本發(fā)明涉及元素檢測(cè)領(lǐng)域，為一種全新的試劑盒組成，用于icp-ms檢測(cè)人血清中的元素。
背景技術(shù)：
：：根據(jù)人體內(nèi)元素含量的多少，礦物質(zhì)又可以被分為常量元素和微量元素，其中常量元素是指占人體比重超過(guò)萬(wàn)分之一的元素，包括鈣(ca)、鈉(na)、磷(p)、鉀(k)、鎂(mg)、氯(cl)和硫(s)等。而微量元素則是指含量處于人體總量的萬(wàn)分之一以下，且日需攝入量低于100mg微量元素。1995年，微量元素中的銅(cu)、鈷(co)、鉻(cr)、鐵(fe)、氟(f)、碘(i)、錳(mn)、鉬(mo)、硒(se)和鋅(zn)等10種元素被fao/who國(guó)際組織的專(zhuān)家委員會(huì)列為維持人體正常生命活動(dòng)所不可缺少的必需微量元素，其中fe又稱(chēng)為半微量元素；硅(si)、鎳(ni)、硼(b)、釩(v)這四種元素則被列為可能必需微量元素，而鉛(pb)、鎘(cd)、汞(hg)、鋁(al)，鉈(ti)，砷(as)和錫(sn)等六種元素則被列為具有潛在毒性，但低劑量時(shí)可能具有功能作用的微量元素。最后是近年來(lái)各國(guó)科研工作者所重點(diǎn)研究的對(duì)象，如銻(sb)，鎢(w)，鋇(ba)，它們有潛在可能為人體必須的微量元素。醫(yī)學(xué)研究表明，雖然人體中微量元素的含量不多，但其對(duì)人體健康有著至關(guān)重要的作用。分子生物學(xué)的研究揭示，微量元素通過(guò)與蛋白質(zhì)和其他有機(jī)基團(tuán)結(jié)合，形成了酶、激素、維生素等生物大分子，發(fā)揮著重要的生理生化功能。微量元素是構(gòu)成生物體的基本組成要素，其參與多種人體生化反應(yīng)。微量元素是許多酶的組成成分，或是酶作用的輔助因子，在人體內(nèi)有不可替代的重要作用。微量元素是維持人體正常新陳代謝和生命活動(dòng)的重要物質(zhì)，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞膜的通透性和維持神經(jīng)肌肉興奮性的作用，也是反映人體營(yíng)養(yǎng)狀況的重要指標(biāo)，元素的缺失和富集可以引起多種疾病。微量元素亦是人體組織的重要組成成分，如鐵為血紅蛋白的重要組成成分，鈣、磷、鎂為組成牙齒、骨骼的成分，在體內(nèi)成為某些酶、激素和維生素等的組成部分，研究發(fā)現(xiàn)體內(nèi)50％-70％的酶需要微量元素的參與或激活，如硒是人體內(nèi)硒谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的組成成分，鐵參與血紅蛋白、肌紅蛋白、細(xì)胞色素及許多酶的合成，錳是超氧化物歧化酶的重要成分。微量元素在人體中的作用具有二重性，當(dāng)它們的攝入不足時(shí)，會(huì)使有微量元素參與的生理功能無(wú)法正常進(jìn)行，引起人體生理的異常，而當(dāng)他們攝入過(guò)量時(shí)，同樣會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生損害，導(dǎo)致產(chǎn)生疾病等。某些對(duì)人體有益的微量元素，在含量過(guò)高時(shí)同樣會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生毒副作用，如元素硒和銅等。人體攝入過(guò)多的某些微量元素，如砷，鎘，鉛等，會(huì)導(dǎo)致人中毒。長(zhǎng)期某些礦物質(zhì)攝入不足，或人體對(duì)其吸收、利用障礙均可引起亞臨床缺乏癥狀甚至缺乏病，如缺鐵性貧血、兒童生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、骨質(zhì)疏松、克山病等，而盲目過(guò)量補(bǔ)礦物質(zhì)或食用污染的食物或飲料均可能引起過(guò)量或中毒，如攝入過(guò)量鈉會(huì)增加血液循環(huán)的負(fù)荷，導(dǎo)致血壓上升，久而久之，會(huì)引發(fā)中風(fēng)和心血管疾病。由于微量元素在人體中的作用的二重性，正常人體中對(duì)于微量元素是有一定的范圍的，若低于或高于此范圍提示身體的異常狀態(tài)。對(duì)于有益元素，鈣、鎂、鐵、鋅、硒等，若人血清中的含量低于標(biāo)準(zhǔn)范圍，提示該進(jìn)行相應(yīng)的補(bǔ)充，或提示與相應(yīng)疾病如缺鐵性貧血、兒童生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、骨質(zhì)疏松、克山病的相關(guān)性。對(duì)于有害元素，鉛、鎘、汞、砷、鉈等，若血清中含量超限則提示中毒，必須進(jìn)行相應(yīng)的解毒措施。對(duì)于與特異性疾病相關(guān)的一些微量元素，其含量的變化提示疾病的發(fā)展階段及預(yù)后情況。人體元素分析涉及的生物檢材有血液、尿液、頭發(fā)、骨頭和指甲等，其中最常用的是血液。研究表明，機(jī)體內(nèi)含鐵fe、銅cu、鋅zn總量減少時(shí)，均可減弱免疫能力，助長(zhǎng)細(xì)菌感染，而且感染后的死亡率亦較高等；當(dāng)部分微量元素(重金屬元素)超過(guò)一定濃度時(shí)，可引起急性中毒或在人體內(nèi)畜積產(chǎn)生長(zhǎng)久的毒害作用。尤其隨現(xiàn)今工業(yè)的發(fā)展，金屬污染涉及到了人類(lèi)活動(dòng)的各個(gè)領(lǐng)域，當(dāng)各金屬元素濃度超過(guò)一定生物接觸限值時(shí)即可引起中毒。研究表明，人體毒物或毒物代謝物的含量測(cè)定，是臨床上證實(shí)毒物中毒的最關(guān)鍵的客觀依據(jù)，生物材料中有毒物質(zhì)的增高能說(shuō)明毒物在體內(nèi)的過(guò)度吸收。因此準(zhǔn)確、快速的微量元素分析及檢測(cè)結(jié)果的醫(yī)學(xué)評(píng)價(jià)，對(duì)人體疾病診斷和環(huán)境、職業(yè)健康研究的生物監(jiān)測(cè)提供有力依據(jù)。此外，在掃毒禁毒中，對(duì)于各類(lèi)新型毒品的微量元素的檢測(cè)已經(jīng)成為掃毒禁毒工作中的重點(diǎn)，而對(duì)于司法實(shí)踐工作中，以無(wú)機(jī)元素毒物投毒和自殺等案件也時(shí)有發(fā)生，例如在法醫(yī)學(xué)鑒定中，需要準(zhǔn)確、快速對(duì)中毒原因和中毒程度作出判斷，但無(wú)機(jī)元素目標(biāo)物的不確定性以及毒物種類(lèi)的廣泛性，導(dǎo)致元素檢測(cè)存在一定的復(fù)雜性，且不同元素的急性中毒可能會(huì)出現(xiàn)相似的癥狀。另外，在體內(nèi)興奮劑的檢測(cè)工作中，由于各種新型興奮劑具有的代謝快、殘留低、難檢測(cè)的特點(diǎn)，對(duì)于超時(shí)的代謝后的興奮劑的微量成分的檢測(cè)，也一直成為體育界反興奮劑工作的研究熱點(diǎn)。因此，除了疾病診斷和環(huán)境、職業(yè)病等健康監(jiān)測(cè)工作中，在司法、執(zhí)法工作以及其他領(lǐng)域中(如反興奮劑工作)中進(jìn)行準(zhǔn)確、快速的無(wú)機(jī)元素分析及檢測(cè)結(jié)果，對(duì)了解事實(shí)真相具有重要意義。由于血清中含有人體內(nèi)多種微量元素，血清中元素濃度能夠在很大程度上代表人體內(nèi)元素水平，對(duì)其中微量元素含量的檢測(cè)，在臨床上具有重要意義，因此人血液中元素的濃度常作為重要的生物學(xué)指標(biāo)。然而，隨著微量元素與疾病關(guān)系的日益明確以及人們對(duì)健康問(wèn)題的密切關(guān)注，準(zhǔn)確、快速、方便的測(cè)定人體內(nèi)微量元素的含量，成為微量元素檢測(cè)領(lǐng)域急需解決的問(wèn)題。