1.一種脫氮型活性污泥微生物胞內(nèi)一氧化氮原位測定的方法,其特征在于:包括以下步驟:
(1)、選取未膨脹的脫氮型污泥或已膨脹的脫氮型污泥作為目標污泥,分析其特征情況;
(2)、用1*PBS清洗目標泥三次,并用1*PBS稀釋至原本泥量,去除脫氮型污泥中其他雜質(zhì)的干擾;
(3)、未膨脹的脫氮型污泥微生物胞內(nèi)一氧化氮原位測定的方案為:吸取步驟(2)1-10μL樣品均勻地涂在事先用明膠包被好的玻片上的每個well孔中,涂片量同樣以剛好平鋪實際玻片上well孔為準,并在室溫下晾干;在避光條件下,取1-20μL濃度為1-50μmol/L的DAF-FM DA(NO熒光探針)添加到涂有樣品的每個well孔中,DAF-FM DA添加量以探針液包被住well孔中污泥;將樣品放置于20-37℃恒溫條件下靜置5-20分鐘后取出,在避光條件下用1*PBS洗滌玻片三次,將未進入微生物細胞的DAF-FM DA(NO熒光探針)液去除,并置于室溫下晾干,加入抗熒光衰減劑,并用指甲油密封,進行后續(xù)熒光原位檢測;
或已膨脹的脫氮型污泥微生物胞內(nèi)一氧化氮原位測定的方案為:在避光條件下,先將稀釋好的1-50μmol/L的DAF-FM DA(NO熒光探針)與步驟(2)樣品等體積混合,混勻后置于0-4℃條件下靜置5-20分鐘,后再吸取1-10μL加有DAF-FM DA的樣品均勻平鋪涂在事先用明膠包被好的玻片每個well孔中,涂片量以剛好平鋪實際玻片上well孔為準,并置于室溫下晾干,加入抗熒光衰減劑,并用指甲油密封,進行后續(xù)熒光原位檢測。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種脫氮型活性污泥微生物胞內(nèi)一氧化氮原位測定的方法,其特征在于:未膨脹的脫氮型污泥的SVI值小于150mL/g,已膨脹的脫氮型污泥的SVI值大于150mL/g。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種脫氮型活性污泥微生物胞內(nèi)一氧化氮原位測定的方法,其特征在于:DAF-FM DA的溶液為1*PBS。