸根、磷酸根、硅烷醇以及任何其他供質(zhì)子的官能團(tuán)。兩性和兩性離子配體包括至少一個(gè)陰離子交換基團(tuán)和至少一個(gè)陽(yáng)離子交換基團(tuán)，這些基團(tuán)中的每一者可以選自上述離子交換基團(tuán)。鍵聯(lián)到該基質(zhì)的離子交換和親水性配體在某些條件下形成帶電（正或負(fù)）的一個(gè)功能（例如，離子交換）層（例如，在這些基質(zhì)孔隙的內(nèi)壁旁邊）。舉例來(lái)說(shuō)，在適合pH值條件（例如，低于7的pH值）下，用一種陰離子交換配體官能化的一種基質(zhì)是帶正電的。配體與該固體載體的連接在一個(gè)實(shí)例中，該固體載體使用反應(yīng)性配體前體（“反應(yīng)性配體”）官能化。舉例來(lái)說(shuō)，該反應(yīng)性配體（例如，硅烷基配體）包括可用于連接到該固體載體的一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)。該配體的反應(yīng)性官能團(tuán)能夠與該固體載體反應(yīng)（例如，與該固體載體的表面上的互補(bǔ)反應(yīng)性官能團(tuán)反應(yīng)）以形成一個(gè)或多個(gè)共價(jià)鍵。參看例如，圖2-圖4。配體與一種無(wú)機(jī)固體載體的連接用于將配體連接到無(wú)機(jī)基質(zhì)（諸如二氧化硅基質(zhì)）的方法是已知的。示例性方法在此和在如下文獻(xiàn)中描述：例如，WO2006/088760（2006年2月10日提交）、WO2006/0054559（2004年9月10日提交）、WO2005/047886（2004年10月4日提交）、美國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?1/753,934（2007年5月25日提交）、H.水口（H.Minakuchi）等人，分析化學(xué)（Anal.Chem.）1996,68:3498-3501、H.水口等人，色譜雜志（J.Chromatogr.）1998,797:121-131、美國(guó)專利6,248,798、美國(guó)專利5,968,363、美國(guó)專利5,865,994、美國(guó)專利5,936,003以及美國(guó)專利5,925,253，這些文獻(xiàn)的的披露內(nèi)容各自通過(guò)引用結(jié)合在此用于所有目的。在一個(gè)實(shí)例中，該反應(yīng)性配體包括一個(gè)反應(yīng)性硅烷基。舉例來(lái)說(shuō)，該反應(yīng)性硅烷基可以與包括表面硅烷醇（例如，Si-OH）基團(tuán)的一種二氧化硅基質(zhì)的表面反應(yīng)，以在該硅烷基配體與該二氧化硅基質(zhì)之間形成諸個(gè)硅氧烷鍵。在不同實(shí)施例中，該反應(yīng)性配體包括具有根據(jù)式(I)的一種結(jié)構(gòu)的一個(gè)活化硅烷基：在根據(jù)式(I)的示例性硅烷基中，R20、R21以及R22是經(jīng)過(guò)獨(dú)立選擇的硅烷基取代基。一個(gè)活化硅烷基包括至少一個(gè)反應(yīng)性硅烷基取代基。一個(gè)反應(yīng)性硅烷基取代基能夠與一種本發(fā)明的基質(zhì)反應(yīng)在該反應(yīng)性配體與該基質(zhì)之間形成一個(gè)共價(jià)鍵。因此，R20、R21以及R22中的至少一個(gè)是一個(gè)反應(yīng)性硅烷基取代基。示例性反應(yīng)性硅烷基取代基包括烷氧基、鹵素、伯或仲氨基以及羧酸基。在一個(gè)實(shí)施例中，R20、R21以及R22是獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的成員：鹵素、OR14、NR14R15、OC(O)R16、OS(O)2R16、酰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。每個(gè)R14和每個(gè)R15是獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的一個(gè)成員：H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。每個(gè)R16是獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的一個(gè)成員：被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。在一個(gè)實(shí)施例中，R20、R21以及R22中的至少一個(gè)不是OH、未被取代的烷基、未被取代的芳基、未被取代的雜芳基以及未被取代的雜環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)施例中，R20、R21以及R22中的至少一個(gè)是烷氧基或鹵素?？捎糜谑挂粋€(gè)反應(yīng)性配體共價(jià)鍵聯(lián)到該固體載體的示例性反應(yīng)性硅烷基包括：-Si(OMe)3；-SiMe(OMe)2；-SiMe2(OMe)；-Si(OEt)3；-SiMe(OEt)2；-SiMe2(OEt)、-SiCl3、-SiMeCl2；-SiMe2Cl；-SiCl2(OMe)；以及-SiCl(OMe)2。在一個(gè)實(shí)例中，R20、R21以及R22中的一個(gè)是一個(gè)非反應(yīng)性硅烷基取代基。在另一個(gè)實(shí)例中，R20、R21以及R22中的兩個(gè)是非反應(yīng)性硅烷基取代基。示例性非反應(yīng)性硅烷基取代基包括烷基或芳基。在一個(gè)實(shí)施例中，R20、R21以及R22中的一個(gè)或兩個(gè)是獨(dú)立地選自未被取代的C1-C6烷基（例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基等）的成員。在又另一個(gè)實(shí)例中，R20、R21以及R22中的兩個(gè)是獨(dú)立地選自被取代或未被取代的烷基、諸如被取代或未被取代的C1-C6烷基（例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基等）的成員。在一個(gè)具體實(shí)施例中，R20、R21以及R22中的一個(gè)或兩個(gè)是甲基。在一個(gè)實(shí)例中，被用于對(duì)該固體載體進(jìn)行共價(jià)改性的該反應(yīng)性配體包括一個(gè)離子交換基團(tuán)?？商娲?，該反應(yīng)性配體包括可以在該反應(yīng)性配體與該固體載體偶合之后被轉(zhuǎn)化為一個(gè)離子交換基團(tuán)的一個(gè)基團(tuán)。舉例來(lái)說(shuō)，該反應(yīng)性配體可以包含一個(gè)受保護(hù)的酸性基團(tuán)（例如，一個(gè)末端酯基），它在該配體與該固體載體偶合之后被脫保護(hù)以提供一個(gè)游離酸（例如，羧酸基）。任何數(shù)目的不同離子交換和非離子交換配體（例如，親水性）可以結(jié)合到該固體載體。在一個(gè)實(shí)例中，該功能層基本上由兩種類型的配體（HILIC和/或陰離子交換和/或陽(yáng)離子交換）組成。在另一個(gè)實(shí)例中，該功能層包括獨(dú)立地選自HILIC陰離子和陽(yáng)離子交換配體的至少三種不同類型的配體。在另一個(gè)實(shí)例中，該功能層包括至少兩種不同類型的配體，其中至少一種配體是一種離子交換配體（選自陰離子和陽(yáng)離子交換配體）并且至少一種配體是一種不可電離或非離子配體（HILIC）。舉例來(lái)說(shuō)，除了這些離子交換配體之外，本發(fā)明的組合物可以進(jìn)一步包括結(jié)合到與這些離子交換配體相同的固體載體的HILIC配體。在又另一個(gè)實(shí)例中，該功能層包括至少兩種不同類型的配體，其中兩種配體都是陰離子交換配體，或兩種配體都是陽(yáng)離子交換配體，或兩種配體都是HILIC配體。在另一個(gè)實(shí)例中，該功能層包括至少兩種不同類型的配體，其中至少一種配體是一種陰離子交換配體或一種陽(yáng)離子交換配體和一種HILIC配體。本發(fā)明的組合物可以包括任何類型的離子交換配體。該配體包括至少一種陰離子交換基團(tuán)和/或至少一種陽(yáng)離子交換基團(tuán)。示例性離子交換基團(tuán)在此描述。在不同實(shí)例中，該配體包括以下基團(tuán)中的至少一者：-Z-OH、-(Z)nN(R6)(R7)、-(Z)nN+(R6)(R7)(R8)X-、-(Z)nC(O)OR9、-(Z)nS(O)2OR9、-(Z)nOP(O)(OR10)(OR11)以及-(Z)nB(OR10)(OR11)(OR12)，其中n是選自0和1的一個(gè)整數(shù)。R6、R7以及R8是獨(dú)立地選自以下的成員：H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。R9是選自以下的一個(gè)成員：H、一個(gè)單一負(fù)電荷以及一個(gè)陽(yáng)離子平衡離子。R10和R11是獨(dú)立地選自以下的成員：H、一個(gè)單一負(fù)電荷、一個(gè)陽(yáng)離子平衡離子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。X-存在或不存在，并且當(dāng)存在時(shí)，是一個(gè)陰離子平衡離子。Z是選自以下的一個(gè)成員：被取代或未被取代的芳基和被取代或未被取代的雜芳基。這些配體可以任選地包括另外的極性基團(tuán)（例如，醚、硫醚、酰胺、磺酰胺、脲、硫脲、碳酸酯、氨基甲酸酯等）。在一個(gè)實(shí)施例中，該配體具有不超過(guò)8個(gè)、不超過(guò)7個(gè)、不超過(guò)6個(gè)、不超過(guò)5個(gè)、不超過(guò)4個(gè)、不超過(guò)3個(gè)或不超過(guò)2個(gè)有序的碳原子。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，這些有序的碳原子中的至少兩個(gè)任選地是一個(gè)被取代或未被取代的環(huán)（例如，被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或被取代或未被取代的環(huán)烷基）的一部分。在一個(gè)實(shí)例中，該親水性部分對(duì)于該配體是足夠親水性的以展現(xiàn)HILIC特征。在這個(gè)實(shí)例中，該配體包括至少一個(gè)極性基團(tuán)。除了離子或可電離分析物之外，這種材料可以例如用于分析不帶電荷的分子（例如，在同一樣品內(nèi)）。所增加的HILIC能力可以被用以分析除了離子或可電離分子之外包含有機(jī)親水性和/或極性分子的樣品。具有HILIC部分的示例性配體和固體載體包括配體2-6（圖2-4）和固體載體11-21。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該配體并有具有根據(jù)式(II)、式(III)、式(IV)或式(V)的一種結(jié)構(gòu)的一個(gè)部分，其中m和n是獨(dú)立地選自0和1的整數(shù)：在根據(jù)以上實(shí)施例（例如，在式(II)、式(III)或式(IV)中）中的任一者的示例性配體中，W和W1獨(dú)立地選自離子交換基團(tuán)（例如，離子或可電離基團(tuán)）或不帶電荷的極性基團(tuán)。