本發(fā)明屬于酶生物傳感器技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于摻雜石墨烯的膽固醇傳感器及制備與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

膽固醇是人體中不可缺少的重要物質(zhì)，它直接參與形成細胞膜，也是合成膽汁酸、維生素d以及甾體激素的原料。人體中膽固醇大約有75％是自身合成，25％是由食物攝取得到，人體中的膽固醇含量須維持在一個正常的濃度范圍，若膽固醇濃度過高，會引發(fā)糖尿病、心臟病、動脈粥樣硬化、肝膽系統(tǒng)疾病等多種疾?。贿^低則需要檢查是否有重病或營養(yǎng)不良，而且會增加憂郁、出血性中風等疾病的風險。目前，已報道的血膽固醇檢測方法較多，常見的有氣液色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、溫度測定法、分子發(fā)光法、比色法、電化學方法等，但是這些檢測方法中的選擇性大多依賴于對膽固醇特異性識別的酶或抗體，并具有損壞性，成本相當昂貴。因此，針對血清或者食物樣品，設(shè)計出簡單、高選擇性、低成本、快速和高靈敏的膽固醇檢測方法仍然極具臨床意義。

石墨烯具有獨特的網(wǎng)狀格結(jié)構(gòu)特征和物理化學性能，可應(yīng)用于生物分析和環(huán)境檢測的電化學傳感器，同時，石墨烯具有較大的電勢窗口，使檢測具有高氧化還原電位的分子變得可行。摻雜石墨烯可在一定程度上改善石墨烯的活性區(qū)域，提高其電化學活性，同時為酶提供更多的活性位點，有效提高酶活性中心與電子介體間的電子傳輸速率。近年來，摻雜石墨烯材料發(fā)展起來的傳感器，具有較高的選擇性、靈敏度和穩(wěn)定性，已應(yīng)用于葡萄糖、h2o2和一些小分子(草酸、抗壞血酸、尿酸等)的檢測，同時對甲醇、乙醇等也有著優(yōu)異的催化效果，在燃料電池領(lǐng)域有著巨大的應(yīng)用前景。但目前還未有摻雜石墨烯材料傳感器應(yīng)用于膽固醇檢測的報道。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了解決以上現(xiàn)有技術(shù)的缺點和不足之處，本發(fā)明的首要目的在于提供一種基于摻雜石墨烯的膽固醇傳感器。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述基于摻雜石墨烯的膽固醇傳感器的制備方法。

本發(fā)明的再一目的在于提供上述基于摻雜石墨烯的膽固醇傳感器在膽固醇檢測中的應(yīng)用。

本發(fā)明目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：

一種基于摻雜石墨烯的膽固醇傳感器，由參比電極、對電極及修飾后的工作電極組成，所述修飾后的工作電極由工作電極及固化在工作電極表面的物質(zhì)識別膜組成，其中，所述物質(zhì)識別膜由摻雜石墨烯復合材料(n-gn)、麥爾多拉藍(mb)、膽固醇氧化酶(chox)、辣根過氧化物酶(hrp)及全氟磺酸樹脂(nafion)組成。

優(yōu)選地，所述的工作電極為玻碳電極，參比電極為銀/氯化銀電極，對電極為鉑片電極。

上述基于摻雜石墨烯的膽固醇傳感器的制備方法，包括如下制備步驟：

(1)對工作電極進行表面預處理；

(2)制備摻雜石墨烯復合材料；

(3)將步驟(2)的摻雜石墨烯復合材料制備成摻雜石墨烯復合材料分散液，然后與麥爾多拉藍溶液、膽固醇氧化酶溶液、辣根過氧化物酶溶液及全氟磺酸樹脂溶液混合均勻得復合溶液；

(4)將復合溶液滴加到步驟(1)的電極表面，室溫晾干，得到基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極；

(5)將基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極與參比電極和對電極組成三電極體系，得到所述基于摻雜石墨烯的膽固醇傳感器。