人體體液中微量元素檢測(cè)的主要難點(diǎn)在于某些元素的濃度很低，甚至達(dá)到ng/l-ug/l級(jí)別，而且基體復(fù)雜，給檢測(cè)帶來(lái)干擾，因此如何準(zhǔn)確快速的進(jìn)行多元素同時(shí)測(cè)定，是亟待解決的問(wèn)題。目前對(duì)于元素的檢測(cè)方法有：原子吸收光譜法(atomicabsorptionspectrometry：aas)、原子發(fā)射光譜法(atomicemissionspectrometry:aes)、原子熒光光譜法(atomicflorescencespectrometry:afs)、紫外可見(jiàn)分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry:uvs)、電感耦合等離子體質(zhì)譜(inductivelycoupledplasma-massspectrometry:icp-ms)。表1：幾種不同微量元素檢測(cè)方法的特點(diǎn)比較血中微量元素的測(cè)定常采用原子吸收法(aas),根據(jù)原子化的方式不同，原子吸收光譜法又可以被分為石墨爐原子吸收光譜法(gf-aas)、流動(dòng)注射-冷蒸汽發(fā)生原子吸收光譜法(fi-vgaas)以及火焰原子吸收光譜法(faas)。gf-aas具有取樣量少、前處理簡(jiǎn)單、靈敏度高、能直接分析固體和高粘度液體試樣等優(yōu)點(diǎn)，適用于生物樣品的分析，在實(shí)際元素檢驗(yàn)工作中被廣泛應(yīng)用，較為嚴(yán)重的基體干擾是其主要缺點(diǎn)，此外，一次只能對(duì)一種元素進(jìn)行檢測(cè)，耗時(shí)較長(zhǎng)。faas是一種經(jīng)典的分析技術(shù)，具有信號(hào)穩(wěn)定、干擾相對(duì)較小、分析速度快、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，在痕量元素檢測(cè)中多被采用。該方法的主要缺點(diǎn)是不適合測(cè)定分解不完全的耐高溫元素、堿土金屬元素以及共振吸收譜線在遠(yuǎn)紫外區(qū)的元素。fi-vgaas可用于氫化物或冷蒸汽形成的元素檢測(cè)，如砷、硒、鉍、汞等。晏晟等[晏晟，李偉新，解原,原子吸收光譜法與icp-ms法測(cè)鉈的對(duì)比研究,[j]，廣東化工,2016,9:232-236],原子吸收光譜法與icp-ms法測(cè)定鉈，兩者準(zhǔn)確度和精密度均較高，均能滿(mǎn)足地質(zhì)樣品的檢測(cè)要求。兩者比較而言，原子吸收光譜法操作過(guò)程較為繁瑣，檢出限與線性范圍均不如icp-ms，aas的檢出限5ug/l，icp-ms的檢出限為0.024ug/l。原子吸收光譜法的線性范圍在0～10mg/l，icp-ms法的線性范圍在0～100ug/l，相關(guān)系數(shù)r＝0.9998。抗干擾能力較icp-ms更強(qiáng)。icp-ms的優(yōu)點(diǎn)在于能夠?qū)崿F(xiàn)多元素的同時(shí)測(cè)定，操作更為方便快速，適合大批量樣品。電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(inductivelycoupledplasmaatomicemissionspectroscopy：icp-aes)，是一種采用電感耦合等離子體作為激發(fā)光源以及原子化裝置的原子發(fā)射光譜的分析檢測(cè)方法。icp-aes具有以下優(yōu)點(diǎn)：1、可以同時(shí)測(cè)定樣品中的多種元素，具有多元素同時(shí)檢測(cè)的能力；2、分析速度快，可在短時(shí)間內(nèi)定量分析多達(dá)幾十種元素；3、檢出限較低，一般為1-10ug/l；4、分析準(zhǔn)確度和精密度高，是各種分析方法中所受干擾較小的一種，一般情況下其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤10％，當(dāng)分析物濃度超過(guò)100倍檢出限時(shí)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤1％。icp-aes在實(shí)際元素分析檢測(cè)工作中應(yīng)用較為廣泛，如申治國(guó)等[申治國(guó),徐新云,張順祥,張仁利,何雅青，icp-aes和icp-ms法測(cè)定血中微量元素[j]，現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2003,30(5)：644-645]，用icp-ms檢測(cè)學(xué)生血中砷、鉛、硒、鋇、銻、鍺，其值在0.004-1.08mg/kg，用icp-aes檢測(cè)學(xué)生血中鋁、鈣、鐵、鉀、鎂、錳、銅、鋅含量，其值在0.03-1409mg/kg。徐軍等[徐軍等，icp-ms/icp-aes法分析成年男性血清中18種元素含量參照值，廣東微量元素科學(xué)，2006,13(4):17-23]，對(duì)于k、mg、ca、na、fe采用icp-aes檢測(cè)，其檢出限為0.02-0.60ug/ml,對(duì)于as、cd、co、cr采用icp-ms檢測(cè)，其檢出限為0.005-0.1ng/ml。對(duì)于常量元素可以用icp-aes進(jìn)行檢測(cè)，而對(duì)于痕量元素，其檢測(cè)限達(dá)不到痕量元素的要求，需用icp-ms檢測(cè)。電感耦合等離子體質(zhì)譜(icp-ms)法使用icp焰炬作為儀器的原子化和離子化裝置，將質(zhì)譜作為檢測(cè)手段，可對(duì)元素周期表中大部分元素進(jìn)行測(cè)定，同時(shí)可以滿(mǎn)足對(duì)測(cè)定靈敏度的要求。該方法譜圖簡(jiǎn)單，試樣制備和進(jìn)樣技術(shù)簡(jiǎn)單，質(zhì)量掃描快速，分析速度快，運(yùn)行周期短，且選擇性好，線性范圍寬，檢出限低，能進(jìn)行多種元素檢測(cè)和同位素比測(cè)定，是一種前景廣闊的痕量(超痕量)無(wú)機(jī)多元素分析技術(shù)，目前已廣泛應(yīng)用于冶金、環(huán)境、醫(yī)學(xué)、生物等領(lǐng)域，成為最強(qiáng)有力的元素分析技術(shù)，是一種適合檢測(cè)人體體液樣品的分析方法。icp-ms對(duì)大多數(shù)金屬元素具有ng/l級(jí)的檢出限,無(wú)需富集處理,從而減少了環(huán)境對(duì)樣品的污染,提高了分析方法的可靠性和準(zhǔn)確性。血液的微量元素分析經(jīng)常作為疾病診斷和環(huán)境、職業(yè)健康研究的生物監(jiān)測(cè)手段。但是由于微量元素的含量很低，多數(shù)元素在ng/l-ug/l級(jí)別，而人體血液的基質(zhì)復(fù)雜，給檢測(cè)過(guò)程帶來(lái)了很多不確定影響因素，因此，在臨床上建立一套準(zhǔn)確檢測(cè)血液微量元素的方法具有重要意義。icp-ms檢測(cè)人體中微量元素，需要首先對(duì)樣品進(jìn)行前處理，由于血清成分復(fù)雜，含有蛋白質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、膽固醇等成分，復(fù)雜的基質(zhì)給測(cè)量帶來(lái)干擾，樣品前處理有助于減少基體干擾，并且適當(dāng)?shù)臉悠非疤幚矸椒梢蕴岣邷y(cè)量準(zhǔn)確度。主要前處理方法有灰化和熔融，濕法消解，微波消解以及直接稀釋法。樣品的處理，既要防止待測(cè)痕量組分因揮發(fā)逸出或生成難溶化合物或吸附于器壁不易洗脫等原因造成的損失，又要防止前處理過(guò)程中引入的污染，還要使最終得到的樣品溶液能滿(mǎn)足測(cè)定條件的要求，如盡可能減少或消除基體干擾等。因此選擇適當(dāng)?shù)臉悠诽幚矸椒▽?duì)分析工作是十分重要的。熔融技術(shù)多用于含硅較多的樣品，由于其采用試劑空白較高，而血清中微量元素含量很低(ug/l～ng/l量級(jí))，進(jìn)而會(huì)對(duì)微量元素檢測(cè)造成很大影響，且熔融過(guò)程會(huì)造成元素的揮發(fā)，影響微量元素檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性，而灰化法由于器皿在處理過(guò)程中會(huì)引入較大的干擾，因此血清樣品前處理不采用熔融和灰化方法。