離子交換基團(tuán)示例性離子交換基團(tuán)在上文中描述。在一個(gè)實(shí)例中，末端安置的離子交換基團(tuán)（例如，“-W”）[例如，當(dāng)m是0時(shí)式(II)中的W，當(dāng)n是0時(shí)式(III)中的W，當(dāng)m是0時(shí)式(III)中的W1]是獨(dú)立地選自以下的成員：-Z-OH、-(Z)nN(R6)(R7)、-(Z)nN+(R6)(R7)(R8)X-、-(Z)nC(O)OR9、-(Z)nS(O)2OR9、-(Z)nOP(O)(OR10)(OR11)以及-(Z)nB(OR10)(OR11)(OR12)，其中n是選自0和1的一個(gè)整數(shù)。在另一個(gè)實(shí)例中，內(nèi)部（例如，“-W-”）離子交換基團(tuán)[例如，當(dāng)m是1時(shí)式(II)中的W，當(dāng)n是1時(shí)式(III)中的W，當(dāng)m是1時(shí)式(III)中的W1，式(IV)中的W]是獨(dú)立地選自以下的成員：-N(R6)-、-N+(R6)(R7)X--、-OP(O)(OR10)O-以及-B(OR10)(OR11)O-。R6、R7以及R8是獨(dú)立地選自以下的成員：H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。R9是選自以下的一個(gè)成員：H、一個(gè)單一負(fù)電荷以及一個(gè)陽(yáng)離子平衡離子。R10和R11是獨(dú)立地選自以下的成員：H、一個(gè)單一負(fù)電荷、一個(gè)陽(yáng)離子平衡離子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。X-存在或不存在，并且當(dāng)存在時(shí)，是一個(gè)陰離子平衡離子。Z是選自以下的一個(gè)成員：被取代或未被取代的芳基和被取代或未被取代的雜芳基。極性基團(tuán)在一個(gè)實(shí)例中，該HILIC或離子交換配體包括至少一個(gè)極性基團(tuán)。在以上闡述的這些式中，W和W1這些基團(tuán)在每次出現(xiàn)時(shí)可以是一個(gè)極性基團(tuán)而不是一個(gè)離子交換基團(tuán)。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該極性基團(tuán)是一個(gè)不帶電荷的極性基團(tuán)。在不同實(shí)施例中，該配體可以包括一個(gè)離子交換基團(tuán)和一個(gè)極性基團(tuán)。在根據(jù)以上實(shí)施例中的任一者的示例性配體中，W和/或W1是選自以下的一個(gè)成員：醚、硫醚、酰胺、磺酰胺、碳酸酯、氨基甲酸酯、脲或硫脲。舉例來(lái)說(shuō)，式(II)中的W和/或W1可以是可用于連接兩個(gè)鍵聯(lián)基團(tuán)L1與L2的任何極性基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施例中，L1與L2通過(guò)一個(gè)醚鍵（例如，W和/或W1是O）、一個(gè)硫醚鍵（例如，W和/或W1是S）、一個(gè)酰胺（例如，W和/或W1是-NHC(O)-或-C(O)NH-）或磺酰胺基（例如，W和/或W1是-NHS(O)2-或-S(O)2NH-）或可替代地通過(guò)一個(gè)碳酸酯（例如，W和/或W1是-OC(O)O-）、氨基甲酸酯（例如，W和/或W1是-OC(O)NH-或-NHC(O)O-）、脲（例如，W和/或W1是-NHC(O)NH-）或硫脲基連接。在一個(gè)實(shí)施例中，W和/或W1是一個(gè)酰胺基：-C(O)NR13-或NR13C(O)-，其中R13是選自以下的一個(gè)成員：H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，R13是氫或低級(jí)烷基（諸如甲基）?；鶊F(tuán)L在根據(jù)以上實(shí)施例（例如式(II)、式(III)或式(IV)）中的任一者的示例性配體中，L1、L2以及L3是獨(dú)立地選自以下的成員：被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，L1是被對(duì)應(yīng)于W和W1的兩個(gè)羧酸部分取代的一個(gè)苯基（例如，相12）。在另一個(gè)示例性實(shí)施例中，L1是被一個(gè)酰胺、一個(gè)胺（1級(jí)、2級(jí)、3級(jí)或4級(jí)）或一個(gè)脲末端取代的被取代或未被取代的烷基。在不同實(shí)施例中，組分A包括兩個(gè)所述配體（例如，相15）。在不同實(shí)施例中，L1是被取代或未被取代的烷基，W1是O或OCH2OH，并且W是一個(gè)胺（伯、仲、叔或季）（例如，相17）。在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明的這些配體包括至少一個(gè)親水性部分。在一個(gè)實(shí)例中，上式中的L1、L2以及L3中的至少一個(gè)包括一個(gè)親水性（極性）部分。舉例來(lái)說(shuō)，當(dāng)在式(II)中n是1時(shí)，L1和L2中的至少一個(gè)包括一個(gè)親水性部分。在另一個(gè)實(shí)例中，當(dāng)n是0時(shí)，L2包括一個(gè)親水性部分。術(shù)語(yǔ)“親水性部分”在此定義。該親水性部分可以包括在該配體的一個(gè)內(nèi)部部分中，或可以見于一種配體的末端部分中（例如式(III)中的L2）。本發(fā)明的示例性反應(yīng)性硅烷基配體示出在圖2-圖4中?？捎糜诒景l(fā)明中的另外的反應(yīng)性配體、基質(zhì)以及官能化的基質(zhì)披露在如下專利中，例如，WO2006/088760（2006年2月10日提交）、WO2006/0054559（2004年9月10日提交）以及WO2005/047886（2004年10月4日提交），這些專利的披露內(nèi)容各自通過(guò)引用結(jié)合在此用于所有目的。本發(fā)明的示例性官能化的基質(zhì)具有具備根據(jù)式(IIa)、式(IIIa)以及式(IVa)的一種結(jié)構(gòu)的至少一個(gè)配體-基質(zhì)組分：其中n、m、Y、W、W1、W2、W3、L1、L2以及L3在上文中定義。每個(gè)A是一個(gè)經(jīng)過(guò)獨(dú)立選擇的鍵聯(lián)基團(tuán)，它將該配體連接到該基質(zhì)（固體載體）并且衍生自用以將該配體共價(jià)鍵聯(lián)到該固體載體的反應(yīng)性官能團(tuán)。在一個(gè)實(shí)例中，每個(gè)A是一個(gè)經(jīng)過(guò)獨(dú)立選擇的硅烷基。因此，本發(fā)明提供了組合物，包括并有根據(jù)下式中的一者的一種結(jié)構(gòu)的一種官能化的基質(zhì)：其中n、m、W、W1、L1、L2以及L3在上文中定義。R2和R3是獨(dú)立地選自以下的成員：酰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。在一個(gè)實(shí)例中，R2和R3是獨(dú)立地選自以下的成員：被取代或未被取代的烷基和被取代或未被取代的芳基。在一個(gè)實(shí)施例中，R2和R3中的一個(gè)或兩個(gè)是選自未被取代的C1-C6烷基（例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基等）的成員。在又另一個(gè)實(shí)例中，R2和R3中的兩個(gè)是獨(dú)立地選自被取代或未被取代的烷基、諸如被取代或未被取代的C1-C6烷基（例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基等）的成員。在一個(gè)具體實(shí)施例中，R2和R3中的一個(gè)或兩個(gè)是甲基。在另一個(gè)實(shí)施例中，R2和R3兩個(gè)都是甲基。配體與一種有機(jī)（聚合）固體載體的連接用于將配體連接到有機(jī)基質(zhì)（諸如聚合樹脂）的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員所已知的。在一個(gè)實(shí)例中，該基質(zhì)從單體制備，這些單體在聚合之后提供不飽和基團(tuán)（諸如乙烯基）。在一個(gè)實(shí)例中，該聚合物是苯乙烯與二乙烯基苯的一種共聚物（PS-DVB）。這些樹脂的不飽和基團(tuán)（例如，乙烯基）可以被用于連接一個(gè)離子交換配體。在一個(gè)實(shí)例中，該配體包括一個(gè)硫醇基，該硫醇基通過(guò)涉及自由基中間物的一種加成機(jī)制而加成到雙鍵上，由此在該配體與該固體載體之間形成一個(gè)硫-醚鍵。所述反應(yīng)描述于例如WO/03022433（2002年9月5日提交）中。舉例來(lái)說(shuō)，陰離子交換基團(tuán)（例如，氨基）或陽(yáng)離子交換基團(tuán)（例如，羧酸基）通過(guò)在一種自由基起始劑（諸如2,2'-偶氮雙(2-甲基丙腈)）存在下加熱（和/或用光處理）一種包含乙烯基的樹脂（例如，PS-DVB）與并有一個(gè)硫醇基的一種反應(yīng)性配體來(lái)添加到該固體載體。該配體進(jìn)一步包括至少一個(gè)陰離子交換基團(tuán)（例如，伯、仲、叔或季氨基）、至少一個(gè)陽(yáng)離子交換基團(tuán)或至少一個(gè)潛在離子交換基團(tuán)，該至少一個(gè)潛在離子交換基團(tuán)可以在該配體鍵聯(lián)到該固體載體之后被轉(zhuǎn)化為一個(gè)離子交換基團(tuán)（例如，一個(gè)酯基，它可以被水解）。一種示例性方法展示在以下方案1中：方案1：可用于以上方法中的示例性配體包括：其中q是選自1到50的一個(gè)整數(shù)。在一個(gè)實(shí)例中，q是選自1到18的一個(gè)成員。在另一個(gè)實(shí)例中，q是選自1到10的一個(gè)成員。在一個(gè)特定實(shí)例中，q是1。在一個(gè)實(shí)例中，Ra、Rb以及Re是獨(dú)立地選自以下的成員：H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)例中，Ra、Rb以及Re是獨(dú)立地選自H和被取代或未被取代的(C1-C4)烷基的成員。在一個(gè)具體實(shí)例中，Ra和Rb獨(dú)立地選自H和甲基。在另一個(gè)具體實(shí)例中，Re是選自甲基和乙基的一個(gè)成員。每個(gè)Rc和每個(gè)Rd是獨(dú)立地選自以下的成員：H、羥基、鹵素、氰基、烷氧基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。在另一種方法中，該有機(jī)聚合固體載體并有提供一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)的一種單體，該反應(yīng)性官能團(tuán)可以被用于將一個(gè)離子交換配體共價(jià)鍵聯(lián)到該固體載體。