本發(fā)明涉及食品檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種鴨肉中雌二醇的專(zhuān)用檢測(cè)方法及其設(shè)備。

背景技術(shù)：

雌二醇是一種天然的雌激素，并且廣泛存在于自然環(huán)境中，它可以從外部環(huán)境進(jìn)入人體，從而擾亂人體內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，造成人體在神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和生殖發(fā)育等系統(tǒng)上的病變，女性吸收過(guò)多的雌二醇容易導(dǎo)致提前發(fā)育，男性吸收過(guò)多的雌二醇容易出現(xiàn)第二性征，一些動(dòng)物或家禽，如家鴨，不法養(yǎng)殖戶(hù)為提前催熟家鴨，縮短養(yǎng)殖期，使用雌二醇進(jìn)行催熟，因此開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單的、快捷的、靈敏的針對(duì)雌二醇的檢測(cè)方法具有重大的意義。

傳統(tǒng)的雌二醇的檢測(cè)方法有高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法，化學(xué)發(fā)光免疫法等等，這些方法雖然能夠達(dá)到較高的檢測(cè)限，但是都是基于實(shí)驗(yàn)室中復(fù)雜昂貴的儀器，并且成本高，耗時(shí)長(zhǎng)，難以滿(mǎn)足現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)精準(zhǔn)檢測(cè)的需要，本發(fā)明提供一種利用陽(yáng)離子表面活性劑聚集納米金比色檢測(cè)雌二醇的方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

（一）解決的技術(shù)問(wèn)題

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種鴨肉中雌二醇的專(zhuān)用檢測(cè)方法及其設(shè)備，解決了現(xiàn)有雌二醇檢測(cè)方法及設(shè)備成本高和耗時(shí)長(zhǎng)的問(wèn)題。

（二）技術(shù)方案

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種鴨肉中雌二醇的專(zhuān)用檢測(cè)方法，包括以下步驟：

一、采取鴨肉樣本：將新鮮鴨肉用清水洗凈，用不銹鋼刀具順著鴨肉經(jīng)絡(luò)方向割取兩塊5*5厘米的樣品，一塊用于實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，一塊用于備用，將兩塊鴨肉樣品分別放在食品級(jí)攪拌機(jī)內(nèi)以每秒10圈的速度分別將兩塊鴨肉樣品攪碎，并且在攪拌的過(guò)程中添加少量清水，防止鴨肉粘貼在攪拌機(jī)內(nèi)部，鴨肉攪碎后，用干凈的勺匙分別將兩塊鴨肉樣品取出來(lái)，放置在干凈的玻璃器皿中，暫時(shí)放在冰箱或冰柜中冷藏5-8分鐘，溫度設(shè)為5-8攝氏度；

二、設(shè)置對(duì)照樣品：取一只干凈的玻璃器皿，并用馬克筆在玻璃器皿上標(biāo)記為A，向玻璃器皿內(nèi)添加100-120毫升的純凈水，再將步驟一中制得的兩份鴨肉樣品從冰箱或冰柜中取出一份，另一份使用保鮮膜包裹在鴨肉樣品上，繼續(xù)冷藏，作為備用檢測(cè)樣品儲(chǔ)備起來(lái)，取出的鴨肉樣品用干凈的玻璃器皿盛放，并用馬克筆在玻璃器皿上標(biāo)記為B，向B器皿中添加20-30毫升的純凈水，用干凈的攪拌勺將攪碎的鴨肉樣品進(jìn)行攪拌，使其與純凈水充分融合；

三、開(kāi)始試驗(yàn)；S1、分別向A、B器皿中添加等量的適配體溶液，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻和孵育5分鐘，得混合液A1、B1；

S2、分別向A1和B1中分別添加適量的等質(zhì)量的二甘脂試劑，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻，靜置1分鐘，再分別向A1、B1中添加等質(zhì)量的甲基丙磺酸試劑，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻和孵育5分鐘，得混合液A2、B2；

S3、向A2、B2中分別添加的30-40毫升等質(zhì)量的納米金溶液，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻，得混合液A3、B3；

S4、向A3、B3中分別添加15-20毫升等質(zhì)量的氯化鈉與氯化鉀混合液，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻，得混合液A4、和B4；

