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      一種呋喃西林代謝物的快速檢測方法與流程

      文檔序號:11107350閱讀:1483來源:國知局

      本發(fā)明涉及一種檢測方法,具體是一種呋喃西林代謝物的快速檢測方法。



      背景技術:

      硝基呋喃類藥物常作為廣譜類抗生素用于預防和治療由沙門氏菌和埃希氏菌引 起的豬、牛、家禽及蜜蜂的胃腸道疾病。但在長時間的實驗研究過程中發(fā)現(xiàn),硝基呋喃類藥 物和代謝物均可以使實驗動物發(fā)生癌變和基因突變,此類藥物禁止在治療和飼料中使用。由于硝基呋喃類原型藥在生物體內代謝迅速,無法檢測,但其代謝產物因和蛋白 質結合而相當穩(wěn)定,所以在分析此類藥物的殘留時經常要分析其代謝后的產物,管理部門 就以檢測代謝產物為手段達到檢測硝基呋喃類殘留的目的。目前用來檢測硝基呋喃類代 謝物的最常用方法是高效液相色譜法 (HPLC)、液質聯(lián)用法 (LC-MS/MS) 等,這些方法靈敏度高、結果準確、重復性好、假陽性少,但樣品前處理過程復雜,儀器化程度高價格昂貴。



      技術實現(xiàn)要素:

      本發(fā)明的目的在于提供一種呋喃西林代謝物的快速檢測方法,以解決上述背景技術中提出的問題。

      為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術方案:

      一種呋喃西林代謝物的快速檢測方法,包括如下步驟:(a)制作熒光增敏標準曲線:配制一系列不同濃度的呋喃西林代謝物標準溶液,并將其分別移至5mL的比色管中,向每個所述比色管中均加入1.0mL濃度為7.25× mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后,室溫放置5~10min,用分子熒光光度計檢測上述各個體系的熒光強度F;同時,取1.0mL濃度為7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測體系的熒光強度F0;以呋喃西林代謝物濃度為橫坐標,以F/F0為縱坐標,得呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程;(b)分別取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代謝物的樣品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻使其充分反應,室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測得到體系的熒光強度,與所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程對照,即得所述樣品液中呋喃西林代謝物的含量。

      作為本發(fā)明進一步的方案:所述步驟(a)和所述步驟(b)中,所述熒光強度的檢測條件為:激發(fā)波長為300nm,激發(fā)和發(fā) 射狹縫寬度均為3nm。

      作為本發(fā)明進一步的方案:所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度分別為4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。

      作為本發(fā)明再進一步的方案:當所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度范圍為4μg/L-80μg/L時,所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程F/F0=0.0019C+1.0321,線性相關系數為0.996。

      與現(xiàn)有技術相比,本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明具有靈敏度高、樣品預處理簡單、短暫的檢測時間、較大的檢測樣本量等特點,適合現(xiàn)場監(jiān)控和大量樣品的篩查。

      具體實施方式

      下面對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。

      本發(fā)明實施例中,一種呋喃西林代謝物的快速檢測方法,包括如下步驟:(a)制作熒光增敏標準曲線:配制一系列不同濃度的呋喃西林代謝物標準溶液,并將其分別移至5mL的比色管中,向每個所述比色管中均加入1.0mL濃度為7.25×mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后,室溫放置5~10min,用分子熒光光度計檢測上述各個體系的熒光強度F;同時,取1.0mL濃度為7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測體系的熒光強度F0;以呋喃西林代謝物濃度為橫坐標,以F/F0為縱坐標,得呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程;(b)分別取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代謝物的樣品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻使其充分反應,室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測得到體系的熒光強度,與所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程對照,即得所述樣品液中呋喃西林代謝物的含量。所述步驟(a)和所述步驟(b)中,所述熒光強度的檢測條件為:激發(fā)波長為300nm,激發(fā)和發(fā) 射狹縫寬度均為3nm。所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度分別為4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。當所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度范圍為4μg/L-80μg/L時,所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程F/F0=0.0019C+1.0321,線性相關系數為0.996。

      實施例1:

      本發(fā)明呋喃西林代謝物的快速檢測方法,包括如下步驟:(a)制作熒光增敏標準曲線:配制一系列不同濃度的呋喃西林代謝物標準溶液,并將其分別移至5mL的比色管中,向每個所述比色管中均加入1.0mL濃度為7.25×mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后,室溫放置5min,用分子熒光光度計檢測上述各個體系的熒光強度F;同時,取1.0mL濃度為7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測體系的熒光強度F0;以呋喃西林代謝物濃度為橫坐標,以F/F0為縱坐標,得呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程;(b)分別取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代謝物的樣品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻使其充分反應,室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測得到體系的熒光強度,與所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程對照,即得所述樣品液中呋喃西林代謝物的含量。所述步驟(a)和所述步驟(b)中,所述熒光強度的檢測條件為:激發(fā)波長為300nm,激發(fā)和發(fā) 射狹縫寬度均為3nm。所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度分別為4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。當所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度范圍為4μg/L-80μg/L時,所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程F/F0=0.0019C+1.0321,線性相關系數為0.996。

      本發(fā)明呋喃西林代謝物的快速檢測方法,包括如下步驟:(a)制作熒光增敏標準曲線:配制一系列不同濃度的呋喃西林代謝物標準溶液,并將其分別移至5mL的比色管中,向每個所述比色管中均加入1.0mL濃度為7.25×mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后,室溫放置10min,用分子熒光光度計檢測上述各個體系的熒光強度F;同時,取1.0mL濃度為7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測體系的熒光強度F0;以呋喃西林代謝物濃度為橫坐標,以F/F0為縱坐標,得呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程;(b)分別取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代謝物的樣品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻使其充分反應,室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測得到體系的熒光強度,與所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程對照,即得所述樣品液中呋喃西林代謝物的含量。所述步驟(a)和所述步驟(b)中,所述熒光強度的檢測條件為:激發(fā)波長為300nm,激發(fā)和發(fā) 射狹縫寬度均為3nm。所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度分別為4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。當所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度范圍為4μg/L-80μg/L時,所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程F/F0=0.0019C+1.0321,線性相關系數為0.996。

      本發(fā)明呋喃西林代謝物的快速檢測方法,包括如下步驟:(a)制作熒光增敏標準曲線:配制一系列不同濃度的呋喃西林代謝物標準溶液,并將其分別移至5mL的比色管中,向每個所述比色管中均加入1.0mL濃度為7.25×mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后,室溫放置8min,用分子熒光光度計檢測上述各個體系的熒光強度F;同時,取1.0mL濃度為7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻后室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測體系的熒光強度F0;以呋喃西林代謝物濃度為橫坐標,以F/F0為縱坐標,得呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程;(b)分別取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代謝物的樣品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液定容,搖勻使其充分反應,室溫放置15min,用分子熒光光度計檢測得到體系的熒光強度,與所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程對照,即得所述樣品液中呋喃西林代謝物的含量。所述步驟(a)和所述步驟(b)中,所述熒光強度的檢測條件為:激發(fā)波長為300nm,激發(fā)和發(fā) 射狹縫寬度均為3nm。所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度分別為4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。當所述呋喃西林代謝物標準溶液的濃度范圍為4μg/L-80μg/L時,所述呋喃西林代謝物對CdTe量子點熒光增敏的線性回歸方程F/F0=0.0019C+1.0321,線性相關系數為0.996。

      對于本領域技術人員而言,顯然本發(fā)明不限于上述示范性實施例的細節(jié),而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下,能夠以其他的具體形式實現(xiàn)本發(fā)明。因此,無論從哪一點來看,均應將實施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本發(fā)明的范圍由所附權利要求而不是上述說明限定,因此旨在將落在權利要求的等同要件的含義和范圍內的所有變化囊括在本發(fā)明內。

      此外,應當理解,雖然本說明書按照實施方式加以描述,但并非每個實施方式僅包含一個獨立的技術方案,說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見,本領域技術人員應當將說明書作為一個整體,各實施例中的技術方案也可以經適當組合,形成本領域技術人員可以理解的其他實施方式。

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