在一個(gè)實(shí)例中，該單體并有一個(gè)羧酸基或一個(gè)酯基，該酯基可以在聚合之后被水解形成一個(gè)羧酸基。根據(jù)這個(gè)實(shí)例的示例性單體包括丙烯酸、甲基丙烯酸、丙烯酸烷酯（例如，甲酯或乙酯）以及甲基丙烯酸烷酯（例如，甲酯或乙酯）。該羧酸基可以與該配體上的一個(gè)互補(bǔ)的反應(yīng)性官能團(tuán)反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)例中，該配體包括一個(gè)氨基，該氨基可以與該羧酸基反應(yīng)以在該固體載體與該配體之間形成一個(gè)酰胺鍵。羧酸基可以例如在與該反應(yīng)性配體反應(yīng)之前通過(guò)形成一個(gè)酰氯來(lái)進(jìn)行活化。在另一個(gè)實(shí)例中，該聚合固體載體并有包括一個(gè)環(huán)氧基的一種單體。該環(huán)氧環(huán)可以使用一種親核配體打開，由此在該配體與該固體載體之間形成一個(gè)共價(jià)鍵。舉例來(lái)說(shuō)，該配體可以包括一個(gè)氨基（例如，一個(gè)伯氨基）或一個(gè)硫氫基，該氨基或硫氫基可以與該環(huán)氧環(huán)反應(yīng)，以在該配體與該固體載體之間對(duì)應(yīng)地形成例如一個(gè)胺或一個(gè)硫-醚鍵聯(lián)。包括一個(gè)環(huán)氧環(huán)并且可以被并到一種聚合物中的示例性單體包括丙烯酸縮水甘油酯、甲基丙烯酸縮水甘油酯、甲基丙烯酸2-縮水甘油氧基乙酯、乙烯基苯甲基縮水甘油醚、2-(4-乙烯基苯甲氧基)乙基縮水甘油醚。一種示例性方法展示在以下方案2中：方案2：其中YH是一個(gè)親核基團(tuán)，諸如一個(gè)硫氫基或一個(gè)伯氨基。Y是衍生自該親核基團(tuán)與該環(huán)氧環(huán)的反應(yīng)的一個(gè)基團(tuán)?？捎糜谝陨戏椒ㄖ械氖纠杂H核配體包括：其中q、Ra、Rb、Rc、Rd以及Re在上文中定義。在又另一個(gè)實(shí)例中，該聚合固體載體并有一種單體，該單體包括一個(gè)離去基團(tuán)，諸如一個(gè)鹵素取代基，該離去基團(tuán)可以例如在一種親核取代反應(yīng)中被一個(gè)親核配體置換，由此在該配體與該固體載體之間形成一個(gè)共價(jià)鍵。一種示例性單體是乙烯基苯甲氯。在另一個(gè)實(shí)例中，該聚合固體載體并有包括一個(gè)羥基或一個(gè)硫氫基的一種單體。該羥基可以例如被用于通過(guò)對(duì)應(yīng)地形成一個(gè)醚鍵或一個(gè)硫-醚鍵來(lái)將一個(gè)配體共價(jià)鍵聯(lián)到該固體載體。并有一個(gè)羥基的示例性單體包括乙烯基苯甲醇和2-(4-乙烯基苯甲氧基)乙醇。納米顆粒用于本發(fā)明中的納米顆?？梢杂蔁o(wú)機(jī)或有機(jī)材料形成。這些納米顆?？梢杂扇魏我阎ɡ纾铣桑╇x子交換樹脂形成。示例性納米顆粒包括一種聚合材料，諸如一種樹脂聚合物（例如，合成樹脂聚合物）。樹脂聚合物在本領(lǐng)域中已知并且包括乳膠和乳膠衍生的材料。示例性納米顆粒披露在巴雷托等人的美國(guó)專利5,324,752和5,532,279和波爾（Pohl）等人的美國(guó)專利4,376,047中，這些美國(guó)專利的披露內(nèi)容各自通過(guò)引用結(jié)合在此用于所有目的。在一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒包括一種樹枝狀聚合物。本發(fā)明的納米顆粒可以使用已知技術(shù)和在此描述的技術(shù)來(lái)形成。在一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒使用一種乳液聚合技術(shù)來(lái)制造。示例性納米顆粒通過(guò)在一種適合乳化劑存在下加熱并且攪拌至少一種單體于一種適合溶劑中的一種懸浮液來(lái)形成?？商娲?，該聚合可以通過(guò)一種懸浮、本體或溶液方法來(lái)進(jìn)行，繼而通過(guò)機(jī)械構(gòu)件、諸如研磨機(jī)（例如，球磨機(jī)、棒磨機(jī)等）將樹脂研磨成所希望的尺寸。在一個(gè)實(shí)例中，在不同聚合程序期間形成（并且通常以副產(chǎn)物形式被去除）的極精細(xì)顆粒（精細(xì)物）可以被用作本發(fā)明的組合物中的納米顆粒。在另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒由交聯(lián)的聚合物形成。這些納米顆?？梢杂扇缦赂黜?xiàng)形成，例如，丙烯酸縮水甘油酯、甲基丙烯酸縮水甘油酯、聚(乙烯基芳香族)樹脂（諸如苯乙烯-二乙烯基苯共聚物、二乙烯基苯-乙烯基苯甲氯共聚物或甲基丙烯酸酯-乙烯基苯甲氯共聚物）或二乙烯基苯-乙烯基苯甲基縮水甘油醚（或丙烯酸系環(huán)氧基型單體）或其他包含乙烯基單體的環(huán)氧基取代基。其他示例性納米顆粒包括并有諸如以下的反應(yīng)性官能團(tuán)的單體：反應(yīng)性鹵化物（例如，乙烯基苯甲溴或甲基丙烯酸溴乙酯）或酸酐（例如，順丁烯二酸酐與二乙烯基苯的共聚物）。在一個(gè)實(shí)例中，該納米顆粒是一種乳膠顆粒。乳膠顆?？梢匝苌匀槟z乳液。用于制備納米顆粒的方法是已知的。示例性方法在此（參看例如，實(shí)例3）和在美國(guó)專利5,936,003、美國(guó)專利5,925,253、美國(guó)專利5,532,279以及美國(guó)專利5,324,752中描述，這些美國(guó)專利各自通過(guò)引用結(jié)合在此用于所有目的。在一個(gè)實(shí)施例中，這些乳膠顆粒包括以重量計(jì)包含約0.25%到約100%單體的一種交聯(lián)聚合物或共聚物。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，這些乳膠顆粒包括以重量計(jì)包含約1%到約5%之間的單體的一種交聯(lián)聚合物或共聚物。在另一個(gè)實(shí)例中，該納米顆粒衍生自無(wú)機(jī)材料，諸如二氧化硅、氧化鋁、氧化鋯以及二氧化鈦。用于制備無(wú)機(jī)納米顆粒的示例性方法包括本領(lǐng)域中已知的適合用于制備無(wú)機(jī)基質(zhì)的那些。舉例來(lái)說(shuō)，已經(jīng)描述具有極小粒度的二氧化硅顆粒（例如，適合用于超高壓色譜的那些）。參看例如，R.E.梅杰斯（R.E.Majors），LCGC2006,24(S4):8-15；R.E.梅杰斯，LCGC2008,26(3):8-15；以及R.E.梅杰斯，LCGC2008,26(S4):10-17。該無(wú)機(jī)材料可以用離子交換基團(tuán)例如經(jīng)由如在此描述用于一種固體載體的官能化的離子交換配體（例如，使用反應(yīng)性硅烷基配體）官能化。在根據(jù)以上實(shí)施例中的任一者的不同實(shí)例中，這些納米顆粒包括離子交換基團(tuán)（例如，以產(chǎn)生負(fù)或正電荷）。與該顆粒表面上的離子交換基團(tuán)締合的電荷可以被用于經(jīng)由靜電連接將該納米顆粒（例如，乳膠顆粒）連接到該固體載體（例如，二氧化硅）（參看例如，巴雷托等人的美國(guó)專利5,532,279，通過(guò)引用結(jié)合在此）。這些離子交換基團(tuán)可以衍生自在聚合期間并到該納米顆粒中的一種單體。在另一個(gè)實(shí)例中，該納米顆粒的合成產(chǎn)生一個(gè)中性表面。如果該納米顆粒的合成產(chǎn)生一個(gè)中性表面，那么這些納米顆粒被進(jìn)一步處理以例如通過(guò)使有機(jī)離子交換配體共價(jià)結(jié)合到該納米顆粒的表面來(lái)添加離子交換基團(tuán)至少到該納米顆粒的表面。這些配體可以任選地提供另一親水性官能團(tuán)。舉例來(lái)說(shuō)，該納米顆粒的表面用反應(yīng)性離子交換配體例如以在上文中描述用于用有機(jī)配體對(duì)一種聚合有機(jī)基質(zhì)進(jìn)行改性的方式共價(jià)官能化。在一個(gè)實(shí)例中，該反應(yīng)性配體包括一個(gè)硫醇基并且共價(jià)鍵聯(lián)到一種乳膠顆粒的表面（例如，經(jīng)由使一個(gè)不飽和部分、諸如一個(gè)乙烯基官能化）。用于使有機(jī)聚合樹脂官能化的方法在上文中描述用于對(duì)該固體載體進(jìn)行改性。那些方法中的每一者同樣適用于制備有機(jī)聚合納米顆粒。術(shù)語(yǔ)離子交換基團(tuán)在此定義。示例性離子交換基團(tuán)在上文中描述（例如，與這些配體結(jié)合），并且那些實(shí)施例同樣適用于與這些納米顆粒結(jié)合的實(shí)施例。這些納米顆粒的示例性離子交換基團(tuán)包括：-Z-OH、-(Z)nN(R6)(R7)、-(Z)nN+(R6)(R7)(R8)X-、-(Z)nC(O)OR9、-(Z)nS(O)2OR9、-(Z)nOP(O)(OR10)(OR11)以及-(Z)nB(OR10)(OR11)(OR12)，其中n是選自0和1的一個(gè)整數(shù)。R6、R7以及R8是獨(dú)立地選自以下的成員：H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。R9是選自以下的一個(gè)成員：H、一個(gè)單一負(fù)電荷以及一個(gè)陽(yáng)離子平衡離子。R10和R11是獨(dú)立地選自以下的成員：H、一個(gè)單一負(fù)電荷、一個(gè)陽(yáng)離子平衡離子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的環(huán)烷基以及被取代或未被取代的雜環(huán)烷基。X-存在或不存在，并且當(dāng)存在時(shí)，是一個(gè)陰離子平衡離子。Z是選自以下的一個(gè)成員：被取代或未被取代的芳基和被取代或未被取代的雜芳基。納米顆粒的尺寸這些納米顆粒（例如，乳膠顆粒）可以具有任何尺寸和形狀。在一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒具有范圍從約0.2nm到約1000nm（1μm）的中值直徑。在另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒具有范圍從約1nm到約900nm、從約1nm到約800nm、從約1nm到約700nm、從約1nm到約600nm、從約1nm到約500nm、從約1nm到約400nm、從約1nm到約300nm、從約1nm到約200nm或從約1nm到約100nm的中值直徑。在又另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒具有范圍從約2nm到約100nm、從約4nm到約100nm、從約6nm到約100nm、從約8nm到約100nm或從約10nm到約100nm的中值粒徑。在又另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒具有范圍從約10nm到約1000nm、從約10nm到約900nm、從約10nm到約800nm、從約10nm到約700nm、從約10nm到約600nm、從約10nm到約500nm、從約10nm到約400nm、從約10nm到約300nm或從約10nm到約200nm的中值粒徑。