本發(fā)明涉及甲基化處理氣相檢測(cè)分析方法機(jī)械領(lǐng)域，具體涉及一種甲基化處理氣相檢測(cè)分析方法。

背景技術(shù)：

目前，現(xiàn)有滅草松(3一異丙基一(1H)一苯并一2，1，3一噻二嗪-4-酮一2，2一二氧化物)和2,4-滴(2,4-二氯苯氧基乙酸)，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

兩者均為使用廣泛的除草劑，毒性程度為低毒或中等。在GB5749-2006《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定生活飲用水中滅草松的限值為0.3mg/L，2,4-滴的限值為0.03mg/L。兩者在水中殘留的檢測(cè)方法有國家標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)報(bào)道的有氣相色譜、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用、高效液相色譜、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜、離子色譜法等方法。

國家生活飲用水檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)GB/T5750.9-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法農(nóng)藥指標(biāo)》中對(duì)滅草松和2,4-滴的檢測(cè)采用氣相色譜法(配ECD檢測(cè)器)進(jìn)行檢測(cè)，樣品是需要衍生后方能分析的。

對(duì)于2,4-滴和滅草松直接檢測(cè)的方法有離子色譜法、高效液相色譜、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜這幾種方法，但是存在以下問題：離子色譜分析時(shí)間較長(zhǎng)，2,4-滴出峰時(shí)間12.917min、滅草松出峰時(shí)間42.947min，另外離子色譜檢出限較高，2,4-滴為10μg/L、滅草松為30μg/L(崔勇，張冠英，李青.離子色譜法同時(shí)分析水中酸性除草劑滅草松和2,4-滴[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20(2)：295-296)。高效液相色譜法2,4-滴和滅草松的檢測(cè)限可以做到3μg/L(陳鋒，蔡少杰，李慶云，劉麗儀.高效液相色譜測(cè)定水中酸性除草劑滅草松和2,4-滴)[J].分析實(shí)驗(yàn)室，2008，27(Z1)：286-288)。雖然離子色譜和高效液相色譜法的檢測(cè)限均低于國家生活飲用水的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)GB5749-2006《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》的限值要求，然而比國家生活飲用水的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)GB/T5750.9-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法農(nóng)藥指標(biāo)》中的方法檢出限卻要高很多(在該檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中滅草松的檢出限為0.2μg/L、2,4-滴的檢出限為0.05μg/L)，所以這兩種方法雖然不需要進(jìn)行衍生就能分析，但并不是非常的理想。

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜在直接進(jìn)樣，選擇多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式的條件下滅草松檢出限為0.4μg/L、2,4-滴檢出限為0.6μg/L(駱春迎，余輝菊.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定生活飲用水中的滅草松和2,4-滴[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2014,24(21)：3059-3061)，考慮到該方法檢出限是直接進(jìn)樣，水樣沒有經(jīng)過濃縮得到的，因此推測(cè)如果水樣經(jīng)固相或液液萃取濃縮200倍再上儀器分析的話，檢出限會(huì)低得多，應(yīng)該可以滿足國家生活飲用水檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)GB/T5750.9-2006的檢出限要求。盡管HPLC-MS/MS分析滅草松和2,4-滴非常方便，但目前國內(nèi)還是難以大范圍推廣，原因之一是HPLC-MS/MS設(shè)備價(jià)格昂貴；二是環(huán)境和水質(zhì)國家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)要使用HPLC-MS/MS來檢測(cè)的項(xiàng)目非常少，因此大都數(shù)環(huán)境和水質(zhì)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)和單位并沒有配置該設(shè)備；三是HPLC-MS/MS人員儀器操作培訓(xùn)花費(fèi)的時(shí)間要比其它設(shè)備要多。

綜合目前國內(nèi)情況，對(duì)于生活飲用水中滅草松和2,4-滴檢測(cè)使用最多的還是氣相色譜(配ECD檢測(cè)器)和氣相色譜-氣質(zhì)聯(lián)用兩種方法，對(duì)這兩種方法來說，前期的衍生化是必不可少的。衍生方法其中一種的是碘甲烷法，通過甲基化反應(yīng)，使得滅草松和2,4-滴分別衍生成為甲基滅草松和2,4-滴甲酯：

