本發(fā)明是關(guān)于檢測(cè)裝置，更具體的講，是關(guān)于一種分析液體樣品中是否存分析物質(zhì)的檢測(cè)裝置。

背景技術(shù)：
利用橫向流動(dòng)免疫試劑條來(lái)檢測(cè)樣品中被分析物的裝置越來(lái)越普及，但是，檢測(cè)的準(zhǔn)確性仍然需要改進(jìn)和提高。特別地，當(dāng)檢測(cè)樣品中的一些細(xì)菌或病毒抗原或抗體的時(shí)候，需要準(zhǔn)確的獲得檢測(cè)結(jié)果更為重要。例如，利用雙抗體原理來(lái)檢測(cè)血液樣品中鏈球菌(StrepA)抗原的免疫檢測(cè)裝置中，通常需要把一種結(jié)合抗原的抗體固定在載體上，例如硝酸纖維素膜上，然后再在載體上處理一些封閉試劑，例如牛血清蛋白(BSA)或酪蛋白(Casein),然后再把載體干燥，最后制備成干的載體或試劑條。這樣處理雖然可以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性，當(dāng)大量規(guī)?；a(chǎn)時(shí)，這樣處理的過(guò)程過(guò)于煩瑣，另外，這樣的處理對(duì)某些被分析物的檢測(cè)并不能明顯提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性,還是容易出現(xiàn)假陽(yáng)性的結(jié)果,例如丙型肝炎病毒(HCV)抗原。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了解決以上問(wèn)題，本發(fā)明提供一種檢測(cè)裝置和檢測(cè)方法，可以明顯提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)簡(jiǎn)化了生產(chǎn)工藝。一方面，本發(fā)明提供一種檢測(cè)裝置,包括：支持液體流動(dòng)的載體,在載體上包括：一個(gè)被分析物結(jié)合區(qū)，一個(gè)反應(yīng)試劑區(qū)；一個(gè)封閉試劑區(qū)；所述的被分析物結(jié)合區(qū)包括一種特異性的結(jié)合分子；所述的封閉試劑區(qū)上包括一種或幾種封閉試劑；所述的反應(yīng)試劑區(qū)上包括一種或幾種完成反應(yīng)的反應(yīng)試劑；其中，所述的封閉試劑比其中的一種反應(yīng)試劑提前接觸所述被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。在一個(gè)優(yōu)選的方式中，在沒(méi)有施加液體樣品到檢測(cè)裝置前，載體上各個(gè)區(qū)都以干的狀態(tài)存在，在被液體濕潤(rùn)后，封閉試劑和反應(yīng)試劑被液體向被分析物結(jié)合區(qū)移動(dòng)。在一些具體的方式中，為了讓封閉試劑提前接觸被分析物結(jié)合分子的方式可以是，讓封閉試劑與被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子之間的距離小于反應(yīng)試劑與被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子之間的距離。更具體的一個(gè)方式中，讓封閉試劑區(qū)位于分析物結(jié)合區(qū)的上游并且位于反應(yīng)試劑區(qū)的下游。另外，也可以讓封閉試劑區(qū)位于被分析物結(jié)合區(qū)的下游，反應(yīng)試劑區(qū)位于的被分析物結(jié)合區(qū)的上游。還可以是，反應(yīng)試劑區(qū)位于被分析物結(jié)合區(qū)的上游，封閉試劑區(qū)與反應(yīng)試劑區(qū)和被分析物結(jié)合區(qū)排列的方向垂直。在一些優(yōu)選的方式中，反應(yīng)試劑包括帶有顏色顆粒的特異結(jié)合被分析物的分子；封閉試劑比帶有顏色顆粒的特異結(jié)合被分析物的分子提前接觸所述的被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。更為具體的方式中，帶有顏色的顆粒標(biāo)記物為金顆?；蛉槟z顆粒。更為具體的方式中，被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子為被分析物(被分析物為抗原)的第一抗體，帶有顏色顆粒的特異結(jié)合被分析物的分子為被分析物的第二抗體。在一些具體方案中，特異結(jié)合被分析物的結(jié)合分子被固定在載體上。在另外的一些方式中，封閉區(qū)上的封閉試劑和反應(yīng)試劑可以隨液體移動(dòng)。這里所說(shuō)的“固定”是指那些試劑被處理在載體上而不能隨液體一起移動(dòng)，最優(yōu)的是90-100％的試劑不能被移動(dòng)，也可能是80-95％的試劑不能隨液體在載體上移動(dòng)；也可能是60-90％。這里所說(shuō)的“移動(dòng)“是指那些被處理在載體上的試劑能夠被液體移動(dòng)，最優(yōu)的是80-100％的試劑被液體在載體上移動(dòng)；也可能是60-95％的試劑被液體移動(dòng)，還可能是1-60％的試劑被液體移動(dòng)。在一些具體的方式中,封閉試劑可以結(jié)合被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子上的非特異性結(jié)合位點(diǎn).另一方面，本發(fā)明還提供一種分析液體樣品中被分析物質(zhì)的方法，包括：提供一種支持液體流動(dòng)的載體，該載體上包括：一個(gè)被分析物結(jié)合區(qū)，所述的結(jié)合區(qū)上包括一種特異結(jié)合分子；一種或幾種完成反應(yīng)的反應(yīng)試劑；和一種或幾種與被分析物結(jié)合區(qū)上特異性結(jié)合分子上的位點(diǎn)結(jié)合的封閉試劑；讓檢測(cè)試劑和封閉試劑隨著液體向被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子移動(dòng)；讓封閉試劑比反應(yīng)試劑提前接觸所述的被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。在一個(gè)具體的方式中，被分析物結(jié)合區(qū)上特異性結(jié)合分子包括特異結(jié)合被分析物的一種抗體或抗體片段，反應(yīng)試劑包括特異結(jié)合被分析物質(zhì)的另一種抗體或片段。在以上所有的實(shí)施方式中，被分析物質(zhì)結(jié)合區(qū)可以位于硝酸纖維素膜上。另外，封閉試劑可以為血清蛋白或酪蛋白中的一種或兩種。反應(yīng)試劑還可以包括帶顏色的顆粒標(biāo)記物。被分析物可以包括丙肝病毒、乙肝病毒、乙肝表面抗原或艾滋病毒。封閉試劑可以帶有正電荷。另外，在以上所有的實(shí)施方式中，載體和載體上的各個(gè)區(qū)在未進(jìn)行檢測(cè)前都可以為干的狀態(tài)，當(dāng)進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，樣品濕潤(rùn)載體以及載體上個(gè)各個(gè)區(qū)，其中反應(yīng)試劑和封閉試劑能夠被液體移動(dòng)。