在一個(gè)實(shí)例中，該納米顆粒是平均粒度在約2nm與約90nm之間的一種乳膠顆粒。在另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒具有至少約2nm、至少約4nm、至少約6nm、至少約8nm或至少約10nm的中值粒徑。在另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒具有至少約20nm、至少約30nm、至少約40nm、至少約50nm、至少約60nm、至少約70nm、至少約80nm、至少約90nm或至少約100nm的中值粒徑。在另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒具有至少約200nm、至少約300nm、至少約400nm、至少約500nm、至少約600nm、至少約700nm、至少約800nm、至少約900nm或至少約1000nm的中值粒徑。納米顆粒尺寸與基質(zhì)孔隙尺寸之間的比率在一個(gè)實(shí)施例中，這些納米顆粒具有等于這些基質(zhì)孔隙的平均直徑的平均粒度。在另一個(gè)實(shí)施例中，這些納米顆粒具有大于這些基質(zhì)孔隙的平均直徑的平均粒度（例如，以基本上阻斷這些納米顆粒滲透到這些內(nèi)部孔隙中）。在一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒（例如，乳膠顆粒）的平均直徑與這些基質(zhì)孔隙的平均直徑的比率范圍在約1:1與約1000:1之間。在一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒的平均直徑與這些基質(zhì)孔隙的平均直徑的比率范圍在約1.2:1與約100:1之間、在約1.4:1與約100:1之間、在約1.6:1與約100:1之間、在約1.8:1與約100:1之間、在約2:1與約100:1之間、在約4:1與約100:1之間、在約6:1與約100:1之間、在約8:1與約100:1之間或在約10:1與約100:1之間。在另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒的平均直徑與這些基質(zhì)孔隙的平均直徑的比率是至少約1.2:1、至少約1.4:1、至少約1.6:1、至少約1.8:1或至少約2:1。在另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒的平均直徑與這些基質(zhì)孔隙的平均直徑的比率是至少約3:1、至少約4:1、至少約5:1、至少約6:1、至少約7:1、至少約8:1、至少約9:1或至少約10:1。在另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒的平均直徑與這些基質(zhì)孔隙的平均直徑的比率是至少約20:1、至少約30:1、至少約40:1、至少約50:1、至少約60:1、至少約70:1、至少約80:1、至少約90:1或至少約100:1。粒度與納米顆粒尺寸之間的比率在一個(gè)實(shí)例中，這些載體顆粒的平均直徑與這些納米顆粒（例如，乳膠顆粒）的平均直徑的比率范圍在約20:1與約5,000:1之間，例如從約100:1到約2500:1。示例性比率描述在波爾等人的美國(guó)專利4,376,047(1983)中。這些納米顆粒與該固體載體（基質(zhì)）的連接用于將乳膠顆粒連接（結(jié)合）到硅膠和二氧化硅單塊的示例性方法描述在巴雷托的美國(guó)專利5,532,279、美國(guó)專利5,324,752、J.P.哈欽森（J.P.Hutchinson）等人，色譜雜志2006,1109:10-18以及K.M.格倫（K.M.Glenn）等人，色譜雜志2007,1155:8-14中，這些文獻(xiàn)的披露內(nèi)容通過(guò)引用全文結(jié)合在此用于所有目的。用于將乳膠顆粒直接或間接靜電連接（結(jié)合）到有機(jī)基質(zhì)的示例性方法描述在史蒂文斯等人的美國(guó)專利4,927,539、史蒂文斯等人的美國(guó)專利4,351,909、史蒂文斯等人的美國(guó)專利4,519,905、巴雷托等人的美國(guó)專利4,383,047和美國(guó)專利5,532,279中，這些美國(guó)專利的披露內(nèi)容各自通過(guò)引用結(jié)合在此用于所有目的。在一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒共價(jià)結(jié)合到該固體載體的外表面。這可以通過(guò)在該固體載體和這些納米顆粒上使用互補(bǔ)官能團(tuán)來(lái)實(shí)現(xiàn)，它們可以與彼此反應(yīng)以形成一個(gè)共價(jià)鍵。示例性反應(yīng)性官能團(tuán)包括胺和羧酸/羧酸衍生物（例如，活化的酯等），它們可以被用于在該固體載體與這些納米顆粒之間形成酰胺鍵。在另一個(gè)實(shí)例中，點(diǎn)擊化學(xué)被用以共價(jià)鍵聯(lián)該兩種組分。在以上實(shí)例中，該固體載體和這些納米顆粒各自提供一個(gè)適合官能團(tuán)并且在足以在它們之間形成一個(gè)共價(jià)鍵的條件下與彼此接觸。在上文中描述用于將配體共價(jià)鍵聯(lián)到該固體載體和這些納米顆粒的方法同樣適用于在這些納米顆粒與該固體載體之間形成共價(jià)鍵。在一個(gè)特定實(shí)例中，這些納米顆粒通過(guò)靜電力結(jié)合到該基質(zhì)。舉例來(lái)說(shuō)，該官能化的固體載體（例如，官能化的硅膠）于一種適合介質(zhì)（例如，含水的介質(zhì)）中的一種漿液與這些官能化的納米顆粒（例如，官能化的聚合物乳膠顆粒）的一種漿液在足以用于使這些納米顆粒結(jié)合到該載體的表面的條件下接觸。被用以制備該固體載體漿液和該納米顆粒漿液的介質(zhì)優(yōu)選地被選擇，以便離子交換基團(tuán)帶電。在一個(gè)實(shí)例中，該介質(zhì)是一種含水的介質(zhì)，它任選地被調(diào)節(jié)到適合pH值。舉例來(lái)說(shuō)，一種陰離子交換載體（例如，具有氨基）懸浮于一種緩沖液系統(tǒng)（例如，乙酸銨）中，提供微酸性pH值（例如，約pH5）。在另一個(gè)實(shí)例中，一種陽(yáng)離子交換載體（例如，用磺化的配體官能化的二氧化硅）懸浮于具有足以產(chǎn)生去質(zhì)子化的酸性基團(tuán)的pH值（例如，約中性或微堿性pH值）的一種緩沖液系統(tǒng)（例如，乙酸銨緩沖液）中。在一個(gè)實(shí)例中，該納米顆粒漿液以足以提供過(guò)量納米顆粒的量使用。在另一個(gè)實(shí)例中，兩種漿液被混合（例如，使用一個(gè)機(jī)械攪拌器或震蕩器）足量的時(shí)間以獲得所希望的納米顆粒負(fù)載程度。諸種反應(yīng)物在適合溫度下被混合。在一個(gè)實(shí)例中，該溫度被選擇在約環(huán)境溫度與約40℃之間。產(chǎn)生的混合物然后可以被過(guò)濾，并且濾餅可以被徹底地洗滌并且干燥，以獲得一種本發(fā)明的組合物。這些納米顆粒與該固體載體的靜電連接可以可替代地通過(guò)“柱上結(jié)合”實(shí)現(xiàn)。舉例來(lái)說(shuō)，包括該離子交換固體載體（例如，官能化的硅膠或二氧化硅單塊）的一個(gè)柱與一個(gè)泵（例如，HPLC泵）連接，并且這些納米顆粒的一種溶液或懸浮液在足以用于使這些納米顆粒結(jié)合到該載體的表面的條件下通過(guò)該柱泵送。在這個(gè)程序期間，該柱保留在適合溫度（例如，環(huán)境溫度）下。納米顆粒通過(guò)該柱泵送足量的時(shí)間以獲得所希望的納米顆粒柱負(fù)載。在一個(gè)實(shí)例中，納米顆粒通過(guò)該柱泵送直到納米顆粒排出該柱，表明足夠負(fù)載。舉例來(lái)說(shuō)，通過(guò)對(duì)于納米顆粒（諸如乳膠衍生的顆粒）穿透監(jiān)測(cè)柱流出物流，可以確定納米顆粒負(fù)載的完成。被用于這種方法的柱可以是一個(gè)填充柱或一個(gè)單塊。在一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒通過(guò)基本上排除了在正常色譜條件下從該固體載體去除這些納米顆粒的任何方法連接到該固體載體的外表面。舉例來(lái)說(shuō)，這些納米顆粒當(dāng)經(jīng)受強(qiáng)電解質(zhì)或剪切力時(shí)將基本上保留結(jié)合到該固體載體，這些強(qiáng)電解質(zhì)或剪切力當(dāng)一種液體流動(dòng)通過(guò)由本發(fā)明提供的一個(gè)色譜物質(zhì)床時(shí)產(chǎn)生。所述“不可逆”連接方法包括共價(jià)結(jié)合、靜電連接（例如，具有相反電荷的部分之間的鹽橋形成）、聚合物纏結(jié)、氫鍵結(jié)、其組合以及提供足以基本上防止在典型的色譜條件（例如，典型的LC、快速色譜或HPLC）期間從該固體載體去除該納米顆粒的力的任何其他機(jī)制。本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)理解，在某些條件（例如，極高流動(dòng)速率、極端溫度、高鹽電導(dǎo)率（例如，高于5MNaCl）、強(qiáng)酸性或堿性條件）下，納米顆?？梢员粡脑摴腆w載體去除。另外，當(dāng)這些納米顆粒非共價(jià)連接到該固體載體時(shí)，即使在正常色譜條件下，小百分比的這些納米顆粒也可能被從該固體載體去除。然而，所述置換優(yōu)選地不賦予該柱的功能。在一個(gè)實(shí)施例中，這些納米顆粒可以間接結(jié)合到該基質(zhì)。間接連接可以經(jīng)由另一個(gè)層的納米顆粒來(lái)實(shí)現(xiàn)。舉例來(lái)說(shuō)，一個(gè)第一層的帶正電的（例如，胺化的）乳膠顆粒經(jīng)由靜電力結(jié)合到一個(gè)帶負(fù)電的固體載體（例如，用陽(yáng)離子交換基團(tuán)官能化的二氧化硅）。一個(gè)第二層的帶負(fù)電的乳膠顆粒（例如，磺化的乳膠顆粒）然后經(jīng)由靜電力連接到該第一層。在另一個(gè)實(shí)例中，這些納米顆粒的間接連接可以經(jīng)由一種分散劑來(lái)實(shí)現(xiàn)，該分散劑例如共價(jià)或經(jīng)由永久纏結(jié)不可逆結(jié)合到該固體載體，如巴雷托等人在美國(guó)專利5,532,279中所描述，該美國(guó)專利通過(guò)引用結(jié)合在此。在另一個(gè)實(shí)施例中，這些納米顆粒經(jīng)由永久物理纏結(jié)而結(jié)合到一種本發(fā)明的聚合有機(jī)基質(zhì)，例如，如巴雷托等人的美國(guó)專利5,532,279中所描述，該美國(guó)專利通過(guò)引用結(jié)合在此。本發(fā)明的示例性組合物在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明的組合物包括一種多孔二氧化硅基質(zhì)（例如，硅膠或二氧化硅單塊），該多孔二氧化硅基質(zhì)用一種陰離子交換配體（例如，包括氨基的配體）或一種陽(yáng)離子交換配體（例如，包括羧酸或磺酸基的配體）以及一種HILIC配體官能化。