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      一種微流控芯片及使用其制備納米膠囊的方法_3

      文檔序號(hào):8235924閱讀:來源:國知局
      圖2為實(shí)施例2提供的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖)所示,與實(shí)施例1提供的微流控芯片的區(qū)別僅在于第八通道130為直線型結(jié)構(gòu)。
      [0084]實(shí)施例3
      [0085]一種微流控芯片,如圖3 (圖3為實(shí)施例3提供的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖)所示,與實(shí)施例1提供的微流控芯片的區(qū)別僅在于第八通道130為矩形波結(jié)構(gòu)。
      [0086]實(shí)施例4
      [0087]一種微流控芯片,如圖4 (圖4為實(shí)施例4提供的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖)所示,與實(shí)施例1提供的微流控芯片的區(qū)別僅在于第八通道130為圓形串珠結(jié)構(gòu)。
      [0088]實(shí)施例5
      [0089]一種微流控芯片,如圖5 (圖5為實(shí)施例5提供的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖)所示,與實(shí)施例1提供的微流控芯片的區(qū)別僅在于第八通道130為菱形串珠結(jié)構(gòu)。
      [0090]實(shí)施例6
      [0091]一種微流控芯片,如圖6(圖6為實(shí)施例6提供的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖)所示,與實(shí)施例1提供的微流控芯片的區(qū)別僅在于第二通道200和第三通道300具有同一個(gè)入口。
      [0092]實(shí)施例7
      [0093]一種微流控芯片,如圖7(圖7為實(shí)施例7提供的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖)所示,與實(shí)施例1提供的微流控芯片的區(qū)別僅在于第二通道200和第三通道300具有同一個(gè)入口 ;第四通道400和第五通道500具有同一個(gè)入口。
      [0094]實(shí)驗(yàn)例1:包載水溶性熒光物質(zhì)鈣黃綠素的納米膠囊的制備與表征
      [0095]取4.55mg DPPC和0.48mg高純膽固醇溶于2mL乙醇中,振蕩50min使其混勾,得磷脂溶液。取20mg PLGA溶于6.5mL 二甲基甲酰胺和3.5mL三氟乙醇的混合物中,振蕩過夜使其混勻,得PLGA溶液;向PLGA溶液中加入0.016mg DOTAP。取30mg鈣黃綠素溶解于2ml三次水中,構(gòu)成被包載物質(zhì)的水溶液。
      [0096]在實(shí)施例1的微流控芯片的第一通道100入口處接裝有鈣黃綠素的溶液的注射器,在第二通道200與第三通道300的入口處接裝有DOTAP與PLGA溶液的注射器,在第四通道400和第五通道500的入口處接裝有三次水的注射器,在第六通道600的入口處接裝有磷脂溶液的注射器,在第八通道130出口處接收集管。
      [0097]使用注射泵控制三次水的流速20mL/h,磷脂溶液和鈣黃綠素溶液的流速0.2mL/h,PLGA與DOTAP溶液流速為lmL/h,待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道130出口處收集納米膠囊懸浮液。
      [0098]取10 μ L實(shí)驗(yàn)例I得到的納米膠囊懸浮液,滴于碳膜銅網(wǎng)上,靜置5min后用濾紙從側(cè)面吸去多余液體,干燥后使用透射電子顯微鏡進(jìn)行觀察,如圖8(圖8為實(shí)驗(yàn)例I制備得到的納米膠囊的透射電子顯微鏡圖片)所示,制備得到的納米膠囊顆粒形態(tài)完好、成中空膠囊狀。
      [0099]實(shí)驗(yàn)例2:包載脂溶性熒光物質(zhì)DiI的納米膠囊的制備與表征
      [0100]取3.74mgDLPC和0.48mg高純膽固醇溶于2mL乙醇中,振蕩20min使其混勻,得磷脂溶液。取19.5mg PLA溶于1mL 二甲基亞砜中,振蕩過夜使其混勻,得PLA溶液;向PLA溶液中加入 0.024mg HSPC 與 1.5mg DiI。
      [0101]在實(shí)施例2的微流控芯片的第一通道100入口處接裝有三次水的注射器,在第二通道200與第三通道300的入口處接裝PLA與HSPC溶液的注射器,在第四通道400和第五通道500的入口處接裝三次水的注射器,在第六通道600的入口處接裝磷脂溶液的注射器,在第八通道130處接收集管。
      [0102]使用注射泵控制第四通道400和第五通道500三次水的流速14mL/h,磷脂溶液和第一通道100三次水的流速0.13mL/h,PLA與HSPC溶液流速為1.4ml/h,待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道130的出口收集納米膠囊懸浮液。