有益效果：利用本發(fā)明的裝置，可以明顯提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)簡(jiǎn)化了生產(chǎn)該裝置的生產(chǎn)工藝，降低了成本。附圖說(shuō)明圖1為利用三明志雙抗體夾心法檢測(cè)樣品中抗原的傳統(tǒng)裝置中試劑條的俯視結(jié)構(gòu)示意圖，圖1A為未施加液體樣品前的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；1B為施加液體樣品后的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測(cè)裝置中，包括一個(gè)載體100,在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105,在105上包括一種特異被分析物質(zhì)的結(jié)合分子101,例如被分析物的第一抗體；和一個(gè)反應(yīng)試劑區(qū)106,在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的另一個(gè)特異結(jié)合分子,被分析物的第二抗體；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑區(qū)被布置在同一個(gè)液體流動(dòng)方向的上下游。在進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，把液體樣品施加到載體100上，讓其從反應(yīng)試劑區(qū)域向被分析物結(jié)合區(qū)移動(dòng)，在濕潤(rùn)的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果樣品中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過(guò)計(jì)算標(biāo)記物質(zhì)累積的多少來(lái)判斷被分析物的多少。圖2為本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式，圖2A為未施加液體樣品前的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；圖2B為施加液體樣品后的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測(cè)裝置中，包括一個(gè)單一的載體100,在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105,在105上包括一種特異性的結(jié)合分子101,和一個(gè)反應(yīng)試劑區(qū)106,在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的另一個(gè)特異結(jié)合分子；和一個(gè)封閉區(qū)域104,104包括封閉試劑103；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑區(qū)被布置在同一個(gè)液體流動(dòng)方向的上下游，而封閉區(qū)104被設(shè)置成與被分析物結(jié)合區(qū)垂直(圖2A)，同時(shí)讓反應(yīng)試劑區(qū)106與被分析物結(jié)合區(qū)105的距離大于封閉試劑區(qū)104與被分析物結(jié)合區(qū)105的距離，這樣讓流體在兩個(gè)區(qū)間的流動(dòng)時(shí)間不同，從而表現(xiàn)出達(dá)到結(jié)合區(qū)105的時(shí)間有先后。在進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，把液體樣品施加到載體100上，讓其從反應(yīng)試劑區(qū)域向被分析物結(jié)合區(qū)移動(dòng)，另外把液體樣品施加到載體104上，讓液體沿著載體104向被分析物結(jié)合區(qū)移動(dòng)，這樣封閉試劑被液體帶到被分析物結(jié)合區(qū)域先結(jié)合特異結(jié)合分子101上的一些位點(diǎn)，在濕潤(rùn)的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑隨后到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果樣品中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過(guò)計(jì)算標(biāo)記物質(zhì)累積的多少來(lái)判斷被分析物的多少。圖3為本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式，圖3A為未施加液體樣品前的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；圖3B為施加液體樣品后的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測(cè)裝置中，包括一個(gè)載體100,在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105,在105上包括一種特異結(jié)合被析物質(zhì)的第一抗體101,和一個(gè)反應(yīng)試劑區(qū)106,在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的另另一個(gè)抗體；和一個(gè)封閉區(qū)域104,104包括封閉試劑103；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑區(qū)被布置在同一個(gè)液體流動(dòng)方向的上下游，而封閉區(qū)域被設(shè)置在反應(yīng)試劑區(qū)和被分析物結(jié)合區(qū)之間。在進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，把液體樣品施加到載體100上的反應(yīng)試劑區(qū)106上，讓其從反應(yīng)試劑區(qū)域向被分析物結(jié)合區(qū)105移動(dòng)，由于位置的不同，液體中的水分子運(yùn)動(dòng)的速度比較快,先行到達(dá)封閉區(qū),這樣封閉試劑先行通過(guò)載體到達(dá)被分析物結(jié)合區(qū)先結(jié)合第一抗體101上的一些位點(diǎn)，同時(shí)，也可以先行封閉載體上的一些大的孔，減少這些大孔對(duì)反應(yīng)試劑的截獲；在濕潤(rùn)的情況下，液體帶著被標(biāo)記的第二抗體隨后到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果樣品中不存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上就不會(huì)發(fā)生非特異性的結(jié)合,不累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過(guò)計(jì)算標(biāo)記物質(zhì)累積的多少來(lái)判斷被分析物的多少。