濕法消化是在生物樣品的痕量元素分析中一種可以使用的方法，雖然痕量元素在消解過(guò)程中揮發(fā)損失比灰化小，由于血清中微量元素含量很低，其同樣會(huì)干擾微量元素測(cè)定結(jié)果，故在血清微量元素檢測(cè)中同樣不宜采用。微波消解是近年來(lái)在生物樣品消化方面應(yīng)用較多，它能夠使樣品基質(zhì)中有機(jī)物分子破裂，使其轉(zhuǎn)化為澄清透明液體，將大分子轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)元素形式存在，有利于icp-ms進(jìn)行檢測(cè)。微波消解的過(guò)程中，由于要重復(fù)使用石英管或者特氟龍?jiān)嚬?，兩次消解之間容易引入污染，使微量元素的檢測(cè)結(jié)果偏高。而且在消解過(guò)程中，需高溫加熱，血清樣本存在元素?fù)p失的可能性。同時(shí)應(yīng)用微波消解對(duì)血清樣品進(jìn)行處理，過(guò)程繁瑣，雖然消解時(shí)間短，但消解完成后，冷卻時(shí)間較長(zhǎng)，不利于對(duì)大樣本量的樣品檢測(cè)。直接稀釋法是通過(guò)向樣品中加入稀釋劑，對(duì)稀釋后的樣品進(jìn)行直接檢測(cè)的方法。通過(guò)直接稀釋法對(duì)樣品進(jìn)行前處理，能夠很好的避免消解過(guò)程中引入的干擾，同時(shí)我們采用了較高的稀釋倍數(shù)，能夠一定程度的抑制基體效應(yīng)，而且，直接稀釋法操作簡(jiǎn)便，能夠盡量減少由于前處理過(guò)程引起的元素?fù)p失，處理樣本效率高，能夠在短時(shí)間內(nèi)對(duì)大量樣品進(jìn)行前處理。本試劑盒所采用的前處理方法，為直接稀釋法處理血清樣本，適用于各種型號(hào)的icp-ms儀器平臺(tái)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種定量檢測(cè)血清微量元素的試劑盒和檢測(cè)方法以及制備方法，可用于同時(shí)檢測(cè)人體血清中20種微量元素(鈣44ca、鎂25mg、鐵56fe、銅63cu、鋅66zn、硒78se、釩51v、鉻52cr、錳55mn、鈷59co、鎳58、60ni、砷75as、鉬96、98mo、鎘111cd、錫118sn、銻121sb、鋇137ba、汞201hg、鉈205tl、鉛207、208pb；選擇各內(nèi)標(biāo)元素質(zhì)量數(shù)為鍺72ge、銦115in、镥175lu、銠103rh)。其中，所述20種元素，既包括人體生長(zhǎng)的必需元素(如鈣，鎂，鉻，錳，鐵，鈷，鋅，硒，銅，鉬，碘)，也包括對(duì)人體有害的毒素元素(如砷，鎘，汞，鉈，鉛)，還包括成為人體必需的潛在微量元素(如釩，鎳，錫，銻，鋇)。該試劑盒所需樣品用量少，前處理簡(jiǎn)單，檢測(cè)周期短、準(zhǔn)確度和精密度高、檢測(cè)穩(wěn)定性好，適合于高通量樣本的檢測(cè)。因此，本發(fā)明第一目的是提供一種定量檢測(cè)血清20種微量元素的試劑盒，包括：標(biāo)準(zhǔn)溶液、稀釋液、內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液、質(zhì)控品，其中：(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液由含有7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度的20種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液混合而成：對(duì)于元素鈣ca、鎂mg，7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度為0.1、0.2、0.5、1、5、10、20mg/l；對(duì)于元素鐵fe、銅cu、鋅zn、硒se，7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度為1、2、5、10、50、100、200ug/l；對(duì)于元素釩v,鉻cr,錳mn,鈷co,鎳ni,砷as,鉬mo,鎘cd,錫sn,銻sb,鋇ba,汞hg,鉈tl,鉛pb，7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度為0.01、0.02、0.05、0.1、0.5、1、2ug/l；然后將含有上述1-7點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的20種元素分別混合成獨(dú)立的1管混合液，由此得到7管獨(dú)立的標(biāo)準(zhǔn)溶液混合液，每管均含有20種元素，另設(shè)1管稀釋液作為空白管；(2)血清質(zhì)控品分別是由20種元素的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和牛血清溶液配制而成。(3)稀釋液是含有2％(v/v)硝酸溶液。(4)內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液為銦,鍺,镥,銠四種元素，用稀釋液配制至濃度為100ug/l。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法還包含用于承載大批量樣品的微孔平板。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述平板是24孔板。在另一具體實(shí)施方案中，所述試劑盒是通過(guò)電感耦合等離子質(zhì)譜系統(tǒng)定量檢測(cè)血清20種微量元素的試劑盒。在另一實(shí)施方案中，選擇各待測(cè)元素質(zhì)量數(shù)為鈣44ca、鎂25mg、鐵56fe、銅63cu、鋅66zn、硒78se、釩51v、鉻52cr、錳55mn、鈷59co、鎳58、60ni、砷75as、鉬96、98mo、鎘111cd、錫118sn、銻121sb、鋇137ba、汞201hg、鉈205tl、鉛207、208pb；選擇各內(nèi)標(biāo)元素質(zhì)量數(shù)為鍺72ge、銦115in、镥175lu、銠103rh。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述產(chǎn)品還包含用于采血的元素采血管。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述元素采血管選自6ml的藍(lán)蓋采血管(368380-bdspcplusplastictubewithbdhemogardtmclosure,6ml)。本發(fā)明第二目的是利用上述檢測(cè)產(chǎn)品，來(lái)檢測(cè)人體血清中20種元素的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)使用元素采血管，連續(xù)采集2管血，并棄去第1管血樣和保留第2管血樣；(2)將血液靜置30min后，離心分離；(3)取2例1ml上層血清樣本，加入1ml內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，用稀釋液定容至10ml；(4)將1g血清質(zhì)控品，用3ml超純水混勻20min后，取3例1ml血清質(zhì)控品，加入1ml內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，用稀釋液定容至10ml；(5)通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)溶液建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)血清質(zhì)控品和待測(cè)血清樣本進(jìn)行20種元素的icpms分析檢測(cè)；其中步驟3和步驟4的稀釋液是2％(v/v)的硝酸。