S5、取內(nèi)徑為60*60毫米高度為60毫米的石英熒光比色皿兩個(gè)，并用馬克筆分別標(biāo)記為A5和B5，洗凈并讓其自然晾干，晾干后，將A4、和B4混合液分別用導(dǎo)流管引流至A5和B5中，并將A5和B5兩個(gè)石英熒光比色皿置于熒光分光光度計(jì)內(nèi)，接通電源，向熒光分光光度計(jì)內(nèi)的A5和B5最終分別添加50-60毫升的等質(zhì)量的羅丹明溶液，開(kāi)啟熒光分光光度計(jì)進(jìn)行掃描測(cè)定信號(hào)。

優(yōu)選的，所述熒光分光光度計(jì)的掃描條件為：激發(fā)光狹縫為9納米，發(fā)射光狹縫為2納米，激發(fā)光波長(zhǎng)為480納米，在此條件下進(jìn)行掃描，獲得其熒光光譜信號(hào)，A5和B5的熒光強(qiáng)度信號(hào)分別為C1和C2，計(jì)算增強(qiáng)的熒光強(qiáng)度值為C2與C1的差值。

優(yōu)選的，所述納米金溶液的制備方法如下：在100毫升的煮沸的質(zhì)量百分比濃度為0.015%的氯金酸溶液中，加入4毫升質(zhì)量百分比濃度為1%的檸檬酸三鈉溶液，攪拌30分鐘，移除加熱裝置后繼續(xù)攪拌混合物15分鐘，最后，使溶液達(dá)到25攝氏度并且使用0.15微米的超濾膜過(guò)濾，然后儲(chǔ)存在恒溫為4攝氏度的黑色玻璃瓶中備用，從而制得納米金溶液。

優(yōu)選的，所述氯化鈉的濃度為0.14mol/L，羅丹明的濃度為8umol/L，甲基丙磺酸試劑的濃度為20umol/L，甲基丙磺酸試劑是作為緩沖液的作用，還可以使用乙基丙磺酸代替甲基丙磺酸試劑。

優(yōu)選的，所述鴨肉中雌二醇檢測(cè)方法所涉及的制備樣品檢測(cè)體系為：取10毫升B5待測(cè)樣品，加入到離心管中，充分混勻后再將離心管置于25攝氏度條件下孵育25分鐘后，在混合液中加入30毫升濃度為0.14mol/L的氯化鈉溶液和25毫升濃度為8umol/L的羅丹明溶液，混勻，然后按照C2減C1的計(jì)算方式得到增強(qiáng)的熒光強(qiáng)度值。

優(yōu)選的，所述鴨肉中雌二醇的專(zhuān)用檢測(cè)設(shè)備，包括機(jī)體，機(jī)體內(nèi)固定安裝有滑桿，所述滑桿上滑動(dòng)套接有滑座，所述滑座的底部固定連接有激光掃描儀，所述機(jī)體內(nèi)設(shè)置有檢測(cè)臺(tái)，所述檢測(cè)臺(tái)頂部的右側(cè)開(kāi)設(shè)有凹槽且凹槽內(nèi)固定連接有減震墊，所述減震墊的頂部設(shè)置有兩個(gè)器皿，且兩個(gè)器皿之間通過(guò)隔板隔開(kāi)，所述機(jī)體內(nèi)壁的頂部固定安裝有遮光板，所述機(jī)體的兩側(cè)均固定安裝有通風(fēng)窗，所述機(jī)體的底部固定安裝有底座。

（三）有益效果

本發(fā)明提供了一種鴨肉中雌二醇的專(zhuān)用檢測(cè)方法。具備以下有益效果：

（1）、本發(fā)明通過(guò)將鴨肉攪碎后支撐液態(tài)狀并與納米金溶液混合，使得雌二醇適配體包裹在納米金的表面，當(dāng)鴨肉中存在雌二醇時(shí)，包裹在納米金上的適配體會(huì)與雌二醇特異性結(jié)合，從而釋放出游離的納米金，加入氯化鈉和氯化鉀溶液之后，游離的納米金產(chǎn)生聚集，加入羅金丹對(duì)聚集的納米金熒光沒(méi)有猝滅作用，當(dāng)檢測(cè)物中沒(méi)有加入羅丹明時(shí)，納米金處于游離狀態(tài)，而納米金對(duì)于游離狀態(tài)的納米金具有很強(qiáng)的熒光猝滅作用，試驗(yàn)通過(guò)設(shè)置對(duì)比例的方式，起到很直觀的對(duì)比作用，具有明確的辨別鴨肉中是否含有雌二醇的效果，并且通過(guò)熒光的對(duì)比強(qiáng)度，還可判斷鴨肉中所含雌二醇的濃度高低，并且該檢測(cè)方法具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)耗時(shí)短、成本較低的優(yōu)點(diǎn)。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明結(jié)構(gòu)示意圖。

