本申請屬于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及同時分離測定三種AGs(妥布霉素、依替米星、奈替米星)的含量的方法。

背景技術(shù)：

氨基糖苷類抗生素(Aminoglycoside antibiotics，AGs)是由氨基糖與氨基環(huán)醇通過氧橋連接而成的苷類抗生素，包括鏈霉素、慶大霉素、新霉素、妥布霉素，以及一些新合成氨基糖苷類藥物如依替米星和奈替米星等。由于其廉價、毒性低及抗菌譜廣的特點，AGs成為臨床上使用最為廣泛的抗生素。同時，AGs具有一定的耳毒性及腎毒性，為保證用藥安全，劑量使用范圍較窄，臨床監(jiān)管十分嚴格。

由于AGs缺乏特征紫外吸收基團，目前其主要的分析方法包括微生物法，紫外可見光譜法，HPLC-柱前衍生法，HPLC-蒸發(fā)光散射檢測法，HPLC-脈沖電化學檢測方法，質(zhì)譜法，HPLC-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜分析，毛細管電泳法和熒光偏振免疫法。目前，HPLC-衍生法和分光光度法是測定AGs的主要方法。然而，HPLC-衍生法仍有許多缺點無法避免，例如衍生化反應(yīng)不完全、衍生試劑的額外費用等。此外，分光光度法的靈敏度不夠高，不能滿足痕量分析的臨床要求。因此，建立一種簡便，快速，靈敏度高的測定AGs的方法無論在制劑分析還是臨床檢測中都是十分必要的。

目前，HPLC-RRS聯(lián)用測定AGs的文獻還未見報道。本文以RRS技術(shù)作為HPLC一種新型的檢測模式，同時分離測定三種AGs的含量(妥布霉素、依替米星、奈替米星)，該方法已成功分離了三種抗生素的混合物，同時應(yīng)用于妥布霉素滴眼液、硫酸依替米星注射液和硫酸奈替米星注射液中AGs含量的測定中。

共振瑞利散射(resonance Rayleigh scattering，RRS)是指當瑞利散射位于或接近分子吸收帶時，電子吸收電磁波的頻率與散射光頻率相同，電子因共振而強烈吸收輻射能量并再次發(fā)生散射的過程。RRS因其靈敏度高、線性范圍較寬、方法簡便等優(yōu)點，已發(fā)展成為光譜分析中活躍的研究領(lǐng)域。國內(nèi)西南大學和北京大學先后在共振光的研究方面進行了開創(chuàng)性的工作。西南大學的劉紹璞等研究發(fā)現(xiàn)，靜電作用、疏水作用以及電荷轉(zhuǎn)移作用對于光譜特征以及RRS強度的增加有重要影響。通過離子締合反應(yīng)，RRS技術(shù)不僅可用于測定生物大分子 如蛋白質(zhì)、核酸等還可應(yīng)用于痕量離子及藥物小分子的測定中，極大的拓展了RRS的應(yīng)用領(lǐng)域。

近年來，RRS與流動注射分析及毛細管電泳聯(lián)用方法的成功建立，表明被測物可在動態(tài)反應(yīng)中與探針結(jié)合成離子締合物，并被定量檢測。盡管這些聯(lián)用方法仍存在著一定的不足，卻充分發(fā)揮了RRS高靈敏度及高選擇性的優(yōu)點同時避免了其重現(xiàn)性、穩(wěn)定性較差的不足。

高效液相色譜法(high performance liquid chromatography，HPLC)自20世紀70年代建立以來，以高速、高效、靈敏度高及檢測范圍廣等特點成為目前應(yīng)用最多的色譜分析方法，在有機化學、生物化學、醫(yī)學、藥物開發(fā)與檢測、食品科學、環(huán)境監(jiān)測、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用。經(jīng)過幾十年的發(fā)展，HPLC已與眾多檢測技術(shù)相結(jié)合，從傳統(tǒng)的紫外、熒光檢測器到先進的質(zhì)譜及核磁共振檢測技術(shù)，HPLC已可同時滿足對被測物定量及定性的分析需求。HPLC與更為精密的檢測儀器聯(lián)用的同時也大大提高了設(shè)備成本及檢測成本，因此發(fā)展高效通用的檢測器仍是HPLC的主要發(fā)展趨勢之一。

