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      吞噬細胞對細菌的黏附率和吞噬率的檢測方法與流程

      文檔序號:12267433閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.吞噬細胞對細菌的黏附率和吞噬率的檢測方法,其特征在于,將吞噬細胞分為對照組,處理組和未處理組,對照組細胞用臺盼藍和細胞松弛素D處理,處理組細胞用臺盼藍或細胞松弛素D處理,未處理組細胞不作處理,用CFDA-SE標(biāo)記細菌,細菌與細胞相互作用后通過流式細胞術(shù)檢測吞噬細胞黏附率和吞噬率。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吞噬細胞對細菌的黏附率和吞噬率的檢測方法,其特征在于,包括如下步驟:

      (1)將吞噬細胞分為對照組,0.4%臺盼藍處理組和未處理組,對照組細胞用20ug/ml細胞松弛素D預(yù)處理30min;

      (2)用CFDA-SE標(biāo)記細菌,細菌濃度為108/mL,CFDA-SE工作濃度為5μM,室溫避光孵育30min,孵育期間輕柔顛倒混勻1次/10min;

      (3)細菌與細胞相互作用,將步驟(2)制備好的菌體與各組吞噬細胞共同孵育,孵育完成后對照組和0.4%臺盼藍處理組均加入0.4%臺盼藍室溫下孵育5min;

      (4)流式細胞術(shù)檢測,以對照組作為檢測時的設(shè)門標(biāo)準(zhǔn),未處理組檢測結(jié)果為黏附率與吞噬率總和,0.4%臺盼藍處理組檢測結(jié)果為吞噬率,由此計算出吞噬細胞對細菌的黏附率和吞噬率。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吞噬細胞對細菌的黏附率和吞噬率的檢測方法,其特征在于,包括如下步驟:

      (1)將吞噬細胞分為對照組,細胞松弛素D處理組和未處理組,對照組和細胞松弛素D處理組細胞用20ug/ml細胞松弛素D預(yù)處理30min;

      (2)用CFDA-SE標(biāo)記細菌,細菌濃度為108/mL,CFDA-SE工作濃度為5μM,室溫避光孵育30min,孵育期間輕柔顛倒混勻1次/10min;

      (3)細菌與細胞相互作用,將步驟(2)制備好的菌體與各組吞噬細胞共同孵育,孵育完成后對照組加入0.4%臺盼藍室溫下孵育5min;

      (4)流式細胞術(shù)檢測,以對照組作為檢測時的設(shè)門標(biāo)準(zhǔn),未處理組檢測結(jié)果為黏附率與吞噬率總和,細胞松弛素D處理組檢測結(jié)果為黏附 率,由此計算出吞噬細胞對細菌的黏附率和吞噬率。

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