圖中：1機(jī)體、2滑桿、3滑座、4激光掃描儀、5檢測(cè)臺(tái)、6減震墊、7器皿、8隔板、9遮光板、10通風(fēng)窗、11底座。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

如圖1所示，本發(fā)明提供一種技術(shù)方案：一種鴨肉中雌二醇的專(zhuān)用檢測(cè)方法，包括以下步驟：

一、采取鴨肉樣本：將新鮮鴨肉用清水洗凈，用不銹鋼刀具順著鴨肉經(jīng)絡(luò)方向割取兩塊5*5厘米的樣品，一塊用于實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，一塊用于備用，將兩塊鴨肉樣品分別放在食品級(jí)攪拌機(jī)內(nèi)以每秒10圈的速度分別將兩塊鴨肉樣品攪碎，并且在攪拌的過(guò)程中添加少量清水，防止鴨肉粘貼在攪拌機(jī)內(nèi)部，鴨肉攪碎后，用干凈的勺匙分別將兩塊鴨肉樣品取出來(lái)，放置在干凈的玻璃器皿中，暫時(shí)放在冰箱或冰柜中冷藏5-8分鐘，溫度設(shè)為5-8攝氏度；

二、設(shè)置對(duì)照樣品：取一只干凈的玻璃器皿，并用馬克筆在玻璃器皿上標(biāo)記為A，向玻璃器皿內(nèi)添加100-120毫升的純凈水，再將步驟一中制得的兩份鴨肉樣品從冰箱或冰柜中取出一份，另一份使用保鮮膜包裹在鴨肉樣品上，繼續(xù)冷藏，作為備用檢測(cè)樣品儲(chǔ)備起來(lái)，取出的鴨肉樣品用干凈的玻璃器皿盛放，并用馬克筆在玻璃器皿上標(biāo)記為B，向B器皿中添加20-30毫升的純凈水，用干凈的攪拌勺將攪碎的鴨肉樣品進(jìn)行攪拌，使其與純凈水充分融合；

三、開(kāi)始試驗(yàn)；S1、分別向A、B器皿中添加等量的適配體溶液，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻和孵育5分鐘，得混合液A1、B1；

S2、分別向A1和B1中分別添加適量的等質(zhì)量的二甘脂試劑，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻，靜置1分鐘，再分別向A1、B1中添加等質(zhì)量的甲基丙磺酸試劑，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻和孵育5分鐘，得混合液A2、B2；

S3、向A2、B2中分別添加的30-40毫升等質(zhì)量的納米金溶液，納米金溶液的制備方法如下：在100毫升的煮沸的質(zhì)量百分比濃度為0.015%的氯金酸溶液中，加入4毫升質(zhì)量百分比濃度為1%的檸檬酸三鈉溶液，攪拌30分鐘，移除加熱裝置后繼續(xù)攪拌混合物15分鐘，最后，使溶液達(dá)到25攝氏度并且使用0.15微米的超濾膜過(guò)濾，然后儲(chǔ)存在恒溫為4攝氏度的黑色玻璃瓶中備用，從而制得納米金溶液，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻，得混合液A3、B3；

S4、向A3、B3中分別添加15-20毫升等質(zhì)量的氯化鈉與氯化鉀混合液，氯化鈉的濃度為0.14mol/L，羅丹明的濃度為8umol/L，甲基丙磺酸試劑的濃度為20umol/L，甲基丙磺酸試劑是作為緩沖液的作用，還可以使用乙基丙磺酸代替甲基丙磺酸試劑，并分別用攪拌勺進(jìn)行混勻，得混合液A4、和B4；