雖然高效液相色譜法(HPLC)是目前藥物分析中最常用的檢測方法，但HPLC與RRS聯(lián)用(HPLC-RRS)的方法鮮見報道。RRS技術(shù)與其他分析儀器聯(lián)用方法的成功建立表明其可以作為一種新型的檢測方法與HPLC聯(lián)用(HPLC-RRS)。RRS技術(shù)作為一種新型的HPLC檢測方法，其突出優(yōu)點是RRS信號的產(chǎn)生不依賴于被測物本身的化學特性，尤其適用于無紫外特征吸收及非熒光物質(zhì)的檢測。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

有鑒于此，本申請要解決HPLC-衍生法衍生化反應(yīng)不完全、衍生試劑的額外費用高，分光光度法的靈敏度不夠高，不能滿足痕量分析的臨床要求的問題。提供一種簡便，快速，靈敏度高的測定AGs的方法，無論在制劑分析還是臨床檢測中都是十分必要的。

為了解決上述技術(shù)問題，本申請公開了一種同時分離測定三種AGs的含量的方法，采用高效液相色譜與共振瑞利散射聯(lián)用技術(shù)，先用高效液相色譜法將供試品中的AGs洗脫分離，再將洗脫分離后的妥布霉素、依替米星、奈替米星和探針溶液混合反應(yīng)，最后將混合反應(yīng)后的反應(yīng)液注入檢測器進行檢測；

進一步的，所述高效液相色譜的色譜條件為：甲醇∶水(含0.2％TFA)＝5∶95(v/v)為流動相，流速＝0.50mL·min^-1，所述探針溶液為PSB溶液，所述檢測器為熒光檢測器。

進一步的，所述檢測波長λex＝λem＝362nm。

進一步的，所述PSB溶液濃度為2.0×10^-4mol·L^-1。

進一步的，所述BR緩沖液溶液pH＝9.5。

進一步的，所述BR緩沖液的流速為0.2mL·min^-1。

進一步的，所述反應(yīng)管管長250cm，內(nèi)徑0.5mm。

進一步的，所述三種AGs的最低檢測限為1.0μg·mL^-1。

進一步的，所述三種AGs的線性范圍為2.0μg·mL^-1～20.0μg·mL^-1。

進一步的，所述色譜條件的色譜柱為C18，5μm，250mm×4.6mm。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本申請可以獲得包括以下技術(shù)效果：

1)本申請的技術(shù)方案，建立了HPLC-RRS聯(lián)用同時分離測定三種AGs的含量。

2)本申請的檢測方法，方法簡便、快速、靈敏度高、選擇性好并成功用于分離了三種抗生素的混合物，同時應(yīng)用于妥布霉素滴眼液、硫酸依替米星注射液和硫酸奈替米星注射液中AGs含量的測定中。

3)本申請的HPLC-RRS聯(lián)用方法，進一步拓寬了RRS技術(shù)的應(yīng)用范圍，并為HPLC提供了一種全新的檢測模式。

當然，實施本申請的任一產(chǎn)品不一定需要同時達到以上所述的所有技術(shù)效果。

附圖說明

此處所說明的附圖用來提供對本申請的進一步理解，構(gòu)成本申請的一部分，本申請的示意性實施例及其說明用于解釋本申請，并不構(gòu)成對本申請的不當限定。在附圖中：

圖1為本申請實施例中三種氨基糖苷類抗生素及PSB的RRS光譜圖；

圖2為本申請實施例中PSB-TOB體系RRS光譜圖；

圖3為本申請實施例中酸度對RRS反應(yīng)的影響圖；

圖4為本申請實施例中SB-TOB離子締合物UV/VIS吸收圖與RRS光譜圖對比圖；

圖5為本申請實施例中TOB與PSB反應(yīng)式圖；

圖6為本申請實施例中PSB-AGs體系HPLC-RRS色譜圖；

圖7為本申請實施例中PSB濃度對RRS反應(yīng)的影響圖；

圖8為本申請實施例中探針流速對RRS反應(yīng)的影響圖；

圖9為本申請實施例中反應(yīng)管長度對RRS反應(yīng)的影響圖。

具體實施方式

以下將配合附圖及實施例來詳細說明本申請的實施方式，藉此對本申請如何應(yīng)用技術(shù)手段來解決技術(shù)問題并達成技術(shù)功效的實現(xiàn)過程能充分理解并據(jù)以實施。