優(yōu)選地，步驟(1)中所述的表面預處理過程如下：將工作電極的表面依次用直徑為0.3μm和0.05μm的al2o3粉末拋光成鏡面，再用水沖洗；然后依次在無水乙醇和水中超聲清洗1min，取出用水洗凈，晾干，然后置于鐵氰化鉀溶液中(5mmol/lk3fe(cn)6+0.2mol/lkcl)進行電極活化處理。

優(yōu)選地，步驟(2)中所述摻雜石墨烯復合材料通過如下方法制備：將氧化石墨加入到去離子水中超聲剝離1～4h，然后加入fecl3·6h2o溶液和吡咯單體，攪拌混合均勻后加入到水熱反應(yīng)器中，在120～240℃條件下水熱還原8～24h后取出，冷凍干燥，得到所述摻雜石墨烯復合材料。

所述氧化石墨可采用現(xiàn)有公開的方法制備，優(yōu)選采用如下修正的hummers方法制備：0～4℃條件下，往濃h2so4中依次加入清洗后的石墨粉、nano3和kmno4，攪拌反應(yīng)90min至溶液呈紫綠色；然后升溫至30～40℃攪拌反應(yīng)90min，溶液依然呈紫綠色；再升溫至70～100℃，加入去離子水和雙氧水反應(yīng)至溶液變成金黃色；將反應(yīng)后的溶液用去離子水洗滌、離心、過濾，所得固體產(chǎn)物用去離子水超聲清洗、干燥，得到所述氧化石墨。

所述清洗后的石墨粉通過如下方法制備：將天然鱗片狀石墨粉加入到蒸餾水中，然后加入濃鹽酸，在60～80℃水浴中加熱并攪拌2h，真空抽濾后，依次用蒸餾水、丙酮、乙醇清洗，清洗完畢后，放入真空干燥箱中100℃烘干，之后用瑪瑙研缽研磨成粉狀備用。

優(yōu)選地，步驟(3)中所述摻雜石墨烯復合材料分散液的濃度為0.5～10mg/ml；所述麥爾多拉藍溶液的濃度為1～10mmol/l；所述膽固醇氧化酶溶液的濃度為1～10mg/ml；所述辣根過氧化物酶溶液的濃度為1～10mg/ml；所述全氟磺酸樹脂溶液的ph值為7.0；所述摻雜石墨烯復合材料分散液、麥爾多拉藍溶液、膽固醇氧化酶溶液、辣根過氧化物酶溶液及全氟磺酸樹脂溶液混合的體積比為1:1:1:1:1。

優(yōu)選地，所述摻雜石墨烯復合材料分散液采用水為分散溶劑，所述麥爾多拉藍溶液以水為溶劑，所述膽固醇氧化酶溶液和辣根過氧化物酶溶液采用ph值為7.0，濃度為0.2mol/l的pbs溶液配制，所述全氟磺酸樹脂溶液由0.1mol/lnaoh溶液調(diào)節(jié)。

優(yōu)選地，步驟(4)中所述復合溶液的滴加量為3～10μl。

上述基于摻雜石墨烯的膽固醇傳感器在膽固醇檢測中的應(yīng)用。

本發(fā)明的原理為：首先制備摻雜石墨烯復合材料，該復合材料借助不同組分的協(xié)同作用克服石墨烯本身卷曲、層間堆疊和溶劑中分散性差的不足，然后，利用全氟磺酸樹脂的成膜性，并利用摻雜石墨烯的載體特性，固載酶催化劑以利于對底物的催化；最后，取適量混合液滴于已表面預處理的工作電極上，得到修飾后的工作電極；再利用修飾后的工作電極，配合參比電極與對電極組成三電極體系，制得一種新型的檢測膽固醇的酶生物傳感器。

本發(fā)明將摻雜石墨烯復合材料應(yīng)用于酶生物傳感器，制備得到的檢測膽固醇的傳感器檢測性能良好，檢測范圍為1.92×10^-4～1.951×10^-3mol/l，線性方程為i(μa)＝1.6227+0.7003c(mmol/l)，相關(guān)系數(shù)為r²＝0.9810。檢測限為4.94×10^-8mol/l(s/n＝3)，靈敏度為9.91mamol^-1cm^-2。

