技術(shù)特征：

1.一種飼料中四環(huán)素類(lèi)藥物及其異構(gòu)體的檢測(cè)方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：

步驟一：稱(chēng)取待測(cè)樣品加入提取液Na₂EDTA-Mcllvaine緩沖液和乙酸鉛水溶液渦動(dòng)混勻，震蕩，離心，取出上清液，備用；

步驟二：用甲醇、超純水活化PRiME HLB固相萃取小柱，上清液過(guò)柱，用甲醇水溶液淋洗，真空泵抽干；甲醇洗脫，收集洗脫液，氮?dú)獯蹈珊?，再用甲醇水溶液溶解殘?jiān)└咝б合嗌V-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定；

步驟三：高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀的測(cè)定，液相色譜選用C₁₈柱，采用0.1％甲酸乙腈和0.1％甲酸水體系，梯度洗脫，質(zhì)譜條件采用正離子模式下進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測(cè)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的飼料中四環(huán)素類(lèi)藥物及其異構(gòu)體的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟一中Na₂EDTA-Mcllvaine緩沖液PH值為5.0。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的飼料中四環(huán)素類(lèi)藥物及其異構(gòu)體的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟二中選用固相萃取小柱PRiME HLB 60mg，3mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的飼料中四環(huán)素類(lèi)藥物及其異構(gòu)體的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟二中淋洗液選用的甲醇和水的混合體積比為5∶95。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的飼料中四環(huán)素類(lèi)藥物及其異構(gòu)體的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟二中溶解殘?jiān)募状妓芤褐屑状己退幕旌象w積比為5∶5。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的飼料中四環(huán)素類(lèi)藥物及其異構(gòu)體的檢測(cè)方法，其特征在于：步驟三中色譜柱為Waters BEH C₁₈色譜柱；流動(dòng)相為A：0.1％甲酸乙腈和B：0.1％甲酸水；梯度洗脫程序如下：

0～0.5min，A5％，B95％；

0.5～2.5min，A5％～20％，B95％～80％；

2.5～4.3min，A20％～95％，B80％～5％；

4.3～5.3min，A95％～5％，B5％～95％；

流速為0.3mL/min；進(jìn)樣量10μL；質(zhì)譜條件為電噴霧正離子電離ESI；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描；電噴霧電壓：5500V；霧化氣壓力：50psi；氣簾氣壓力：30psi；輔助氣流速：60psi；離子源溫度：500℃；輔助氣流速：60psi；離子源溫度：500℃；碰撞氣：Medium。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的飼料中四環(huán)素類(lèi)藥物及其異構(gòu)體的檢測(cè)方法，其特征在于：四環(huán)素類(lèi)藥物分別為四環(huán)素、土霉素、金霉素，四環(huán)素類(lèi)藥物的異構(gòu)體分別為差相四環(huán)素、差相土霉素、差相金霉素。