實施例

1、試劑

妥布霉素(Tobramycin，TOB)、依替米星(etimicin，ETI)及奈替米星(netilmicin，NET)標準品均購自中國藥品生物制品檢定所，滂胺天藍(PSB)購自Chroma公司(德國)。甲醇和乙腈均為色譜純(江蘇省漢邦公司)。BR緩沖溶液由0.04mol·mL^-1H₃PO₄、H₃BO₃、CH₃COOH與0.02mol·mL^-1NaOH溶液按一定比例混合，配成不同pH值的緩沖溶液，用酸度計校正其pH值。三氟乙酸(TFA)為分析純。實驗中使用超純水。妥布霉素滴眼液、硫酸依替米星針劑及硫酸奈替米星針劑均購自當?shù)厮幏俊?/p>

2、儀器

安捷倫1100系統(tǒng)(美國)(G1322A在線脫氣，G1311A四元泵，G1316A柱溫箱，G1313A自動進樣器，G1321A熒光檢測器、G2070-60069色譜工作站)。P100高壓力恒定流泵(伍豐科學儀器有限公司，上海，中國)。Eclipse熒光分光儀(瓦里安，美國)用于測量RRS強度。U-3019/3310紫外可見分光光度計(日立，日本)用于記錄吸收光譜。PHS-3C型酸度計(上海大普分析儀器廠)。Sartorius BS210S電子天平(Sartorius公司，德國)。SK-1快速混勻器(江蘇國華儀器廠)。TGL-16高速臺式離心機(上海醫(yī)用分析儀器廠)。BF2000型氮氣吹干儀(北京八方世紀有限公司)。

3、溶液的配制

3.1標準溶液的配置

精密稱取TOB、ETI及NET標準品10.0mg，經(jīng)雙蒸水溶解后定溶于10mL容量瓶中，得到濃度為1.0mg·mL^-1的儲備液，并存儲于4～8℃的冰箱中。精密量取不同體積的TOB、ETI及NET儲備液于5mL容量瓶中，用BR緩沖溶液稀釋得到不同濃度的工作液。RRS實驗中所用TOB、ETI及NET標準溶液為儲備液由雙蒸水稀釋所得。

3.2探針溶液的配制

精密稱取PSB固體粉末，經(jīng)雙蒸水溶解后定溶于容量瓶中，得到濃度為1.0×10^-3mol·L^-1的儲備液，并存儲于4～8℃的冰箱中。HPLC-RRS所用PSB探針溶液由BR緩沖溶液溶解，濃度為2.0×10^-5mol·L^-1；RRS實驗中所用PSB溶液為雙蒸水稀釋所得，濃度為1.0×10^-4mol·L^-1。

3.3樣品的配制

取妥布霉素滴眼液、硫酸依替米星針劑及硫酸奈替米星針劑適量，用雙蒸水稀釋至適量濃度，所用樣品均置于4℃冰箱中保存，進樣前均經(jīng)0.45μm濾膜過濾。

4、RRS實驗

4.1RRS光譜

于10mL比色管中，依次加入1.0mL pH＝5.00的BR緩沖溶液、一定量的AGs標準溶液 和1.0mL 1.0×10^-4mol·L^-1的PSB溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，于熒光分光光度計上以λex＝λem方式進行同步掃描，記錄共振瑞利散射光譜，并分別于最大RRS波長處測量離子締合物的RRS強度I_RRS及試劑空白的RRS強度I₀，ΔI_RRS＝I_RRS-I₀。

三種氨基糖苷類抗生素及PSB的RRS光譜圖如圖1所示。從圖1中可以看出，TOB、ETI、NET及PSB自身的RRS均十分微弱，但當三種氨基糖苷類抗生素與PSB反應(yīng)形成離子締合物后，RRS強度明顯增強；它們具有相似的光譜特征，最大散射波長位于362nm處，另外兩個散射峰分別位于275nm與677nm處。PSB-AGs體系RRS強度順序為TOB＞ETI＞NET。以TOB為例，RRS強度與TOB濃度呈良好線性關(guān)系，如圖2。

