本發(fā)明涉及一種快速制備單細(xì)胞懸液的過濾器，屬于免疫研究技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

流式細(xì)胞技術(shù)（flow cytometry，F(xiàn)CM）是利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行的一種單細(xì)胞定量分析和分選技術(shù)。流式細(xì)胞術(shù)是單克隆抗體及免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、激光和電子計(jì)算機(jī)科學(xué)等高度發(fā)展及綜合利用的高技術(shù)產(chǎn)物。流式細(xì)胞術(shù)工作原理是在細(xì)胞分子水平上通過單克隆抗體對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個(gè)細(xì)胞，并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù)，具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)之一。

流式細(xì)胞分選術(shù)指樣品管中經(jīng)熒光染料染色或標(biāo)記的單細(xì)胞懸液，經(jīng)高壓壓進(jìn)入流動(dòng)室內(nèi)。流動(dòng)室充滿鞘液，單細(xì)胞懸液在鞘液的包裹及推動(dòng)下，細(xì)胞被排成單個(gè)細(xì)胞列，以一定速度從流動(dòng)室噴嘴噴出。在流動(dòng)室的噴嘴上配有一個(gè)超高頻的壓電晶體，充電后可發(fā)生振動(dòng)，使噴出的液流按照一定頻率斷裂為一個(gè)個(gè)均勻的液滴，待測(cè)的單個(gè)細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以不同的電荷，當(dāng)液滴流通過帶有幾千伏電壓的偏轉(zhuǎn)板時(shí)，在高壓電場(chǎng)作用下發(fā)生偏轉(zhuǎn)，落入各自的收集容器里，沒有被充電的液滴則落入中間的廢液缸，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。

流式細(xì)胞術(shù)及流式細(xì)胞分選都是針對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行的分析及分選過程，且流式細(xì)胞儀為高精密度高通量?jī)x器，對(duì)樣品制備的要求較為嚴(yán)格，故無論是利用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行分析，還是利用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞的分選，都是基于單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行的，所以單細(xì)胞懸液的制備對(duì)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行都起到至關(guān)重要的影響。

流式細(xì)胞術(shù)上機(jī)前，需要將上機(jī)樣品進(jìn)行過濾，以制備單細(xì)胞混懸液，尤其是進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分選細(xì)胞時(shí)，成團(tuán)的細(xì)胞會(huì)堵塞噴嘴使儀器無法正常運(yùn)行，甚至?xí)?duì)儀器造成一定的損害。而現(xiàn)有樣品過濾方法主要為手工將濾膜套于兩個(gè)tip頭之間，在通過移液槍配1mL tip頭將細(xì)胞懸液噴出，最后收集于流式上樣管，這么做不僅浪費(fèi)tip頭，而且制備過程中耗時(shí)較長(zhǎng)，濾過面積太小容易造成堵塞，細(xì)胞濾過率不高，對(duì)實(shí)驗(yàn)效率也會(huì)有很大的影響。手工制備過程中濾膜容易污染，導(dǎo)致分選后的細(xì)胞也受到波及，無法進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。本過濾器操作簡(jiǎn)便，經(jīng)濟(jì)便捷，可進(jìn)行高壓消毒，過濾后的單細(xì)胞懸液可直接收集于1.5mL eppendorf管或流式管中，尤其適用于小體積（200μL~1mL）的單細(xì)胞懸液、尤其是原代細(xì)胞的單細(xì)胞懸液的制備，大大簡(jiǎn)化了流式上機(jī)前樣品制備的步驟，縮短了流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)的時(shí)間，減少單細(xì)胞懸液制備過程中細(xì)胞的污染。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有流式上機(jī)前制備單細(xì)胞濾器的空缺、手工制備濾器的不便捷、細(xì)胞耗損大、細(xì)胞易污染、費(fèi)時(shí)且浪費(fèi)tip頭的問題，從而提供一種適用于小體積細(xì)胞懸液的快速、便捷地制備單細(xì)胞懸液的濾器。

本發(fā)明的技術(shù)方案：一種快速制備單細(xì)胞懸液的過濾器，包括tip頭插入孔、流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽、和濾膜；所述tip頭插入孔設(shè)置于流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽上方，流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽底部設(shè)有濾膜。

所述濾膜為尼龍濾膜。

所述濾膜過濾孔目數(shù)為300、400、500、700、800或1000目。

所述tip頭插入孔所插入的tip頭為1mL。

所述tip頭插入孔的直徑a為7mm，高度b為10mm；流式上樣管卡槽或1.5 mL eppendorf管卡槽的高度c為25mm；濾膜直徑d為10mm。

所述快速制備單細(xì)胞懸液的過濾器總高度e為35mm。

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明提供的過濾器操作簡(jiǎn)便，經(jīng)濟(jì)便捷，可存放于市面上大部分1mL tip盒并進(jìn)行高壓消毒，過濾后的單細(xì)胞懸液可直接收集于1.5mL eppendorf管或流式管中，適用于小體積細(xì)胞懸液的制備，大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，極大減少了單細(xì)胞懸液制備過程中細(xì)胞污染。

附圖說明

圖1是本發(fā)明結(jié)構(gòu)示意圖。

圖2是本發(fā)明使用示意圖。

附圖標(biāo)記說明：1、tip頭插入孔；2、流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽；3、濾膜；A、1mL tip頭；B、1.5mL eppendorf管。

具體實(shí)施方式

如圖1所示：一種快速制備單細(xì)胞懸液的過濾器，包括tip頭插入孔1、流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽2、濾膜3；所述tip頭插入孔1設(shè)置于流式上樣管卡槽或1.5 mL eppendorf管卡槽2上方，流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽2底部設(shè)有濾膜3。

所述濾膜3為尼龍濾膜。所述濾膜3過濾孔目數(shù)為300、400、500、700、800或1000目。

所述tip頭插入孔1所插入的tip頭為1mL。

所述tip頭插入孔1的直徑a為7mm，高度b為10mm；流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽2的高度c為25mm；濾膜3直徑d為10mm。

所述快速制備單細(xì)胞懸液的過濾器總高度e為75mm。

本發(fā)明使用時(shí)，具體如圖2所示，先用1mL移液槍配1mL tip頭A將待測(cè)細(xì)胞懸液吸起，將本過濾器置于流式上樣管或1.5mL eppendorf管上，把吸有細(xì)胞懸液的tip頭插入本過濾器的tip頭插入孔，通過按壓移液槍使細(xì)胞懸液從tip頭中噴出，經(jīng)過本過濾器濾膜最后收集于流式上樣管或1.5mL eppendorf管，即可直接上機(jī)或進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)。