国产精品1024永久观看,大尺度欧美暖暖视频在线观看,亚洲宅男精品一区在线观看,欧美日韩一区二区三区视频,2021中文字幕在线观看

  • <option id="fbvk0"></option>
    1. <rt id="fbvk0"><tr id="fbvk0"></tr></rt>
      <center id="fbvk0"><optgroup id="fbvk0"></optgroup></center>
      <center id="fbvk0"></center>

      <li id="fbvk0"><abbr id="fbvk0"><dl id="fbvk0"></dl></abbr></li>

      一種去除血清中的小分子物質的方法與流程

      文檔序號:12267054閱讀:3736來源:國知局
      一種去除血清中的小分子物質的方法與流程

      本發(fā)明涉及體外診斷醫(yī)學檢驗領域。具體地說,本發(fā)明涉及一種去除血清中的小分子物質,例如血清中的甲狀腺激素的方法以及所制備的去除小分子物質的血清的用途。



      背景技術:

      在體外診斷醫(yī)學檢驗領域,所謂的定標品是指客戶端使用的,作為適用于特定試劑的標準物質。例如,為檢測血清中某種物質,為了避免不同檢測物質的誤差,一般需要去除該物質的血清作為定標品稀釋液。在試劑盒的研制過程中,公司內通過校準品建立各批號試劑盒的主曲線并給產品中的定標品賦值,客戶端采用定標品修正主曲線生成定標曲線,測定常規(guī)樣本后得到測定結果。

      校準品是具有在校準函數(shù)中用作獨立變量值的參考物質;主曲線是反映被測物質濃度與發(fā)光值之間函數(shù)關系的曲線。主曲線由試劑制造商制定。不同批號試劑的主曲線,一般都不會完全相同。

      甲狀腺作為人體最重要的腺體,通過合成、儲存以及釋放甲狀腺素(thyroxine,levothyronine,T4)及三碘甲狀腺原氨酸(Triiodothyronine,liothyronine,T3)兩種甲狀腺激素來控制能量、蛋白質及脂肪的合成代謝等人體生理活動(如圖1所示)。

      三碘甲狀腺原氨酸(T3)是一種分子量為651道爾頓的激素,是甲狀腺激素在組織中實現(xiàn)生物作用的活性形式。在人體內,超過99%的三碘甲狀腺原氨酸與甲狀腺素結合球蛋白(TBG)特異性結合,處于結合狀態(tài),只有約0.3%為游離狀態(tài)(FT3)。血清總T4(TT4)、總T3(TT3)測定是反映甲狀腺功能狀態(tài)的最佳指標,它們在甲亢時增高,甲減時降低,而在甲亢時,血清TT3增高常較TT4增高出現(xiàn)更早。TT3的測定,有助于早期甲亢的診斷及對甲亢的治療的監(jiān)控。

      游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)是總三碘甲狀腺原氨酸(TT3)中具有生物活性的形式。檢測FT3的優(yōu)勢在于,當由于懷孕、使用一些激素類藥物進行治療等情況導致三碘甲狀腺原氨酸的蛋白結合濃度或親和力變化時,F(xiàn)T3并不受到影響。FT3與游離T4(FT4)的聯(lián)合檢測,是臨床診斷某些復雜或非典型甲亢及罕見甲狀腺疾病的重要依據(jù)。

      目前臨床上總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸的檢測方法主要有始于二十世紀中后期的放射免疫分析法(RIA)試劑盒,發(fā)展到二十世紀后期的酶聯(lián)免疫法(ELISA)試劑盒。由于酶聯(lián)免疫試劑盒采用酶促顯色反應,其定量量程小、靈敏度低,需采用人工操作,費時費力且誤差大,已逐漸被國外市場所淘汰。目前總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸試劑盒多采用化學發(fā)光法(CLIA),化學發(fā)光法(CLIA)試劑盒不論是靈敏度、準確性,還是特異性都有很大的提高?;瘜W發(fā)光法(CLIA)包括板式化學發(fā)光法和全自動化學發(fā)光試劑盒。板式化學發(fā)光法雖然解決了酶聯(lián)免疫法定量靈敏度較低的缺點,但是不適用全自動免疫發(fā)光儀,相對于國外進口試劑盒沒有優(yōu)勢。國內試劑廠商所生產的試劑盒多數(shù)仍為酶聯(lián)免疫法試劑盒(ELISA),缺乏市場競爭力,造成目前我國檢測總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸的試劑盒主要由國外四大體外診斷試劑公司,如羅氏,雅培,貝克曼,西門子所壟斷,這是檢測診斷成本高的一個原因,且試劑盒的制備方法和相關材料均作為保密資料,未被公開,不利于總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測在社區(qū)基層醫(yī)院的推廣。國產總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸試劑盒重復性較差,批間差異難控,且靈敏度較低,交叉反應率較高,臨床應用前景較差。