其中步驟3和步驟4的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液是銦,鍺,镥,銠四種元素，用含有2％(v/v)硝酸配制至濃度為100ug/l。其中，步驟(5)中，首先利用20種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，包括1例空白，7例不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后計(jì)算相關(guān)系數(shù)r2，對(duì)待測(cè)血清樣本進(jìn)行icpms檢測(cè)，并將所測(cè)定值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算元素的含量。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述元素采血管選自6ml的藍(lán)蓋采血管(368380-bdspcplusplastictubewithbdhemogardtmclosure,6ml)。在一個(gè)實(shí)施方案中，樣品準(zhǔn)備過(guò)程中所使用的試管(優(yōu)選聚丙烯)，均采用10％硝酸浸泡過(guò)夜，并用超純水清洗3遍待用。在上述任一實(shí)施方案中，所述血清是來(lái)自人體血清，其中人體血清既包括健康成年人的血清，也包括兒童和孕婦及懷疑中毒的職業(yè)人群。在上述任一實(shí)施方案中，在用聚光expec7000icp-ms對(duì)各元素的檢測(cè)中，選擇各待測(cè)元素質(zhì)量數(shù)為鈣44ca、鎂25mg、鐵56fe、銅63cu、鋅66zn、硒78se、釩51v、鉻52cr、錳55mn、鈷59co、鎳58、60ni、砷75as、鉬96、98mo、鎘111cd、錫118sn、銻121sb、鋇137ba、汞201hg、鉈205tl、鉛207、208pb；選擇各內(nèi)標(biāo)元素質(zhì)量數(shù)為鍺72ge、銦115in、镥175lu、銠103rh。在另一實(shí)施方案中，所述步驟1-4為用于icp-ms檢測(cè)的血清前處理方法。在其他實(shí)施方案中，所述檢測(cè)方法用于檢測(cè)環(huán)境微量毒素污染、檢測(cè)微量興奮劑成分、人體或尸體的法醫(yī)毒物檢測(cè)。本發(fā)明第三目的提供一種制備上述定量檢測(cè)血清20種微量元素的試劑盒的方法，步驟包括：(1)配制微量元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液將鈣ca、鎂mg元素的單元素標(biāo)準(zhǔn)液或單標(biāo)液等量混合稀釋成100mg/l，得到標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液1；將鐵fe、銅cu、鋅zn、硒se元素的單元素標(biāo)準(zhǔn)液或單標(biāo)液等量混合稀釋成10mg/l，得到標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液2；將鋇ba,釩v,鉻cr,錳mn,鈷co,鎳ni,砷as,鉬mo,鎘cd,錫sn,銻sb,汞hg,鉈tl,鉛pb元素的單元素標(biāo)準(zhǔn)液或單標(biāo)液等量混合稀釋成10mg/l，得到標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液3，再把儲(chǔ)備液3稀釋100倍得儲(chǔ)備液3-1；其中，單元素標(biāo)準(zhǔn)液或單標(biāo)液起始濃度均為1000mg/l；(2)配制中標(biāo)液將上述標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液1、儲(chǔ)備液2、儲(chǔ)備液3-1配成混合中標(biāo)液儲(chǔ)備液4、儲(chǔ)備液4-1、儲(chǔ)備液std7和std4；(3)配制7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別從儲(chǔ)備液4中取2.5ml、5ml，并用稀釋液補(bǔ)足至9ml配制儲(chǔ)備液std5、std6；分別從儲(chǔ)備液4-1中取1ml、2ml、5ml，并用稀釋液補(bǔ)足至9ml配制儲(chǔ)備液std1、std2、std3；(4)配制內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液將內(nèi)標(biāo)元素銦,鍺,镥,銠四種元素的單標(biāo)液加硝酸和超純水配制成濃度為100ug/l，得到內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，其中四種單元素標(biāo)準(zhǔn)液或單標(biāo)液起始濃度均為1000mg/l。(5)配制質(zhì)控品測(cè)定外購(gòu)的牛血清中的20種元素，確定其中各待測(cè)元素的含量后，根據(jù)各元素的血清中微量元素參考值上限加入各元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至將牛血清中20種元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度，得到血清質(zhì)控品，并冷凍干燥和滅菌后低溫保存(6)配制稀釋液將原硝酸10ml，加入超純水定容至500ml，混勻即得稀釋液；(7)產(chǎn)品包裝將所制備的標(biāo)準(zhǔn)溶液、稀釋液、內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液、質(zhì)控品獨(dú)立包裝后，滅菌包裝成試劑盒，并于低溫保存。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法還包含用于承載大批量樣品的微孔平板。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述平板是24孔板。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述產(chǎn)品還包含用于采血的元素采血管。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述元素采血管選自6ml的藍(lán)蓋采血管(368380-bdspcplusplastictubewithbdhemogardtmclosure,6ml)。本發(fā)明第四目的是提供上述試劑盒或上述方法所制備的試劑盒，用于檢測(cè)血清中微量元素的用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述用途是檢測(cè)環(huán)境微量毒素污染、檢測(cè)微量興奮劑成分、人體或尸體的法醫(yī)毒物檢測(cè)。技術(shù)效果：(1)建立了一種適用于icp-ms檢測(cè)血清中微量元素的靈敏、特異的前處理試劑盒，受血清中其他成分的干擾較少。(2)檢出限低：本發(fā)明在icpms的檢測(cè)平臺(tái)上，定量檢出限在ng/l-ug/l級(jí)別，as≤100ng/l；se≤1ug/l；pb≤100ng/l；cu≤100ng/l；cd≤80ng/l；tl≤10ng/l；zn≤1ug/l；hg≤100ng/l；co≤20ng/l；mn≤100ng/l；mg≤10ng/l；ca≤100ng/l；fe≤1ug/l；v≤100ng/l；cr≤100ng/l；ni≤1ug/l；mo≤100ng/l；sn≤100ng/l；sb≤80ng/l；ba≤100ng/l。(3)專(zhuān)屬性強(qiáng)：icp-ms檢測(cè)是基于元素的質(zhì)核比，因此本發(fā)明對(duì)于血清中的微量元素檢測(cè)專(zhuān)屬性強(qiáng)，定量準(zhǔn)確。(4)簡(jiǎn)便安全：樣品前處理簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)單安全、譜圖解析及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)對(duì)人員要求低。