圖4描繪了本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式。圖4A為試劑條結(jié)構(gòu)的立體結(jié)構(gòu)示意圖，圖4B為試劑條結(jié)構(gòu)的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測(cè)裝置中，構(gòu)成樣品墊18的載體材料為玻璃纖維；構(gòu)成標(biāo)記墊的材料為聚脂膜12，在標(biāo)記墊上處理有帶有乳膠顆粒的抗丙型肝炎病毒的第一種單克窿抗體；構(gòu)成封閉墊的材料為聚脂膜14，在該膜上處理有酪蛋白(Casein)；構(gòu)成被分析結(jié)合墊15的材料為硝酸纖維素膜，在該膜上固定了特異結(jié)合丙型肝炎病毒的另一種單克窿抗體11；和構(gòu)成吸水墊17的濾紙，他們首尾相連，讓液體樣品能夠從樣品墊18流到吸水墊17上。圖5為本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式，圖5A為未施加液體樣品前的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；圖5B為施加液體樣品后的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測(cè)裝置中，包括一個(gè)載體100,在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105,在105上包括一種特異結(jié)合帶有標(biāo)記物質(zhì)的結(jié)合分子101,和一個(gè)反應(yīng)試劑區(qū)106,在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的特異結(jié)合分子；和一個(gè)封閉試劑區(qū)104,104包括封閉試劑103；反應(yīng)試劑區(qū)106位于被分析物結(jié)合區(qū)的上游；封閉試劑區(qū)位于被分析物結(jié)合區(qū)的下游，封閉試劑區(qū)與特異結(jié)合分子的距離小于反應(yīng)試劑區(qū)與特異結(jié)合分子的距離。在進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，把液體樣品同時(shí)施加到載體100上的反應(yīng)試劑區(qū)106上和封閉區(qū)上，這樣封閉試劑先行通過(guò)載體到達(dá)被分析物結(jié)合區(qū)先結(jié)合特異結(jié)合分子101上的一些位點(diǎn)，在濕潤(rùn)的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑隨后到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果樣品中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過(guò)計(jì)算標(biāo)記物質(zhì)累積的多少來(lái)判斷被分析物的多少。圖6描繪了本發(fā)明的另一些優(yōu)選的具體實(shí)施方式。圖6A為試劑條結(jié)構(gòu)的立體結(jié)構(gòu)示意圖，圖6B為試劑條結(jié)構(gòu)的剖面結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測(cè)裝置中，構(gòu)成樣品墊18的載體材料為玻璃纖維；構(gòu)成標(biāo)記墊的材料為聚脂膜12，標(biāo)記墊位于樣品接收墊之上，在墊18的一端14靠近纖維素薄膜上處理封閉試劑；標(biāo)記墊上處理帶有顏色顆粒的抗被分析物質(zhì)的一種抗體；構(gòu)成被分析結(jié)合墊15的材料為硝酸纖維素膜，在該膜上固定了特異結(jié)合被分析物質(zhì)的另一種抗體；和構(gòu)成吸水墊17的濾紙。標(biāo)記說(shuō)明：載體100；特異結(jié)合分子101，反應(yīng)試劑區(qū)106，反應(yīng)試劑102；封閉試劑103；封閉區(qū)域104；樣品施加墊18；構(gòu)成標(biāo)記墊12；封閉墊14；被分析結(jié)合墊15；被分析物質(zhì)的特異結(jié)合分子帶或檢測(cè)線(T線)11；吸水墊17。具體實(shí)施方式下面對(duì)本發(fā)明涉及的結(jié)構(gòu)或這些所使用的技術(shù)術(shù)語(yǔ)做進(jìn)一步的說(shuō)明。檢測(cè)檢測(cè)表示化驗(yàn)、分析或測(cè)試一種物質(zhì)或材料是否存在，比如，但并不限于此，化學(xué)物質(zhì)、有機(jī)化合物、無(wú)機(jī)化合物、新陳代謝產(chǎn)物、藥物或者藥物代謝物、有機(jī)組織或有機(jī)組織的代謝物、核酸、蛋白質(zhì)或聚合物。另外，檢測(cè)表示測(cè)試物質(zhì)或材料的數(shù)量。進(jìn)一步說(shuō)，檢測(cè)還表示免疫檢測(cè)，化學(xué)檢測(cè)、酶檢測(cè)等。載體支持液體流動(dòng)的載體是指液體可以在載體上從一個(gè)區(qū)流動(dòng)到另一個(gè)區(qū)。在一個(gè)具體的方式中，液體可以從反應(yīng)試劑區(qū)或封閉試劑區(qū)流到到被分析物結(jié)合區(qū)，處理在反應(yīng)試劑區(qū)或封閉試劑區(qū)上的試劑可以被液體移動(dòng)到被分析結(jié)合區(qū)上。一方面，這種液體的流動(dòng)可以是載體本身材質(zhì)的不同而讓液體主動(dòng)的被移動(dòng)。在一個(gè)具體方案中，裝置包含一種吸水材料，提供了支持液體流動(dòng)的載體材料。“載體材料”是指支持液體流動(dòng)和運(yùn)輸?shù)囊环N材料。在一個(gè)具體方案中，載體材料是一種吸水材料。液體流過(guò)本裝置是借助于毛細(xì)管運(yùn)動(dòng)作用實(shí)現(xiàn)的。在不同的具體方案中，載體材料可以是單一材料構(gòu)成的條狀物(圖2)，也可以是由多種在液體中相互作用的吸水材料組成，如圖4或6所示，載體包括玻璃纖維組成的樣品應(yīng)用墊18、聚脂材料組成的標(biāo)記墊12、聚脂材料組成的封閉墊14、硝酸纖維膜組成的被分析物結(jié)合墊15和濾紙組成的吸水墊17。”吸水的”材料是指那些可以穩(wěn)定地吸收水分并使水分在其中通過(guò)毛細(xì)管運(yùn)動(dòng)作用運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)。吸水材料的例子包括硝化纖維，濾紙，玻璃纖維，聚酯和其它合適的物質(zhì)。同時(shí)，這種載體材料還包括只提供一個(gè)或幾個(gè)單獨(dú)的毛細(xì)管的載體，液體通過(guò)這些單獨(dú)的毛細(xì)管作用進(jìn)行移動(dòng)。