1.一種基于核酸適體的人胰島素檢測方法,其特征在于:包括以下步驟:
1)先通過檸檬酸鈉還原氯金酸制備納米金;
2)再將人胰島素適配體修飾在所述納米金表面,得到探針;
3)將一系列不同濃度的人胰島素標準液先分別與所述探針反應,再分別與NaCl溶液反應,各所得反應液分別通過紫外檢測納米金聚集態(tài)及分散態(tài)的紫外吸收峰值,建立人胰島素濃度值對應納米金聚集態(tài)紫外吸收峰值和納米金分散態(tài)紫外吸收峰值比率的標準曲線;
4)將含人胰島素的待測液按3)步驟通過紫外檢測,并依據(jù)標準曲線進行分析,即得待測液中人胰島素的濃度。
2.根據(jù)權利要求1所述的基于核酸適體的人胰島素檢測方法,其特征在于:所述的納米金尺寸為13nm~15nm。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的基于核酸適體的人胰島素檢測方法,其特征在于:所述納米金的制備過程為:將濃度為0.005~0.015wt%氯金酸溶液加熱至沸騰后,加入濃度為1.5~2.5wt%的檸檬酸鈉溶液進行反應,溶液由無色變?yōu)樽仙僮優(yōu)榫萍t色,在酒紅色的狀態(tài)下保持沸騰15~20分鐘,再在攪拌條件下冷卻至室溫,即得納米金;其中,氯金酸與檸檬酸鈉的質量比為1:3~5。
4.根據(jù)權利要求1所述的基于核酸適體的人胰島素檢測方法,其特征在于:將人胰島素適體與納米金在室溫下反應,得到探針。
5.根據(jù)權利要求4所述的基于核酸適體的人胰島素檢測方法,其特征在于:人胰島素適體與納米金的反應比例為50~80nM:2~5nM。
6.根據(jù)權利要求1所述的基于核酸適體的人胰島素檢測方法,其特征在于:將濃度為50pM、250pM、500pM、1nM、10nM、50nM、100nM、150nM和200nM的人胰島素標準液分別與探針反應15~20min,再分別與50~100mM的NaCl溶液反應10~15min后,分別采用紫外檢測人胰島素標準溶液中納米金聚集態(tài)及分散態(tài)的紫外吸收峰值,并建立人胰島素濃度值對應納米金聚集態(tài)紫外吸收峰值和納米金分散態(tài)紫外吸收峰值比率的標準曲線。