      因此,本領域急需一種具有檢測靈敏度高、特異性好、重復性高等優(yōu)點的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒。



      技術實現(xiàn)要素:

      本發(fā)明的目的是提供一種去除分子量小于1,000道爾頓的小分子,例如甲狀腺激素的血清及其制備方法,利用所述血清大幅提高了試劑盒的準確度及靈敏度。

      本發(fā)明還有一目的是提供包括上述血清的檢測試劑盒,例如人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒。

      本發(fā)明再有一目的是提供利用本發(fā)明的血清或試劑盒,例如去甲狀腺激素血清或人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸測試劑盒檢測,例如人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸的方法。

      在第一方面,本發(fā)明提供一種葡聚糖處理的活性炭,其中,活性炭的粒徑為0.4~0.6mm,孔徑為10~20A,葡聚糖的分子量為10000~40000道爾頓。

      在優(yōu)選的實施方式中,所述葡聚糖的分子量為10000;所述活性炭的粒徑為0.6mm,孔徑為20A。

      在具體的實施方式中,用葡聚糖處理活性炭是將活性炭加入飽和的葡聚糖溶液中緩慢混勻過夜制備得到。

      在優(yōu)選的實施方式中,所述的葡聚糖處理活性炭的制備,是將活性炭加入飽和的葡聚糖溶液中,緩慢混勻過夜,活性炭上完全被葡聚糖封閉后,使用水溶液洗凈瀝干后,保存?zhèn)溆谩?/p>

      在優(yōu)選的實施方式中,葡聚糖與活性炭的質量比為50-500:1,優(yōu)選100:1。

      在第二方面,本發(fā)明提供一種去除人血清中分子量小于1,000道爾頓的小分子的方法,所述方法包括以下步驟:

      a)利用本發(fā)明第一方面所述的葡聚糖處理的活性炭來處理人血清;

      b)混合步驟a)得到的葡聚糖處理的活性炭與人血清的體系以去除人血清中分子量小于1,000道爾頓的小分子后,低速離心去除葡聚糖處理的活性炭。

      在具體的實施方式中,所述分子量小于1,000的小分子是甲狀腺激素、性激素、腎上腺皮質激素,優(yōu)選甲狀腺激素。

      在優(yōu)選的實施方式中,所述處理是將葡聚糖處理的活性炭與血清進行混合,濃度為20-40mg/ml,在2-8℃,混合2-7天;優(yōu)選40mg/ml,以50rpm混合3天或者20mg/ml,混合2天后,再加入10mg/ml混合1天,50rpm。

      在第三方面,本發(fā)明提供一種去甲狀腺激素人血清,所述人血清利用本發(fā)明第一方面所述的葡聚糖處理的活性炭進行處理,從而去除了甲狀腺激素。

      在優(yōu)選的實施方式中,將葡聚糖處理的活性炭與人血清進行混合,濃度為20-40mg/ml,在2-8℃,混合2-7天。

      在具體的實施方式中,所述去甲狀腺激素人血清中總甲狀腺素的含量低于8ng/ml,游離甲狀腺素含量低于0.3ng/dL,總三碘甲狀腺原氨酸含量低于0.25ng/ml,游離三碘甲狀腺原氨酸含量低于1pg/ml。

      在第四方面,本發(fā)明提供利用本發(fā)明第一方面所述的葡聚糖處理的活性炭得到的去甲狀腺激素血清,或采用本發(fā)明第二方面所述的方法得到的去甲狀腺激素人血清,或本發(fā)明第三方面所述的去甲狀腺激素人血清在制備人總三碘甲狀腺原氨酸及游離甲狀腺原氨酸檢測試劑盒中的用途。