(5)快速：質(zhì)量掃描快速，分析速度快，運(yùn)行周期短，可實(shí)現(xiàn)批量處理，可在2分鐘內(nèi)完成1個(gè)樣本的20種元素的檢測(cè)。(6)驗(yàn)證了5種不同的采血管對(duì)于采集血液過(guò)程中，管材的微量元素含量對(duì)于血清檢測(cè)的影響，并優(yōu)選采血管使用6ml的藍(lán)蓋采血管(368380-bdspcplusplastictubewithbdhemogardtmclosure,6ml)。原理與定義術(shù)語(yǔ)“icp-ms”是將電感耦合等離子體作為離子源的一種無(wú)機(jī)多元素分析技術(shù)，通常情況下，氬氣流由高能的射頻能量激發(fā)形成等離子體，而被檢測(cè)的樣品通過(guò)水溶液的氣溶膠的形式進(jìn)入等離子體中，進(jìn)行去溶劑化、汽化解離和電離。部分等離子體進(jìn)入真空系統(tǒng)中，其中的正離子被按照質(zhì)荷比進(jìn)行分離。電感耦合等離子體質(zhì)譜通常情況下是由樣品引入系統(tǒng)、離子源、接口部分、離子聚焦系統(tǒng)、質(zhì)量分析器、檢測(cè)系統(tǒng)這幾部分組成，此外，儀器中還配備真空系統(tǒng)、供電系統(tǒng)以及用于儀器控制與數(shù)據(jù)處理的計(jì)算機(jī)系統(tǒng)。術(shù)語(yǔ)“元素采血管”是專(zhuān)用于采集生物血液或生物流體(組織液、尿液等)的專(zhuān)用管，該采血管通常由特殊的材料聚丙烯制成，管壁經(jīng)過(guò)特殊工藝處理，極度光滑，以避免血細(xì)胞或待測(cè)樣品液的附壁，減少標(biāo)本體外溶血，其材質(zhì)應(yīng)當(dāng)不含任何由管壁硅化而帶入的外來(lái)元素。術(shù)語(yǔ)“檢測(cè)產(chǎn)品”，指用于檢測(cè)人體血清中元素的任何常規(guī)產(chǎn)品，包括：檢測(cè)試劑、檢測(cè)芯片(如固體芯片、液體芯片等)、檢測(cè)載體，以及檢測(cè)試劑盒等。術(shù)語(yǔ)“元素”指具有相同的核電荷數(shù)(即核內(nèi)質(zhì)子數(shù))的一類(lèi)原子的總稱(chēng)。在人體中，同一元素存在著不同質(zhì)子數(shù)的情況，例如c12、c14。本發(fā)明中對(duì)于檢測(cè)元素同位素的選擇，參考以下2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)：選擇相對(duì)豐度較高的同位素，選擇相對(duì)干擾(氧化物，多原子等質(zhì)譜干擾)較小的同位素。以se元素為例，se存在同位素77、78、80、82，相對(duì)豐度較高的是78和80兩個(gè)同位素，而80同位素存在ar雙原子的干擾，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)結(jié)果，因此，選擇78同位素作為檢測(cè)對(duì)象。附圖說(shuō)明圖1為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鎂(mg)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖2為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鈣(ca)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖3為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中釩(v)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖4為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鉻(cr)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖5為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中錳(mn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖6為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鐵(fe)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖7為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鈷(co)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖8為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鎳(ni)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖9為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中銅(cu)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖10為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鋅(zn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖11為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中砷(as)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖12為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中硒(se)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖13為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鉬(mo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖14為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鎘(cd)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖15為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中錫(sn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖16為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中銻(sb)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖17為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鋇(ba)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖18為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中汞(hg)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖19為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鉈(tl)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖20為電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體血清中微量元素方法中鉛(pb)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。