這也是國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5750.9-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法農(nóng)藥指標(biāo)》規(guī)定的分析滅草松和2,4-滴的前處理方法。其它衍生方法還有重氮甲烷法(趙守成，董振霖，衛(wèi)鋒等.甲基化處理氣相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)大米中12種酸性除草劑[J].質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2005，26(4)：206-210)，原理也是將兩者甲基化后進(jìn)行分析，其優(yōu)點(diǎn)是衍生速度較快，副產(chǎn)物少，色譜圖也很干凈。但是因?yàn)橹氐淄樵噭┯行诜浅６?，不能長(zhǎng)久保存，難以買到商品化的試劑，此外由于重氮甲烷試劑屬于高毒物質(zhì)，制備過程也比較危險(xiǎn)，所以使用該方法來做滅草松和2,4-滴的檢測(cè)機(jī)構(gòu)和單位是較少的。GB/T5750.9-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法農(nóng)藥指標(biāo)》規(guī)定的碘甲烷法是目前國內(nèi)生活飲用水中滅草松和2,4-滴檢測(cè)使用最普遍的方法，它的前處理大致過程是先通過乙酸乙酯萃取水中滅草松和2,4-滴，氮吹濃縮近干后加入碘甲烷-二氯甲烷溶和四丁基硫酸氫銨-氫氧化鈉溶液，一并轉(zhuǎn)移到燒杯里面水浴超聲衍生，水浴溫度需要控制在10℃—20℃，超聲反應(yīng)時(shí)間為50分鐘，完成后再轉(zhuǎn)移到分液漏斗將二氯甲烷層分離出來，再次氮吹近干，最后加正己烷定容后上氣相色譜(ECD檢測(cè)器)上分析?？傮w來說，碘甲烷法試劑易得，反應(yīng)條件也不算苛刻，但是操作步驟是比較繁瑣的(如氮吹就需要進(jìn)行兩次，液體轉(zhuǎn)移次數(shù)也較多)，此外超聲溫度控制也是有難度的(隨著超聲時(shí)間延長(zhǎng)，超聲儀里面的水在超聲作用下溫度是在逐步升高的，這在夏季尤其難控制)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明針對(duì)上述問題，提出了一種甲基化處理氣相檢測(cè)分析方法，解決了現(xiàn)有甲基化處理氣相檢測(cè)分析方法中使用重氮甲烷法存在重氮甲烷試劑有效期非常短，不能長(zhǎng)久保存，有高毒性；使用碘甲烷法存在操作繁瑣，超聲條件難以控制的缺陷。

本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下：

一種甲基化處理氣相檢測(cè)分析方法，用于分析滅草松或2，4-滴；包括以下步驟：

1)甲基化反應(yīng)：將萃取得到的樣品溶液移入容器中，使用氣體吹干，吹干后加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛，在80℃～180℃的條件下進(jìn)行甲基化反應(yīng)0.5h-3h；

2)萃取待檢溶液：將反應(yīng)物中加入氯化物水溶液或水，混合后靜置分離，取上層有機(jī)相溶液，等待檢測(cè)；

3)氣相檢測(cè)：將上述的待檢溶液在氣相色譜上進(jìn)行檢測(cè)。

本發(fā)明采用N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛，將滅草松和2,4-滴甲基化，然后用氣相色譜(ECD檢測(cè)器又稱電子俘獲檢測(cè)器)進(jìn)行檢測(cè)，該方法衍生速度快，靈敏度高，操作簡(jiǎn)單。

可選的，所述步驟1)和步驟2)中的混合采用渦旋振蕩器，振蕩混合時(shí)間為1min-5min。

可選的，所述步驟1)中，在甲基化反應(yīng)前還加入保護(hù)溶劑。

可選的，所述保護(hù)溶劑為異辛烷。采用異辛烷為保護(hù)溶劑，不但有利于衍生反應(yīng)進(jìn)行，而且異辛烷會(huì)對(duì)衍生產(chǎn)物有保護(hù)作用，使得衍生物免遭高溫破壞。

可選的，所述步驟1中，滅草松的甲基化反應(yīng)更優(yōu)的反應(yīng)溫度為160℃-170℃。在該反應(yīng)溫度，甲基化反應(yīng)具有更優(yōu)的收率。

可選的，所述步驟1)中，滅草松或2，4-滴的甲基化反應(yīng)更優(yōu)的反應(yīng)時(shí)間為0.8h-1h。在該反應(yīng)時(shí)間，甲基化反應(yīng)具有更優(yōu)的收率。