      在第五方面,一種人總三碘甲狀腺原氨酸及游離甲狀腺原氨酸檢測試劑盒,所述試劑盒裝有:利用本發(fā)明第一方面所述的葡聚糖處理的活性炭得到的去甲狀腺激素血清,或采用本發(fā)明第二方面所述的方法得到的去甲狀腺激素人血清,或本發(fā)明第三方面所述的去甲狀腺激素人血清作為稀釋液制得的定標品。

      在優(yōu)選的實施方式中,所述檢測試劑盒還可裝有:酶標記的三碘甲狀腺原氨酸;包被T3抗體的磁微粒;稀釋液;化學發(fā)光底物和洗滌液以及使用說明書。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述人游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒還裝有:酶標記的三碘甲狀腺原氨酸;包被T3抗體的磁微粒;稀釋液;化學發(fā)光底物和洗滌液。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述酶標記的三碘甲狀腺原氨酸中的酶是堿性磷酸酶。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述包被T3抗體的磁微粒的主要成分是超順磁性微粒,粒徑為800nm~3μm,主要的活性功能基團為羧基、氨基或苯甲磺酰基。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述化學發(fā)光底物的主要成分為1,2-二氧雜環(huán)丁烷衍生物,為酶促化學發(fā)光底物。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述1,2-二氧雜環(huán)丁烷衍生物為AMPPD(3-(2'-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯-1,2-二氧雜環(huán)丁烷)、CDP-star。

      在第六方面,本發(fā)明提供一種檢測人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸的方法,所述方法包括利用本發(fā)明第一方面所述的葡聚糖處理的活性炭得到的去甲狀腺激素血清,或采用本發(fā)明第二方面所述的方法得到的去甲狀腺激素血清,或本發(fā)明第三方面所述的去甲狀腺激素人血清,或本發(fā)明第五方面所述的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒檢測離體樣品中的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸。

      在第七方面,本發(fā)明提供制備人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒的方法,所述的方法包括:

      將利用本發(fā)明第一方面所述的葡聚糖處理的活性炭得到的去甲狀腺激素血清,或采用本發(fā)明第二方面所述的方法得到的去甲狀腺激素血清,或本發(fā)明第三方面所述的去甲狀腺激素人血清;酶標記的三碘甲狀腺原氨酸;包被T3抗體的磁微粒;稀釋液;化學發(fā)光底物和洗滌液制成人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述的總三碘甲狀腺原氨酸定標品的濃度分別為0-2ng/mL和4-8ng/mL;所述的游離三碘甲狀腺原氨酸定標品的濃度分別為0-5pg/mL和10-30pg/mL。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述的T3抗體交聯(lián)磁微粒的制備,是將活性功能基團為羧基、氨基或苯甲磺酰基的磁微粒通過共價交聯(lián)的方式與T3抗體中的裸露氨基交聯(lián)反應,并通過含有0.5~2%的酪蛋白溶液洗滌和封閉,最終貯存于含有0.1~1%的酪蛋白溶液中,2~8℃保存?zhèn)溆谩?/p>

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述的磁微粒試劑稀釋液的配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl、0.5~2%酪蛋白、0.05~0.2%ProClin-300。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,堿性磷酸酶標記三碘甲狀腺原氨酸的制備方法為戊二醛偶聯(lián)法,具體操作為:將堿性磷酸酶溶于終濃度5%戊二醛溶液中,室溫靜置過夜,生理鹽水透析后,加入三碘甲狀腺原氨酸,50mM pH9.6碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液中透析過夜,加入甘氨酸,室溫反應2小時,等體積加入飽和硫酸銨,2~8℃2小時,4000rpm離心去上清,沉淀溶于50mM pH7.40磷酸緩沖液中,對其透析過夜,加入等體積甘油,置于-20℃保存。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,堿性磷酸酶標記三碘甲狀腺原氨酸的稀釋液的配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl、0.5~2%BSA、5~15%甘油、0.05~0.5%吐溫-20、0.05~0.2%ProClin-300。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述總三碘甲狀腺原氨酸的稀釋液配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl,0.5~2%酪蛋白,0.1~1mg/ml解離劑,0.05~0.2%ProClin-300。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述游離三碘甲狀腺原氨酸的稀釋液配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl,0.5~2%酪蛋白,0.05~0.2%ProClin-300。