另一個(gè)方面，這種液體的流動(dòng)也包括通過(guò)機(jī)械或外力的作用進(jìn)行被動(dòng)移動(dòng)，例如當(dāng)液體被施加在載體上時(shí)，例如由塑料，玻璃等非吸水材料組成的載體，讓載體通過(guò)外力傾斜，液體在重力的作用下從一個(gè)區(qū)移動(dòng)到另一個(gè)區(qū)。在一個(gè)優(yōu)選的方式中，處理在載體上的試劑以干的狀態(tài)存在，當(dāng)液體被施加到在載體上的時(shí)候，載體被液體濕潤(rùn)。樣品施加區(qū)檢測(cè)裝置可以包括一個(gè)樣品施加區(qū)。樣品施加區(qū)可能包括一種緩沖液以溶解樣品，也可能僅僅是一個(gè)載體上的加入樣品的部位，但是也可能包含進(jìn)行試驗(yàn)的其它試劑。例如，在那些可以結(jié)合樣品中干擾反應(yīng)的物質(zhì)的“清道夫”抗體有用的具體方案中，“清道夫”抗體可以放在樣品應(yīng)用區(qū)，試劑區(qū)或者載體的其它區(qū)上。因此樣品施加區(qū)也成了反應(yīng)試劑區(qū)。進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)液體樣品使用較方便，但是它也可能在試驗(yàn)條上變干，只能加水、緩沖液和其它試劑以溶解樣品開始試驗(yàn)。樣品本身可能是液體樣品，也可能是被溶解的或者被制備成液體狀的固體樣品。樣品應(yīng)用區(qū)也可以包括樣品應(yīng)用墊18，在檢測(cè)的時(shí)候，把液體樣品施加到樣品應(yīng)用墊18上。反應(yīng)試劑包含在試劑區(qū)中的完成反應(yīng)的試劑是可以移動(dòng)的。在一個(gè)具體的實(shí)施例子中，一些試劑能夠附帶在標(biāo)記物質(zhì)上，并與樣品中的目標(biāo)被分析物結(jié)合，形成帶標(biāo)記的被分析物。樣品應(yīng)用區(qū)和/或反應(yīng)試劑區(qū)也可能包含特殊試驗(yàn)中需要的溶解樣品和調(diào)節(jié)PH值的緩沖液。在一個(gè)具體方案中，試劑區(qū)包含一種特異性的結(jié)合分子(例如：一種抗體或抗體片斷)和標(biāo)記物質(zhì)相連接。標(biāo)記物質(zhì)可以是任何合適的標(biāo)記，例如金溶膠、熒光染料或者水溶性染料。特異性的結(jié)合分子能夠特異性地結(jié)合目標(biāo)被分析物的一個(gè)或者多個(gè)抗原決定基，從而標(biāo)記被分析物。反應(yīng)試劑區(qū)、被分析物結(jié)合區(qū)結(jié)合目標(biāo)被分析物的標(biāo)記提供產(chǎn)生了被分析物結(jié)合區(qū)的可以觀察到的檢測(cè)信號(hào)，當(dāng)樣品中含有被分析物時(shí),被分析結(jié)合區(qū)域上出現(xiàn)標(biāo)記物質(zhì)。被分析物的特異性結(jié)合分子攜帶有試劑區(qū)的標(biāo)記。當(dāng)被分析物結(jié)合去上的特異性的結(jié)合分子捕獲被分析物而且被標(biāo)記了的被分析物在被分析物結(jié)合區(qū)被結(jié)合的時(shí)候，由于標(biāo)記物質(zhì)在這里積聚這個(gè)區(qū)就可以觀察到。被分析物的特異性的結(jié)合分子也可以和表明樣品中被分析物的存在或者與被分析物的存在相關(guān)聯(lián)的分子相結(jié)合。牢固結(jié)合是指結(jié)合達(dá)到改變?cè)囼?yàn)結(jié)果或者使試驗(yàn)結(jié)果不明顯的程度。在一些具體方案中，特異性的結(jié)合分子可能是一種抗體或者一種抗體片段(例如，一種抗體的Fab區(qū))，一種抗原，一種結(jié)合配體的受體或者受體的片段，或者生物素－鏈霉菌抗生物素蛋白結(jié)合對(duì)的一個(gè)成分或者其它類型的結(jié)合對(duì)。這樣試劑區(qū)就可以提供標(biāo)記物質(zhì)，當(dāng)樣品流過(guò)試劑區(qū)的時(shí)候，被分析物結(jié)合了可以產(chǎn)生可檢測(cè)信號(hào)的標(biāo)記物質(zhì)?！皹?biāo)記物質(zhì)區(qū)塊”是指載體上含有可以結(jié)合樣品中可能存在的被分析物的物質(zhì)的部位。因此一個(gè)試劑區(qū)就是一個(gè)標(biāo)記區(qū)塊?！皹?biāo)記”可以是產(chǎn)生可檢測(cè)信號(hào)的任何合適的標(biāo)記物質(zhì)。例如，標(biāo)記可以是可溶性顆粒，熒光顆粒，化學(xué)發(fā)光顆粒，金屬或者合金(例如，膠體金)，或者囊，特別是包含可見染料的脂質(zhì)體。疏水溶膠也是有用的，疏水的有機(jī)染料或者色素在水中不可溶或者只有很有限的一小部分可溶。標(biāo)記物質(zhì)還可以是聚合體顆粒，例如有色的聚苯乙烯顆粒(例如，球狀的)。其它有用的顆粒狀的標(biāo)記包括鐵蛋白，藻紅蛋白，藻膽素－蛋白，沉淀的或者可溶性的金屬或者合金，真菌，海藻，或者細(xì)菌的色素或衍生物，例如細(xì)菌的葉綠素或者其它的植物原料。在某些具體方案中，標(biāo)記是有色顆粒，例如右旋糖苷顆粒。在其它的具體方案中，標(biāo)記可能是被分析物的一種帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異性結(jié)合分子(例如，一種抗體)。例如，在一個(gè)具體方案中，目標(biāo)被分析物是血液樣品中的丙肝病毒(HCV)，結(jié)合HCV的是帶有金溶膠標(biāo)記的抗HCV抗體。當(dāng)樣品到達(dá)試劑區(qū)(或者標(biāo)記區(qū)塊)時(shí)，樣品中的HCV被金溶膠標(biāo)記的抗HCV抗體結(jié)合。標(biāo)記抗體并不干擾被分析物結(jié)合區(qū)上被固定的另一種特異結(jié)合分子(捕獲分子)和標(biāo)記的HCV相結(jié)合。例如，標(biāo)記可以結(jié)合被分析物的一個(gè)部分，而捕獲分子可以結(jié)合被分析物的另一個(gè)部分或者結(jié)合標(biāo)記。HCV-抗-HCV抗體-金復(fù)合物移動(dòng)到載體的下游。當(dāng)復(fù)合物到達(dá)被分析物結(jié)合區(qū)時(shí)和捕獲分子相結(jié)合形成金-抗HCV抗體-HCV-抗HCV抗體。捕獲分子可能是HCV的另一種特異性結(jié)合分子，或者是結(jié)合HCV被分析物的半體的特異性結(jié)合分子。當(dāng)金-抗-HCV特異性結(jié)合分子-HCV-抗-HCV特異性結(jié)合分子復(fù)合物結(jié)合到被分析物結(jié)合區(qū)時(shí)，被分析物結(jié)合區(qū)被復(fù)合物上的金標(biāo)記著色并且在被分析物結(jié)合區(qū)金標(biāo)記變得肉眼可見。在一個(gè)具體方案中，特異性的結(jié)合分子是抗體或者抗體片段。標(biāo)記和捕獲結(jié)合分子能夠結(jié)合被分析物上不同的抗原決定部位，在一個(gè)具體方案中，標(biāo)記的特異性結(jié)合分子結(jié)合了β-hCG，而捕獲結(jié)合分子結(jié)合了α-hCG?！