可選的，所述步驟1)中加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛為200μL-500μL。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明采用N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛，將滅草松和2,4-滴甲基化，然后用氣相色譜(ECD檢測(cè)器)進(jìn)行檢測(cè)，該方法衍生速度快，靈敏度高，操作簡(jiǎn)單。

附圖說明：

圖1是本發(fā)明甲基化處理氣相檢測(cè)分析方法的操作流程示意圖；

圖2是生活飲用水中滅草松標(biāo)準(zhǔn)曲線以及相關(guān)系數(shù)；

圖3是生活飲用水中2,4滴標(biāo)準(zhǔn)曲線以及相關(guān)系數(shù)；

圖4是滅草松和2,4-滴穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)收率和衍生物的穩(wěn)定性折線圖；

圖5是滅草松和2,4-滴水樣加標(biāo)回收率色譜圖。

具體實(shí)施方式：

下面結(jié)合各附圖，對(duì)本發(fā)明做詳細(xì)描述。

N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛(CAS號(hào)4637-24-5)，簡(jiǎn)稱DMFDMA，無色透明液體，沸點(diǎn)104℃-108℃，分子結(jié)構(gòu)下：

在本發(fā)明中常用的氣相檢測(cè)儀器可以選用：安捷倫6890N氣相色譜儀，配μECD檢測(cè)器(稱微電子捕獲器)；在實(shí)際操作中還用到了可控溫烘箱、氮吹儀、漩渦振蕩器。

采用的氣相分析條件包括：DB-35毛細(xì)管柱，30m×0.25mm×0.25μm，進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣。

用到的標(biāo)準(zhǔn)品為：滅草松標(biāo)準(zhǔn)品，德國“Dr.Ehrenstorfer”公司生產(chǎn)，純度99.0％，生產(chǎn)批號(hào)30814；2,4-滴標(biāo)準(zhǔn)品，德國“Dr.Ehrenstorfer”公司生產(chǎn)，純度99.0％，生產(chǎn)批號(hào)40616；甲基滅草松標(biāo)準(zhǔn)溶液，美國“O2Si smart solutions”公司生產(chǎn)，溶劑正己烷，濃度1012μg/mL，生產(chǎn)批號(hào)269733；2,4-滴甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，溶劑甲醇，美國“O2Si smart solutions”公司生產(chǎn)，濃度99.9μg/mL，生產(chǎn)批號(hào)253560。

N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛采用“上海百靈威化學(xué)技術(shù)有限公司”提供，純度≥95.0％。

色譜純乙酸乙酯可采用“上海安譜實(shí)驗(yàn)科技有限公司”生產(chǎn)，色譜純異辛烷可采用“天津科密歐化學(xué)試劑有限公司”生產(chǎn)，色譜純丙酮可采用“默克”公司生產(chǎn)，硝酸為優(yōu)級(jí)純，國藥集團(tuán)生產(chǎn)。

水樣的處理：按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5750.9-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法農(nóng)藥指標(biāo)》，先用250mL水樣加入1.1mL硝酸，使得水樣pH＜1，樣品置于4℃冰箱保存。

本發(fā)明分析方法衍生物檢測(cè)線性分析：

(1)工作液配制：用萬分之一天平稱取滅草松標(biāo)準(zhǔn)品10.0mg，2，4-滴標(biāo)準(zhǔn)品10.0mg一并到25mL棕色容量瓶?jī)?nèi)，先加10mL丙酮超聲溶解，再加丙酮定容至刻度，配制成2,4-滴、滅草松的濃度各為400μg/mL母液；用1mL的胖度移液管從母液中移去1.0mL到10mL容量瓶?jī)?nèi)，加丙酮定容至刻度，配成40μg/mL的工作液。