本發(fā)明的制備方法及所得到的傳感器具有如下優(yōu)點及有益效果：

(1)本發(fā)明所得檢測膽固醇的生物傳感器具有良好的電子傳遞性，能將反應(yīng)產(chǎn)生的電子進行良好的轉(zhuǎn)移，能實現(xiàn)生物分子的選擇性檢測，提高所述生物傳感器的反應(yīng)速度。

(2)本發(fā)明所得檢測膽固醇的生物傳感器具有良好的選擇性、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，可對膽固醇進行準確檢測，抗干擾能力強。

(3)本發(fā)明所得檢測膽固醇的生物傳感器可用于血清總膽固醇或食品中膽固醇的檢測，具有較寬的檢測范圍，較低的檢測限，反應(yīng)在室溫中性環(huán)境下進行，性能穩(wěn)定，具有良好的應(yīng)用前景。

附圖說明

圖1為實施例2中基底玻碳電極、不同的酶修飾工作電極在磷酸緩沖溶液中的循環(huán)伏安圖。

圖2為實施例2中制備的基于摻雜石墨烯的膽固醇酶生物傳感器在滴加不同膽固醇后在磷酸緩沖溶液中的循環(huán)伏安圖。

圖3為實施例2中制備的基于摻雜石墨烯的膽固醇酶生物傳感器在滴加不同膽固醇后在磷酸緩沖溶液中對不同濃度膽固醇的響應(yīng)電流的標準曲線圖。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例及附圖對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。

實施例1

本實施例的一種基于摻雜石墨烯的膽固醇酶生物傳感器的制備方法，具體制備步驟如下：

(1)將直徑為3mm的玻碳電極依次用直徑為0.3μm和0.05μm的al2o3粉末拋光成鏡面，用蒸餾水沖洗，然后依次在無水乙醇和蒸餾水中超聲清洗1min，再將玻碳電極置于10ml鐵氰化鉀溶液中(5mmol/lk3fe(cn)6+0.2mol/lkcl)在0～0.8v下采用循環(huán)伏安法掃描6圈進行電極活化，取出用蒸餾水沖洗，室溫晾干得到預處理的玻碳電極。

(2)取100mg氧化石墨于燒杯中，加入50ml去離子水后超聲剝離4h，之后加入6.25mlfecl3·6h2o溶液和235μl吡咯單體，置于40℃恒溫攪拌1h后加入反應(yīng)釜中，在180℃條件下水熱還原16h后取出，冷凍干燥24h后制得摻雜石墨烯復合材料。

(3)將摻雜石墨烯復合材料分散為濃度為0.5mg/ml的水分散液，將麥爾多拉藍配制成濃度為5mmol/l的水溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的膽固醇氧化酶溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的辣根過氧化物酶溶液，采用0.1mol/lnaoh溶液調(diào)節(jié)全氟磺酸樹脂溶液至ph7.0。將五種溶液以1:1:1:1:1體積比混合得到混合溶液。

(4)取5μl步驟(4)的混合溶液滴于步驟(1)的電極表面，在室溫下晾干，得到基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極。

(5)將所得基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極與參比電極和對電極組成三電極體系(鉑片電極為對電極，銀/氯化銀為參比電極)，得到所述檢測膽固醇的酶生物傳感器。

本實施例所得酶生物傳感器在室溫下進行電化學試驗，均在10ml磷酸緩沖溶液(0.2mol/l、ph7.0)中進行，測試之前通n2，測試過程中采用循環(huán)伏安法。其中空白對照未滴加膽固醇溶液，測試穩(wěn)定后依次滴加400μl膽固醇溶液。

本實施例所得酶生物傳感器在膽固醇濃度為0.192mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.126μa；在膽固醇濃度為0.370mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.156μa。

