本發(fā)明屬于生物傳感技術(shù)領(lǐng)域,利用基于棱鏡結(jié)構(gòu)的表面等離子體共振(SPR)傳感元件,將檢測信號調(diào)諧至紅外波段,涉及到表面等離子體共振(SPR)原理。整個(gè)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)簡單,容易操作,可以實(shí)現(xiàn)對生物樣品高靈敏度高分辨率的測量,在生物小分子傳感領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用前景。
背景技術(shù):
表面等離子體共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)傳感技術(shù)是一種新型的光電檢測技術(shù)。當(dāng)光入射到鍍有一定厚度金屬薄膜的棱鏡表面時(shí),會發(fā)生全反射現(xiàn)象,在滿足一定條件時(shí),形成的消逝波與介質(zhì)中的等離子波發(fā)生共振效應(yīng),因此入射光強(qiáng)度大幅度衰減,即為SPR效應(yīng)。由于它對吸附在金屬表層的介質(zhì)折射率具有良好的敏感性和動態(tài)響應(yīng)性,因此能夠檢測傳感表面與折射率有關(guān)的變化(如生物分子結(jié)合過程等)。與傳統(tǒng)傳感器相比,SPR傳感器具有抗電磁干擾、穩(wěn)定性好、響應(yīng)速度快等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)在醫(yī)學(xué)、生物、化學(xué)等許多重要領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。目前SPR傳感器由于其靈敏度和分辨率的限制,因此在蛋白小分子結(jié)合和細(xì)胞特性檢測領(lǐng)域具有一定的局限性,因此實(shí)現(xiàn)高靈敏度探測是目前SPR檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢。目前,多數(shù)SPR傳感器多應(yīng)用于大分子檢測領(lǐng)域,只能檢測大分子量的生物樣品,因此,設(shè)計(jì)高靈敏度高分辨率的SPR傳感器成為小分子檢測領(lǐng)域的迫切需求。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明旨在提供一種高靈敏度、高分辨率的棱鏡式SPR生物傳感器。該傳感器基于SPR傳感原理,通過對光源入射角進(jìn)行調(diào)諧,可以改變SPR檢測信號的波長范圍。當(dāng)SPR檢測信號處于紅外波段時(shí),可以大幅度提高SPR檢測信號的靈敏度。相比于常見的可見光波段SPR傳感器,該發(fā)明可以提高一個(gè)數(shù)量級的靈敏度,從而實(shí)現(xiàn)了高靈敏度、快速響應(yīng)的蛋白質(zhì)檢測,在生物小分子傳感領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用前景。
本發(fā)明的技術(shù)方案:
高靈敏度紅外波段SPR生物傳感器,其傳感區(qū)包括棱鏡1、金屬薄膜2和待測樣品3,棱鏡1上濺射一層45-55nm金屬薄膜2,流通池安裝在濺射有金屬薄膜2的棱鏡1側(cè);寬帶光源10提供入射光,通過多模光纖14導(dǎo)出,再經(jīng)過準(zhǔn)直透鏡11以一定的光源入射角6射入棱鏡1,在傳感區(qū)表面發(fā)生SPR效應(yīng),出射光5再經(jīng)準(zhǔn)直透鏡11由多模光纖14傳入光譜儀12中,數(shù)據(jù)經(jīng)USB數(shù)據(jù)線15導(dǎo)入電腦13;將流通池9固定于金屬薄膜2表面,待測樣品3通過樣品進(jìn)液口7導(dǎo)入,從樣品出液口8導(dǎo)出,實(shí)現(xiàn)待測樣品3檢測;通過改變光源入射角6,調(diào)節(jié)SPR檢測信號的波長范圍,增大光源入射角,SPR波長向長波方向漂移,提高SPR檢測信號靈敏度。
所述的光源入射角6小于90度。
本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明通過改變光源入射角度,可以對SPR檢測信號實(shí)現(xiàn)波長調(diào)諧,從而可調(diào)諧SPR信號的靈敏度,大幅度提升SPR傳感器靈敏度,相比于普通可見光波段的SPR傳感器,該發(fā)明靈敏度可提升一個(gè)數(shù)量級。此外,本發(fā)明采用的棱鏡式SPR傳感元件具有良好的穩(wěn)定性和精確度,可實(shí)現(xiàn)高靈敏度、高分辨率、高精度的實(shí)時(shí)快速檢測。該發(fā)明無需拋光研磨,激光加工,化學(xué)腐蝕,生化膜系合成等手段,制作工藝簡單,操作方便快捷,可以實(shí)現(xiàn)微濃度、小分子樣品的SPR高靈敏度檢測,在生物化學(xué)檢測領(lǐng)域具有很好的前景。
附圖說明
圖1為棱鏡式傳感元件示意圖。
圖2為SPR檢測系統(tǒng)圖。
圖3為折射率檢測示意圖。
圖4為不同波段SPR靈敏度對比圖。
圖中:1棱鏡;2金屬薄膜;3待測樣品;4入射光;5出射光;
6光源入射角;7樣品進(jìn)液口;8樣品出液口;9流通池;10寬帶光源;
11準(zhǔn)直透鏡;12光譜儀;13電腦;14多模光纖;15USB數(shù)據(jù)線。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合技術(shù)方案和附圖詳細(xì)敘述本發(fā)明的具體實(shí)施方式。
實(shí)施例
1.制備工藝
1)利用磁控濺射技術(shù)在棱鏡1一側(cè)表面沉積為50nm的金屬薄膜,并固定于支架上;
2)將流通池9安裝在棱鏡1表面,用于待測樣品3傳輸;
3)采用SMA905作為連接器,多模光纖14將寬帶光源10的光導(dǎo)入準(zhǔn)直透鏡11中,并將光束投射至棱鏡1表面,光源入射角小于90度;
4)從棱鏡1出射出的光再次經(jīng)過準(zhǔn)直透鏡11,經(jīng)多模光纖14導(dǎo)入光譜儀12;
5)利用USB數(shù)據(jù)線15將光譜儀12中的數(shù)據(jù)傳入電腦13,用于數(shù)據(jù)處理和分析。
2.操作
1)測試裝置如圖2所示。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,當(dāng)沒有通入待測樣品3時(shí),保持傳感器干燥,分別點(diǎn)亮/熄滅光源,通過光譜儀12采集背景光譜/暗光譜;
2)利用蠕動泵將待測樣品3通入流通池9中,光在傳感表面發(fā)生SPR效應(yīng),對待測樣品3進(jìn)行檢測;
3)對數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄,每5秒記錄一組,并存儲;
4)如圖3所示,通入不同折射率的待測樣品3時(shí),該系統(tǒng)具有良好的折射率響應(yīng),當(dāng)SPR信號對應(yīng)1550nm波段時(shí),折射率靈敏度為4985nm/RIU(單位折射率);
5)減小光源入射角,相應(yīng)調(diào)整光路,可以對SPR信號的波長向紅外波段調(diào)諧,如圖4所示,隨著SPR信號的波長增大,傳感靈敏度大幅度提高,波長范圍在1550nm波段時(shí),SPR的信號靈敏度相對于可見光波段可以提高一個(gè)數(shù)量級。