(2)衍生過程：用移液槍移取2,4-滴、滅草松40μg/mL工作液5μL、10μL、20μL、40μL、80μL、160μL各到衍生試管中，氮?dú)獯蹈?，各加?00μL的N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛和1.0mL異辛烷，加蓋密封，漩渦1min，放入烘箱內(nèi)180℃衍生30min。完畢后取出恢復(fù)室溫，加入飽和氯化鈉水溶液1.5mL，加蓋再次漩渦1min，漩渦后靜置5min，待異辛烷和水相徹底分層后，用移液槍移取上層異辛烷0.8mL裝入2mL安捷倫進(jìn)樣小瓶?jī)?nèi)，共制得濃度為0.2μg/mL、0.4μg/mL、0.8μg/mL、1.6μg/mL、3.2μg/mL、6.4μg/mL六個(gè)濃度的標(biāo)液，以萃取200mL水樣來計(jì)，工作曲線質(zhì)量濃度相當(dāng)于水中濃度的1.0μg/L、2.0μg/L、4.0μg/L、8.0μg/L、16.0μg/L、32μg/L。滅草松的回歸方程Y＝2996.906X-1205.646，相關(guān)系數(shù)r為0.999；2，4-滴回歸方程Y＝2830.253X-1512.424，相關(guān)系數(shù)r為0.999(見附圖2、3)。進(jìn)一步的，樣品經(jīng)過GC-MS定性衍生產(chǎn)物為甲基滅草松和2，4-滴甲酯。

本發(fā)明分析方法衍生物收率和衍生物的穩(wěn)定性：

實(shí)驗(yàn)過程為：

一組待處理的水樣滅草松和2,4-滴均為2μg/L；另一組待處理的水樣滅草松和2,4-滴均為16μg/L。

1)水樣預(yù)處理：先量取水樣200mL置于500mL的分液漏斗中，加乙酸乙酯50mL萃取水樣，共三次，一共150mL合并于200mL燒杯中，水浴45℃進(jìn)行氮吹，當(dāng)乙酸乙酯還剩4-5mL時(shí)候轉(zhuǎn)入衍生管，燒杯再加乙酸乙酯2mL潤(rùn)洗，一起合并到衍生管內(nèi)，繼續(xù)水浴氮吹干。

2)甲基化反應(yīng)：取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，氮?dú)獯蹈?，吹干后加?00μL的N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛和1.0mL異辛烷，加蓋密封，漩渦5min，放入烘箱內(nèi)160℃甲基化反應(yīng)0.5h。

3)萃取待檢溶液：畢后取出恢復(fù)室溫，加入飽和氯化鈉水溶液1.5mL，加蓋再次漩渦1min，漩渦后靜置5min，待異辛烷和水相徹底分層后，用移液槍移取上層異辛烷0.8mL裝入2mL安捷倫進(jìn)樣小瓶?jī)?nèi)；

4)對(duì)照品溶液的配制：配制等濃度的甲基滅草松和2,4-滴甲酯溶液作為衍生收率和穩(wěn)定性的對(duì)照品溶液。

5)氣相檢測(cè)：樣品衍生完成后立即進(jìn)樣，得到的該組數(shù)據(jù)為0小時(shí)數(shù)據(jù)，然后將樣品放置于3-5℃的冰箱內(nèi)，24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)后再次進(jìn)樣分析(進(jìn)樣前樣品恢復(fù)至室溫)，記錄的數(shù)據(jù)并編制表1、表2和附圖4。樣品處理和數(shù)據(jù)處理同本發(fā)明分析方法衍生物檢測(cè)線性分析，說明：

表1 2，4-滴衍生物收率和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

表2滅草松衍生物收率和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

從實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)和折線圖(見附圖4)來看，滅草松和2,4-滴的甲基化產(chǎn)物盡管在72小時(shí)內(nèi)含量略有降低，但不明顯(最大下降幅度不超過6％)。因此，可以認(rèn)為樣品衍生后只要保存在3-5℃環(huán)境中，并處以2mL密封小瓶包裝下，至少可以存放72小時(shí)。取6個(gè)平行樣品衍生峰的峰面積平均值，并計(jì)算RSD值，規(guī)定當(dāng)RSD值大于15％時(shí)，數(shù)據(jù)不采用，該組實(shí)驗(yàn)重新進(jìn)行，同時(shí)做等濃度甲基滅草松和2,4-滴甲酯對(duì)照品溶液，通過單點(diǎn)比較法，計(jì)算衍生物的收率。

實(shí)施例一：本發(fā)明公開了一種甲基化處理氣相檢測(cè)分析方法，

1)水樣預(yù)處理：先量取水樣200mL置于500mL的分液漏斗中，加乙酸乙酯50mL萃取水樣，共三次，一共150mL合并于200mL燒杯中，水浴45℃進(jìn)行氮吹，當(dāng)乙酸乙酯還剩4-5mL時(shí)候轉(zhuǎn)入衍生管，燒杯再加乙酸乙酯2mL潤(rùn)洗，一起合并到衍生管內(nèi)，繼續(xù)水浴氮吹干。