實施例2

本實施例的一種基于摻雜石墨烯的膽固醇酶生物傳感器的制備方法，具體制備步驟如下：

(1)將直徑為3mm的玻碳電極依次用直徑為0.3μm和0.05μm的al2o3粉末拋光成鏡面，用蒸餾水沖洗，然后依次在無水乙醇和蒸餾水中超聲清洗1min，再將玻碳電極置于10ml鐵氰化鉀溶液中(5mmol/lk3fe(cn)6+0.2mol/lkcl)在0～0.8v下采用循環(huán)伏安法掃描6圈進行電極活化，取出用蒸餾水沖洗，室溫晾干得到預處理的玻碳電極。

(2)取100mg氧化石墨于燒杯中，加入50ml去離子水后超聲剝離4h，之后加入6.25mlfecl3·6h2o溶液和235μl吡咯單體，置于40℃恒溫攪拌1h后加入反應(yīng)釜中，在180℃條件下水熱還原16h后取出，冷凍干燥24h后制得摻雜石墨烯復合材料。

(3)將摻雜石墨烯復合材料分散為濃度為1.0mg/ml的水分散液，將麥爾多拉藍配制成濃度為5mmol/l的水溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的膽固醇氧化酶溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的辣根過氧化物酶溶液，采用0.1mol/lnaoh溶液調(diào)節(jié)全氟磺酸樹脂溶液至ph7.0。將五種溶液以1:1:1:1:1體積比混合得到混合溶液。

(4)取5μl步驟(3)的混合溶液滴于步驟(1)的電極表面，在室溫下晾干，得到基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極。

(5)將所得基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極與參比電極和對電極組成三電極體系(鉑片電極為對電極，銀/氯化銀為參比電極)，得到所述檢測膽固醇的生物傳感器。

本實施例所得酶生物傳感器在室溫下進行電化學試驗，均在10ml磷酸緩沖溶液(0.2mol/l、ph7.0)中進行，測試之前通n2，測試過程中采用循環(huán)伏安法。其中空白對照未滴加膽固醇溶液，測試穩(wěn)定后依次滴加400μl膽固醇溶液。

本實施例所得酶生物傳感器在膽固醇濃度為0.192mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.097μa；在膽固醇濃度為0.370mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.212μa。

本實施例中基底玻碳電極、不同的酶修飾工作電極在磷酸緩沖溶液中的循環(huán)伏安圖如圖1所示。圖中曲線a為未修飾的基底玻碳電極的循環(huán)伏安圖(gce)，曲線b為膽固醇氧化酶、辣根過氧化物酶及全氟磺酸樹脂修飾的玻碳電極的循環(huán)伏安圖(chox+hrp+nafion)，曲線c為膽固醇氧化酶、辣根過氧化物酶、麥爾多拉藍及全氟磺酸樹脂修飾的玻碳電極的循環(huán)伏安圖(chox+hrp+mb+nafion)，曲線d為膽固醇氧化酶、辣根過氧化物酶、麥爾多拉藍、摻雜石墨烯及全氟磺酸樹脂修飾的玻碳電極的循環(huán)伏安圖(chox+hrp+mb+n-gn+nafion)。從圖1結(jié)果可知，電極修飾麥爾多拉藍后出現(xiàn)了一對可逆的氧化還原峰，電極修飾摻雜石墨烯后峰間距沒有明顯變化(δep＝82mv)，中間電位沒有明顯變化(em＝-0.158v)，且基礎(chǔ)電流明顯提高。電流的增大可能歸結(jié)于修飾摻雜石墨烯復合材料后，導電性提高，電化學活性增強并增大了電極的有效面積。