4.2酸度對RRS反應(yīng)的影響

通過調(diào)節(jié)BR緩沖溶液的pH值來考察酸度對RRS的反應(yīng)，實驗通過調(diào)節(jié)BR緩沖溶液的pH值來考察酸度對RRS的反應(yīng)，如圖3所示。結(jié)果表明，反應(yīng)的最佳酸度范圍為pH 4.0～6.0，超出此范圍，PSB-AGs體系的RRS強度均會明顯降低。這與AGs及PSB的結(jié)構(gòu)有關(guān)，在較低的pH值下，PSB自身形成二聚物的趨勢增加，與PSB-AGs分子間的締合作用相競爭，導致離子締合物的RRS強度減??；另一方面，在較高pH值條件下，不利于形成AGs陽離子，亦使RRS反應(yīng)強度減低。

4.3PSB-AGs體系的紫外可見光吸收圖譜

圖4所示為本文以PSB-TOB為例分析的紫外-可見光(UV/VIS)吸收圖譜。其中362nm及677nm的散射峰與347nm及635nm的吸收峰相對應(yīng)，這是RRS強度增強的主要原因。

4.4離子締合物的形成

在弱酸環(huán)境中(pH 5.00)，PSB結(jié)構(gòu)中的四個磺酸基團解離形成一個大的陰離子，同時AGs質(zhì)子化為陽離子。實驗中使用摩爾比法和等摩爾連續(xù)變化法測定了PSB與AGs結(jié)合成離子締合物的組成比約為1∶2。以PSB-TOB為例，其反應(yīng)過程及離子締合物的組成情況如圖5所示。在pH＝5.0的BR緩沖溶液中，帶4個單位負電荷的PSB^4-與帶2個單位正電荷的TOB²⁺之間存在較強的靜電引力作用。此外，PSB結(jié)構(gòu)中的2個萘基及1個聯(lián)苯基與AGs結(jié)構(gòu)中的多個環(huán)醇基均為較大的疏水基團。因此，當AGs陽離子與PSB陰離子形成電中性的離子締合物后，由于靜電引力及疏水作用，散射強度大大增加。

4.5結(jié)論

當反應(yīng)條件確定之后，RRS反應(yīng)強度主要有以下兩方面因素決定：一是形成的離子締合物的體積(體積越大，散射強度越強)；二是散射分子的摩爾吸光系數(shù)ε(ε值越大，分子的吸光度越強，對散射強度的貢獻越大)。當TOB²⁺與染料陰離子PSB^4-相反應(yīng)形成離子締合物 后，分子的體積及ε值均較TOB自身大幅度的增加。此外，由于范德華力及疏水作用力均導致大的散射分子形成，這都大大的有利于散射強度的增加。

5、HPLC-RRS實驗

實驗中所用色譜柱為Agilent Zorbox SB-C18column(250mm×4.6mm i.d.，5μm)及保護柱(Security Guard C18，4×2mm，Phenomenex)。流動相為甲醇∶水(含0.2％TFA)＝5∶95(v/v)，HPLC流速為0.50mL·min^-1，λex＝λem＝362nm，柱溫為30℃，進樣量為20μL，探針為2.0×10^-5mol·L^-1的PSB溶液，pH為9.5，單泵的流速為0.2mL·min^-1，反應(yīng)管長250cm，內(nèi)徑0.5mm。實驗所用的溶液均經(jīng)過0.45μm濾膜過濾。

5.1色譜條件的優(yōu)化

5.1.1測定波長的選擇

根據(jù)4.3項，兩個主要的散射峰分別為362nm和677nm，實驗中分別嘗試λex＝λem＝362nm及677nm的情況。發(fā)現(xiàn)當λex＝λem＝362nm時，散射峰明顯，峰形較好；相反，當λex＝λem＝677nm時，液相圖譜中完全沒有散射峰出現(xiàn)，這與熒光檢測器的光源的能量有關(guān)。因此，實驗中選擇362nm為測定波長。

5.1.2有機溶劑對RRS反應(yīng)的影響及流動相的選擇

實驗中選擇在水相中添加TFA來調(diào)節(jié)pH值，TFA有以下兩方面作用：一是使流動相呈酸性，使目標成分在流動相中完全離子化；二是起到離子對試劑的作用，調(diào)節(jié)保留時間。