      在另一優(yōu)選的實施方式中,所述的洗滌液配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl,50~300mM NaCl,0.1~1%曲拉通X-100,0.05~0.2%ProClin-300。

      應理解,在本發(fā)明范圍內中,本發(fā)明的上述各技術特征和在下文(如實施例)中具體描述的各技術特征之間都可以互相組合,從而構成新的或優(yōu)選的技術方案。限于篇幅,在此不再一一累述。

      附圖說明

      圖1顯示了甲狀腺素及三碘甲狀腺原氨酸的結構;

      圖2顯示了使用本發(fā)明所述方法得到的去甲狀腺激素血清、使用普通活性炭處理得到的去甲狀腺激素血清和去甲狀腺激素牛血清,對于總三碘甲狀腺原氨酸試劑盒定標品的影響。由圖2可看出對照去甲狀腺激素血清線性最佳,優(yōu)于使用普通活性炭處理得到的去甲狀腺激素血清和去甲狀腺激素牛血清。

      具體實施方式

      發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究,出乎意料地發(fā)現(xiàn)利用葡聚糖處理的活性炭處理血清,能夠有效去除其中分子量小于1,000道爾頓的小分子物質,將經(jīng)處理的血清用作檢測試劑盒的定標品,能夠顯著改善最終所得試劑盒的準確度及靈敏度。在此基礎上完成了本發(fā)明。

      在具體的實施方式中,利用葡聚糖處理的活性炭處理得到的去甲狀腺激素血清,用作總三碘甲狀腺原氨酸試劑盒及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒的定標品,能夠顯著改善最終所得試劑盒的準確度及靈敏度。

      本發(fā)明的去甲狀腺激素血清及其制備方法

      基于以上出乎意料的發(fā)現(xiàn),本發(fā)明首先提供一種去甲狀腺激素血清,所述去甲狀腺激素血清在作為試劑盒定標品稀釋液前,利用葡聚糖處理的活性炭進行處理。

      本文所用的術語“葡聚糖處理的活性炭”是指由葡聚糖和活性炭構成的組合物,其中,活性炭的粒徑為0.4~0.6mm,孔徑為10~20A,葡聚糖的分子量為10000~40000道爾頓。在優(yōu)選的實施方式中,所述葡聚糖的分子量為10000;所述活性炭的粒徑為0.6mm,孔徑為20A。

      在具體的實施方式中,用葡聚糖處理活性炭是指將活性炭加入飽和的葡聚糖溶液中緩慢混勻過夜以制備葡聚糖處理的活性炭。在優(yōu)選的實施方式中,所述的葡聚糖處理活性炭的制備,是將活性炭加入飽和的葡聚糖溶液中,反復活性炭上完全被葡聚糖封閉后,使用水溶液洗凈瀝干后,保存?zhèn)溆?。其中,葡聚糖與活性炭的質量比為50-500:1,優(yōu)選100:1。

      相應地,本發(fā)明還提供了上文所述去甲狀腺激素血清的制備方法,所述方法包括以下步驟:

      a)利用上述的葡聚糖處理的活性炭來處理人血清;

      b)混合步驟a)得到的葡聚糖處理的活性炭與人血清的體系以去除人血清中的甲狀腺激素后,低速離心去除葡聚糖處理的活性炭。

      在本發(fā)明中,所述處理是將葡聚糖處理的活性炭與正常人血清進行混勻。

      所述處理是將葡聚糖處理活性炭與正常人血清進行混勻,濃度為20-40mg/ml,在2-8℃,混勻2-7天;優(yōu)選40mg/ml混勻3天或者20mg/ml,2天后再加入10mg/ml混勻1天。鑒于本發(fā)明的教導和現(xiàn)有技術,本領域普通技術人員可以合理確定上述處理中,正常人血清與葡聚糖處理活性炭各自合適的濃度以及相互的比例。

      例如,在具體的實施方式中,前處理中所述處理是將葡聚糖處理活性炭與正常人血清進行混勻,濃度為20-40mg/ml,在2-8℃,混勻2-7天;優(yōu)選40mg/ml混勻3天50rpm或者20mg/ml,2天后再加入10mg/ml混勻1天50rpm。