在一些實(shí)施例中，該HILIC與離子交換配體是同一配體。換句話說(shuō)，該極性基團(tuán)與該離子交換基團(tuán)是同一配體的組分。并有具有一種相反電荷的離子交換基團(tuán)的乳膠顆粒結(jié)合到該二氧化硅基質(zhì)的外表面。在一個(gè)實(shí)施例中，一種二氧化硅基質(zhì)（硅膠或二氧化硅單塊）用并有一個(gè)伯、仲、叔或季氨基的陰離子交換配體官能化，產(chǎn)生一種二氧化硅陰離子交換基質(zhì)（圖3、圖4）。并有羧酸和/或磺酸基的乳膠顆粒結(jié)合到該二氧化硅陰離子交換基質(zhì)的外表面(圖15)。根據(jù)這個(gè)實(shí)施例的示例性組合物概述于圖16中(參看例如，組合物30)。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)理解，圖16的表中列出的組合物的示例性帶有氨基的配體/基質(zhì)可以被任何其他帶有氨基的配體/基質(zhì)(諸如在此描述、通過(guò)引用結(jié)合在此的那些)取代。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，一種二氧化硅基質(zhì)(硅膠或二氧化硅單塊)用并有羧酸和/或磺酸基的陽(yáng)離子交換配體官能化，產(chǎn)生一種二氧化硅陽(yáng)離子交換基質(zhì)(圖2)。并有一個(gè)氨基的乳膠顆粒結(jié)合到該二氧化硅陰離子交換基質(zhì)的外表面。根據(jù)這個(gè)實(shí)施例的示例性組合物概述于圖16中(參看例如，組合物30-32和35-38)。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)理解，圖16的表中這些組合物的示例性帶有羧酸或磺酸的配體/基質(zhì)可以被任何其他帶有羧酸或磺酸的配體/基質(zhì)(諸如在此描述并且通過(guò)引用結(jié)合在此的那些)取代。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，本發(fā)明的組合物包括一種多孔聚合有機(jī)基質(zhì)(例如，一種聚苯乙烯二乙烯基苯共聚物)，該多孔聚合有機(jī)基質(zhì)用陰離子交換配體(例如，包括氨基的配體)或陽(yáng)離子交換配體(例如，包括羧酸或磺酸基的配體)官能化。并有具有一種相反電荷的離子交換基團(tuán)的乳膠顆粒結(jié)合到該二氧化硅基質(zhì)的外表面。在一個(gè)實(shí)施例中，一種PS-DVB基質(zhì)用并有一個(gè)伯、仲、叔或季氨基的陰離子交換配體官能化，產(chǎn)生一種PS-DVB陰離子交換基質(zhì)。并有羧酸和/或磺酸基的乳膠顆粒結(jié)合到該P(yáng)S-DVB陰離子交換基質(zhì)的外表面。在另一個(gè)實(shí)施例中，一種PS-DVB基質(zhì)用并有羧酸和/或磺酸基的陽(yáng)離子交換配體官能化，產(chǎn)生一種PS-DVB陽(yáng)離子交換基質(zhì)。并有伯、仲、叔或季氨基的乳膠顆粒結(jié)合到該P(yáng)S-DVB陽(yáng)離子交換基質(zhì)的外表面。根據(jù)這個(gè)實(shí)施例的一種示例性組合物列于圖16中。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)理解，圖16的表中這些組合物的示例性帶有羧酸或磺酸的配體/基質(zhì)可以被任何其他帶有羧酸或磺酸的配體/基質(zhì)(諸如在此描述并且通過(guò)引用結(jié)合在此的那些)取代。在另一個(gè)實(shí)施例中，一種基質(zhì)通過(guò)聚合封裝用并有羧酸和/或磺酸基的陽(yáng)離子交換配體官能化，產(chǎn)生一種聚合物封裝的HILIC/陽(yáng)離子交換基質(zhì)。并有伯、仲、叔或季氨基的乳膠顆粒結(jié)合到該基質(zhì)的外表面。根據(jù)這個(gè)實(shí)施例的示例性組合物列于圖16中。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)理解，圖16的表中這些組合物的示例性帶有羧酸或磺酸的配體/基質(zhì)可以被任何其他帶有羧酸或磺酸的配體/基質(zhì)（諸如在此描述并且通過(guò)引用結(jié)合在此的那些）取代。柱本發(fā)明還提供了諸個(gè)實(shí)施例，其中本發(fā)明的組合物被包含在一個(gè)容器中。該容器優(yōu)選地是一種色譜柱。示例性色譜柱包括金屬柱、玻璃柱以及由一種聚合材料（諸如塑料）制成的柱。金屬柱可以是常用于采用高壓的色譜程序（例如，HPLC、超高壓）的那些。塑料柱可以是常用于制備型色譜系統(tǒng)的那些。所述聚合柱經(jīng)常是一次性的并且通常被稱為濾筒。一個(gè)金屬柱可以具有襯有諸如聚醚醚酮（PEEK）的塑料的一個(gè)內(nèi)體積。因此，在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明提供了填充有一種分離介質(zhì)的一種色譜柱，該分離介質(zhì)包括一種本發(fā)明的組合物。在另一個(gè)實(shí)例中，本發(fā)明提供了包括一種本發(fā)明的單塊組合物的一種色譜柱。在又另一個(gè)實(shí)例中，本發(fā)明提供了在一個(gè)流通床中適合用作一種色譜介質(zhì)的一種本發(fā)明的組合物。IV.方法本發(fā)明的組合物和化合物可以使用本領(lǐng)域中已知的方法和在此描述的方法（參看例如，實(shí)例1到20）來(lái)合成?？赡苄枰獙?duì)那些方法進(jìn)行改變以合成某些實(shí)施例的組合物。那些替代性方法將對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員顯而易見。可用于制備本發(fā)明的組合物和化合物的起始物質(zhì)和試劑是可商購(gòu)的或可以使用領(lǐng)域認(rèn)可的方法來(lái)制備。用于制備反應(yīng)性硅烷基配體和制備示例性官能化的基質(zhì)的示例性方法提供于例如WO2006/088760（2006年2月10日提交）、WO2006/0054559（2004年9月10日提交）以及WO2005/047886（2004年10月4日提交）中，這些專利的披露內(nèi)容各自通過(guò)引用結(jié)合在此用于所有目的。其他反應(yīng)性硅烷基配體是可商購(gòu)的。一般來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的組合物可以如下制備：當(dāng)該多孔基質(zhì)的合成產(chǎn)生至少在表面上具有離子交換基團(tuán)（具有或不具有親水性特征）的一種物質(zhì)時(shí)，該物質(zhì)可以被用于下一步驟，在一個(gè)示例性實(shí)施例中，它使一個(gè)或多個(gè)HILIC和/或離子交換配體結(jié)合到該表面。當(dāng)該基質(zhì)的合成產(chǎn)生一個(gè)中性表面時(shí)，該基質(zhì)被離子交換配體（具有或不具有親水性特征）和HILIC配體共價(jià)改性。用該離子交換配體改性包括至少這些表面孔隙。分別地，或在該基質(zhì)存在下，合成納米顆粒。那些顆粒當(dāng)其合成產(chǎn)生至少在表面上具有離子交換基團(tuán)（具有或不具有親水性特征）的一種物質(zhì)時(shí)可以被使用而不進(jìn)一步改性。當(dāng)這些納米顆粒的合成產(chǎn)生一個(gè)中性表面時(shí)，這些納米顆粒被至少在表面上的離子交換基團(tuán)（具有或不具有親水性特征）改性。當(dāng)這些納米顆粒的合成分別地進(jìn)行時(shí)，該基質(zhì)接著與這些官能化的納米顆粒接觸。因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種用于制造本發(fā)明的組合物的方法，例如，用于分離一種液體樣品中的諸種分析物。在一個(gè)實(shí)施例中，該方法包括：(a)使離子交換納米顆粒直接或間接鍵結(jié)到一種多孔固體載體的一個(gè)外表面，其中該固體載體是無(wú)孔的，或包括界定延伸到該外表面中的開口的內(nèi)部孔隙的內(nèi)壁，并且其中該表面和/或這些內(nèi)壁用離子交換配體和HILIC配體共價(jià)官能化。這些配體包括具有一種第一電荷（選自正和負(fù)）的至少一個(gè)離子交換基團(tuán)。這些離子交換與HILIC配體可以同一配體或不同配體。這些納米顆粒包括了具有選自正和負(fù)的一種第二電荷的離子交換基團(tuán)。該第二電荷優(yōu)選地與該第一電荷相反。在某些實(shí)施例中，這些納米顆粒的平均直徑等于或大于這些孔隙的平均直徑。以上方法可以進(jìn)一步包括(b)使有機(jī)配體共價(jià)鍵結(jié)到該固體載體（包括這些內(nèi)壁）。另一種示例性方法包括：(a)提供一種無(wú)孔或一種固體載體，具有一個(gè)外表面和界定延伸到該外表面中的開口的內(nèi)部孔隙的內(nèi)壁；(b)使有機(jī)配體共價(jià)鍵結(jié)到該表面和/或這些內(nèi)壁。這些配體包括具有一種第一電荷（選自正和負(fù)）的至少一個(gè)離子交換基團(tuán)和一種HILIC配體。該方法進(jìn)一步包括(c)使納米顆粒直接或間接鍵結(jié)到該固體載體的該外表面（例如，不可逆）。這些納米顆粒包括了具有選自正和負(fù)的一種第二電荷的離子交換基團(tuán)。該第二電荷優(yōu)選地與該第一電荷相反。在某些實(shí)施例中，這些納米顆粒的平均直徑等于或大于這些孔隙的平均直徑。色譜方法本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種色譜方法（例如，用于分離一種液體樣品中的諸種分析物）。該方法包括使一種液體流動(dòng)通過(guò)包括一種本發(fā)明的組合物的分離介質(zhì)的一個(gè)單塊或一個(gè)填充床。在一個(gè)實(shí)例中，該液體包括一種分析物。舉例來(lái)說(shuō)，該液體包括各自基本上由該分離介質(zhì)保留的至少一種類型的陰離子（例如，有機(jī)和/或無(wú)機(jī)陰離子）和至少一種類型的陽(yáng)離子（例如，有機(jī)和/或無(wú)機(jī)陽(yáng)離子）。在另一個(gè)實(shí)例中，該液體包括各自基本上由該分離介質(zhì)保留的至少一種類型的陰離子（例如，有機(jī)和/或無(wú)機(jī)陰離子）、至少一種類型的陽(yáng)離子（例如，有機(jī)和/或無(wú)機(jī)陽(yáng)離子）以及至少一種類型的不帶電荷的分子（例如，親水性分子，諸如聚糖）。在又另一個(gè)實(shí)例中，以上方法可以被用于分離至少一種類型的陰離子（例如，有機(jī)和/或無(wú)機(jī)陰離子）和至少一種類型的陽(yáng)離子（例如，有機(jī)和/或無(wú)機(jī)陽(yáng)離子）。在一個(gè)實(shí)例中，可用于本發(fā)明的方法中的流動(dòng)相包括水。流動(dòng)相的水含量?jī)?yōu)選地在約0.1%（v/v）與100%（v/v）之間、更優(yōu)選地在約1%與約100%（v/v）之間、甚至更優(yōu)選地在約10%與約100%（v/v）之間、并且最優(yōu)選地在約20%與約100%（v/v）之間。