實驗中分別考察了乙腈及甲醇作為有機相的情況，發(fā)現(xiàn)當流動相中含有乙腈時，基線波動較大，目標峰面積顯著減小，當流動相中含有甲醇時，則色譜峰形較好，基線穩(wěn)定。測定添加TFA的流動相的pH值約為2.0，在此情況下，若使用乙腈作為有機相，則乙腈分子結(jié)構(gòu)中的N原子所含的孤對電子(CH₃CN：)極易吸引溶液中的氫質(zhì)子(H⁺)而帶正電荷。當攜帶正電荷的流動相與帶負電荷的PSB探針溶液在反應(yīng)盤管中匯合，必然導致PSB^4-與CH₃CN：H⁺及PSB^4-與AGs²⁺之間形成競爭，表現(xiàn)為基線波動及目標峰面積下降。因此，實驗中選擇甲醇-水(含TFA)作為流動相。實驗中發(fā)現(xiàn)當甲醇比例超過10％后，ETI與NET不能分開，若甲醇比例低于3％則洗脫時間大大增加，色譜峰展寬。最終實驗確定流動相為甲醇∶水(含0.2％TFA)＝5∶95(v/v)，HPLC-RRS色譜圖如圖6所示，其中TOB、NET及ETI的保留時間分別為9.5min、16.2min及18.8min，分離度均大于1.5。

5.1.3HPLC流速對RRS反應(yīng)的影響

HPLC-RRS聯(lián)用中HPLC流速的選擇與一般液相方法不同。實驗中考察了HPLC流速(0.20ml·min^-1～0.80ml·min^-1)對RRS反應(yīng)的影響。實驗表明，反應(yīng)管中的pH值由流動相 及探針溶液共同決定，混合后溶液中兩者的比例由HPLC及單泵的流量決定，因此HPLC流速變化對反應(yīng)管中pH值有顯著的影響。實驗發(fā)現(xiàn)，當HPLC流速加大時，色譜峰面積明顯減少，這不僅與流速加大導致反應(yīng)時間縮短有關(guān)，還與反應(yīng)管中pH值明顯降低有關(guān)。若HPLC流速過緩，則目標成分保留時間延長、色譜峰展寬嚴重。綜合評價了對稱因子、保留時間及RRS反應(yīng)的基礎(chǔ)上，實驗最終選定了0.50ml·min^-1為HPLC流速。

5.2柱后條件的優(yōu)化

柱后條件的優(yōu)化采用流動注射分析的方法進行考察，也就是用不銹鋼兩通代替色譜柱，去除色譜柱的影響僅分析柱后反應(yīng)的情況，包括BR緩沖溶液酸度、探針濃度、探針流速及反應(yīng)管長度的考察。

5.2.1PSB濃度對RRS反應(yīng)的影響

以TOB為例，PSB濃度對RRS反應(yīng)強度的影響如圖7所示。起初依照反應(yīng)比，PSB濃度沒有達到飽和，RRS反應(yīng)強度隨鉬酸銨濃度的增大而增大，當濃度達到一定值后，PSB趨于飽和，當濃度再度增大時，PSB自身形成二聚物的趨勢加大，與PSB-AGs分子間的締合作用相競爭，導致離子締合物的RRS強度隨PSB濃度的增大而減小。因此，實驗中選擇濃度為2.0×10^-5mol·L^-1的PSB溶液為探針。

5.2.2pH值對RRS反應(yīng)的影響

靜態(tài)條件下pH對RRS反應(yīng)的影響已考察，結(jié)果表明BR緩沖溶液最佳酸度范圍是pH4.0～6.0。經(jīng)測定含0.2％TFA的流動相的pH值約為2.0，為了平衡過酸的流動相對反應(yīng)的影響，必須調(diào)節(jié)BR緩沖溶液的酸度，使混合后溶液的pH在4.00～6.00的范圍內(nèi)。經(jīng)測定當BR緩沖溶液的pH值在8.5～10.0時，可滿足反應(yīng)的pH要求，但當pH值過高時，基線波動大、靈敏度降低，因此實驗中選擇BR緩沖溶液的pH值為9.5。

5.2.3探針流速對RRS反應(yīng)的影響

實驗考察了探針流速(0.10mL·min^-1～0.45mL·min^-1)對RRS反應(yīng)的影響。以PSB-TOB為例結(jié)果如圖8所示，當單泵流速低于0.10mL·min^-1時，由于探針流速過慢導致RRS反應(yīng)不完全，色譜峰面積下降、靈敏度減低；同時流速過快，導致反應(yīng)時間減少，RRS強度下降。因此，實驗中選擇0.20mL·min^-1的PSB為探針。

