本發(fā)明涉及抗氧化能力測定的技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種測定抗氧化能力的試劑盒。

背景技術(shù)：

氧化自由基學(xué)說認(rèn)為，活性氧(ROS)和活性氮(RNS)可以生成自由基，從而引起細(xì)胞脂質(zhì)、細(xì)胞膜、蛋白和DNA出現(xiàn)氧化性損傷。隨著時(shí)間的推移，氧自由基產(chǎn)生增多，而機(jī)體清除能力下降，同時(shí)SOD、GSH-PX、CAT酶等活性降低。而且過剩的自由基能與機(jī)體細(xì)胞中不飽和脂肪酸結(jié)合產(chǎn)生MDA等有害化合物。

機(jī)體內(nèi)所有抗氧化基的抗氧化能力的總和稱之為“總抗氧化能力”，總抗氧化能力常常用來評價(jià)機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的總體能力，同時(shí)也被用來評價(jià)一些保健食品和天然植物的抗氧化性能，揭示出生物抵抗細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激誘導(dǎo)損傷的能力的強(qiáng)弱。目前對抗氧化能力檢測的基本上是通過購買試劑盒對機(jī)體樣品加以檢測的。但是現(xiàn)有技術(shù)公開的試劑盒，操作步驟繁瑣、復(fù)雜。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種測定抗氧化能力的試劑盒。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種測定抗氧化能力的試劑盒，包括以下試劑：碘液、淀粉溶液和凝固劑溶液。

優(yōu)選的，所述碘液是由碘單質(zhì)、碘化物和水配制而成。

優(yōu)選的，所述碘液中碘單質(zhì)的濃度為(6.9～8.5)×10^-7mol/ml。

優(yōu)選的，所述碘化物為碘化鉀、碘化鈉、碘化銀、四碘化碳和三碘化氮中的一種或幾種。

優(yōu)選的，所述碘化物為碘化鉀。

優(yōu)選的，所述淀粉溶液中淀粉的濃度為(3.0～4.5)g/ml。

優(yōu)選的，所述凝固劑溶液中凝固劑的濃度為(1.0～1.4)g/ml。

優(yōu)選的，所述凝固劑為瓊脂、明膠和果膠中的一種或幾種。

進(jìn)一步的，所述試劑盒在測定抗氧化能力方面的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了上述試劑盒的應(yīng)用，所述測定的過程包括以下步驟：

1)將所述碘液、淀粉溶液和凝固劑溶液混合，得到藍(lán)色的預(yù)處理碘淀粉混合液；

2)將所述步驟1)得到的預(yù)處理碘淀粉混合液冷卻，得到凝固態(tài)的碘淀粉；

3)將待測樣品溶液置于所述步驟2)得到的凝固態(tài)的碘淀粉上，根據(jù)顏色的變化得到氧化能力的測定結(jié)果。

本發(fā)明提供的測定抗氧化能力的試劑盒，包括碘液、淀粉溶液和凝固劑溶液。在本發(fā)明中，碘液、淀粉溶液和凝固劑混合后，得到藍(lán)色的混合溶液，原理是淀粉溶液中的淀粉遇到碘液中的碘單質(zhì)后變成藍(lán)色，待藍(lán)色的混合溶液冷卻后，得到凝固態(tài)的碘淀粉，而樣品中的還原物質(zhì)將與淀粉結(jié)合的碘單質(zhì)還原為碘離子，使藍(lán)色變?yōu)榘咨?，根?jù)顏色的變化快速分辨抗氧化能力的強(qiáng)弱。本發(fā)明提供的試劑盒，操作步驟簡單便捷、快速，可在1h內(nèi)得到測定結(jié)果。而且通過用肉眼可直接判斷樣品溶液抗氧化能力的強(qiáng)弱，并能定量分析樣品溶液中的抗氧化能力，本發(fā)明提供的試劑盒的檢測試劑安全無毒，成本低，效果明顯。

附圖說明

圖1為本發(fā)明試劑盒的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2為本發(fā)明試劑盒優(yōu)選方案的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖3為本發(fā)明實(shí)施例提供的測定抗氧化能力儀器的連接示意圖。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明提供了一種測定抗氧化能力的試劑盒，包括碘液、淀粉溶液和凝固劑溶液。