具體實(shí)施方式為了更好地說(shuō)明本發(fā)明，下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例一：元素采血管的選擇目前，商業(yè)可購(gòu)買(mǎi)采血管包括：no.1：規(guī)格vacutainertraceelementserum，bd公司，型號(hào)368380。no.2：規(guī)格vacutainerserum，bd公司，型號(hào)367812。no.3：規(guī)格zserumsepclotactivator，greinerbioone公司，型號(hào)454067cn。no.4：規(guī)格zserumclotactivator，greinerbioone公司，型號(hào)454204。no.5：規(guī)格vacutainersstiiadvance，bd公司，型號(hào)367957。術(shù)語(yǔ)“微量元素采血管”是指用于容納血樣或生物組織的特殊采血管。雖然理論上采血管材質(zhì)應(yīng)當(dāng)不含任何由管壁硅化而帶入的外來(lái)元素，但在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，由于材質(zhì)、加工設(shè)備以及空氣環(huán)境等，并不能完全避免引入外來(lái)元素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，雖然可以通過(guò)陰性或陽(yáng)性對(duì)照來(lái)消除背景元素，但發(fā)明人發(fā)現(xiàn)由于部分微量元素的可檢測(cè)值已經(jīng)低于背景元素值，因此并非所有的微量元素采血管都適合本發(fā)明。鑒于本發(fā)明之前未有針對(duì)商業(yè)上的采血管的背景微量元素的相關(guān)報(bào)道，因此，發(fā)明人通過(guò)以下預(yù)備試驗(yàn)，對(duì)比以上5種血清采血管，使用10％hno3溶液或水作為浸出液，確定最適宜的采血管。icp-ms檢測(cè)5種采血管中的20種元素(包含：鋁、釩、鉻、錳、鐵、鈷、鎳、銅、鋅、砷、硒、鉬、鎘、錫、銻、鋇、鎢、汞、鉈和鉛，與本發(fā)明的20種元素相比，少鈣和鎂，增加鎢)實(shí)驗(yàn)：1儀器及工作參數(shù)本文采用agilent8800icp-qqq儀器(安捷侖公司，美國(guó))進(jìn)行元素分析，儀器配備360個(gè)樣本的agilentsps4自動(dòng)進(jìn)樣器(安捷倫公司，美國(guó))，儀器的基本參數(shù)設(shè)置如表1所示。表2icpms8800儀器參數(shù)設(shè)置table2instrumentalsettings由于碰撞反應(yīng)池對(duì)于減少干擾，提高檢測(cè)限有明顯幫助，因此，對(duì)于硒元素我們采用h2模式，對(duì)于元素釩，鉻，錳，鐵，鈷，鎳，銅，鋅，我們采用he模式，元素砷采用o2模式，其余元素采用標(biāo)準(zhǔn)模式。2樣品處理對(duì)于5種不同的血液采集管，我們每種型號(hào)各取12只，向其中6只采血管注入與其額定容量相等容積的超純水，向另外6只采血管注入與其額定容量相等容積的10％hno3。然后將采集管置于混勻器上，室溫下混勻1小時(shí)?；靹蚝?，用移液槍移取4ml浸出液至離心管，加入1ml內(nèi)標(biāo)，1ml硝酸，定容至10ml。3試劑與標(biāo)準(zhǔn)溶液實(shí)驗(yàn)所用超純水由milliq超純水儀制備(millipore公司，奧地利)，硝酸(≥65％,p.a.,iso,roth,karlsruhe,德國(guó))，硝酸經(jīng)過(guò)低沸點(diǎn)蒸餾進(jìn)行純化。實(shí)驗(yàn)所用單標(biāo)液，鋁、釩、鉻、錳、鐵、鈷、鎳、銅、鋅、砷、硒、鉬、鎘、錫、銻、鋇、鎢、汞、鉈和鉛(1000mg/l,rosa，美國(guó))，混標(biāo)液(icpmulti-elementstandardsolutionvi,merck,德國(guó))，天然水1640a(nist，gaithersburg,美國(guó))包含有15種元素的標(biāo)定值。4樣品測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線用單標(biāo)液混合進(jìn)行配制，對(duì)于血液中含量較高的元素鐵，銅，鋅，硒，鋇，7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度為1,2,5,10,50,100,200ug/l，對(duì)于其余血液中含量較低的元素，7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度為0.01,0.02,0.05,0.1,0.5,1,2ug/l。內(nèi)標(biāo)選擇銦,鍺,镥,銠四種元素，檢測(cè)溶液中的最終濃度為10ug/l。在icp-ms優(yōu)化的條件下，對(duì)處理好的樣品中的20種元素進(jìn)行測(cè)定，儀器根據(jù)7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)溶液自動(dòng)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算出被測(cè)樣本的濃度。5結(jié)果與討論5.1儀器檢出限和準(zhǔn)確度10％硝酸作為空白溶液，同時(shí)測(cè)定這20種元素的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，得到元素的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)。通過(guò)連續(xù)測(cè)量4次空白溶液，以其的平均值加上3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差作為儀器的檢出限。為了檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線的準(zhǔn)確性，我們采用nist1640a天然水作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其標(biāo)定元素含量范圍，本方法檢出值及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差如表3所示。由表3可知，本方法中所檢測(cè)的20種元素信號(hào)值與濃度均呈現(xiàn)出良好的線性，相關(guān)系數(shù)均在0.9991以上。本方法檢出限低，對(duì)于元素鈷，鉬，鎘，錫，銻，鋇，鎢，汞，鉈和鉛，檢測(cè)限低于0.01μg/l；對(duì)于元素釩，鉻，錳，鎳，銅，砷和硒，檢測(cè)限低于0.1μg/l；對(duì)于元素鋁，鐵，鋅檢測(cè)限低于1ug/l。本方法的背景等效濃度低，對(duì)于元素鈷，鉬，鎘，銻，鋇，鎢，鉈和鉛，背景等效濃度低于0.01ug/l；對(duì)于元素釩，錳，砷，硒，錫和汞，背景等效濃度低于0.1ug/l；對(duì)于元素鋁，鉻，鐵，鎳，銅和鋅，背景等效濃度低于1ug/l，說(shuō)明在該測(cè)量條件下，有非常好的抑制背景干擾的能力。本方法對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(天然水)的檢測(cè)結(jié)果良好，元素鋁，錳，鐵，鋅，硒，鎘，鋇，鉈和鉛的測(cè)量值均在天然水的標(biāo)定范圍之內(nèi)，元素釩，鈷，銅，砷和鉬的測(cè)量值與標(biāo)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差rsd小于5％，元素鉻，鎳，銻的測(cè)量值與標(biāo)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差rsd小于10％。