2)甲基化反應(yīng)：取有機(jī)相內(nèi)(也就是萃取得到的)的樣品溶液移入衍生試管中，氮?dú)獯蹈?，吹干后加?00μL的N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛和1.0mL異辛烷，加蓋密封，漩渦1min，放入烘箱內(nèi)80℃甲基化反應(yīng)0.5h。

3)萃取待檢溶液：畢后取出恢復(fù)室溫，加入飽和氯化鈉水溶液1.5mL，加蓋再次漩渦1min，漩渦后靜置5min，待異辛烷和水相徹底分層后，用移液槍移取上層異辛烷0.8mL裝入2mL安捷倫進(jìn)樣小瓶?jī)?nèi)。

4)對(duì)照品溶液的配制及衍生：根據(jù)上述的對(duì)照品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作液配制方法進(jìn)行配置，并按照其衍生過程進(jìn)行操作。

5)氣相檢測(cè)：將上述的待檢溶液和甲基化的對(duì)照品溶液在氣相色譜上進(jìn)行檢測(cè)。分析后得滅草松和2,4-滴回收率為：2μg/L樣品的2,4-滴平均回收率為81.6％，滅草松平均為82.7％；16μg/L樣品2,4-滴平均回收率為79.9％，滅草松平均為80.3％；精密度：2μg/L樣品2,4-滴為7.7％，滅草松7.2％；16μg/L樣品2,4-滴為9.5％，滅草松8.9％。

本發(fā)明的水樣預(yù)處理按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5750.9-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法農(nóng)藥指標(biāo)》進(jìn)行操作；本發(fā)明采取氯化鈉飽和水溶液，減少了目標(biāo)產(chǎn)物溶于水而產(chǎn)生的損失。

實(shí)施例二：

1)水樣預(yù)處理：先量取水樣200mL置于500mL的分液漏斗中，加乙酸乙酯50mL萃取水樣，共三次，一共150mL合并于200mL燒杯中，水浴45℃進(jìn)行氮吹，當(dāng)乙酸乙酯還剩4-5mL時(shí)候轉(zhuǎn)入衍生管，燒杯再加乙酸乙酯2mL潤(rùn)洗，一起合并到衍生管內(nèi)，繼續(xù)水浴氮吹干。

2)甲基化反應(yīng)：取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，氮?dú)獯蹈?，吹干后加?00μL的N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛和1.0mL異辛烷，加蓋密封，漩渦5min，放入烘箱內(nèi)180℃甲基化反應(yīng)3h。

3)萃取待檢溶液：畢后取出恢復(fù)室溫，加入飽和氯化鈉水溶液1.5mL，加蓋再次漩渦1min，漩渦后靜置5min，待異辛烷和水相徹底分層后，用移液槍移取上層異辛烷0.8mL裝入2mL安捷倫進(jìn)樣小瓶?jī)?nèi)。

4)對(duì)照品溶液的配制及衍生：根據(jù)上述的對(duì)照品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作液配制方法進(jìn)行配置，并按照其衍生過程進(jìn)行操作。

5)氣相檢測(cè)：將上述的待檢溶液和對(duì)照品溶液在氣相色譜上進(jìn)行檢測(cè)。分析后得滅草松和2,4-滴回收率為：2μg/L樣品的2,4-滴平均回收率為86.4％，滅草松平均為93.7％；16μg/L樣品2,4-滴平均回收率為85.2％，滅草松平均為93.3％；精密度：2μg/L樣品2,4-滴為6.8％，滅草松6.3％；16μg/L樣品2,4-滴為8.8％，滅草松8.2％。

實(shí)施例三：

1)水樣預(yù)處理：先量取水樣200mL置于500mL的分液漏斗中，加乙酸乙酯50mL萃取水樣，共三次，一共150mL合并于200mL燒杯中，水浴45℃進(jìn)行氮吹，當(dāng)乙酸乙酯還剩4-5mL時(shí)候轉(zhuǎn)入衍生管，燒杯再加乙酸乙酯2mL潤(rùn)洗，一起合并到衍生管內(nèi)，繼續(xù)水浴氮吹干。