翱贵w”是指免疫球蛋白，無(wú)論是天然的還是部分或者全部合成的。這個(gè)術(shù)語(yǔ)還包括其中保持結(jié)合能力的抗體的衍生物，也包括任何含有與免疫球蛋白的結(jié)合域同源的或者很大程度上同源的結(jié)合域的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)可能是源自天然物質(zhì)，也可能是部分或者全部合成的。一種抗體可能是單克隆的或者是多克隆的。一種抗體可能是任何免疫球蛋白類型中的一員，包括任何人類的免疫球蛋白類型：IgG,IgM,IgA,IgD,IgG和IgE?！翱贵w片段”是抗體的衍生物或者抗體的小于全長(zhǎng)的一個(gè)部分?？贵w片段能夠保留至少一個(gè)全長(zhǎng)抗體的結(jié)合能力的顯著位點(diǎn)?？贵w片斷的例子包括Fab,Fab',F(ab')2,scFv,Fv,dsFv二聚體,和Fd碎片，但是不僅僅包括以上這些?？贵w片段可以由任何方式生成。例如，抗體片段可以通過(guò)酶解或者化學(xué)裂解一個(gè)完整的抗體來(lái)生成，或者也可以通過(guò)從編碼部分抗體序列的基因重組。換句話說(shuō)，抗體片段可以部分地或者全部地重組產(chǎn)生。抗體片段可以是任意的單鏈抗體片段。換句話說(shuō)，抗體片段可以包含多條相互聯(lián)結(jié)的肽鏈，例如，通過(guò)二硫鍵相聯(lián)結(jié)?？贵w片段也可以是任意的一種多分子復(fù)合物。一個(gè)有功能的抗體片段通常包含至少大約50個(gè)氨基酸，而更多的抗體片段通常包含至少大約200個(gè)氨基酸。單鏈Fvs(scFvs)是重組的抗體片段，它僅由可變輕鏈(VL)和可變重鏈(VH)相互以多肽鏈共價(jià)結(jié)合。VL和VH中一方具有胺基端區(qū)域。多肽鏈長(zhǎng)度和組成是可變的，其長(zhǎng)度可以使兩個(gè)可變域相互橋聯(lián)并且對(duì)原子的排列沒(méi)有嚴(yán)重影響。多肽鏈通常主要由甘氨酸和絲氨酸殘基延伸構(gòu)成，其中有一些谷氨酸和賴氨酸殘基散在分布以增加其溶解度。“二聚體”是指單鏈Fvs的二聚物。二聚體的單體包含的肽鏈通常比大多數(shù)單鏈Fvs的短，并且它們顯示出形成二聚物的傾向?！癋v”片段由一個(gè)VH和一個(gè)VL域以非共價(jià)相互連接組成。術(shù)語(yǔ)“dsFv”在這里是指包含一個(gè)穩(wěn)定VH-VL對(duì)的分子間二硫鍵的Fv。“F(ab')2”片段是抗體的一個(gè)片段，本質(zhì)上和用胃蛋白酶在pH4.0-4.5時(shí)消化免疫球蛋白(通常是IgG)得到的片段相同。這個(gè)片段也可以重組合成?！癋ab'”片段是一種抗體片段，本質(zhì)上和通過(guò)減少F(ab')2片段上的兩條重鏈相互連接的雙硫鍵得到的片段相同。Fab'片段也可以重組合成?！癋ab”片段是一種本質(zhì)上和用木瓜蛋白酶消化免疫球蛋白(通常IgG)得到的片段相同的抗體片段。Fab片段也可以重組合成。Fab片段上的重鏈片段是Fd碎片。封閉試劑封閉試劑區(qū)包括在封閉試劑區(qū)的封閉試劑是可移動(dòng)的。任何不會(huì)實(shí)質(zhì)影響特異結(jié)合分子之間的結(jié)合反應(yīng)的試劑都可以作為封閉試劑，例如一些惰性蛋白，包括酪蛋白或白蛋白，例如牛血清白蛋白。把封閉試劑處理在載體上的技術(shù)也是本領(lǐng)域常見的技術(shù)手段，例如把封閉試劑配置成溶液然后浸泡載體，然后把載體干燥。當(dāng)然，也可以在封閉試劑中添加其他的試劑來(lái)改善封閉試劑的溶解性能或結(jié)合載體的性能，例如把酪蛋白溶解在PH值為7-9.5Tris緩沖溶液中。當(dāng)液體經(jīng)過(guò)封閉試劑區(qū)的時(shí)候，被處理在該區(qū)上的封閉試劑被液體濕潤(rùn)然后隨液體一起向被分析物結(jié)合區(qū)域移動(dòng)。在一個(gè)具體的例子中，在濕潤(rùn)的情況下，封閉試劑先于反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。在另一個(gè)具體的例子中，檢測(cè)裝置中的各個(gè)區(qū)為干的時(shí)候，當(dāng)需要檢測(cè)的時(shí)候，向載體上施加液體樣品讓裝置中的各個(gè)區(qū)順次濕潤(rùn)，然后完成檢測(cè)。在這種濕潤(rùn)的情況下，我們驚訝的發(fā)現(xiàn)封閉試劑對(duì)載體上的孔或者特異結(jié)合分子上的位點(diǎn)具有良好的封閉效果。讓封閉試劑先于反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子的方式有多種。在一個(gè)具體的方式中，例如圖5所示，讓封閉區(qū)104和反應(yīng)試劑區(qū)106位于被分析物結(jié)合區(qū)105的兩側(cè)，讓封閉區(qū)上的封閉試劑103與特異結(jié)合分子101的距離小于反應(yīng)試劑與特異結(jié)合分子的距離，這里，反應(yīng)試劑102包括目的被分析物的一種抗體，被分析物結(jié)合區(qū)105上的特異結(jié)合分子101包括目的被分析物的另一種抗體，該抗體被固定在結(jié)合區(qū)105上。反應(yīng)試劑和封閉試劑也被處理在載體上，他們可以隨液體樣品移動(dòng)。在檢測(cè)的時(shí)候，向反應(yīng)試劑區(qū)106上施加液體樣品，讓反應(yīng)試劑隨液體樣品向特異結(jié)合分子101移動(dòng)，同時(shí)，向封閉區(qū)104施加液體樣品，讓封閉試劑隨液體樣品向特異結(jié)合分子101移動(dòng)，當(dāng)載體的材質(zhì)一樣的時(shí)候，封閉試劑會(huì)先于反應(yīng)試劑到達(dá)被分析物結(jié)合區(qū)域105并與特異結(jié)合分子101上的一些位點(diǎn)結(jié)合。被封閉的位點(diǎn)可能是特異結(jié)合分子上的一些非特異位點(diǎn)。隨后，反應(yīng)試劑到達(dá)被分析物特異結(jié)合分子101上，由于一些非特異的位點(diǎn)被結(jié)合后，如果樣品中不存在目的被分析物質(zhì)，反應(yīng)試劑就不會(huì)和特異結(jié)合分子發(fā)生特異結(jié)合，讓檢測(cè)結(jié)果為準(zhǔn)確的陰性結(jié)果。除了以上方式外，還可以改變施加樣品的先后順序讓封閉試劑先于反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。例如，先施加樣品到封閉區(qū)103上，然后再施加樣品到反應(yīng)試劑區(qū)106上；或者直接在被分析物結(jié)合區(qū)域上施加微量的封閉試劑溶液，例如1-10微升，然后再在反應(yīng)試劑取上施加液體樣品。在另一個(gè)具體的方式中，讓封閉試劑區(qū)105和反應(yīng)試劑區(qū)106都位于被分析結(jié)合區(qū)105的上游，同時(shí)，讓封閉試劑區(qū)位于反應(yīng)試劑區(qū)和被分析結(jié)合區(qū)之間，如圖3所示。