本發(fā)明涉及中藥領域，具體涉及一種新型離子液體輔助的中藥烏藥活性組分綠色提取方法。

背景技術(shù)：

1、烏藥(linderae?radix)是一種主要生長在中國南方的傳統(tǒng)中藥，來源于樟科山胡椒屬植物烏藥(lindera?aggregate(sims)kosterm)的干燥根。烏藥因其獨特的理氣止痛功效，在中醫(yī)藥領域有著廣泛的應用。烏藥的藥理活性主要歸因于其中多種化學成分，尤其是倍半萜、倍半萜內(nèi)酯、揮發(fā)油和生物堿等疏水性化合物。研究表明，這些疏水性成分對烏藥的理氣止痛、抗炎和神經(jīng)保護等藥理作用起著至關重要的作用。

2、倍半萜和倍半萜內(nèi)酯作為烏藥中的主要活性成分，已被證明具有顯著的抗炎、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用。此外，烏藥中的揮發(fā)油成分在緩解胃腸痙攣、改善消化不良等方面也表現(xiàn)出顯著療效。生物堿(尤其是疏水性生物堿)則在抗氧化、抗抑郁和神經(jīng)保護方面顯示出獨特的藥理活性。這些疏水性成分的獨特藥理活性決定了它們在烏藥應用中的核心地位，因此，對這些成分的高效提取和檢測具有重要意義。

3、目前烏藥中活性成分的提取通常采用有機溶劑輔助的超聲提取和熱回流提取等方法。然而這些傳統(tǒng)方法存在明顯的不足，如提取時間長、樣品用量大、有毒溶劑消耗多，且難以實現(xiàn)對疏水性化合物的高效選擇性提取。液固小型化提取小型化液固提取是一種可靠的復雜基質(zhì)樣品預處理技術(shù)，已成功應用于包括食品、植物和傳統(tǒng)醫(yī)學在內(nèi)的多個領域。因所需樣品量少、吸附劑和洗脫液用量小以及環(huán)保等優(yōu)勢，基質(zhì)固相分散微萃取成為提取復雜基質(zhì)中活性成分的一種理想技術(shù)。

4、小型化液固提取液固小型化提取中吸附材料和洗脫溶劑的選擇對目標化合物的提取效果至關重要。目前常用的吸附劑在疏水性化合物提取中表現(xiàn)出有限的選擇性。在洗脫溶劑方面，傳統(tǒng)的有機溶劑如甲醇、乙腈等雖具有效的洗脫能力，但其環(huán)境毒性及不可持續(xù)性成為限制其應用的主要瓶頸。

5、近年來，新型離子液體新型離子液體因其綠色環(huán)保的特性逐漸成為一種新型的綠色溶劑，并被廣泛應用于植物活性成分的提取。新型離子液體新型離子液體通過氫鍵供體(hydrogen?bond?donor，hbd)和氫鍵受體(hydrogen?bond?acceptor，hba)在特定摩爾比下自組裝形成，其具有低毒性、易生物降解、可調(diào)節(jié)性強等優(yōu)點。目前大部分研究集中在使用親水性新型離子液體新型離子液體提取極性化合物，然而疏水性新型離子液體新型離子液體在疏水性化合物提取中的潛力尚未得到充分探索。因此，將疏水性新型離子液體新型離子液體應用于烏藥中疏水性活性成分的小型化液固提取液固小型化提取過程，不僅有望提高提取效率，還能夠降低對環(huán)境的影響，具有重要的研究意義和應用價值。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種新型離子液體輔助的中藥烏藥活性組分綠色提取方法，該方法以聚酰胺等為分散劑，以新型離子液體為洗脫劑，提取烏藥中包括去甲異波爾定(norisoboldine)、烏藥內(nèi)酯(linderalactone)、烏藥醚內(nèi)酯(linderane)、異烏藥內(nèi)酯(isolinderalactone)、烏藥醇(linderene)和烏藥醇乙酸酯(lindenenyl?acetate)等強疏水性化合物。

2、為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供一種新型離子液體輔助的中藥烏藥活性組分綠色提取方法，所述方法包括以下步驟：