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種分離一種液體樣品中的諸種分析物的方法，包括使所述液體樣品流動(dòng)通過(guò)包括一種本發(fā)明的組合物的一種色譜介質(zhì)。上文中針對(duì)本發(fā)明的組合物所概述的諸個(gè)實(shí)施例和諸個(gè)實(shí)例中的每一個(gè)都同樣適用于本發(fā)明的方法。舉例來(lái)說(shuō)，如上文中所概述的關(guān)于該固體載體的類型、這些固體載體顆粒的尺寸、孔隙尺寸、這些有機(jī)離子交換配體的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)、這些納米顆粒的類型和尺寸、這些離子交換基團(tuán)的類型和性質(zhì)、以及這些親水性部分的類型和性質(zhì)的每個(gè)實(shí)施例同樣適用于本發(fā)明的方法。在一個(gè)實(shí)例中，該方法采用一種組合物，該組合物包括一種多孔固體載體和結(jié)合到該固體載體的納米顆粒。這些組合物包括陽(yáng)離子交換基團(tuán)、陰離子交換基團(tuán)以及反相部分，其中這些陽(yáng)離子交換與陰離子交換基團(tuán)彼此充分地間隔開以避免它們之間的相互作用。這些反相部分由共價(jià)鍵聯(lián)到該固體載體的有機(jī)配體提供。在另一個(gè)實(shí)例中，該方法采用一種組合物，包括：(a)一種多孔固體載體。該多孔固體載體具有一個(gè)外表面和由內(nèi)壁界定的內(nèi)部孔隙。這些孔隙延伸到該外表面中的開口。該組合物進(jìn)一步包括(b)有機(jī)離子交換配體，共價(jià)結(jié)合到包括這些孔隙的內(nèi)壁的該固體載體。在不同實(shí)例中，這些配體包括任選地具有一種第一電荷（選自正和負(fù)）的離子交換基團(tuán)。該組合物進(jìn)一步包括(c)納米顆粒（例如，乳膠顆粒），包括任選地具有一種第二電荷（選自正或負(fù)）的離子交換基團(tuán)，其中該第二電荷與該第一電荷相反。這些納米顆粒直接或間接（例如，經(jīng)由納米顆粒的另外的層）結(jié)合（例如，經(jīng)由靜電引力）到該固體載體的外表面。本發(fā)明還提供了并有本發(fā)明的色譜介質(zhì)的裝置和系統(tǒng)。因此，在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該色譜介質(zhì)在一個(gè)流通床中適合用作一種色譜裝置。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，本發(fā)明提供了一種色譜柱，填充有本發(fā)明的色譜介質(zhì)。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該裝置是一個(gè)柱，填充有一種發(fā)明的色譜介質(zhì)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，柱硬件包括待用作色譜柱、具有不同形狀（包括圓柱形、圓錐形、矩形以及多邊形）的硬管或這些管的一個(gè)組合件。該管可以由本領(lǐng)域中已知的任何常規(guī)材料制成，包括金屬、玻璃、二氧化硅、塑料或其他聚合物，更優(yōu)選地是不銹鋼或玻璃。這個(gè)管的內(nèi)部尺寸的直徑、厚度、寬度或深度可以是從數(shù)微米到數(shù)米。該色譜介質(zhì)可以跨越該管的整個(gè)橫截面積，其中樣品的分離通過(guò)取決于分離模式軸向或徑向通過(guò)該管、更具體來(lái)說(shuō)軸向或直流色譜或徑向流色譜來(lái)進(jìn)行（李W-C（Lee,W-C）等人，“用于胰蛋白酶純化的徑向流親和性色譜（RadialFlowAffinityChromatographyforTrypsinPurification）”，蛋白質(zhì)純化（ProteinPurification）（書籍），ACS研討會(huì)系列（ACSSymposiumSeries）427，第8章，美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)（AmericanChemicalSociety），華盛頓哥倫比亞特區(qū)（Washington,D.C.），1990.）。該柱的內(nèi)表面可以是非反應(yīng)性的，或可以被處理以增加與色譜介質(zhì)表面的粘附。該管可以并有本領(lǐng)域中已知的任何可用的配件以將其與其他儀器、更具體來(lái)說(shuō)色譜儀器連接。在不同實(shí)施例中，本發(fā)明提供了一種色譜系統(tǒng)。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，該系統(tǒng)是一種高效液相色譜（HPLC）系統(tǒng)。示例性系統(tǒng)包括一個(gè)或多個(gè)分離裝置，該一個(gè)或多個(gè)分離裝置包含一種本發(fā)明的色譜介質(zhì)。一種示例性系統(tǒng)包括與如下裝置聯(lián)機(jī)并且流體連通的一個(gè)或多個(gè)分離裝置：用于調(diào)節(jié)洗脫劑向該分離裝置的供應(yīng)的一個(gè)或多個(gè)裝置，例如，一個(gè)洗脫劑產(chǎn)生器，一個(gè)泵；一個(gè)或多個(gè)檢測(cè)裝置，例如，一個(gè)質(zhì)譜和/或熒光檢測(cè)器；以及將一種樣品引入到該分離裝置上的一個(gè)或多個(gè)構(gòu)件，例如，一個(gè)樣品注射閥。通過(guò)展示，用于HPLC分析的示例性系統(tǒng)典型地包括使用包含一種電解質(zhì)的一種洗脫劑的一個(gè)色譜分離區(qū)，和一個(gè)洗脫劑抑制階段，繼而典型地通過(guò)質(zhì)譜儀或一個(gè)熒光檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。在該色譜分離階段中，一種注射的樣品的聚糖組分從一個(gè)分離柱洗脫。洗脫劑由一個(gè)源供應(yīng)，該源可以包括包含預(yù)制成的洗脫劑的一個(gè)容器，或它可以由一個(gè)洗脫劑產(chǎn)生器產(chǎn)生。洗脫劑產(chǎn)生器在本領(lǐng)域中已知。一種示例性洗脫劑產(chǎn)生器在美國(guó)專利號(hào)7,767,462中披露。通過(guò)以下實(shí)例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。這些實(shí)例不旨在限定或限制本發(fā)明的范圍。實(shí)例制備離子交換/HILIC雙模式相實(shí)例1.制備相12（圖2）在一個(gè)500mL圓底燒瓶中制備11.58g氯化偏苯三酸酐（1，西格瑪-奧德里奇公司（Sigma-Aldrich））于100mL甲苯（無(wú)水）中的一種溶液，然后將該溶液冷卻到5℃。用一個(gè)加料漏斗向這個(gè)溶液中緩慢添加17.2g雙(三甲氧基硅烷基丙基)胺（2，蓋勒斯特公司（Gelest），美國(guó)賓夕法尼亞州莫里斯維爾（Morrisville,PA,U.S.A））、10mL三乙胺（10.0mL）于50mL甲苯中的一種溶液。在環(huán)境溫度下攪拌3小時(shí)之后，將反應(yīng)混合物濾出，并且用10mL甲苯洗滌濾餅。然后使濾液在真空下在50℃下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，以得到25g呈帶棕色粘性液體狀的硅烷基配體3。將25g硅烷基配體3和50g干燥的二氧化硅顆粒（粒度，3μm；孔隙尺寸，；表面積，300m2/g）在250mL甲苯中混合。在小心地分散直到均一之后，將反應(yīng)混合物攪拌并且回流48小時(shí)。將官能化的二氧化硅顆粒濾出，并且用丙酮徹底地洗滌，以得到約60g相11。在配備有一個(gè)機(jī)械攪拌器的一個(gè)250mL燒瓶中將10g相11分散于150mL甲酸水溶液（1%）中。在環(huán)境溫度下攪拌20小時(shí)之后，將反應(yīng)混合物濾出，然后用100mL丙酮繼而100mL甲苯洗滌濾餅。在配備有一個(gè)機(jī)械攪拌器的一個(gè)250mL燒瓶中將濾餅再分散于150mL甲苯（無(wú)水）中。在回流48小時(shí)之后，將官能化的二氧化硅顆粒濾出，并且用丙酮徹底地洗滌，以得到約10g相12。以相同方式，對(duì)應(yīng)地從二氧化硅顆粒（粒度，3μm；孔隙尺寸，；表面積，200m2/g）和原始二氧化硅顆粒（粒度，3μm；孔隙尺寸，；表面積，100m2/g）制備相13和14。實(shí)例2.制備相15（圖3）在一個(gè)250mL圓底燒瓶中將10g脲丙基三甲氧基硅烷（4，蓋勒斯特公司）和2g3-氨基丙基三甲氧基硅烷（5，蓋勒斯特公司）分散于30mL甲苯（無(wú)水）中。添加15g原始硅膠（粒度，3μm；孔隙尺寸，；表面積，300m2/g）到以上混合物中，然后在機(jī)械攪拌下將它混合直到均一。在回流下維持48小時(shí)之后，將反應(yīng)混合物過(guò)濾，并且用乙腈洗滌濾餅，并且在真空烘箱中在環(huán)境溫度下干燥20小時(shí)，以得到相15。實(shí)例3.制備相17（圖4）在一個(gè)250mL圓底燒瓶中將10g(3-縮水甘油醚氧基丙基)三甲氧基硅烷（6，蓋勒斯特公司）和15g原始硅膠（粒度，5μm；孔隙尺寸，；表面積，300m2/g）分散于50mL甲苯（無(wú)水）中。在機(jī)械攪拌下混合直到均一之后，將反應(yīng)混合物保持在回流下48小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，并且用乙腈洗滌濾餅，并且在真空烘箱中在環(huán)境溫度下干燥20小時(shí)，以得到相16。在一個(gè)40mL玻璃小瓶中將4.0g三甲胺（45%wt于水中，奧德里奇）溶解于15mL二噁烷中。添加2.0g相16到小瓶中，并且用一個(gè)螺帽密封。將產(chǎn)生的混合物混合直到均一。將反應(yīng)混合物保持在50℃下在輕緩翻滾下40分鐘。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，繼而用甲醇（50mL）、0.1%磷酸水溶液（100mL）、去離子水（50mL）以及乙腈（50mL）洗滌濾餅，以得到相17。實(shí)例4.制備相18（圖5）在一個(gè)500mL圓底燒瓶中將45g聚(丁二烯順丁烯二酸（7，42%于水中，多科學(xué)公司（Polysciences））、7g過(guò)氧化二異丙苯（起始劑，奧德里奇）以及55g原始硅膠（粒度，5μm；孔隙尺寸，；表面積，300m2/g）分散于200mL丙酮中。在聲處理下混合直到均一之后，使產(chǎn)生的混合物在真空下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，以小心地去除所有揮發(fā)物。然后在氮?dú)夥諊職v時(shí)2-3小時(shí)將反應(yīng)物加熱到190℃，并且保持在這個(gè)溫度下在10旋轉(zhuǎn)/分鐘的速率下16小時(shí)。在將反應(yīng)物冷卻到環(huán)境溫度之后，用丙酮使處理過(guò)的二氧化硅進(jìn)行一個(gè)索氏萃取（SoxhletExtraction）。然后將洗滌過(guò)的二氧化硅在真空烘箱中在環(huán)境溫度下干燥20小時(shí)，以得到相18。