在進(jìn)行測(cè)試前，載體為干的狀態(tài)；當(dāng)把液體樣品施加到反應(yīng)試劑區(qū)上，液體樣品首先和反應(yīng)試劑接觸并帶動(dòng)反應(yīng)試劑向被分析物結(jié)合區(qū)移動(dòng)，由于反應(yīng)試劑事先以干的狀態(tài)存在于反應(yīng)試劑區(qū)上，需要大約一小段時(shí)間，大約5-20秒鐘，讓這些干的試劑被液體樣品溶解或濕潤(rùn)。在此過(guò)程中，由于液體樣品中的部分水分子運(yùn)動(dòng)速度較快，可以提前接觸位于下游的封閉區(qū)域并濕潤(rùn)其上的封閉試劑，讓封閉試劑快于反應(yīng)試劑向被分析物結(jié)合區(qū)域移動(dòng)。提前移動(dòng)的部分封閉試劑提前經(jīng)過(guò)被分析物結(jié)合區(qū)域，一方面可能對(duì)位于封閉試劑和被分析物結(jié)合區(qū)域之間的載體,例如硝酸纖維素膜,進(jìn)行預(yù)先的處理，另一方面也可能提前封閉該區(qū)域上特異結(jié)合分子上一些非特意性結(jié)合位點(diǎn)，另外，還可能中和被分析結(jié)合區(qū)上特異結(jié)合分子的電荷等。這樣，讓隨后的反應(yīng)試劑，例如帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物質(zhì)的抗體或片段與被分析物特異結(jié)合區(qū)域上的特異結(jié)合分子，如特異結(jié)合被分析物的另一抗體或片段進(jìn)行特異性的結(jié)合，減少了非特異性的結(jié)合，提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。在另一個(gè)方式中，組成檢測(cè)裝置的是硝酸纖維素膜試劑條，包括液體樣品施加墊18，在樣品墊上設(shè)置一個(gè)標(biāo)記墊12并讓標(biāo)記墊遠(yuǎn)離封閉試劑；在樣品施加墊的一端14處理有封閉試劑。和一個(gè)硝酸纖維素膜15，在薄膜上處理特異結(jié)合分子帶16和與薄膜15連接的濾紙17，圖6B表示試劑條的剖面示意圖；圖6A表示試劑條的立體結(jié)構(gòu)示意圖。當(dāng)把液體樣品施加到施加墊上，部分液體樣品沿著箭頭方向直接流到封閉試劑區(qū)域14上，而另一部分液體樣品需要先濕潤(rùn)標(biāo)記墊14，濕潤(rùn)標(biāo)記墊上預(yù)先被處理的干的帶有顏色顆粒的特異結(jié)合分子；由于液體流向的路徑不同而讓封閉試劑在濕潤(rùn)的條件下先于標(biāo)記墊14上的試劑接觸被分析結(jié)合區(qū)域上的特異結(jié)合分子。圖2為本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式，圖2A為未施加液體樣品前的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；圖2B為施加液體樣品后的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測(cè)裝置中，包括一個(gè)單一的載體100,在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105,在105上包括一種特異性的結(jié)合分子101,和一個(gè)反應(yīng)試劑區(qū)106,在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的另一個(gè)特異結(jié)合分子；和一個(gè)封閉區(qū)域104,104包括封閉試劑103；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑區(qū)被布置在同一個(gè)液體流動(dòng)方向的上下游，而封閉區(qū)104被設(shè)置成與被分析物結(jié)合區(qū)垂直(圖2A)，同時(shí)讓反應(yīng)試劑區(qū)106與被分析物結(jié)合區(qū)105的距離大于封閉試劑區(qū)104與被分析物結(jié)合區(qū)105的距離，這樣讓流體在兩個(gè)區(qū)間的流動(dòng)時(shí)間不同，從而表現(xiàn)出達(dá)到結(jié)合區(qū)105的時(shí)間有先后。在進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，把液體樣品施加到載體100上，讓其從反應(yīng)試劑區(qū)域向被分析物結(jié)合區(qū)移動(dòng)，另外把液體樣品施加到載體104上，讓液體沿著載體104向被分析物結(jié)合區(qū)移動(dòng)，這樣封閉試劑被液體帶到被分析物結(jié)合區(qū)域先結(jié)合特異結(jié)合分子101上的一些位點(diǎn)，在濕潤(rùn)的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑隨后到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果樣品中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過(guò)計(jì)算標(biāo)記物質(zhì)累積的多少來(lái)判斷被分析物的多少。圖4描繪了本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式。圖4A為試劑條結(jié)構(gòu)的立體結(jié)構(gòu)示意圖，圖4B為試劑條結(jié)構(gòu)的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測(cè)裝置中，構(gòu)成樣品施加墊18的載體材料為玻璃纖維；構(gòu)成標(biāo)記墊的材料為聚脂膜12，在標(biāo)記墊上處理有帶有乳膠顆粒的抗丙型肝炎病毒的第一種單克窿抗體；構(gòu)成封閉墊的材料為聚脂膜14，在該膜上處理有酪蛋白；構(gòu)成被分析結(jié)合墊15的材料為硝酸纖維素膜，在該膜上固定了特異結(jié)合丙型肝炎病毒的另一種單克窿抗體11；和構(gòu)成吸水墊17的濾紙，他們首尾相連，讓液體樣品能夠從樣品墊18流到吸水墊17上。封閉試劑“先于”反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子中的“先于”在本發(fā)明可以表示為提前，提早，早于?？赡苡?-99％的封閉試劑先于1-99％的反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的1-99％的特異結(jié)合分子；也可能有10-99％的封閉試劑先于10-90％的反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的20-99％的特異結(jié)合分子；還可能有50-99％的封閉試劑先于30-80％的反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的10-80％的特異結(jié)合分子。