3、(1)將烏藥干燥根粉碎后過篩，得到烏藥粉末；

4、(2)將烏藥粉末和分散劑放于研缽中，研磨得到混合均勻的填料；

5、(3)將填料轉(zhuǎn)移到底部有篩板的固相萃取柱中，在填料上方放置另一個篩板并壓實；

6、(4)制備疏水性新型離子液體新型離子液體，所述新型離子液體由氫鍵供體(hbd)和氫鍵受體(hba)形成；

7、(5)用步驟(4)制備的疏水性新型離子液體洗脫步驟(3)得到的固相萃取柱，收集洗脫液，離心，取上清液，得到烏藥活性成分提取物溶液。

8、優(yōu)選的，所述方法進一步包含以下步驟：

9、(6)取烏藥活性成分提取物，用甲醇稀釋3倍體積，在超高效液相色譜中進行分析。

10、優(yōu)選的，所述步驟(1)中烏藥干燥根粉碎后過3-5號篩。更優(yōu)選的，所述步驟(1)中烏藥干燥根粉碎后過4號篩。

11、優(yōu)選的，所述步驟(2)中的分散劑選自c18填料、硅藻土、殼聚糖、聚酰胺和氮化硼納米片中的一種或多種。更優(yōu)選的，所述步驟(2)中的分散劑為聚酰胺。

12、優(yōu)選的，所述步驟(2)中的研磨時間為30-120s。更優(yōu)選的，所述步驟(2)中的研磨時間為60-90s。進一步優(yōu)選的，所述步驟(2)中的研磨時間為90s。

13、優(yōu)選的，所述步驟(2)中烏藥粉末和分散劑的重量比為1：(0.5-1.5)。更優(yōu)選的，烏藥粉末和分散劑的重量比為1：(1-1.2)。進一步優(yōu)選的，烏藥粉末和分散劑的重量比為1：1.2。

14、優(yōu)選的，所述步驟(4)中新型離子液體的制備方法如下：將氫鍵受體和氫鍵供體混合，超聲，獲得均勻透明的溶液。

15、優(yōu)選的，所述氫鍵受體為dl-薄荷腦，所述氫鍵供體選自乙酸、1-辛醇、辛酸、丁酸中的一種或多種。更優(yōu)選的，所述氫鍵供體為乙酸。

16、優(yōu)選的，所述氫鍵受體和氫鍵供體的摩爾比為1:1-1:4。更優(yōu)選的，所述氫鍵受體和氫鍵供體的摩爾比為1:2-1:3。進一步優(yōu)選的，所述氫鍵受體和氫鍵供體的摩爾比為1:3。

17、最優(yōu)選的，所述步驟(4)中新型離子液體的制備方法如下：將dl-薄荷腦和乙酸混合以1:3的摩爾比混合，超聲，獲得均勻透明的溶液。

18、優(yōu)選的，所述步驟(4)中疏水性新型離子液體與烏藥粉末的比例為1ml：10mg。

19、優(yōu)選的，所述步驟(4)中dl-薄荷腦和乙酸混合后的體積為10ml。

20、優(yōu)選的，所述新型離子液體的超聲時間為10-20min。更優(yōu)選的，所述新型離子液體的超聲時間為15min。

21、優(yōu)選的，所述步驟(5)中將洗脫液在15000rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心3min。

22、優(yōu)選的，所述步驟(5)中得到烏藥活性成分提取物溶液含有去甲異波爾定、烏藥內(nèi)酯、烏藥醚內(nèi)酯、異烏藥內(nèi)酯、烏藥醇和烏藥醇乙酸酯中的一種或多種。更優(yōu)選的，所述步驟(5)中得到烏藥活性成分提取物溶液同時含有去甲異波爾定、烏藥內(nèi)酯、烏藥醚內(nèi)酯、異烏藥內(nèi)酯、烏藥醇和烏藥醇乙酸酯。

23、本發(fā)明的第二方面提供上述方法制備得到的烏藥活性成分提取物溶液，所述提取物溶液含有去甲異波爾定、烏藥內(nèi)酯、烏藥醚內(nèi)酯、異烏藥內(nèi)酯、烏藥醇和烏藥醇乙酸酯中的一種或多種。更優(yōu)選的，所述提取物溶液同時含有去甲異波爾定、烏藥內(nèi)酯、烏藥醚內(nèi)酯、異烏藥內(nèi)酯、烏藥醇和烏藥醇乙酸酯。

24、本發(fā)明產(chǎn)生的技術(shù)效果：

25、1、本發(fā)明建立了一種聚酰胺和新型離子液體輔助的液固小型化提取方法用于從烏藥中提取疏水性化合物，該方法僅需在進樣前對樣品進行基礎的研磨和填充處理，無需依賴傳統(tǒng)的固相萃取裝置，不僅提升了萃取速率，也大幅度降低了實驗開銷。

26、2、本發(fā)明方法采用了新型離子液體新型離子液體作為洗脫劑，代替了傳統(tǒng)的有機溶劑，進一步增強了其環(huán)保特性。

27、3、本發(fā)明方法不僅在烏藥活性成分的提取與檢測中表現(xiàn)出色，而且為提取復雜植物化合物提供了有技術(shù)價值的參考，具有實際應用潛力和推廣價值。