2)甲基化反應(yīng)：取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，氮?dú)獯蹈?，吹干后加?00μL的N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛和1.0mL異辛烷，加蓋密封，漩渦5min，放入烘箱內(nèi)160℃甲基化反應(yīng)1h。

3)萃取待檢溶液：畢后取出恢復(fù)室溫，加入飽和氯化鈉水溶液1.5mL，加蓋再次漩渦1min，漩渦后靜置5min，待異辛烷和水相徹底分層后，用移液槍移取上層異辛烷0.8mL裝入2mL安捷倫進(jìn)樣小瓶?jī)?nèi)；

4)對(duì)照品溶液的配制及衍生：根據(jù)上述的對(duì)照品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作液配制方法進(jìn)行配置，并按照其衍生過程進(jìn)行操作。

5)氣相檢測(cè)：將上述的待檢溶液和對(duì)照品溶液在氣相色譜上進(jìn)行檢測(cè)。分析后得滅草松和2,4-滴回收率為：2μg/L樣品的2,4-滴平均回收率為92.6％，滅草松平均為97.7％；16μg/L樣品2,4-滴平均回收率為92.9％，滅草松平均為98.9％；精密度：2μg/L樣品2,4-滴為2.0％，滅草松1.8％；16μg/L樣品2,4-滴為4.5％，滅草松4.2％。

實(shí)施例四：

1)水樣預(yù)處理：先量取水樣200mL置于500mL的分液漏斗中，加乙酸乙酯50mL萃取水樣，共三次，一共150mL合并于200mL燒杯中，水浴45℃進(jìn)行氮吹，當(dāng)乙酸乙酯還剩4-5mL時(shí)候轉(zhuǎn)入衍生管，燒杯再加乙酸乙酯2mL潤(rùn)洗，一起合并到衍生管內(nèi)，繼續(xù)水浴氮吹干。

2)甲基化反應(yīng)：取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，氮?dú)獯蹈?，吹干后加?00μL的N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛和1.0mL異辛烷，加蓋密封，漩渦5min，放入烘箱內(nèi)170℃甲基化反應(yīng)0.8h。

3)萃取待檢溶液：畢后取出恢復(fù)室溫，加入飽和氯化鈉水溶液1.5mL，加蓋再次漩渦1min，漩渦后靜置10min，待異辛烷和水相徹底分層后，用移液槍移取上層異辛烷0.8mL裝入2mL安捷倫進(jìn)樣小瓶?jī)?nèi)；

4)對(duì)照品溶液的配制及衍生：根據(jù)上述的對(duì)照品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作液配制方法進(jìn)行配置，并按照其衍生過程進(jìn)行操作。

5)氣相檢測(cè)：將上述的待檢溶液和對(duì)照品溶液在氣相色譜上進(jìn)行檢測(cè)。分析后得滅草松和2,4-滴回收率為：2μg/L樣品的2,4-滴平均回收率為93.7％，滅草松平均為97.9％；16μg/L樣品2,4-滴平均回收率為93.2％，滅草松平均為98.6％；精密度：2μg/L樣品2,4-滴為1.7％，滅草松1.5％；16μg/L樣品2,4-滴為4.1％，滅草松3.8％，

本發(fā)明的檢出限：以3倍噪聲比計(jì)，本方法檢出限2,4-滴為0.04μg/L，滅草松為0.03μg/L?？梢员容^看出，本發(fā)明檢出限優(yōu)于其他的檢測(cè)方法(離子色譜檢出限：2,4-滴為10μg/L、滅草松為30μg/L。高效液相色譜法2,4-滴和滅草松的檢測(cè)限為3μg/L)；也低于GB/T5750.9-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法農(nóng)藥指標(biāo)》標(biāo)準(zhǔn)中滅草松的檢出限0.2μg/L、2,4-滴的檢出限0.05μg/L。本發(fā)明采用N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛，將滅草松和2,4-滴甲基化，然后用氣相色譜(ECD檢測(cè)器)進(jìn)行檢測(cè)，該方法衍生速度快，靈敏度高，操作簡(jiǎn)單。