圖1為傳統(tǒng)裝置中試劑條的俯視結(jié)構(gòu)示意圖，圖1A為未施加液體樣品前的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；1B為施加液體樣品后的檢測(cè)裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測(cè)裝置中，包括一個(gè)載體100,在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105,在105上包括一種特異被分析物質(zhì)的結(jié)合分子101,通常，在檢測(cè)前，事先在被分析物質(zhì)結(jié)合區(qū)10上處理有封閉試劑并且被干燥；和一個(gè)反應(yīng)試劑區(qū)106,在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的另一個(gè)特異結(jié)合分子；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑區(qū)被布置在同一個(gè)液體流動(dòng)方向的上下游；這種試劑條為干的試劑條。在進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候，把液體樣品施加到載體100上，讓其從反應(yīng)試劑區(qū)域向被分析物結(jié)合區(qū)移動(dòng)，在濕潤(rùn)的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果樣品中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過(guò)計(jì)算標(biāo)記物質(zhì)累積的多少來(lái)判斷被分析物的多少。檢測(cè)方法另一方面，本發(fā)明還提供一種分析液體樣品中被分析物質(zhì)的方法，包括：提供一種支持液體流動(dòng)的載體100，該載體上包括：一個(gè)被分析物結(jié)合區(qū)105，所述的結(jié)合區(qū)上包括一種特異結(jié)合分子101；一種或幾種完成反應(yīng)的反應(yīng)試劑102；和一種或幾種封閉試劑103；讓檢測(cè)試劑和封閉試劑隨著液體向被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子移動(dòng)；讓封閉試劑比反應(yīng)試劑提前接觸所述的被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。在一個(gè)具體的方式中，被分析物結(jié)合區(qū)上特異性結(jié)合分子包括特異結(jié)合被分析物的一種抗體或抗體片段，反應(yīng)試劑包括特異結(jié)合被分析物質(zhì)的另一種抗體或片段。在一個(gè)具體方式中,封閉試劑包括與被分析物結(jié)合區(qū)上特異性結(jié)合分子上的位點(diǎn)結(jié)合的試劑。與傳統(tǒng)的技術(shù)相比，本發(fā)明的這種裝置或方法可以很好地提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性，其原因可能是：在濕潤(rùn)情況下，封閉試劑對(duì)一些分子上的位點(diǎn)或載體上的孔具有更好的封閉作用，同時(shí)又不對(duì)載體本身產(chǎn)生一些不利的影響。因?yàn)樵趥鹘y(tǒng)的封閉技術(shù)中，需要先把載體浸泡在封閉溶液中，然后再對(duì)載體進(jìn)行干燥，在這樣的處理過(guò)程中，可能讓載體上的一些表面活性試劑被封閉溶液洗脫掉，從而影響了載體的性能。另外，本發(fā)明裝置中的封閉試劑可以在濕潤(rùn)的情況下帶負(fù)電荷，可以提前接觸被分析結(jié)合區(qū)上帶有正電荷的特異結(jié)合分子，中和了特異分子上的正電荷，減少特異結(jié)合分子和反應(yīng)試劑的非特異性的結(jié)合。特別地，當(dāng)反應(yīng)試劑中包括有金顆粒標(biāo)記的抗體的時(shí)候，它常帶有負(fù)電荷，被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子的電荷被封閉試劑中和后減少了對(duì)金顆?？贵w的結(jié)合，從而提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。樣品的類型任何類型的樣品都能夠用本發(fā)明的裝置進(jìn)行試驗(yàn)，包括體液(例如，尿液和其它體液，以及臨床樣品)。液體樣品可能源自固體的或者半固體的樣品，包括糞，生物組織和食物樣品。這些固體的和半固體的樣品可以通過(guò)任何適合的方法轉(zhuǎn)變成液體樣品，例如在一種適當(dāng)?shù)囊后w中混合，跺碎，浸軟，孵育，溶解或者酶解固體樣品(例如，水，磷酸鹽緩沖液或者其它緩沖液)。“生物樣品”包括源自活的動(dòng)物、植物和食物的樣品，也包括尿液、唾液、血液和血液成分、腦脊液、陰道拭子，精液、糞便、汗液、分泌物、組織、器官、腫瘤、組織和器官的培養(yǎng)物，細(xì)胞培養(yǎng)物和那里的條件介質(zhì)，不管是人的還是動(dòng)物的。食物樣品包括加工過(guò)的食物成分和最后的產(chǎn)品，肉，奶酪，酒，牛奶和飲用水。植物樣品包括源自任何植物、植物組織、植物細(xì)胞培養(yǎng)物和那里的條件介質(zhì)的樣品?！碍h(huán)境樣品”是那些源自環(huán)境的樣品(例如，湖水樣品或者其它水體的樣品，污水樣品，土壤樣品，地下水樣品，海水樣品，廢物廢水的樣品)。污水和相關(guān)的廢物也可以包含在環(huán)境樣品中。被分析物的類型用本發(fā)明可以分析任何被分析物質(zhì)。能夠用本發(fā)明穩(wěn)定檢測(cè)的被分析物的例子包括(但是不僅僅包括)人絨毛膜促性腺激素(hCG)，黃體生成素(LH)，卵巢刺激素(FSH)，丙肝病毒(HCV)，乙肝病毒(HBV)，乙肝表面抗原，艾滋病病毒和任何濫用的藥物。被分析物能夠在任何的液體或者液化樣品中檢測(cè)到，例如尿液，唾液，口水，血液，血漿，或者血清。其它的被分析物的例子還有肌氨酐酸，膽紅素，亞硝酸鹽，蛋白質(zhì)(非特異性的)，血液，白細(xì)胞，血糖，重金屬和毒素，細(xì)菌成分(例如，特定類型的細(xì)菌的特殊的蛋白質(zhì)和糖分，例如大腸桿菌0157:H7，金黃色葡萄球菌，沙門氏菌，產(chǎn)氣莢膜梭菌，彎曲桿菌，單核增生李斯特菌，腸炎弧菌，或者臘狀芽孢桿菌)。任何其它的適合側(cè)流試驗(yàn)形式的被分析物都可以用本裝置檢測(cè)。試驗(yàn)封閉試劑在膠體金側(cè)向?qū)游鲈\斷試紙條中的應(yīng)用下面的實(shí)施例將進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但無(wú)論如何不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明范圍的限制。結(jié)合說(shuō)明書附圖4來(lái)說(shuō)明本試驗(yàn)所使用的試劑條的結(jié)構(gòu)和相關(guān)材料和試劑的準(zhǔn)備。1.