      本發(fā)明的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離甲狀腺原氨酸檢測試劑盒

      本發(fā)明的去甲狀腺激素血清可以用于檢測人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒,從而能夠顯著改善最終所得試劑盒的準確度及靈敏度。

      基于本發(fā)明的去甲狀腺激素血清,本發(fā)明進一步提供了一種人總三碘甲狀腺原氨酸及游離甲狀腺原氨酸檢測試劑盒,所述試劑盒利用本發(fā)明的去甲狀腺激素血清作為定標品稀釋液。

      鑒于本發(fā)明的教導和現(xiàn)有技術,本領域普通技術人員可以確定所述人總三碘甲狀腺原氨酸及游離甲狀腺原氨酸檢測試劑盒中的其它組分,例如,在具體的實施方式中,本發(fā)明的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離甲狀腺原氨酸檢測試劑盒還可裝有:酶標記的三碘甲狀腺原氨酸;包被T3抗體的磁微粒;稀釋液;化學發(fā)光底物和洗滌液。

      在優(yōu)選的實施方式中,所述酶標記的三碘甲狀腺原氨酸中的酶是堿性磷酸酶。

      相應地,本發(fā)明的人三碘甲狀腺原氨酸及游離甲狀腺原氨酸檢測試劑盒中的所述化學發(fā)光底物的主要成分可以為1,2-二氧雜環(huán)丁烷衍生物,為酶促化學發(fā)光底物。在優(yōu)選的實施方式中,所述1,2-二氧雜環(huán)丁烷衍生物為AMPPD(3-(2'-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯-1,2-二氧雜環(huán)丁烷)、CDP-star。而本發(fā)明的人三碘甲狀腺原氨酸及游離甲狀腺原氨酸檢測試劑盒中的磁微粒試劑的主要成分可以是超順磁性微粒,其粒徑為800nm~3μm,主要的活性功能基團為羧基、氨基或苯甲磺酰基。T3抗體交聯(lián)磁微粒的制備,是將活性功能基團為羧基、氨基或苯甲磺?;拇盼⒘Mㄟ^共價交聯(lián)的方式與T3抗體中的裸露氨基交聯(lián)反應,并通過含有0.5~2%的酪蛋白溶液洗滌和封閉,最終貯存于含有0.1~1%的酪蛋白溶液中,2~8℃保存?zhèn)溆谩?/p>

      本發(fā)明的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒可如下所示進行制備,包括:

      T3抗體交聯(lián)磁微粒;酶標記的三碘甲狀腺原氨酸;將本發(fā)明的去甲狀腺激素血清作為稀釋液的定標品;化學發(fā)光底物;和洗滌液制成人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒。

      在具體的實施方式中,所述的磁微粒試劑稀釋液的配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl、0.5~2%酪蛋白、0.05~0.2%ProClin-300。

      在具體的實施方式中,堿性磷酸酶標記T3抗體的制備方法為戊二醛偶聯(lián)法,具體為:將堿性磷酸酶溶于終濃度5%戊二醛溶液中,室溫靜置過夜,生理鹽水透析后,加入三碘甲狀腺原氨酸,50mM pH 9.6碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液中透析過夜,加入甘氨酸,室溫反應2小時,等體積加入飽和硫酸銨,2~8℃2小時,4000rpm離心去上清,沉淀溶于50mM pH 7.40磷酸緩沖液中,對其透析過夜,加入等體積甘油,置于-20℃保存。

      在具體的實施方式中,堿性磷酸酶標記三碘甲狀腺原氨酸的稀釋液的配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl、0.5~2%酪蛋白、5~15%甘油、0.05~0.5%吐溫-20、0.05~0.2%ProClin-300;總三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒定標品的濃度分別為0-2ng/mL和4-8ng/mL;游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒定標品的濃度分別為0-5pg/mL和10-30pg/mL。;總三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒的稀釋液配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl,0.5~2%酪蛋白,0.1~1mg/ml解離劑,0.05~0.2%ProClin-300。游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒的稀釋液配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl,0.5~2%酪蛋白,0.05~0.2%ProClin-300。所述的洗滌液配方為:10~100mM pH 7.2~7.8Tris-HCl,50~300mM NaCl,0.1~1%曲拉通X-100,0.05~0.2%ProClin-300。