本發(fā)明提供的試劑盒包括碘液。在本發(fā)明中，所述碘液優(yōu)選由碘單質(zhì)、碘化物和水配制而成。所述碘化物優(yōu)選為碘化鉀、碘化鈉、碘化銀、四碘化碳和三碘化氮中的一種或幾種。本發(fā)明對所述碘化物的來源沒有特殊的限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)選用的藥品即可。在本發(fā)明中，所述碘化物具體的可優(yōu)選為上述藥品中的任意幾種，更優(yōu)選為兩種。當(dāng)所述碘化物優(yōu)選為碘化鉀和碘化鈉，所述碘化鉀和碘化鈉的質(zhì)量比優(yōu)選為(0.5～2):(0.5～2)，更優(yōu)選為(0.8～1.5)：(0.8～1.5)，最優(yōu)選為1：1。在本發(fā)明中，所述碘化物具體的最優(yōu)選為上述藥品中的碘化鉀。

在本發(fā)明中，所述碘液中碘單質(zhì)的濃度優(yōu)選為(6.9～8.5)×10^-7mol/ml，更優(yōu)選為(7.4～8.2)×10^-7mol/ml，最優(yōu)選為7.9×10^-7mol/ml。在本發(fā)明中，所述試劑盒中的碘液優(yōu)選采用棕色的玻璃瓶盛放，所述棕色玻璃瓶的容量優(yōu)選為10～100ml，更優(yōu)選為30～70ml，最優(yōu)選為50ml。

所述淀粉溶液優(yōu)選采用玻璃瓶或塑料瓶盛放，所述玻璃瓶或塑料瓶的容量優(yōu)選為1～10ml，更優(yōu)選為3～7ml，最優(yōu)選為5ml。

本發(fā)明提供的試劑盒包括淀粉溶液。在本發(fā)明中，所述淀粉溶液中淀粉的濃度優(yōu)選為(3.0～4.5)g/ml，更優(yōu)選為(3.5～4.0)g/ml，最優(yōu)選為3.75g/ml。本發(fā)明對所述淀粉的來源沒有特殊限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)選用的市售商品即可。在本發(fā)明中，所述淀粉具體的可優(yōu)選為可溶性淀粉。在本發(fā)明中，所述淀粉溶液優(yōu)選采用玻璃瓶或塑料瓶盛放，所述淀粉溶液的容量優(yōu)選為1～10ml，更優(yōu)選為3～7ml，最優(yōu)選為5ml。

本發(fā)明提供的試劑盒包括凝固劑溶液。在本發(fā)明中，所述凝固劑溶液中凝固劑的濃度優(yōu)選為(1.0～1.4)g/ml，更優(yōu)選為(1.1～1.3)g/ml，最優(yōu)選為1.2g/ml。在本發(fā)明中，所述凝固劑優(yōu)選為瓊脂、明膠和果膠中的一種或幾種，更優(yōu)選為兩種。當(dāng)所述凝固劑更優(yōu)選為上述藥品中的兩種時(shí)，所述凝固劑的質(zhì)量比優(yōu)選為(0.5～2)：(0.5～2)，更優(yōu)選為(0.8～1.5)：(0.8～1.5)，最優(yōu)為1：1。在本發(fā)明中，所述凝固劑具體的最優(yōu)選為瓊脂。本發(fā)明對所述凝固劑的來源沒有特殊限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的市售商品即可。

在本發(fā)明中，上述各個(gè)試劑中的溶劑為水，本發(fā)明對所述水的種類沒有特殊的限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的配制溶液所需的水即可；在本發(fā)明中，所述水優(yōu)選為蒸餾水，更優(yōu)選為雙蒸水。

在本發(fā)明中，所述凝固劑溶液優(yōu)選由所述凝固劑與水加熱溶解得到。在本發(fā)明中，所述加熱溶解的溫度優(yōu)選為90～110℃，更優(yōu)選為95～105℃，最優(yōu)選為100℃；所述加熱溶解的時(shí)間優(yōu)選為3～8min，更優(yōu)選為4～6min，最優(yōu)選為5min。本發(fā)明對所述加熱溶解的儀器沒有特殊限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)加熱溶解的儀器即可，如微波爐。

在本發(fā)明中，所述凝固劑溶液優(yōu)選采用玻璃瓶或塑料瓶盛放，所述玻璃瓶或塑料瓶的容量為10～100ml，更優(yōu)選為30～70ml，最優(yōu)選為50ml。