5.2.4反應(yīng)管長度對RRS反應(yīng)的影響

實驗中考察了反應(yīng)管長度(150～450cm)對RRS反應(yīng)的影響。以PSB-TOB為例結(jié)果如圖9所示，反應(yīng)管最佳長度范圍為200～300cm。最初RRS反應(yīng)強度隨反應(yīng)管的增加而增強，但當反應(yīng)管長度超過300cm后，出峰時間延長、色譜峰展寬嚴重，對稱度下降，靈敏度降低； 若反應(yīng)管過短，反應(yīng)時間縮短，目標峰面積明顯減小。綜合以上各因素考慮，實驗選擇反應(yīng)管長度為250cm。

6.方法可行性考察

6.1標準曲線及線性范圍

精密配置不同濃度三種AGs標準溶液，按上述色譜條件進行測定，記錄峰面積，三種AGs回歸方程及相關(guān)系數(shù)為見表1，其中y色譜峰面積，x為AGs濃度(μg·mL^-1)。線性范圍為2.0μg·mL^-1～20.0μg·mL^-1，最低檢測限為1.0μg·mL^-1(S/N＝3)。

表1 TOB、NET及ETI回歸方程及相關(guān)系數(shù)

6.2精密度實驗

分別制備高、中、低濃度的AGs標樣各5份，均按上述樣品處理方法處理后，于同日內(nèi)進樣5次測定；另取上述樣品，每天測定一次，連續(xù)測定5天，測定樣品峰面積，按回歸方程求出對應(yīng)濃度，計算其日內(nèi)和日間的精密度。日內(nèi)精密度在1.47％～2.68％之間；日間精密度在3.45％～5.26％之間。

7、應(yīng)用

上述HPLC-RRS方法已成功用于妥布霉素滴眼液、硫酸依替米星針劑及硫酸奈替米星針劑的含量測定中。按3.3項制備樣品后進樣?；厥章室姳?。

表2 不同制劑中AGs含量的測定

HPLC-RRS聯(lián)用技術(shù)中，HPLC系統(tǒng)實現(xiàn)了樣品的自動分離分析，同時RRS檢測技術(shù)實現(xiàn)了對無紫外吸收物質(zhì)的檢測，這是HPLC-RRS聯(lián)用技術(shù)無可比擬的優(yōu)點。

本文以RRS為檢測方法建立了一種全新的HPLC檢測模式，并成功用于不同制劑中AGs含量的測定中。雖然HPLC-RRS的擴大應(yīng)用還有許多困難，但是HPLC-RRS聯(lián)用技術(shù)可以滿足對某些物質(zhì)簡便、快速及高靈敏度的檢測，可以肯定的是，HPLC-RRS聯(lián)用技術(shù)必將在更為廣泛的測定領(lǐng)域得到應(yīng)用。

如在說明書及權(quán)利要求當中使用了某些詞匯來指稱特定成分或方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)可理解，不同地區(qū)可能會用不同名詞來稱呼同一個成分。本說明書及權(quán)利要求并不以名稱的差異來作為區(qū)分成分的方式。如在通篇說明書及權(quán)利要求當中所提及的“包含”為一開放式用語，故應(yīng)解釋成“包含但不限定于”?！按笾隆笔侵冈诳山邮盏恼`差范圍內(nèi)，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠在一定誤差范圍內(nèi)解決所述技術(shù)問題，基本達到所述技術(shù)效果。說明書后續(xù)描述為實施本申請的較佳實施方式，然所述描述乃以說明本申請的一般原則為目的，并非用以限定本申請的范圍。本申請的保護范圍當視所附權(quán)利要求所界定者為準。

還需要說明的是，術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的商品或者系統(tǒng)不僅包括那些要素，而且還包括沒有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種商品或者系統(tǒng)所固有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句“包括一個......”限定的要素，并不排除在包括所述要素的商品或者系統(tǒng)中還存在另外的相同要素。

上述說明示出并描述了本發(fā)明的若干優(yōu)選實施例，但如前所述，應(yīng)當理解本實用新 型并非局限于本文所披露的形式，不應(yīng)看作是對其他實施例的排除，而可用于各種其他組合、修改和環(huán)境，并能夠在本文所述發(fā)明構(gòu)想范圍內(nèi)，通過上述教導或相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)或知識進行改動。而本領(lǐng)域人員所進行的改動和變化不脫離本發(fā)明的精神和范圍，則都應(yīng)在本發(fā)明所附權(quán)利要求的保護范圍內(nèi)。