5.2樣品分析根據(jù)上述所列的儀器條件和方法，對(duì)5種采血管中的20種元素進(jìn)行了測(cè)定，測(cè)定結(jié)果如表4所示。為了進(jìn)一步對(duì)比采血管中元素的濃度是否會(huì)對(duì)血液元素分析造成影響，我們總結(jié)了文獻(xiàn)中提到的人體血液(血清、血漿、全血)元素檢測(cè)的含量范圍，以此作為判斷采血管中的元素含量是否會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響的基礎(chǔ)。人體血液(血清、血漿、全血)元素的含量范圍如表3所示。表3儀器的檢測(cè)限、背景等效濃度，天然水檢測(cè)結(jié)果，文獻(xiàn)中元素參考值和兩種血清采血管元素檢測(cè)值表45種采血管中20種元素含量發(fā)明人經(jīng)過(guò)比較，浸出液中(包括h2o和10％hno3作為溶劑)各種元素的含量由低到高為：采血管1<采血管2<采血管5<采血管4<采血管3根據(jù)人體血液(血清、血漿、全血)微量元素含量的參考范圍，我們?cè)敿?xì)分析了5種采血管中微量元素含量可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成的影響。我們將采血管中微量元素含量低于文獻(xiàn)中血液(血清、血漿、全血)微量元素含量最小值10％的，作為確定能夠檢測(cè)該種元素的采血管；介于文獻(xiàn)中血液微量元素含量最小值10％和最大值10％之間的，作為潛在可檢測(cè)該種元素的采血管；高于血液微量元素含量最大值的10％的，作為不可檢測(cè)該種元素的采血管。由此，我們制作了表5。表55種不同采血管對(duì)20種微量元素的分析能力注：√表示采血管中元素含量低于文獻(xiàn)中人體血液微量元素最小值的10％o表示采血管中元素含量介于文獻(xiàn)中人體血液微量元素最小值的10％和最大值的10％之間空白表示采血管中元素含量大于文獻(xiàn)中人體血液微量元素最大值的10％試管中的微量元素含量采用純水浸出液的檢測(cè)值由表5可知，血清微量元素采血管中，采血管1能夠完全滿(mǎn)足種11種元素的檢測(cè)要求，而采血管1中的元素鋁、鉻、錳、鈷、鎳和鋇的含量會(huì)一定程度上受到采血管中微量元素含量的影響，元素銻和鎢在采血管1中含量相對(duì)較高，會(huì)顯著影響血清微量元素的檢測(cè)結(jié)果。由表3可知，采血管1和采血管3對(duì)實(shí)際血清樣本檢測(cè)結(jié)果的影響，采血管1的檢測(cè)結(jié)果中幾乎所有微量元素含量都低于采血管3的檢測(cè)結(jié)果，尤其是鋁，釩，鉻，錳，砷，錫，銻等幾種元素，說(shuō)明在實(shí)際采血過(guò)程中，采血管的選擇對(duì)微量元素檢測(cè)結(jié)果影響很大。因此，本發(fā)明元素采血管優(yōu)選使用6ml的藍(lán)蓋采血管(368380-bdspcplusplastictubewithbdhemogardtmclosure,6ml)。實(shí)施例二：試劑盒的生產(chǎn)及檢測(cè)要求：標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：?jiǎn)螛?biāo)液，鈣、鎂、鐵、銅、鋅、硒、釩、鉻、錳、鈷、鎳、砷、鉬、鎘、錫、銻、鋇、汞、鉈、鉛(1000mg/l,國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心)2配制中標(biāo)液：硝酸、純化水、已有的標(biāo)準(zhǔn)溶液3目標(biāo)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：標(biāo)準(zhǔn)溶液中各元素的目標(biāo)濃度：4.稀釋液的配制：原硝酸：超純水＝2:98(v/v)，即得2％硝酸溶液。5.內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液的制備方法是：稱(chēng)取一定質(zhì)量的銦,鍺,镥,銠的單標(biāo)液與2％硝酸配制成濃度為100ug/l的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。6.質(zhì)控品的配制：測(cè)定外購(gòu)的牛血清中的20種元素，確定其中各待測(cè)元素的含量。根據(jù)各元素的血清中微量元素參考值上限加入各元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，將牛血清中20種元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度，混勻30min(搖勻)，離心去除纖維沉淀物。3ml/瓶分裝。冷凍干燥：-70℃預(yù)冷凍過(guò)夜，冷凍干燥機(jī)中干燥3-4天。樣品凍干后立即蓋緊瓶蓋。60co輻射滅菌，輻射劑量為2*105rad。2-8℃保存，備用。此試劑盒中的血清質(zhì)控品為本公司自制，其中的各待測(cè)元素含量更接近人體的含量水平。7.試劑盒檢測(cè)要求(1)外觀物理性狀：產(chǎn)品擁有24人份/盒，96人份/盒2種規(guī)格。產(chǎn)品外包裝清潔，無(wú)污漬，密封良好，內(nèi)外包裝濃度標(biāo)識(shí)相符，內(nèi)容物齊全，構(gòu)造完整。液體內(nèi)容物清澈無(wú)沉淀及絮狀物，凍干粉為淺黃色粉末。(2)裝量試劑裝量應(yīng)不少于標(biāo)示裝量或規(guī)定限。(3)準(zhǔn)確度：用質(zhì)控參考品對(duì)試劑(盒)進(jìn)行測(cè)試，平行檢測(cè)20人份，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)與標(biāo)定值一致，相對(duì)偏差應(yīng)不超過(guò)±10％。(4)檢出限用樣本稀釋液作為樣本進(jìn)行檢測(cè)，重復(fù)測(cè)定20次，得出20次測(cè)量結(jié)果，計(jì)算其平均值(m)和標(biāo)準(zhǔn)差(sd)，得出m+2sd。(5)精密度(5.1)重復(fù)性同一批次的某一個(gè)檢測(cè)試劑盒對(duì)檢測(cè)范圍內(nèi)某個(gè)濃度的質(zhì)控品進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)至少20次，計(jì)算20次測(cè)量結(jié)果的平均值(m)和標(biāo)準(zhǔn)差(sd)，根據(jù)公式cv＝sd/m×100％得出變異系數(shù)，變異系數(shù)cv(％)≤5％。(5.2)批內(nèi)(瓶間)差(適合凍干的質(zhì)控品)用已知濃度的質(zhì)控樣品對(duì)該批號(hào)的1個(gè)待檢試劑盒重復(fù)測(cè)試10次，計(jì)算結(jié)果的均值(2)和標(biāo)準(zhǔn)差(sd2)。根據(jù)公式cv＝sd/m×100％計(jì)算瓶間差的變異系數(shù)(cv)，批內(nèi)瓶間差均應(yīng)不大于5％。(5.3)試劑盒批間差三個(gè)批次的檢測(cè)試劑對(duì)檢測(cè)范圍內(nèi)某個(gè)已知濃度的質(zhì)控品(中陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性)各重復(fù)檢測(cè)10次，計(jì)算30次測(cè)量結(jié)果的平均值(m)和標(biāo)準(zhǔn)差(sd)，根據(jù)公式cv＝sd/m×100％得出變異系數(shù)，變異系數(shù)cv(％)值應(yīng)≤20％。(6)穩(wěn)定性(6.1)效期穩(wěn)定性：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)規(guī)定產(chǎn)品的有效期。取到有效期后的樣品檢測(cè)，準(zhǔn)確度應(yīng)符合技術(shù)要求。