本發(fā)明對所述的盛放試劑的玻璃瓶或塑料瓶的來源沒有特殊限定，采用市售商品即可。

在本發(fā)明中，所述試劑盒的形狀優(yōu)選為長方體，上端開口，在試劑盒內(nèi)層的底部優(yōu)選有三個(gè)凹槽，用來固定盛放試劑的試劑瓶，對所述盛放試劑的試劑瓶的擺放順序沒有特殊限定。

本發(fā)明提供了上述技術(shù)方案所述試劑盒在檢測抗氧化能力中的應(yīng)用，在本發(fā)明中，所述應(yīng)用優(yōu)選包括以下步驟：

1)將所述碘液、淀粉溶液和凝固劑溶液混合，得到預(yù)處理碘淀粉混合液；

2)將所述步驟1)得到的預(yù)處理碘淀粉混合液冷卻，得到凝固態(tài)的碘淀粉；

3)將待測樣品溶液浸入所述步驟2)得到的凝固態(tài)的碘淀粉內(nèi)，根據(jù)顏色的變化得到氧化能力的測定結(jié)果。

在本發(fā)明中，所述碘液、淀粉溶液和凝固劑溶液的混合優(yōu)選為：將碘液與淀粉溶液混合后，得到碘淀粉溶液，再與凝固劑溶液混合。在本發(fā)明中，所述凝固劑溶液與碘淀粉溶液混合更優(yōu)選為將凝固劑與水混合后加熱溶解，當(dāng)凝固劑溶液冷卻至45～60℃時(shí)，再與碘淀粉溶液混合。在本發(fā)明中，所述凝固劑溶液更優(yōu)選冷卻至47～55℃，最優(yōu)選為50℃。本發(fā)明對所述凝固劑溶液加熱的儀器沒有特殊的限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)選用的儀器即可，如微波爐。

在本發(fā)明中，用于混合的所述碘液、淀粉溶液和凝固劑溶液的體積比優(yōu)選為(1～3)：(0.1～0.3)：(5～15)，更優(yōu)選為(1.5～2.5)：(0.15：0.25)：(7～10)，最優(yōu)選為2：0.2：8。在本發(fā)明中，混合后，淀粉遇到碘單質(zhì)后變成藍(lán)色，從而使得到的預(yù)處理碘淀粉混合液為藍(lán)色。

得到預(yù)處理碘淀粉混合液后，本發(fā)明將所述預(yù)處理碘淀粉混合液冷卻，得到凝固態(tài)碘淀粉。在本發(fā)明中，對所述預(yù)處理碘淀粉混合液的冷卻方式?jīng)]有特殊限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)選用的冷卻溶液的方式即可，如將溶液置于冰上。

得到凝固態(tài)碘淀粉以后，本發(fā)明將待測樣品溶液浸入所述凝固態(tài)的碘淀粉內(nèi)，根據(jù)顏色的變化得到氧化能力的測定結(jié)果。在本發(fā)明中，所述樣品的種類包括食品、植物和血清。在本發(fā)明中，所述血清的待測樣品的處理步驟優(yōu)選包括將未抗凝處理全血置于離心管中，凝固后3000rpm離心10min，將上清液置于另一離心管中，再次3000rpm離心10min，將上清液置于另一離心管即得。本發(fā)明對所述待測樣品溶液置于凝固態(tài)的碘淀粉上的儀器沒有特殊限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)選用的儀器即可，如注射器。在本發(fā)明中，所述顏色的變化得到抗氧化能力的測定結(jié)果具體為顏色由藍(lán)色變?yōu)榘咨?。在本發(fā)明中，所述顏色變?yōu)榘咨脑硎堑矸廴芤褐械牡矸塾龅降庖褐械牡鈫钨|(zhì)后變成藍(lán)色，樣品中的還原物質(zhì)將與淀粉結(jié)合的碘單質(zhì)還原為碘離子，使藍(lán)色變?yōu)榘咨M(jìn)而根據(jù)顏色的變化快速分辨抗氧化能力的強(qiáng)弱。