對(duì)比例：1)水樣預(yù)處理：先量取水樣200mL置于500mL的分液漏斗中，加乙酸乙酯50mL萃取水樣，共三次，一共150mL合并于200mL燒杯中，水浴45℃進(jìn)行氮吹，當(dāng)乙酸乙酯還剩4-5mL時(shí)候轉(zhuǎn)入衍生管，燒杯再加乙酸乙酯2mL潤(rùn)洗，一起合并到衍生管內(nèi)，繼續(xù)水浴氮吹干。

2)甲基化反應(yīng)：取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，取有機(jī)相內(nèi)的樣品溶液移入容器中，氮?dú)獯蹈?，吹干后加?00μL的N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛和1.0mL異辛烷，加蓋密封，漩渦1min，放入烘箱內(nèi)78℃甲基化反應(yīng)0.2h。

3)萃取待檢溶液：畢后取出恢復(fù)室溫，加入飽和氯化鈉水溶液1.5mL，加蓋再次漩渦1min，漩渦后靜置5min，待異辛烷和水相徹底分層后，用移液槍移取上層異辛烷0.8mL裝入2mL安捷倫進(jìn)樣小瓶?jī)?nèi)；

4)對(duì)照品溶液的配制及衍生：根據(jù)上述的對(duì)照品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作液配制方法進(jìn)行配置，并按照其衍生過程進(jìn)行操作。

5)氣相檢測(cè)：將上述的待檢溶液和對(duì)照品溶液在氣相色譜上進(jìn)行檢測(cè)。分析后得滅草松和2,4-滴回收率為：2μg/L樣品的2,4-滴平均回收率為70.6％，滅草松平均為68.7％；16μg/L樣品2,4-滴平均回收率為72.3％，滅草松平均為68.2％；精密度：2μg/L樣品2,4-滴為14.4％，滅草松15.2％；16μg/L樣品2,4-滴為18.5％，滅草松19.9％。

回收率實(shí)驗(yàn)和精密度實(shí)驗(yàn)：用純凈水制備含滅草松和2,4-滴為2μg/L和16μg/L的兩種加標(biāo)水樣，兩種濃度都平行制備6個(gè)樣品，分別進(jìn)行萃取和衍生；分析后得到滅草松和2,4-滴水樣加標(biāo)回收率色譜圖(見圖5)。

本發(fā)明選擇異辛烷作為衍生反應(yīng)溶劑，具有以下優(yōu)點(diǎn)：1)是異辛烷試劑性質(zhì)穩(wěn)定，即使在高溫高壓下自身也不會(huì)參與反應(yīng)；2)是純度高的異辛烷試劑易得，一般色譜純級(jí)異辛烷純度至少可以達(dá)到≥99.5％，較高的純度可以盡可能減少由溶劑帶入的雜質(zhì)參與衍生反應(yīng)，使得衍生反應(yīng)比較專一，色譜圖干擾峰少；3)是異辛烷沸點(diǎn)比較適中，沸點(diǎn)99.3℃，比正己烷(沸點(diǎn)68℃)要高，雖然跟衍生溫度相比，異辛烷沸點(diǎn)還是不夠高，但如果選擇沸點(diǎn)很高的溶劑也會(huì)帶來后續(xù)分析問題，比如高沸點(diǎn)溶劑和目標(biāo)物的色譜分離難度增大等；4)是異辛烷可以和N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛互溶，但只要加入水兩者就可以得到分離，前期衍生和后續(xù)處理就很方便。采用異辛烷為保護(hù)溶劑，不但有利于衍生反應(yīng)進(jìn)行，而且異辛烷會(huì)對(duì)衍生產(chǎn)物有保護(hù)作用，使得衍生物免遭高溫破壞。

綜上所述，通過實(shí)施例一、二、三、四和對(duì)比例的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，可以看出，甲基化反應(yīng)的反應(yīng)溫度為160℃-170℃，反應(yīng)時(shí)間為0.8h-1h，具有更高的滅草松和2,4-滴回收率和更優(yōu)的精密度(實(shí)施例三、實(shí)施例四中精密度均低于5％)。超出預(yù)定的反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間，滅草松和2,4-滴的回收率大大低于實(shí)施例的收率；其精密度大大差于實(shí)施例的數(shù)據(jù)。而且N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛加入量為400μL-500μL時(shí)；具有更高的滅草松和2,4-滴回收率和最佳的精密度。

以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，并非因此即限制本發(fā)明的專利保護(hù)范圍，凡是運(yùn)用本發(fā)明說明書及附圖內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)變換，直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。