(6.2)熱穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一批號(hào)的產(chǎn)品，37℃放置20天，對(duì)最低檢出限、準(zhǔn)確度、精密度進(jìn)行檢驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)符合要求。凍干品應(yīng)同時(shí)進(jìn)行復(fù)溶穩(wěn)定性試驗(yàn)，復(fù)溶后放置到有效期末，產(chǎn)品性能應(yīng)符合線性區(qū)間、準(zhǔn)確度的技術(shù)要求。實(shí)施例三：健康人血清中20種元素的icp-ms檢測(cè)采集健康人的空腹靜脈血，按照本發(fā)明中的試劑盒的檢測(cè)程序，利用電感耦合離子體質(zhì)譜儀對(duì)血清中的20種元素(包含：鋁、釩、鉻、錳、鐵、鈷、鎳、銅、鋅、砷、硒、鉬、鎘、錫、銻、鋇、鈣、汞、鉈、鉛和鎂)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)：1儀器及工作參數(shù)采用clin-icp-qms進(jìn)行元素分析，儀器的調(diào)諧液為10ppbli、co、in、ba、ce、u，儀器的基本參數(shù)設(shè)置如表6所示。表6clin-icp-qms儀器參數(shù)設(shè)置由于碰撞反應(yīng)池對(duì)于減少干擾，提高檢測(cè)限有明顯幫助，因此對(duì)于待測(cè)的20種元素我們采用氦氣的碰撞池模式。2樣品處理：利用本發(fā)明中制備的試劑盒中的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液、稀釋液、血清質(zhì)控品，按要求程序進(jìn)行血樣及質(zhì)控品的前處理制備。用專(zhuān)用的元素采血管(368380-bdspcplusplastictubewithbdhemogardtmclosure,6ml)，普通針頭，每人采2管血，第一管血不要，第二管用來(lái)分析。將血液靜置30min。將采血管放置在離心機(jī)上，4000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，常溫。取2例1ml上層血清樣本，加入1ml內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，用2％(v/v)的稀釋液將血清樣本稀釋至10ml。使用環(huán)境溫度10～30℃,取1g質(zhì)控品復(fù)溶至超純水3ml中，混勻20分鐘。取3例1ml血清質(zhì)控品，加入1ml內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，用2％(v/v)的稀釋液將血清質(zhì)控品稀釋至10ml。本前處理過(guò)程對(duì)于離心后的血清可在10分鐘內(nèi)進(jìn)行處理并進(jìn)樣分析，制樣簡(jiǎn)單，快速，易于大批量的操作。3樣品測(cè)定：利用本發(fā)明中制備的試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)溶液，包括1例空白，7例不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。對(duì)于元素鈣和鎂，7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度為0.1,0.2,0.5,1,5,10,20mg/l，對(duì)于元素鐵，銅，鋅，硒，7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度為1,2,5,10,50,100,200ug/l，對(duì)于其他元素，7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度為0.01,0.02,0.05,0.1,0.5,1,2ug/l。產(chǎn)品基質(zhì)2％hno3溶液。內(nèi)標(biāo)選擇銦,鍺,镥,銠四種元素，檢測(cè)溶液中的最終濃度為10ug/l。在icp-ms優(yōu)化的條件下，先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)溶液，儀器根據(jù)7點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)溶液自動(dòng)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后對(duì)空白溶劑、血清質(zhì)控品和待測(cè)樣本若干進(jìn)行20種元素的檢測(cè)，儀器根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出被測(cè)樣本的濃度。檢測(cè)結(jié)果的定量分析,根據(jù)混合元素標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測(cè)元素信號(hào)和內(nèi)標(biāo)信號(hào)的比值和混合元素標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測(cè)元素的濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線需滿(mǎn)足r2＞0.999。利用樣品中待測(cè)元素信號(hào)和內(nèi)標(biāo)信號(hào)的比值定量樣品中待測(cè)元素的含量。各元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)(圖1-圖20)。利用樣品中待測(cè)元素信號(hào)和內(nèi)標(biāo)信號(hào)的比值定量樣品中待測(cè)元素的含量。4儀器檢出限：根據(jù)上述所列的儀器條件和方法，空白溶液為2％硝酸，連續(xù)測(cè)量11次空白溶液，4個(gè)平行樣，以其3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差作為該方法的檢出限。說(shuō)明在該測(cè)量條件下，有非常好的抑制背景干擾的能力。5.血清質(zhì)控品分析根據(jù)上述所列的儀器條件和方法，對(duì)血清質(zhì)控品進(jìn)行了測(cè)定，測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度如下：對(duì)于血清質(zhì)控品中的各元素，其檢出值均在標(biāo)準(zhǔn)值范圍內(nèi)，精密度在20％的范圍內(nèi)，即本發(fā)明對(duì)于各元素的檢測(cè)真實(shí)可信。實(shí)施例四、健康人血清的檢測(cè)根據(jù)上述所列的儀器條件和方法，對(duì)100例健康人血清進(jìn)行了測(cè)定，根據(jù)測(cè)定結(jié)果并結(jié)合大量文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，初步確定人血清中20種元素的含量范圍：把待測(cè)樣本中的各元素含量值，與以上標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比，可以初步推斷人體中20種元素的水平是否在正常范圍內(nèi)，及時(shí)實(shí)施相應(yīng)的治療及保健措施。以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本
技術(shù)領(lǐng)域：
：的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，都應(yīng)該涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書(shū)的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。當(dāng)前第1頁(yè)12當(dāng)前第1頁(yè)12