在本發(fā)明中，所述預(yù)處理碘淀粉混合液用毛細(xì)管吸滿，快速冷卻后，得到凝固態(tài)碘淀粉，再將毛細(xì)管的一端進(jìn)行封口。在本發(fā)明在本發(fā)明中，對毛細(xì)管的種類和來源沒有特殊限定，采用市售商品即可。在本發(fā)明中，所述毛細(xì)管的規(guī)格優(yōu)選為容量為5～10μl，更優(yōu)選為6～9μl，最優(yōu)選為8μl；所述毛細(xì)管的長度優(yōu)選為5～15cm；更優(yōu)選為8～12cm，最優(yōu)選為10cm。

在本發(fā)明中，所述毛細(xì)管的連接方式具體的可優(yōu)選為硅膠管的一端連接注射器，硅膠管的另一端連接沒有封口的毛細(xì)管。本發(fā)明對硅膠管和注射器的種類和來源沒有特殊限定，采用市售商品即可。

在本發(fā)明中，所述待測樣品的檢測步驟包括取一端已封口的毛細(xì)管，注射器取待測樣品并將待測樣品置于毛細(xì)管未封口的一端，注射完畢后將毛細(xì)管豎直放置，然后未封口一端連接硅膠管的一端，硅膠管的另一端連接注射器，連接完畢后，注射器注射空氣施加壓力，1h內(nèi)得到測定結(jié)果。

在本發(fā)明中，所述試劑盒優(yōu)選還包括上述毛細(xì)管、注射器和硅膠管，所述試劑盒優(yōu)選還包括三個(gè)凹槽，用來放置上述毛細(xì)管、注射器和硅膠管，對所述毛細(xì)管、注射器和硅膠管的擺放順序沒有特殊的限定。

下面將結(jié)合本發(fā)明中的實(shí)施例，對本發(fā)明中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例1

取未抗凝處理的小鼠全血2ml于離心管中，凝固后3000rpm離心10min，取上清液于另一離心管中，再3000rpm離心10min，取上清液置于干凈的離心管中，即得到待測樣品溶液。取2ml碘液與0.2ml可溶性淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘單質(zhì)的濃度為7.9×10^-7mol/ml，淀粉溶液中淀粉的濃度為3.75g/ml。取8ml瓊脂溶液，100℃加熱5min，待冷卻至50℃時(shí)與碘淀粉溶液混合，得到預(yù)處理碘淀粉混合液，瓊脂溶液中瓊脂的濃度為1.2g/ml。取規(guī)格為8μl，長度為10cm的毛細(xì)管吸滿預(yù)處理碘淀粉溶液，快速冷卻毛細(xì)管中的溶液直至凝固，然后將毛細(xì)管的一端封口，取注射器將待測樣品溶液置于毛細(xì)管上方無凝固物處，并豎直放置，然后注射器與毛細(xì)管通過硅膠管連接，通過注射器空氣施加壓力使其快速反應(yīng)，1h測量結(jié)果。測量結(jié)果為變白部分長度為1.4cm，抗氧化能力相當(dāng)于消耗3.36×10^-10mol碘離子的量。

實(shí)施例2

取未抗凝處理的小鼠全血2ml于離心管中，凝固后3000rpm離心10min，取上清液于另一離心管中，再3000rpm離心10min，取上清液置于干凈的離心管中，即得到待測樣品溶液。取1ml碘液與0.1ml淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘離子的濃度為6.9×10^-7mol/ml，淀粉溶液中淀粉的濃度為3.0g/ml。取5ml瓊脂溶液，100℃加熱5min，待冷卻至60℃時(shí)與碘淀粉溶液混合，得到預(yù)處理碘淀粉混合液，瓊脂溶液中瓊脂的濃度為1.0g/ml。取規(guī)格為5μl，長度為5cm的毛細(xì)管吸滿預(yù)處理碘淀粉溶液，快速冷卻毛細(xì)管中的溶液直至凝固，然后將毛細(xì)管的一端封口，取注射器將待測樣品溶液置于毛細(xì)管上方無凝固物處，并豎直放置，然后注射器與毛細(xì)管通過硅膠管連接，通過注射器空氣施加壓力使其快速反應(yīng)，45min測量結(jié)果。測量結(jié)果為變白部分長度為2.0cm，抗氧化能力相當(dāng)于消耗4.4×10^-10mol碘離子的量。