S5、取內(nèi)徑為60*60毫米高度為60毫米的石英熒光比色皿兩個(gè)，并用馬克筆分別標(biāo)記為A5和B5，洗凈并讓其自然晾干，晾干后，將A4、和B4混合液分別用導(dǎo)流管引流至A5和B5中，并將A5和B5兩個(gè)石英熒光比色皿置于熒光分光光度計(jì)內(nèi)，接通電源，向熒光分光光度計(jì)內(nèi)的A5和B5最終分別添加50-60毫升的等質(zhì)量的羅丹明溶液，鴨肉中雌二醇檢測(cè)方法所涉及的制備樣品檢測(cè)體系為：取10毫升B5待測(cè)樣品，加入到離心管中，充分混勻后再將離心管置于25攝氏度條件下孵育25分鐘后，在混合液中加入30毫升濃度為0.14mol/L的氯化鈉溶液和25毫升濃度為8umol/L的羅丹明溶液，混勻，然后按照C2減C1的計(jì)算方式得到增強(qiáng)的熒光強(qiáng)度值，開(kāi)啟熒光分光光度計(jì)進(jìn)行掃描測(cè)定信號(hào)，熒光分光光度計(jì)的掃描條件為：激發(fā)光狹縫為9納米，發(fā)射光狹縫為2納米，激發(fā)光波長(zhǎng)為480納米，在此條件下進(jìn)行掃描，獲得其熒光光譜信號(hào)，A5和B5的熒光強(qiáng)度信號(hào)分別為C1和C2，計(jì)算增強(qiáng)的熒光強(qiáng)度值為C2與C1的差值，鴨肉中雌二醇的專(zhuān)用檢測(cè)設(shè)備，包括機(jī)體1，機(jī)體1內(nèi)固定安裝有滑桿2，滑桿2上滑動(dòng)套接有滑座3，滑桿2可以自由在滑座3上滑動(dòng)，滑座3的底部固定連接有激光掃描儀4，機(jī)體1內(nèi)設(shè)置有檢測(cè)臺(tái)5，檢測(cè)臺(tái)5頂部的右側(cè)開(kāi)設(shè)有凹槽且凹槽內(nèi)固定連接有減震墊6，減震墊6起到減震的作用，減震墊6的頂部設(shè)置有兩個(gè)器皿7，兩個(gè)器皿7內(nèi)分別盛裝有鴨肉樣品和空白對(duì)照樣，且兩個(gè)器皿7之間通過(guò)隔板8隔開(kāi)，機(jī)體1內(nèi)壁的頂部固定安裝有遮光板9，設(shè)置遮光板9起到增強(qiáng)熒光亮度顯示的效果，機(jī)體1的兩側(cè)均固定安裝有通風(fēng)窗10，機(jī)體1的底部固定安裝有底座11。

使用時(shí)，本發(fā)明通過(guò)將鴨肉攪碎后支撐液態(tài)狀并與納米金溶液混合，使得雌二醇適配體包裹在納米金的表面，當(dāng)鴨肉中存在雌二醇時(shí)，包裹在納米金上的適配體會(huì)與雌二醇特異性結(jié)合，從而釋放出游離的納米金，加入氯化鈉和氯化鉀溶液之后，游離的納米金產(chǎn)生聚集，加入羅金丹對(duì)聚集的納米金熒光沒(méi)有猝滅作用，當(dāng)檢測(cè)物中沒(méi)有加入羅丹明時(shí)，納米金處于游離狀態(tài)，而納米金對(duì)于游離狀態(tài)的納米金具有很強(qiáng)的熒光猝滅作用，試驗(yàn)通過(guò)設(shè)置對(duì)比例的方式，起到很直觀的對(duì)比作用，具有明確的辨別鴨肉中是否含有雌二醇的效果，并且通過(guò)熒光的對(duì)比強(qiáng)度，還可判斷鴨肉中所含雌二醇的濃度高低，并且該檢測(cè)方法具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)耗時(shí)短、成本較低的優(yōu)點(diǎn)。

綜上可得，該鴨肉中雌二醇的專(zhuān)用檢測(cè)設(shè)備，通過(guò)設(shè)置滑桿2、滑座3、激光掃描儀4、隔板8和遮光板9，解決了現(xiàn)有雌二醇檢測(cè)方法及設(shè)備成本高和耗時(shí)長(zhǎng)的問(wèn)題。

需要說(shuō)明的是，在本文中，諸如第一和第二等之類(lèi)的關(guān)系術(shù)語(yǔ)僅僅用來(lái)將一個(gè)實(shí)體或者操作與另一個(gè)實(shí)體或操作區(qū)分開(kāi)來(lái)，而不一定要求或者暗示這些實(shí)體或操作之間存在任何這種實(shí)際的關(guān)系或者順序。而且，術(shù)語(yǔ)“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備不僅包括那些要素，而且還包括沒(méi)有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒(méi)有更多限制的情況下，由語(yǔ)句“包括一個(gè)……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素。

盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對(duì)這些實(shí)施例進(jìn)行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。