      本發(fā)明的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸的檢測方法

      在本發(fā)明的去甲狀腺激素血清以及包含其的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒的基礎上,本發(fā)明還提供一種檢測人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸的方法,所述方法利用本發(fā)明的去甲狀腺激素血清,或本發(fā)明的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑盒檢測離體樣品中的人總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸。

      本領域技術人員知曉,本發(fā)明的肌紅蛋白檢測方法可以用于診斷目的,但不限于診斷目的,例如,可用于科研目的等等。

      本發(fā)明的優(yōu)點

      1)包含本發(fā)明的去甲狀腺激素血清的試劑盒的檢測靈敏度高,目前市場上的總三碘甲狀腺原氨酸試劑盒的最低檢測限一般高于0.3ng/mL,相比之下,包含本發(fā)明去甲狀腺激素血清的試劑盒的最低檢測限能達到0.1ng/mL;前市場上的游離三碘甲狀腺原氨酸試劑盒的最低檢測限一般高于1.5pg/mL,相比之下,包含本發(fā)明去甲狀腺激素血清的試劑盒的最低檢測限能達到0.5pg/mL;

      2)本發(fā)明的試劑盒特異性強;膽紅素、血紅蛋白、乳糜顆粒、類風濕因子(RF)、抗核抗體(ANA)、人抗鼠抗體(HAMA)對總三碘甲狀腺原氨酸及游離三碘甲狀腺原氨酸測定結果均無明顯干擾;

      3)本發(fā)明的試劑盒測定結果穩(wěn)定性好;堿性磷酸酶更穩(wěn)定、測定結果的重復性更好,1,2-二氧雜環(huán)丁烷衍生物具有較長的發(fā)光時間,發(fā)光信號可穩(wěn)定超過20分鐘以上;信號強度高,便于光電倍增管檢測;抗干擾能力強,不易污染。

      下面結合具體實施例,進一步闡述本發(fā)明。應理解,這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法,通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明,否則百分比和份數(shù)是重量百分比和重量份數(shù)。

      除非另行定義,文中所使用的所有專業(yè)與科學用語與本領域熟練人員所熟悉的意義相同。此外,任何與所記載內容相似或均等的方法及材料皆可應用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。

      實施例

      實施例1.葡聚糖處理的活性炭的制備

      選取分子量為10000道爾頓的葡聚糖1g,加入20mL純化水充分溶解后加入粒徑為0.6mm,孔徑為的20A活性炭10mg,緩慢混勻過夜,待活性炭完全封閉后,使用水重復洗凈,瀝干制得葡聚糖處理活性炭。

      實施例2.利用葡聚糖處理的活性炭處理人血清得到去甲狀腺激素血清

      將10g葡聚糖處理的活性炭與250mL血清進行混合,在2-8℃以50rpm轉速進行混勻,混合3天,取去除了激素的血清2500rpm離心,去除活性炭后即制得去甲狀腺激素血清。

      實施例3.檢驗去甲狀腺激素血清中甲狀腺激素去除程度

      使用總甲狀腺素(TT4)、游離甲狀腺素(FT4)、總三碘甲狀腺原氨酸(TT3)、游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)試劑盒測試實施例2中制得的去甲狀腺激素血清;測試結果如下:

      從以上結果可以看出,本發(fā)明制得的去甲狀腺激素血清中甲狀腺激素的含量極低,本發(fā)明的方法能夠充分去除血清中的甲狀腺激素。

      實施例4.本發(fā)明的試劑盒的驗證

      應用本發(fā)明的去甲狀腺激素血清的總三碘甲狀腺原氨酸試劑盒性能如下:

      應用本發(fā)明的去甲狀腺激素血清的游離總三碘甲狀腺原氨酸試劑盒性能如下:

      從以上結果可以看出,應用本發(fā)明的去甲狀腺激素血清的檢測試劑盒具備優(yōu)異的檢測靈敏度、最低檢測限能、特異性、抗干擾性、結果穩(wěn)定性。

      在本發(fā)明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考,就如同每一篇文獻被單獨引用作為參考那樣。此外應理解,在閱讀了本發(fā)明的上述講授內容之后,本領域技術人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改,這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。

      當前第1頁1 2 3 
      網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
      • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
      1