試驗(yàn)材料1.1蛋白原料和材料材料批號(hào)過(guò)期日期HCV抗原C66(金標(biāo)標(biāo)記)F090609HCV-12009.10.15HCV抗原C550905272009.10.27Tris鹽緩沖溶液9T91JA2011.07.07酪蛋白Casein048K00672011.10.14Borax鹽緩沖溶液048K00092013.02.21表面活性劑S19F200801102010.01.10NaCl108K00512014.09.30Na2PH4097K00222010.08.21BSABAH62-9002014.02.28玻璃纖維40724022011.06.03MilliporeNC(硝酸纖維膜)R6MN954212009.12.101.2供試陽(yáng)性血清和陰性血清2.實(shí)驗(yàn)方法2.1處理封閉墊14溶液的配制：Tris:2.5mg/mlCasein:2.5mg/mlPH＝8.02.2處理金標(biāo)墊12溶液的配制：Tris:2.5mg/mlBSA:10.0mg/mlPH＝8.02.3處理樣品墊18溶液的配制：Borax:2.5mg/mlCasein:2.5mg/mlS19:0.5％PH＝8.02.4處理NC膜15上T線11溶液的配制：NaCl:8.8mg/mlNa2PH4:2.1mg/mlPH＝7.42.5金標(biāo)墊12的處理用金標(biāo)墊溶液稀釋用金顆粒標(biāo)記過(guò)的HCV抗原C66(為本公司自行標(biāo)記，抗原從深圳菲鵬公司購(gòu)買)，讓終濃度至OD3.5。稀釋好的金標(biāo)處理液1.5毫升均勻的噴涂到玻璃纖維(長(zhǎng)×寬＝0.8cm×30.1cm)上,并置于37℃干燥箱中過(guò)夜烘干，然后切割成長(zhǎng)×寬＝0.8cm×0.6cm的小片，作為標(biāo)記墊g。2.6樣品墊18和封閉墊14的處理分別用等體積的樣品墊或封閉墊溶液直接噴涂到玻璃纖維上，溶液中的試劑如表1所列的進(jìn)行處理(樣品墊的長(zhǎng)×寬＝1.8cm×0.6cm，封閉墊的長(zhǎng)×寬＝0.5cm×0.6cm)，處理后并置于37℃干燥箱中過(guò)夜烘干。表1樣品墊和封閉墊的處理處理TrisCaseinS19PH樣品墊a2.5mg/ml2.5mg/ml0.5％8.0樣品墊b2.5mg/ml無(wú)0.5％8.0封閉墊c2.5mg/ml無(wú)0.5％8.0封閉墊d2.55mg/ml2.5mg/ml0.5％8.02.7T線的處理T線溶液稀釋HCV抗原C55溶液(抗原為公司自行生產(chǎn))，并以1.0ul/cm，的噴量噴涂于NC膜15上(寬為2.5厘米)，記為NC膜e。并放在37℃干燥箱中過(guò)夜烘干。2.8傳統(tǒng)膜封閉用封閉墊處理溶液1ml均勻噴涂到處理過(guò)T線的NC膜(寬為2.5厘米)上,然后放到37℃干燥箱中過(guò)夜烘干，作為NC膜f。3.試劑條的組裝按照?qǐng)D4所示的結(jié)構(gòu)和順序，對(duì)樣品墊18，標(biāo)記墊12，封閉墊14(如果有)和NC膜15，以及濾紙墊17進(jìn)行組裝，讓樣品墊18疊加在標(biāo)記墊12上，讓標(biāo)記墊12疊加在封閉墊14上，讓封閉墊14疊加在NC膜15上，讓濾紙17疊加在NC膜上，讓試劑條的寬度為0.6厘米；如果沒(méi)有封閉墊的試劑條，在組裝的時(shí)候，讓標(biāo)記墊12直接疊加在NC膜15上。4.操作方法在試劑條的樣品墊上滴加2滴供試陽(yáng)性血清或陰性血清，然后在5分鐘內(nèi)用肉眼觀察T線上的顏色深淺，并與標(biāo)準(zhǔn)的色卡進(jìn)行比較來(lái)判讀檢測(cè)結(jié)果(“+”表示陽(yáng)性，“-”表示陰性)。表2色卡標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)結(jié)果試驗(yàn)1比較Casein在樣品墊中的對(duì)消除假陽(yáng)性的作用處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果HM2N1N2N3N4N5N6N7試劑條16++5+3.5+4+3.6+3.5+4+4+3.5試劑條27++6+6+6+6+6+7+6+6從以上結(jié)果可以看出，當(dāng)在樣品墊上處理有酪蛋白試劑后，不會(huì)影響對(duì)陽(yáng)性樣本準(zhǔn)確性的檢測(cè)，而在檢測(cè)陰性樣本的時(shí)候，雖然可以減輕發(fā)生假陽(yáng)性的程度，即在T線上的顏色深度顯著降低，但是信號(hào)反應(yīng)仍然為陽(yáng)性。實(shí)驗(yàn)2比較同濃度Casein在封閉墊和樣品墊中消除假陽(yáng)性的作用處理試驗(yàn)結(jié)果HM2N1N2N3N4N5N6N7試劑條1+6+5+3.5+4+3.6+3.5+4+4+3.5試劑條3+6+5-1-1-2.5-1-2-1-1試劑條4+6+5-1-1-2-1-2-1-1從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，無(wú)論樣品墊里是否處理有酪蛋白，在封閉墊上處理有酪蛋白的試劑條都可以顯著地消除陰性樣本的假陽(yáng)性結(jié)果，讓檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確；同時(shí)不影響陽(yáng)性樣本的檢測(cè)準(zhǔn)確性。實(shí)驗(yàn)3驗(yàn)證無(wú)Casein的封閉墊是否同樣具有消除假陽(yáng)性的作用處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果HM2N1N2N3N4N5N6N7試劑條5+6+5+4+4+5+4+4+4+4試劑條1+6+5+3.5+4+3.6+3.5+4+4+3.5試劑條4+6+5-1-1-2-1-2-1-1從以上結(jié)果可以看出，當(dāng)不存在封閉墊或者存在封閉墊但無(wú)封閉試劑的時(shí)候,仍然對(duì)降低HCV假陽(yáng)性無(wú)顯著影響；相反,當(dāng)封閉墊上處理有封閉試劑酪蛋白的時(shí)候,可以消除陰性標(biāo)本引起的假陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)4比較封閉墊封閉法和膜封閉法消除假陽(yáng)效果。處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果HM2N8N9N10N11N12試劑條3+5+4-2-1-2-1-2試劑條6+7+5-2-1-2.5-1-1試劑條7+9+6+6+6+6+7+6從試驗(yàn)4的結(jié)果來(lái)看，封閉墊封閉法和噴涂膜封閉法對(duì)消除假陽(yáng)性的效果，發(fā)現(xiàn)兩者效果差不多，同時(shí)，還發(fā)現(xiàn)使用傳統(tǒng)封閉的方法，對(duì)陽(yáng)性靈敏度有較大的影響。但是利用封閉墊封閉法，對(duì)靈敏度的影響不大，并且能簡(jiǎn)化生產(chǎn)工藝，降低生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)效率。