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      一種癌胚抗原濃度的檢測(cè)方法與流程

      文檔序號(hào):12454055閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

      技術(shù)特征:

      1.一種癌胚抗原CEA濃度的檢測(cè)方法,其特征在于:包括以下步驟:

      1)在金納米棒載體上修飾CEA適配體,得到CEA適配體/金納米棒復(fù)合物;

      2)將CEA抗體修飾到氧化石墨烯表面后,將所述氧化石墨烯固定到電極表面,再采用牛血清白蛋白對(duì)所述電極表面進(jìn)行封閉,得到CEA抗體修飾電極;

      3)取一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)CEA溶液分別滴加至所述CEA抗體修飾電極的表面進(jìn)行CEA與CEA抗體之間的特異性結(jié)合反應(yīng),得到一系列CEA抗體—CEA修飾電極;

      4)將所述CEA適配體/金納米棒復(fù)合物滴加至各CEA抗體—CEA修飾電極表面進(jìn)行CEA與CEA適配體之間的特異性結(jié)合反應(yīng),得到一系列含CEA抗體—CEA—CEA適配體/金納米棒復(fù)合物三層夾心式結(jié)構(gòu)的電極;

      5)向各含CEA抗體—CEA—CEA適配體/金納米棒復(fù)合物三層夾心式結(jié)構(gòu)的電極表面分別滴加鉬酸鈉溶液進(jìn)行反應(yīng)后,采用方波伏安法進(jìn)行測(cè)定,得到一系列方波伏安曲線;

      6)將各方波伏安曲線中的峰電流值與對(duì)應(yīng)的CEA濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線;

      7)取待測(cè)CEA溶液替換標(biāo)準(zhǔn)CEA溶液按3)、4)和5)的步驟進(jìn)行操作,得到相應(yīng)峰電流值,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,即得待測(cè)CEA溶液的濃度。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的CEA濃度的檢測(cè)方法,其特征在于:在金納米棒載體溶液中加入含末端巰基修飾的CEA適配體的溶液,在室溫下反應(yīng),即得CEA適配體/金納米棒復(fù)合物。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的CEA濃度的檢測(cè)方法,其特征在于:所述金納米棒載體通過(guò)如下方法制備得到:先采用NaBH4還原HAuCl4,得到納米金種子溶液,所述納米金種子溶液加入到含十六烷基三甲基溴化銨、HAuCl4、AgNO3和抗壞血酸的溶液中反應(yīng),得到金納米棒載體。

      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的CEA濃度的檢測(cè)方法,其特征在于:氧化石墨烯溶液采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-N-羥基琥珀酰亞胺溶液活化后,與CEA抗體進(jìn)行反應(yīng),得到CEA抗體修飾氧化石墨烯,所述CEA抗體修飾氧化石墨烯滴加到電極表面,得到CEA抗體修飾電極。

      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的CEA濃度的檢測(cè)方法,其特征在于:將濃度分別為1pg/mL、5pg/mL、10pg/mL、100pg/mL、1ng/mL和10ng/mL的一系列標(biāo)準(zhǔn)CEA溶液分別滴加到CEA抗體修飾電極的表面,進(jìn)行特異性結(jié)合反應(yīng)。

      6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的CEA濃度的檢測(cè)方法,其特征在于:所述特異性結(jié)合反應(yīng)的條件為:溫度為36~37℃,時(shí)間為1~2h。

      7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的CEA濃度的檢測(cè)方法,其特征在于:4)中的特異性結(jié)合反應(yīng)的條件為:溫度為36~37℃,時(shí)間為1~2h。

      8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的CEA濃度的檢測(cè)方法,其特征在于:所述鉬酸鈉溶液的濃度為1~5mmol/L。

      9.根據(jù)權(quán)利要求1所述類CEA濃度的檢測(cè)方法,其特征在于:所述方波伏安法的測(cè)定條件為:以0.3~0.7mol/L的硫酸溶液為電解液,在0~0.5V電壓范圍內(nèi),頻率為10~20Hz。

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