實(shí)施例3

取未抗凝處理的小鼠全血2ml于離心管中，凝固后3000rpm離心10min，取上清液于另一離心管中，再3000rpm離心10min，取上清液置于干凈的離心管中，即得到待測樣品溶液。取3ml碘液與0.3ml淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘離子的濃度為8.5×10^-7mol/ml，淀粉溶液中淀粉的濃度為4.5g/ml。取15ml瓊脂溶液，90℃加熱6min，待冷卻至45℃時(shí)與碘淀粉溶液混合，得到預(yù)處理碘淀粉混合液，瓊脂溶液中瓊脂的濃度為1.4g/ml。取規(guī)格為10μl，長度為15cm的毛細(xì)管吸滿預(yù)處理碘淀粉溶液，快速冷卻毛細(xì)管中的溶液直至凝固，然后將毛細(xì)管的一端封口，取注射器將待測樣品溶液置于毛細(xì)管上方無凝固物處，并豎直放置，然后注射器與毛細(xì)管通過硅膠管連接，通過注射器空氣施加壓力使其快速反應(yīng)，50min測量結(jié)果。測量結(jié)果為變白部分長度為2.6cm，抗氧化能力相當(dāng)于消耗4.68×10^-10mol碘離子的量。

實(shí)施例4

取超純水反復(fù)沖洗幼嫩葉片或莖段或果肉，稱取1-5g葉片或果肉，在研缽內(nèi)按料液比1:9的比例加入超純水，研磨成勻漿，將研缽內(nèi)的物質(zhì)全部裝入離心管，10000r/min離心10min，吸取上清液，即得待測樣品溶液。取1ml碘液與0.1ml淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘離子的濃度為6.9×10^-7mol/ml，淀粉溶液中淀粉的濃度為3.0g/ml。取5ml瓊脂溶液，100℃加熱4min，待冷卻至55℃時(shí)與碘淀粉溶液混合，得到預(yù)處理碘淀粉混合液，瓊脂溶液中瓊脂的濃度為1.0g/ml。取規(guī)格為5μl，長度為5cm的毛細(xì)管吸滿預(yù)處理碘淀粉溶液，快速冷卻毛細(xì)管中的溶液直至凝固，然后將毛細(xì)管的一端封口，取注射器將待測樣品溶液置于毛細(xì)管上方無凝固物處，并豎直放置，然后注射器與毛細(xì)管通過硅膠管連接，通過注射器空氣施加壓力使其快速反應(yīng)，55min測量結(jié)果。測量結(jié)果為變白部分長度為2.0cm，抗氧化能力相當(dāng)于消耗4.4×10^-10mol碘離子的量。

實(shí)施例5

稱取1-5g的待測食品，先用液氮將研缽預(yù)冷，加入待測食品用液氮研磨成粉末，在研缽內(nèi)按料液比1:9的比例加入超純水，混勻制成勻漿，將研缽內(nèi)的物質(zhì)全部裝入離心管，10000r/min離心10min，吸取上清液，即得待測樣品溶液。取2ml碘液與0.2ml可溶性淀粉溶液混合，得到碘淀粉溶液，碘液中碘單質(zhì)的濃度為7.9×10^-7mol/ml，淀粉溶液中淀粉的濃度為3.75g/ml。取8ml瓊脂溶液，110℃加熱6min，待冷卻至50℃時(shí)與碘淀粉溶液混合，得到預(yù)處理碘淀粉混合液，瓊脂溶液中瓊脂的濃度為1.2g/ml。取規(guī)格為8μl，長度為10cm的毛細(xì)管吸滿預(yù)處理碘淀粉溶液，快速冷卻毛細(xì)管中的溶液直至凝固，然后將毛細(xì)管的一端封口，取注射器將待測樣品溶液置于毛細(xì)管上方無凝固物處，并豎直放置，然后注射器與毛細(xì)管通過硅膠管連接，通過注射器空氣施加壓力使其快速反應(yīng)，1h測量結(jié)果。測量結(jié)果為變白部分長度為1.4cm，抗氧化能力相當(dāng)于消耗3.36×10^-10mol碘離子的量。

由以上實(shí)施例可知，本發(fā)明提供的試劑盒，操作步驟簡單便捷、快速，可在1h內(nèi)得到測定結(jié)果。而且通過用肉眼可直接判斷樣品溶液抗氧化能力的強(qiáng)弱，并能定量分析樣品溶液中的抗氧化能力，本發(fā)明提供的試劑盒的檢測試劑安全無毒，成本低，效果明顯。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。