本實施例所得基于摻雜石墨烯的膽固醇酶生物傳感器在滴加不同濃度膽固醇后在磷酸緩沖溶液中測試的循環(huán)伏安圖如圖2所示。其中氧化曲線右端從下到上依次對應(yīng)的膽固醇濃度為0mmo1/l、0.192mmo1/l、0.370mmo1/l、0.536mmo1/l、0.690mmo1/l、0.833mmo1/l、0.968mmo1/l、1.094mmo1/l、1.212mmo1/l、1.324mmo1/l、1.429mmo1/l、1.528mmo1/l、1.622mmo1/l、1.711mmo1/l、1.795mmo1/l、1.875mmo1/l、1.951mmo1/l。

本實施例所得基于摻雜石墨烯的膽固醇酶生物傳感器在磷酸緩沖溶液中對不同濃度膽固醇的響應(yīng)電流的標準曲線圖如圖3所示。本發(fā)明所得膽固醇酶生物傳感器對底物檢測范圍為1.92×10^-4～1.951×10^-3mol/l，線性方程為i(μa)＝1.6227+0.7003c(mmol/l)，相關(guān)系數(shù)為r²＝0.9810。檢測限為4.94×10^-8mol/l(s/n＝3)，靈敏度為9.91mamol^-1cm^-2。

實施例3

本實施例的一種基于摻雜石墨烯的膽固醇酶生物傳感器的制備方法，具體制備步驟如下：

(1)將直徑為3mm的玻碳電極依次用直徑為0.3μm和0.05μm的al2o3粉末拋光成鏡面，用蒸餾水沖洗，然后依次在無水乙醇和蒸餾水中超聲清洗1min，再將玻碳電極置于10ml鐵氰化鉀溶液中(5mmol/lk3fe(cn)6+0.2mol/lkcl)在0～0.8v下采用循環(huán)伏安法掃描6圈進行電極活化，取出用蒸餾水沖洗，室溫晾干得到預處理的玻碳電極。

(2)取100mg氧化石墨于燒杯中，加入50ml去離子水后超聲剝離4h，之后加入6.25mlfecl3·6h2o溶液和235μl吡咯單體，置于40℃恒溫攪拌1h后加入反應(yīng)釜中，在180℃條件下水熱還原16h后取出，冷凍干燥24h后制得摻雜石墨烯復合材料。

(3)將摻雜石墨烯復合材料分散為濃度為1.5mg/ml的水分散液，將麥爾多拉藍配制成濃度為5mmol/l的水溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的膽固醇氧化酶溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的辣根過氧化物酶溶液，采用0.1mol/lnaoh溶液調(diào)節(jié)全氟磺酸樹脂溶液至ph7.0。將五種溶液以1:1:1:1:1體積比混合得到混合溶液。

(4)取5μl步驟(3)的混合溶液滴于步驟(1)的電極表面，在室溫下晾干，得到基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極。

(5)將所得基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極與參比電極和對電極組成三電極體系(鉑片電極為對電極，銀/氯化銀為參比電極)，得到所述檢測膽固醇的生物傳感器。

本實施例所得酶生物傳感器在室溫下進行電化學試驗，均在10ml磷酸緩沖溶液(0.2mol/l、ph7.0)中進行，測試之前通n2，測試過程中采用循環(huán)伏安法。其中空白對照未滴加膽固醇溶液，測試穩(wěn)定后依次滴加400μl膽固醇溶液。

本實施例所得酶生物傳感器在膽固醇濃度為0.192mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.031μa；在膽固醇濃度為0.370mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.033μa。

實施例4

本實施例的一種基于摻雜石墨烯的膽固醇酶生物傳感器的制備方法，具體制備步驟如下：

(1)將直徑為3mm的玻碳電極依次用直徑為0.3μm和0.05μm的al2o3粉末拋光成鏡面，用蒸餾水沖洗，然后依次在無水乙醇和蒸餾水中超聲清洗1min，再將玻碳電極置于10ml鐵氰化鉀溶液中(5mmol/lk3fe(cn)6+0.2mol/lkcl)在0～0.8v下采用循環(huán)伏安法掃描6圈進行電極活化，取出用蒸餾水沖洗，室溫晾干得到預處理的玻碳電極。