以相同方式，對(duì)應(yīng)地從原始二氧化硅顆粒（粒度，3μm；孔隙尺寸，200；表面積，200m2/g）和原始二氧化硅顆粒（粒度，3μm；孔隙尺寸，；表面積，100m2/g）制備相19和20。制備凝聚的陽(yáng)離子交換/陰離子交換/HILIC多模式相實(shí)例5.制備相30、31以及32使用高壓漿液填充技術(shù)用相12填充一個(gè)50mm×3.0mm（i.d.）316不銹鋼HPLC柱外殼。分別地，用一種乙酸銨緩沖液（2M，pH5）將10mL胺化的乳膠溶液（41）調(diào)節(jié)到pH5。將產(chǎn)生的乳膠溶液轉(zhuǎn)移到一個(gè)250mLHPLC洗脫劑瓶中。使用一個(gè)HPLC泵來(lái)用一種乙酸銨緩沖液（0.1M，pH5）在0.2mL/min下洗滌填充柱30分鐘。然后用乳膠溶液在0.2mL/min下處理柱直到觀測(cè)到乳膠顆粒流出柱的出口。最終，用一種乙酸銨緩沖液（0.1M，pH5）、去離子水以及80%乙腈/20%乙酸銨（0.1M，pH5）洗滌柱，以得到填充有相30的一個(gè)柱。以相同方式對(duì)應(yīng)地從相13和14制備相31和32。實(shí)例6.制備相33使用高壓漿液填充技術(shù)用相15填充一個(gè)50mm×3.0mm（i.d.）316不銹鋼HPLC柱外殼。分別地，用一種乙酸銨緩沖液（2M，pH5）將10mL羧酸酯乳膠溶液（42）調(diào)節(jié)到pH5。將產(chǎn)生的乳膠溶液轉(zhuǎn)移到一個(gè)250mLHPLC洗脫劑瓶中。使用一個(gè)HPLC泵來(lái)用一種乙酸銨緩沖液（0.1M，pH5）在0.2mL/min下洗滌填充柱30分鐘。然后用乳膠溶液在0.2mL/min下處理柱直到觀測(cè)到乳膠顆粒流出柱的出口。最終，用一種乙酸銨緩沖液（0.1M，pH5）、去離子水以及80%乙腈/20%乙酸銨（0.1M，pH5）洗滌柱，以得到填充有相33的一個(gè)柱。實(shí)例7.制備相34在一個(gè)1L燒杯中將10g相17分散于100mL乙酸銨緩沖液（100mM，pH5）中。分別地，在一個(gè)燒杯中用一種乙酸銨緩沖液（2M，pH5）將100mL磺化的乳膠溶液（43）調(diào)節(jié)到pH5。將乳膠溶液添加到二氧化硅漿液中，并且將產(chǎn)生的混合物在環(huán)境溫度下聲處理3小時(shí)。將官能化的二氧化硅顆粒濾出，并且用乙酸銨緩沖液（0.1M，pH5）和丙酮徹底地洗滌，以得到相34。實(shí)例8.制備相35、36、37使用高壓漿液填充技術(shù)用相18填充一個(gè)50mm×3.0mm（i.d.）316不銹鋼HPLC柱外殼。分別地，用一種磷酸鹽緩沖液（0.2M，pH7到8）將10mL胺化的乳膠溶液（41）調(diào)節(jié)到pH7-8。將產(chǎn)生的乳膠溶液轉(zhuǎn)移到一個(gè)250mLHPLC洗脫劑瓶中。使用一個(gè)HPLC泵來(lái)用一種乙酸銨緩沖液（0.1M，pH5）在0.2mL/min下洗滌填充柱30分鐘。然后用乳膠溶液在0.2mL/min下處理柱直到觀測(cè)到乳膠顆粒流出柱的出口。最終，用一種乙酸銨緩沖液（0.1M，pH5）、去離子水以及80%乙腈/20%乙酸銨（0.1M，pH5）洗滌柱，以得到填充有相35的一個(gè)柱。以相同方式對(duì)應(yīng)地從相19和20制備相36和37。實(shí)例9.制備相38在一個(gè)1L燒杯中將5g相21（BioBasicSCX相，賽默飛世爾科技公司（ThermoFisherScientific））分散于100mL乙酸銨緩沖液（100mM，pH5）中。分別地，在一個(gè)燒杯中用一種乙酸銨緩沖液（2M，pH5）將50mL胺化的乳膠溶液（41）調(diào)節(jié)到pH5。將乳膠溶液添加到二氧化硅漿液中，并且將產(chǎn)生的混合物在環(huán)境溫度下聲處理3小時(shí)。將官能化的二氧化硅顆粒濾出，并且用乙酸銨緩沖液（0.1M，pH5）和丙酮徹底地洗滌，以得到相38。色譜評(píng)估實(shí)例10.相30的溶劑作用圖6示出了保留相關(guān)性相較于有機(jī)溶劑，對(duì)應(yīng)地使用萘、山梨糖醇、Na+以及Cl-作為RP、HILIC、陽(yáng)離子交換以及陰離子交換樣本。保留時(shí)間以保留系數(shù)k'的形式描繪。注意，k'=tr-tm/tm，其中tr是峰保留時(shí)間，并且tm是流動(dòng)相流動(dòng)通過(guò)柱的時(shí)間。如圖6中所示，萘的保留隨流動(dòng)相乙腈增加而減少。在超出40%乙腈下，在相30上幾乎觀測(cè)不到疏水性保留。另一方面，高度親水性中性分子山梨糖醇在低于50%乙腈下不展現(xiàn)保留，并且當(dāng)溶劑含量升高超出50%乙腈時(shí)展現(xiàn)增加的有機(jī)溶劑保留。從70%乙腈開始，山梨糖醇保留引人注目地隨流動(dòng)相溶劑含量而增加，表明強(qiáng)HILIC相互作用。如圖6中所示，相30提供強(qiáng)陽(yáng)離子交換和陰離子交換保留，并且離子分析物（諸如Na+和Cl-）的保留是溶劑相關(guān)的。隨著有機(jī)溶劑含量增加，固定相離子交換官能團(tuán)的電離減少，導(dǎo)致離子分析物（例如，Na+和Cl-）對(duì)于固定相上的相反電荷的親和力更小或保留更低。然而，因?yàn)榱鲃?dòng)相離子（例如，銨）的電離也同時(shí)減少，所以流動(dòng)相離子強(qiáng)度變得更弱，導(dǎo)致對(duì)Na+和Cl-離子的保留時(shí)間更長(zhǎng)。因此，離子交換過(guò)程是一種相對(duì)現(xiàn)象，并且離子分析物關(guān)于溶劑含量的保留相關(guān)性是多種因素的組合。測(cè)試條件：柱，相30（HILIC/弱陽(yáng)離子交換/強(qiáng)陰離子交換多模式相），3μm直徑平均粒度，3×50mm柱直徑和長(zhǎng)度；流動(dòng)相，不同比率的乙腈/100mM甲酸銨，pH3.65緩沖液；流動(dòng)速率，0.6mL/min；注射體積，1μL；溫度，30℃；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器；以及測(cè)試樣本（1mg/mL于50%乙腈中）：1.萘；2.山梨糖醇；3.氯化鈉。電霧式檢測(cè)器噴灑流出物流，并且產(chǎn)生可以按與分析物濃度成比例的電流形式測(cè)量的帶電的顆粒。關(guān)于電霧式檢測(cè)器的細(xì)節(jié)可以見于美國(guó)專利號(hào)6,544,484和6,568,245中，這些專利特此通過(guò)引用完全結(jié)合在此。實(shí)例11.相30的緩沖液濃度作用圖7示出了關(guān)于流動(dòng)相緩沖液濃度的保留相關(guān)性。萘（疏水性中性分子）的保留展現(xiàn)極少保留并且?guī)缀醪皇芫彌_液濃度影響。山梨糖醇在測(cè)試條件（80%乙腈）下示出了良好保留（k'>4），它隨緩沖液濃度而逐漸增加。Na+和Cl-的保留隨緩沖液濃度增加而減少，表明典型的陽(yáng)離子交換和陰離子交換機(jī)制。測(cè)試條件：柱，相30（HILIC/弱陽(yáng)離子交換/強(qiáng)陰離子交換多模式相），3μm直徑平均粒度，3×50mm柱直徑和長(zhǎng)度；流動(dòng)相，乙腈/甲酸銨，pH3.65緩沖液（在不同緩沖液濃度下），80/20（v/v）；流動(dòng)速率，0.6mL/min；注射體積，1μL；溫度，30℃；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器；以及測(cè)試樣本（1mg/mL于50%乙腈中）：1.萘；2.山梨糖醇；3.氯化鈉。實(shí)例12.相30的pH值作用為了研究pH值作用，使用不同pH值水平（從3.5到4.5）下的包含80%乙腈（v/v）和10mM甲酸銨緩沖液的流動(dòng)相將萘、山梨糖醇以及NaCl注射到柱上。圖8示出了關(guān)于流動(dòng)相pH值的保留相關(guān)性。萘（疏水性中性分子）的保留展現(xiàn)極少保留并且?guī)缀醪皇躳H值影響，而山梨糖醇示出了良好保留（k'>4），其隨pH值而增加。另一方面，相30在所測(cè)試的所有pH值水平下對(duì)于Cl-都展現(xiàn)恒定保留，而對(duì)于Na+的保留隨pH值而增加。這些觀測(cè)結(jié)果的原因可以假定如下：相30在WCX區(qū)域（在內(nèi)部孔隙區(qū)域中）與SAX區(qū)域（在外表面上）之間具有一種獨(dú)特的空間分隔。因此，陰離子交換保留受外表面上的完全胺化的納米聚合物珠粒支配，這些珠粒的電離不受pH值變化影響。盡管針對(duì)銨離子校正緩沖液濃度，因此甲酸鹽濃度在不同pH值水平下輕微地變化，但這個(gè)作用必須是可忽略的，因?yàn)閷?duì)于Cl-的保留對(duì)于pH值幾乎獨(dú)立。對(duì)于Na+的保留的強(qiáng)pH值相關(guān)性由以下因素引起。首先，固定相WCX官能團(tuán)（pKa1約1.89并且pKa2約5.51）的電離嚴(yán)重受pH值影響：增加pH值導(dǎo)致WCX官能團(tuán)電離更高或?qū)τ陉?yáng)離子（例如，Na+）的保留更長(zhǎng)。另外，二氧化硅表面上的非衍生化的硅烷醇的電離隨pH值而增加，導(dǎo)致Na+與固定相之間的靜電引力增加，使其保留甚至更高。測(cè)試條件：柱，相30（HILIC/弱陽(yáng)離子交換/強(qiáng)陰離子交換多模式相），3μm直徑平均粒度，3×50mm柱直徑和長(zhǎng)度；流動(dòng)相，乙腈/100mM甲酸銨緩沖液（在不同pH值水平下），80/20（v/v）；流動(dòng)速率，0.6mL/min；注射體積，1μL；溫度，30℃；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器；以及測(cè)試樣本（1mg/mL于50%乙腈中）：1.萘；2.山梨糖醇；3.氯化鈉。實(shí)例13.AEX/CEX/RP與AEX/CEX/HILIC多模式相之間的比較為了研究一種分離介質(zhì)在HILIC模式下的保留行為，將具有不同電荷狀態(tài)的三種高度親水性分子用作測(cè)試樣本—內(nèi)消旋-赤藻糖醇（中性）、氨基丁三醇?jí)A以及甘油酸（陰離子）。為了比較，在相同條件下測(cè)試相30（HILIC/弱陽(yáng)離子交換/強(qiáng)陰離子交換多模式）和一種商業(yè)反相/弱陰離子交換/強(qiáng)陽(yáng)離子交換多模式柱。圖9顯示，相30提供了比TrinityP1相顯著更強(qiáng)的HILIC相互作用，如對(duì)于中性親水性分子內(nèi)消旋-赤藻糖醇的k'的四倍系數(shù)增加（相30的k'=2.12并且TrinityP1相的k'=0.53）所展示。另外，堿性樣本氨基丁三醇在相30上強(qiáng)烈保留，很可能由在這種條件下陽(yáng)離子交換與氫鍵結(jié)位點(diǎn)處的強(qiáng)相互作用的組合引起。與TrinityP1相對(duì)比，相30展現(xiàn)不同和互補(bǔ)的選擇性。