      [0103]取10 yL上述納米膠囊懸浮液,滴于碳膜銅網(wǎng)上,靜置5min后用濾紙從側(cè)面吸去多余液體,干燥后使用透射電子顯微鏡進(jìn)行觀察,如圖9 (圖9為實(shí)驗(yàn)例2制備得到的納米膠囊的透射電子顯微鏡圖片)所示,制備得到的納米膠囊可見顆粒形態(tài)完好、成中空膠囊狀。
      [0104]實(shí)驗(yàn)例3:包載水溶性大分子siRNA的納米膠囊的制備與表征
      [0105]取7.14mg DSPC和0.48mg高純膽固醇溶于1.7mL甲醇中,振蕩20min使其混勻,得磷脂溶液。取20mg PHA溶于6.5mL乙腈和3.5mL三氟乙醇的混合物中,振蕩過夜使其混勻,得PHA溶液;向PHA溶液中加入0.018mg DOPSo取30 μ g siRNA溶解于0.2ml三次水中,構(gòu)成被包載物質(zhì)的水溶液。
      [0106]在實(shí)施例3的微流控芯片的第一通道100入口處接裝有siRNA的溶液的注射器,在第二通道200與第三通道300的入口處接裝DOPS與PHA溶液的注射器,在第四通道400和第五通道500的入口處接裝三次水的注射器,在第六通道600的入口處接裝磷脂溶液的注射器,在第八通道130出口處接收集管。
      [0107]使用注射泵控制三次水的流速25mL/h,磷脂溶液和siRNA溶液的流速0.8mL/h,PHA與DOPS溶液流速為4ml/h,待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道130的出口收集納米膠囊。
      [0108]取10 μ L上述納米膠囊懸浮液,滴于碳膜銅網(wǎng)上,靜置5min后用濾紙從側(cè)面吸去多余液體。干燥后使用透射電子顯微鏡進(jìn)行觀察,如圖10 (圖10為實(shí)驗(yàn)例3制備得到的納米膠囊的透射電子顯微鏡圖片)所示,制備得到的納米膠囊顆粒形態(tài)完好、成中空膠囊狀。
      [0109]實(shí)驗(yàn)例4:包載表達(dá)綠色熒光蛋白的質(zhì)粒的納米膠囊的制備與表征
      [0110]取6.15mg EPC和0.48mg高純膽固醇溶于2mL苯甲醇中,振蕩20min使其混勾,得磷脂溶液。取20mg PCL溶于1mL甲醇中,振蕩過夜使其混勻,得PCL溶液;向PCL溶液中加入0.017mg POPCo 100 μ g質(zhì)粒溶解于0.35ml三次水中,構(gòu)成被包載物質(zhì)的水溶液。
      [0111]在實(shí)施例4的微流控芯片的第一通道100入口處接裝有質(zhì)粒的溶液的注射器,在第二通道200與第三通道300的入口處接裝POPC與PCL溶液的注射器,在第四通道400和第五通道500的入口處接裝三次水的注射器,在第六通道600的入口處接裝磷脂溶液的注射器,在第八通道130出口處接收集管。
      [0112]使用注射泵控制三次水的流速17.9mL/h,磷脂溶液和質(zhì)粒溶液的流速0.4mL/h,PCL與POPC溶液流速為5ml/h,待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道130出口收集納米膠囊懸浮液。
      [0113]取10 μ L試驗(yàn)例4得到的納米膠囊懸浮液,滴于碳膜銅網(wǎng)上,靜置5min后用濾紙從側(cè)面吸去多余液體,干燥后使用透射電子顯微鏡進(jìn)行觀察,如圖11 (圖11為實(shí)驗(yàn)例4制備得到的納米膠囊的透射電子顯微鏡圖片)所示,制備得到的納米膠囊顆粒形態(tài)完好、成中空膠囊狀。
      [0114]試驗(yàn)例5:包載水溶性超小金納米顆粒的納米膠囊的制備與表征
      [0115]取6.55mg DOPE和0.48mg高純膽固醇溶于2mL乙腈中,振蕩20min使其混勾,得磷脂溶液。取20mg PAN溶于6.5mL四氫呋喃和3.5mL三氟乙醇的混合物中,振蕩過夜使其混勻,得PAN溶液;向PAN溶液中加入0.026mg DOPCo取150 μ g超小金納米顆粒溶解于0.22ml三次水中,構(gòu)成被包載物質(zhì)的水溶液。
      [0116]在實(shí)施例5的微流控芯片的第一通道100入口處接裝有超小金納米顆粒的溶液的注射器,在第二通道200與第三通道300的入口處接裝DOPC與PAN溶液的注射器,在第四通道400和第五通道500的入口處接裝三次水的注射器,在第六通道600的入口處接裝磷脂溶液的注射器,在第八通道130的出口處接裝收集管。
      [0117]使用注射泵控制三次水的流速40mL/h,磷脂溶液和金顆粒溶液的流速0.8mL/h,PAN與DOPC溶液流速為10mL/h,待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道130出口收集納米膠囊懸浮液。
      [0118]取10 yL上述納米膠囊懸浮液,滴于碳膜銅網(wǎng)上,靜置5min后用濾紙從側(cè)面吸去多余液體,干燥后使用透射電子顯微鏡進(jìn)行觀察,如圖12 (圖12為實(shí)驗(yàn)例5制備得到的納
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