(2)取100mg氧化石墨于燒杯中，加入50ml去離子水后超聲剝離4h，之后加入6.25mlfecl3·6h2o溶液和235μl吡咯單體，置于40℃恒溫攪拌1h后加入反應(yīng)釜中，在180℃條件下水熱還原16h后取出，冷凍干燥24h后制得摻雜石墨烯復合材料。

(3)將摻雜石墨烯復合材料分散為濃度為2.0mg/ml的水分散液，將麥爾多拉藍配制成濃度為5mmol/l的水溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的膽固醇氧化酶溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的辣根過氧化物酶溶液，采用0.1mol/lnaoh溶液調(diào)節(jié)全氟磺酸樹脂溶液至ph7.0。將五種溶液以1:1:1:1:1體積比混合得到混合溶液。

(4)取5μl步驟(3)的混合溶液滴于步驟(1)的電極表面，在室溫下晾干，得到基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極。

(5)將所得基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極與參比電極和對電極組成三電極體系(鉑片電極為對電極，銀/氯化銀為參比電極)，得到所述檢測膽固醇的生物傳感器。

本實施例所得酶生物傳感器在室溫下進行電化學試驗，均在10ml磷酸緩沖溶液(0.2mol/l、ph7.0)中進行，測試之前通n2，測試過程中采用循環(huán)伏安法。其中空白對照未滴加膽固醇溶液，測試穩(wěn)定后依次滴加400μl膽固醇溶液。

本實施例所得酶生物傳感器在膽固醇濃度為0.192mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.022μa；在膽固醇濃度為0.370mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.016μa。

實施例5

本實施例的一種基于摻雜石墨烯的膽固醇酶生物傳感器的制備方法，具體制備步驟如下：

(1)將直徑為3mm的玻碳電極依次用直徑為0.3μm和0.05μm的al2o3粉末拋光成鏡面，用蒸餾水沖洗，然后依次在無水乙醇和蒸餾水中超聲清洗1min，再將玻碳電極置于10ml鐵氰化鉀溶液中(5mmol/lk3fe(cn)6+0.2mol/lkcl)在0～0.8v下采用循環(huán)伏安法掃描6圈進行電極活化，取出用蒸餾水沖洗，室溫晾干得到預處理的玻碳電極。

(2)取100mg氧化石墨于燒杯中，加入50ml去離子水后超聲剝離4h，之后加入6.25mlfecl3·6h2o溶液和235μl吡咯單體，置于40℃恒溫攪拌1h后加入反應(yīng)釜中，在180℃條件下水熱還原16h后取出，冷凍干燥24h后制得摻雜石墨烯復合材料。

(3)將摻雜石墨烯復合材料分散為濃度為2.5mg/ml的水分散液，將麥爾多拉藍配制成濃度為5mmol/l的水溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的膽固醇氧化酶溶液，采用pbs溶液(0.2mol/l、ph7.0)配制濃度為5mg/ml的辣根過氧化物酶溶液，采用0.1mol/lnaoh溶液調(diào)節(jié)全氟磺酸樹脂溶液至ph7.0。將五種溶液以1:1:1:1:1體積比混合得到混合溶液。

(4)取5μl步驟(3)的混合溶液滴于步驟(1)的電極表面，在室溫下晾干，得到基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極。

(5)將所得基于摻雜石墨烯的酶修飾工作電極與參比電極和對電極組成三電極體系(鉑片電極為對電極，銀/氯化銀為參比電極)，得到所述檢測膽固醇的生物傳感器。

本實施例所得酶生物傳感器在室溫下進行電化學試驗，均在10ml磷酸緩沖溶液(0.2mol/l、ph7.0)中進行，測試之前通n2，測試過程中采用循環(huán)伏安法。其中空白對照未滴加膽固醇溶液，測試穩(wěn)定后依次滴加400μl膽固醇溶液。

本實施例所得酶生物傳感器在膽固醇濃度為0.192mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.027μa；在膽固醇濃度為0.370mmol/l時，測試的氧化峰催化電流為0.05μa。

上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其它的任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。