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      基于量子點(diǎn)的絨毛膜促性腺激素HCG免疫層析試紙條的制備方法與流程

      文檔序號:12268416閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種基于量子點(diǎn)的絨毛膜促性腺激素HCG免疫層析試紙條的制備方法;其特征是步驟如下:

      1)將量子點(diǎn)(Quantum dots,QDs)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC)和PBS緩沖液加入反應(yīng)器,在旋轉(zhuǎn)混合架上活化量子點(diǎn)的羧基,離心得到免疫量子點(diǎn)immune QDs;

      2)將絨毛膜促性腺激素α抗體Ab2和上述immune QDs混合,加入PBS緩沖液,在旋轉(zhuǎn)混合架上偶聯(lián)抗體2~3h,離心得到量子點(diǎn)-絨毛膜促性腺激素α抗體熒光探針QDs-Ab2,然后用牛血清白蛋白(Albumin from bovine serum,BSA)封閉QDs-Ab2熒光探針上未反應(yīng)的羧基,同時用樣品墊處理液處理樣品墊、結(jié)合墊處理液處理結(jié)合墊并烘干,然后用上述熒光探針溶液處理結(jié)合墊并烘干;

      3)試紙條制備:將吸水墊、硝酸纖維素膜、樣品墊以及結(jié)合墊組裝在一起,每層疊加2~3mm,得到絨毛膜促性腺激素HCG量子點(diǎn)免疫層析試紙條。

      2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是將量子點(diǎn)QDs:1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽EDC質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為1:4000~10000。

      3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是量子點(diǎn)QDs:絨毛膜促性腺激素α抗體Ab2質(zhì)量分?jǐn)?shù)比=1:10~50。

      4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是所用PBS緩沖液為0.01M pH 7.4的PBS緩沖液,用以保持絨毛膜促性腺激素抗體的免疫活性。

      5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是結(jié)合墊處理液是含有質(zhì)量體積比5%的蔗糖、質(zhì)量體積比5%的牛血清白蛋白BSA、質(zhì)量體積比3%的聚乙二醇PEG、體積比2%的聚氧乙烯山梨醇單月桂酸酯Tween-20的PBS溶液;樣品墊處理液是體積比0.5%的Tween-20的PBS溶液。

      6.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征是根據(jù)試紙條夾心結(jié)構(gòu)捕獲的量子點(diǎn)熒光強(qiáng)度和標(biāo)準(zhǔn)絨毛膜促性腺激素HCG濃度之間的關(guān)系,定性定量檢測標(biāo)準(zhǔn)絨毛膜促性腺激素HCG。

      7.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征是在樣品墊上滴加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)絨毛膜促性腺激素HCG,不同濃度為0~1000mIU/mL,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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