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      一種基于Au@Ag異質結納米棒的玉米赤霉烯酮免疫傳感器的構建的制作方法

      文檔序號:11108670閱讀:來源:國知局

      技術特征:

      1.一種基于Au@Ag異質結納米棒的玉米赤霉烯酮免疫傳感器的構建,其特征在于,包括以下步驟:

      (1)用Al2O3拋光粉打磨直徑為4 mm的玻碳電極,超純水清洗干凈;將6 μL 1.0~1.6 mg/mL Au納米顆粒雜化氨基化CeO2-CuO納米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液滴加到電極表面,室溫下晾干成膜;

      (2)依次滴加6 μL 1~5 μg/mL的玉米赤霉烯酮抗體anti-ZEN,3 μL 質量分數(shù)為0.5% ~ 2%的BSA溶液到電極表面,超純水洗凈,室溫下晾干;

      (3) 滴加6 μL 10-4~100 ng/mL的一系列不同濃度的玉米赤霉烯酮到電極表面,孵化2 h,超純水沖洗,室溫下晾干;

      (4)滴加6 μL Au@Ag異質結納米棒負載硫堇Th的二抗標記物Au@Ag@Ab2@Th,超純水沖洗,室溫下晾干,制得一種夾心型免疫傳感器。

      2.如權利要求1所述的一種基于Au@Ag異質結納米棒的玉米赤霉烯酮免疫傳感器的構建的制備方法,所述的Au納米顆粒雜化氨基化CeO2-CuO納米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液,其特征在于,制備步驟如下:

      (1)CeO2納米棒的制備

      將10~200 mg CeCl3·7H2O在磁力攪拌下溶解于1~50 mL無水乙醇中并加入1.3 mL 0.75 mol/L的H2SO4,將得到的白色懸浮液轉移到聚四氟乙烯內襯的高壓反應釜中,于10~200 °C下加熱1~50 h,將產物離心分離后加入到飽和氫氧化鈉醇溶液中靜置1~10天,將產物洗滌干燥即得到CeO2納米棒;

      (2)CeO2-CuO納米棒的制備

      將1~10 mg Cu(CH3COO)2·H2O溶解到16 mL乙醇中,然后將1~100 mg CeO2納米棒加入上述溶液中并在1~200 °C條件下反應12 h,將產物離心分離并在80 °C下干燥1~10 h制得CeO2-CuO納米棒;

      (3)Au納米顆粒雜化氨基化CeO2-CuO納米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs的制備

      將制得的CeO2-CuO納米棒加入到50 mL無水乙醇中,并加入1 mL三氨丙基三乙氧基硅烷70 °C下加熱2 h,通過離心分離得到氨基化CeO2-CuO,將氨基化CeO2-CuO加入Au NPs洗滌干燥即得Au納米顆粒雜化氨基化CeO2-CuO納米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs。

      3.如權利要求1所述的一種基于Au@Ag異質結納米棒的玉米赤霉烯酮免疫傳感器的構建的制備方法,所述的Au@Ag異質結納米棒負載硫堇的二抗標記物Au@Ag@Ab2@Th,其特征在于,制備步驟如下:

      (1)Au@Ag異質結納米棒的制備

      將1~200 mg硝酸銀、0.6 mL 20 mg/mL氯金酸及0.5640 g PDDA同時加入到140 mL乙二醇溶液中,在195 °C條件下反應80 h,將產物離心分離并用超純水洗滌即得Au@Ag異質結納米棒;

      (2)Au@Ag異質結納米棒負載硫堇的二抗標記物Au@Ag@Ab2@Th的制備

      將0.5 mL 1.0 mg/mL Au@Ag 異質結納米棒樣品溶于1.0 mL超純水中,并加入0.1 mL的玉米赤霉烯酮抗體anti-ZEN和硫堇,4 °C下振蕩1~5 h,得到的產物14500 rpm離心分離,固體重新分散在蒸餾水中即為Au@Ag異質結納米棒負載硫堇的二抗標記物Au@Ag@Ab2@Th。

      4.如權利要求1所述的一種基于Au@Ag異質結納米棒的玉米赤霉烯酮免疫傳感器的構建的制備方法,其特征在于,用于玉米赤霉烯酮的檢測,制備步驟如下:

      (1)使用電化學工作站以三電極體系進行測試,飽和甘汞電極為參比電極,鉑絲電極為輔助電極,所制備的免疫傳感器為工作電極,在10 mL的含有濃度為4~6 mmol/L鐵氰化鉀和10-2~10 mmol/L硝酸鉀溶液中進行測試;

      (2)用方波伏安法對玉米赤霉烯酮標準溶液進行檢測,其電壓測試范圍為0V ~ 0.6V;

      (3)當背景電流趨于穩(wěn)定后,通過記錄玉米赤霉烯酮加入前后的傳感器的峰電流值的變化,繪制工作曲線。

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