測(cè)試條件：柱，相30和AcclaimTrinityP1（反相/弱陰離子交換/強(qiáng)陽(yáng)離子交換多模式相，賽默飛世爾科技公司），3μm直徑平均粒度，3×50mm柱直徑和長(zhǎng)度；流動(dòng)相，乙腈/100mM甲酸銨，pH3.65，80/30（v/v）；流動(dòng)速率，0.5mL/min；注射體積，2.5μL；溫度，30℃；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器；以及測(cè)試樣本（0.3mg/mL去離子水）：1.內(nèi)消旋-赤藻糖醇；2.氨基丁三醇?jí)A；3.甘油酸。應(yīng)用實(shí)例14.在相30上分離諸種離子鹽形成在用以改善藥物的生物藥學(xué)和物理化學(xué)特性的藥物開發(fā)中是重要的。所有藥物中有大約50%被配制成鹽形式。廣泛選擇的無(wú)機(jī)和有機(jī)離子可以被用作藥物平衡離子。非常令人希望的是，在同一分析內(nèi)并且在合理量的時(shí)間中分離藥學(xué)上重要的陰離子和陽(yáng)離子。圖10展示了，相30提供了用于分離單和多價(jià)陰離子和陽(yáng)離子的所希望的選擇性—使用一種梯度法獲得總共十二種離子（包括鈉、鉀、鎂、鈣、氯離子、溴離子、硝酸根、草酸根、檸檬酸根、硫酸根、硫代硫酸根以及檸檬酸根）的基線分辨率。這種所希望的特征由獨(dú)特相設(shè)計(jì)提供，其中小心地使陽(yáng)離子交換能力與陰離子交換能力平衡以獲得對(duì)于離子分離的最佳選擇性。應(yīng)注意到，這種分離不能在任何其他分離介質(zhì)上實(shí)現(xiàn)。關(guān)于蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）的細(xì)節(jié)可以見于美國(guó)專利號(hào)7,847,936和7,911,609、8,089,627以及國(guó)際專利公布號(hào)WO2010068272A1中，這些文獻(xiàn)特此通過(guò)引用完全結(jié)合在此。測(cè)試條件：柱，相30，3μm直徑平均粒度，3×50mm柱直徑和長(zhǎng)度；流動(dòng)相，A—去離子水，B—100mM甲酸銨，pH3.65；梯度，10%B持續(xù)1分鐘，然后在10分鐘中勻變達(dá)到100%B，最終再保留在100%B下9分鐘；流動(dòng)速率，0.6mL/min；注射體積，5μL；溫度，30℃；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器；以及測(cè)試樣本（各自0.05-0.10mg/mL于去離子水中）：1.磷酸根；2.鈉；3.鉀；4.氯離子；5.溴離子；6.硝酸根；7.檸檬酸根；8.草酸根；9.硫酸根；10.鎂；11.鈣；12.硫代硫酸根。實(shí)例15.在相30上分離諸種糖諸種碳水化合物的分析可以使用離子色譜、反相色譜或氣相色譜以及親水性相互作用液體色譜（HILIC）來(lái)實(shí)現(xiàn)。在全部之中，HILIC是一種有吸引力的方法，因?yàn)樗峁┝藢?duì)極性、親水性化合物（諸如碳水化合物）的優(yōu)越分離，易于使用，并且在傳統(tǒng)反相方法失效的情況下良好地工作。相30除了陰離子交換和陽(yáng)離子交換特性之外提供了HILIC相互作用。圖11示出了，單糖（海藻糖和葡萄糖）和二糖（蔗糖、麥芽糖以及乳糖）在一個(gè)50mm長(zhǎng)的柱上在80%乙腈中在60℃下可以被充分地保留并且分離。測(cè)試條件：柱，相30，3μm直徑平均粒度，3×50mm柱直徑和長(zhǎng)度；流動(dòng)相，乙腈/100mM甲酸銨，pH3.65，80/20（v/v）；流動(dòng)速率，0.5mL/min；注射體積，2μL；溫度，60℃；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器；以及測(cè)試樣本（各自1mg/mL于80%乙腈中）：海藻糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖以及乳糖。實(shí)例16.在相30上分離青霉素G與鉀活性藥物成分（API）和平衡離子的測(cè)定在藥物開發(fā)中是重要的分析。歸因于這些藥物相關(guān)分子的多種多樣的電荷和疏水性，挑戰(zhàn)性高的是同時(shí)進(jìn)行API和對(duì)應(yīng)的平衡離子的分離。青霉素G是一種抗生素化合物并且通常被配制成鉀鹽形式。由于API和平衡離子的高親水性質(zhì)，因此不可能在任何RP柱上在同一分析內(nèi)分析兩種組分。如圖12中所示，多模式介質(zhì)相30提供了青霉素G與鉀離子的基線分離，具有極佳分辨率、良好峰形以及充足保留。測(cè)試條件：柱，相30，3μm直徑平均粒度，3×50mm柱直徑和長(zhǎng)度；流動(dòng)相，乙腈/去離子水/100mM甲酸銨，pH3.65，25/50/25（v/v/v）；流動(dòng)速率，0.5mL/min；注射體積，1μL；溫度，30℃；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器；以及測(cè)試樣本（1mg/mL去離子水）：青霉素G、鉀鹽。實(shí)例17.在相30上分離二甲雙胍與氯離子1,1-二甲基雙胍鹽酸鹽（二甲雙胍），配制成氯化物鹽形式的一種高親水性堿性藥物，是一種抗糖尿病劑，它降低血糖水平并且改善胰島素敏感性。圖13展示了二甲雙胍與其平衡離子—氯離子使用相30在HILIC模式下的分離，具有極佳分辨率、良好峰形以及充足保留。測(cè)試條件：柱，相30，3μm直徑平均粒度，3×50mm柱直徑和長(zhǎng)度；流動(dòng)相，乙腈/100mM甲酸銨，pH3.65，80/20（v/v）；流動(dòng)速率，0.5mL/min；注射體積，1μL；溫度，30℃；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器；以及測(cè)試樣本（1mg/mL去離子水）：二甲雙胍氯化氫。實(shí)例18.在相33上分離二甲雙胍與氯離子圖13展示了二甲雙胍與其平衡離子—氯離子使用相33的分離。由于分析物的親水性質(zhì)和由這個(gè)相促進(jìn)的多種保留機(jī)制（HILIC/WAX/WCX），所以API和其平衡離子可以在同一分析內(nèi)在HILIC模式下測(cè)定，具有極佳分辨率、良好峰形以及充足保留。測(cè)試條件：柱，相33，3μm直徑平均粒度，3×50mm柱直徑和長(zhǎng)度；流動(dòng)相，乙腈/100mM乙酸銨，pH5.0，90/10（v/v）；流動(dòng)速率，0.425mL/min；注射體積，1μL；溫度，30℃；檢測(cè)，基于氣霧的檢測(cè)器；以及測(cè)試樣本（1mg/mL去離子水）：二甲雙胍氯化氫。制備納米尺寸的帶電的聚合物珠粒實(shí)例19.制備胺化的乳膠顆粒（41）添加32g乙烯基苯甲基縮水甘油醚（VBGE）和2.7g80%二乙烯基苯（DVB）的一種混合物到包含4.0g70%TritonX-405（一種非離子乙氧基化的烷基酚）、2.1g過(guò)硫酸鉀以及15g8%焦亞硫酸鉀溶液的308g的一種水溶液中。用氮?dú)鈱?duì)混合物脫氣20分鐘。將瓶加蓋并且嵌入到保留在32℃下的一個(gè)水浴中持續(xù)18小時(shí)，以完成聚合。然后向產(chǎn)生的乳膠中添加19.2g70%TritonX-405溶液，以便使其穩(wěn)定化。將白色不透明混合物通過(guò)一個(gè)GF/A玻璃纖維濾紙過(guò)濾，以去除任何凝結(jié)物并且以獲得336g乳膠。向336g以上乳膠中添加62.4g1M硝酸和91.2g5M甲基二乙醇胺的一種混合物，以形成胺化的、季銨化的乳膠。攪拌混合物10分鐘。添加144g1M硝酸和384g5M甲基二乙醇的另一種混合物，并且在50℃下繼續(xù)攪拌12小時(shí)，以得到胺化的乙烯基苯甲基縮水甘油醚/二乙烯基苯乙烯共聚物41（6%交聯(lián)，顆粒直徑：70nm）。實(shí)例20.制備羧化的乳膠顆粒（42）添加12g甲基丙烯酸縮水甘油酯（GMA）和0.6g80%二乙烯基苯（DVB）的一種混合物到包含10g70%TritonX-405（一種非離子乙氧基化的烷基酚）、2.5g過(guò)硫酸鉀以及0.6g焦亞硫酸鉀的400g的一種水溶液中。用氮?dú)鈱?duì)混合物脫氣20分鐘。將瓶加蓋并且嵌入到保留在32℃下的一個(gè)水浴中持續(xù)18小時(shí)，以完成聚合。然后向產(chǎn)生的乳膠中添加19.2g70%TritonX-405溶液，以便使其穩(wěn)定化。向以上乳膠中添加12g二乙基甲胺于25g去離子水中的一種溶液。在50℃下攪拌產(chǎn)生的混合物2小時(shí)。然后添加120g氫氧化鈉水溶液（50%wt）到乳膠中。使產(chǎn)生的混合物在80℃下翻滾24小時(shí)。在冷卻到室溫之后，將乳膠溶液通過(guò)一個(gè)GF/A玻璃纖維濾紙過(guò)濾，得到羧化的乳膠42（5%交聯(lián)，顆粒直徑：90nm）。實(shí)例21.制備磺化的乳膠顆粒（43）在氮?dú)庀孪?.1g氯化鈣二水合物于水（350g）中的一種脫氣的溶液中添加21.66g苯乙烯、1.42g商業(yè)80.5%二乙烯基苯、0.14gVazo33（2,2'-偶氮雙(2,4-二甲基-1-4-甲氧基戊腈)）、3.66gAtlox3403F（陰離子與非離子表面活性劑的摻混物）以及1.09gAtlox3404F的一種混合物。將瓶加蓋，并且使其在32℃下翻滾17小時(shí)。然后向混合物中添加22gIgepalDM880（乙氧基化的二烷基酚）。再次將瓶加蓋，并且使其在32℃下翻滾24小時(shí)。將反應(yīng)混合物使用沃特曼公司（Whatman）的GF/A、GF/D以及GF/F過(guò)濾器過(guò)濾，以得到中間物乳膠。通過(guò)添加92.4g濃硫酸到20g過(guò)濾過(guò)的乳膠中來(lái)使以上乳膠磺化。向混合物中添加氯磺酸（137g）。將混合物在80℃下加熱2小時(shí)，并且然后冷卻到60℃。將冷卻的混合物添加到3.22M氫氧化鈉（1800mL）中，然后通過(guò)一個(gè)沃特曼公司編號(hào)541過(guò)濾器過(guò)濾以去除凝結(jié)物，以得到磺化的4-甲基苯乙烯/二乙烯基苯乙烯共聚物43（5%交聯(lián)，顆粒直徑：150nm）。本發(fā)明除其他之外提供了新穎花青染料、并有這些染料的結(jié)合物以及使用這些染料和結(jié)合物的方法。雖然已經(jīng)提供了具體實(shí)例，但以上描述是說(shuō)明性的并且并非限制性的?？梢詫⑾惹懊枋龅膶?shí)施例的特征中的任一者或多者與本發(fā)明中的任何其他實(shí)施例的一種或多種特征以任何方式組合。此外，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在審閱本說(shuō)明書后將變得清楚本發(fā)明的多種變化形式。因此，本發(fā)明的范圍不應(yīng)參考以上描述來(lái)確定，而是應(yīng)參考所附權(quán)利要求以及其等效物的全部范圍來(lái)確定。在本申請(qǐng)中引用的所有公布和專利文獻(xiàn)出于所有目的通過(guò)引用以其全文結(jié)合，程度如同如此單獨(dú)地指示每個(gè)單獨(dú)的公布或?qū)＠墨I(xiàn)一樣。諸位申請(qǐng)人在本文件中對(duì)不同參考文獻(xiàn)的引用并非是承認(rèn)任何具體的參考文獻(xiàn)是他們的發(fā)明的“現(xiàn)有技術(shù)”。