技術(shù)特征：

1.一種基于核酸適體熒光探針的促紅細(xì)胞生成素試劑盒，其特征在于，主要成分包括：含NH₄Cl、Tris、EDTA-Na₂的紅細(xì)胞裂解液；含 MgCl₂的0.2M磷酸緩沖液；促紅細(xì)胞生成素標(biāo)準(zhǔn)品；促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針；所述促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針為5'和3'兩端分別標(biāo)記熒光芘分子單體的核苷酸單鏈，

該核苷酸單鏈其序列為：atgagacacc ggtgggacgg acgtactctc tccagagcca。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于核酸適體熒光探針的促紅細(xì)胞生成素試劑盒，其特征在于，所述含NH₄Cl、Tris、EDTA-Na₂的紅細(xì)胞裂解液為含有1～280 mmol/L NH₄Cl, 1~34 mmol/L Tris,1~2mmol/LEDTA-Na₂, pH 7.0~7.2；所述含 MgCl₂的0.2M磷酸緩沖液為含有1~10mmol/L MgCl₂。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種基于核酸適體熒光探針的促紅細(xì)胞生成素試劑盒，其特征在于，所述含NH₄Cl、Tris、EDTA-Na₂的紅細(xì)胞裂解液、含 MgCl₂的0.2M磷酸緩沖液、促紅細(xì)胞生成素標(biāo)準(zhǔn)品、促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針為配制好直接使用的液體試劑或是使用前需加水溶解的干粉狀態(tài)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1~3所述的一種基于核酸適體熒光探針的促紅細(xì)胞生成素試劑盒，其特征在于，該試劑盒用于檢測(cè)肝素抗凝全血或末梢血中的促紅細(xì)胞生成素濃度。

5.一種用權(quán)利1~3任一所述基于核酸適體熒光探針的促紅細(xì)胞生成素試劑盒來(lái)檢測(cè)促紅細(xì)胞生成素濃度的方法，其特征在于，方法步驟包括：

（1）血樣裂解：將血樣和含NH₄Cl、Tris、EDTA-Na₂的紅細(xì)胞裂解液按1:0.5~5體積比混勻，靜置5~30min，再中速離心5~10min，收集上清液；

（2）混合卵育：取20~100μl步驟1）得到的上清液和30~50ul的用含 MgCl₂的0.2M磷酸緩沖液，溶解促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針得到的促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針試劑混合，室溫下卵育5~15min，使促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針與血樣充分結(jié)合，得到測(cè)試液；

（3）熒光檢測(cè)：熒光檢測(cè)儀檢測(cè)步驟2）得到的測(cè)試液50ul，在熒光檢測(cè)儀熒光激發(fā)后，讀取熒光激發(fā)后20至100ns時(shí)間段內(nèi)波長(zhǎng)在480~500nm的熒光值；

（4）結(jié)果計(jì)算：使用生物醫(yī)學(xué)作圖軟件，參照促紅細(xì)胞生成素標(biāo)準(zhǔn)樣品制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)合步驟3）中檢測(cè)到的熒光值計(jì)算出血樣中促紅細(xì)胞生成素的濃度。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種用基于核酸適體熒光探針的促紅細(xì)胞生成素試劑盒來(lái)檢測(cè)促紅細(xì)胞生成素濃度的方法，其特征在于，所述促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針試劑中促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針濃度為200~400 nmol/L，所述促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針為5'和3'兩端分別標(biāo)記熒光芘分子單體的核苷酸單鏈，該核苷酸單鏈序列為：gcgaggagtg aaagttgctg cacgaagcct cggtgtagct atgtgacacc gtgggact。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種用基于核酸適體熒光探針的促紅細(xì)胞生成素試劑盒來(lái)檢測(cè)促紅細(xì)胞生成素濃度的方法，其特征在于，所述的促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針不與促紅細(xì)胞生成素結(jié)合時(shí)，核酸適體處于比較松散的結(jié)構(gòu)，5'和3'兩端的芘分子單體相互游離, 熒光激發(fā)后發(fā)射波長(zhǎng)在 370~ 400nm 之間；所述的促紅細(xì)胞生成素核酸適體熒光探針與促紅細(xì)胞生成素結(jié)合時(shí)，促紅細(xì)胞生成素誘導(dǎo)其發(fā)生結(jié)構(gòu)改變，核酸適體5'和3'兩端的芘分子單體相互靠近，形成激發(fā)態(tài)二聚體，熒光激發(fā)后激發(fā)態(tài)二聚體發(fā)射波長(zhǎng)在 480 到 500nm之間。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種用基于核酸適體熒光探針的促紅細(xì)胞生成素試劑盒來(lái)檢測(cè)促紅細(xì)胞生成素濃度的方法，其特征在于，所述的血樣為肝素抗凝全血或末梢血，所述含NH₄Cl、Tris、EDTA-Na₂的紅細(xì)胞裂解液為含有1~280 mmol/L NH₄Cl, 1~34 mmol/L Tris,1~2mmol/LEDTA-Na₂, pH 7.0~7.2；所述含 MgCl₂的0.2M磷酸緩沖液為含有1~10mmol/L MgCl₂；所述熒光檢測(cè)儀為具有時(shí)間分辨熒光測(cè)定的熒光檢測(cè)儀。

9.根據(jù)權(quán)利要求5~7所述的一種用基于核酸適體熒光探針的促紅細(xì)胞生成素試劑盒來(lái)檢測(cè)促紅細(xì)胞生成素濃度的方法，其特征在于，該檢測(cè)方法用于檢測(cè)肝素抗凝全血或末梢血中的促紅細(xì)胞生成素濃度。