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      一種β?內(nèi)酰胺類抗生素敏感性的快速檢測方法與流程

      文檔序號:11131562閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種β-內(nèi)酰胺類抗生素敏感性的快速檢測方法,其特征在于:將待測樣品與β-內(nèi)酰胺類抗生素在等溫滴定微量熱儀反應(yīng)池中混合,記錄實時熱量變化,通過是否產(chǎn)生熱量變化判斷樣品對藥物的敏感信息,若放出熱量,則待測樣品含有β-內(nèi)酰胺酶活。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β-內(nèi)酰胺類抗生素敏感性的快速檢測方法,其特征在于:所述待測樣品為純化的蛋白質(zhì)、細菌裂解液或臨床細菌。

      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的β-內(nèi)酰胺類抗生素敏感性的快速檢測方法,其特征在于:所述臨床細菌為大腸桿菌、鮑曼不動桿菌、綠膿桿菌、肺炎克雷伯菌、屎腸球菌或金黃色葡萄球菌。

      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β-內(nèi)酰胺類抗生素敏感性的快速檢測方法,其特征在于:所述β-內(nèi)酰胺類抗生素為青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類、單環(huán)β-內(nèi)酰胺類。

      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β-內(nèi)酰胺類抗生素敏感性的快速檢測方法,其特征在于包括以下步驟:

      (1)給等溫滴定微量熱儀樣品池加待測樣品,待測樣品濃度為純化蛋白質(zhì)0.5-50 nM 或細菌懸液 OD600 = 1~20;

      (2)滴定針加樣β-內(nèi)酰胺類抗生素藥物,抗生素濃度 1-5 mM,緩沖液含50 mM Tris,pH 7.0;

      (3)將滴定針中β-內(nèi)酰胺類抗生素藥物加入樣品池,實時記錄樣品池中熱量變化;反應(yīng)條件:滴定體積 20-40μL,spacing time = 400s,滴定針轉(zhuǎn)速750 rpm, 反應(yīng)溫度25 oC。

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