本發(fā)明涉及中藥制劑的質(zhì)量控制方法，特別是涉及一種用高效液相色譜法對獨一味泡騰片制劑指紋圖譜的構(gòu)建方法及其指紋圖譜。
背景技術：
：中藥質(zhì)量控制是中藥現(xiàn)代化的重要內(nèi)容，指紋圖譜技術被認為是中藥質(zhì)量控制研究的有效手段。中藥指紋圖譜能比較全面地反映中藥中化學物質(zhì)的種類與數(shù)量，是實現(xiàn)中藥真實性、質(zhì)量可控性和產(chǎn)品穩(wěn)定性的可行模式，能更好地反映中藥的內(nèi)在品質(zhì)。隨著中藥指紋圖譜及化學模式識別技術的發(fā)展，指紋圖譜技術已日益成為國內(nèi)外廣泛接受的中藥質(zhì)量評價模式?；诙恐讣y圖譜技術的中藥質(zhì)量控制模式是以傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論體系為基礎的綜合控制模式，體現(xiàn)了中醫(yī)藥整體治療的特色。定量指紋圖譜技術在原有指紋圖譜的方法上賦予指紋圖譜大量的定性、定量信息共同應用于中藥質(zhì)量控制,對指紋圖譜中目標成分尤其是有效成分進行準確定量，使中藥質(zhì)量控制更加準確，能更真實反映中藥的質(zhì)量狀況和產(chǎn)品組成，產(chǎn)品的質(zhì)量和穩(wěn)定性更加可靠。獨一味泡騰片是由獨一味藥材提取制成的純天然中藥制劑，具有活血止痛，化瘀止血。用于多種外科手術后的刀口疼痛、出血，外傷骨折，筋骨扭傷，風濕痹痛以及崩漏，痛經(jīng)，牙齦腫痛、出血等。文獻報道獨一味藥材中主要有效成分為山梔苷甲酯、8-o-乙酰山梔苷甲酯、木犀草苷，常作為含量測定中質(zhì)量控制指標性成分。隨著現(xiàn)代醫(yī)藥的高速發(fā)展，現(xiàn)行的獨一味泡騰片的質(zhì)量控制標準已不能準確反映產(chǎn)品內(nèi)在品質(zhì)及批次之間產(chǎn)品質(zhì)的一致性。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術問題是克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種獨一味泡騰片指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜，該方法用高效液相色譜法對獨一味泡騰片中的指標成分進行含量測定，獲得指紋圖譜，用于評價和控制獨一味泡騰片的質(zhì)量，可以保證產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定性、一致性和可控性，從而確保獨一味泡騰片的安全性和有效性。為了解決上述技術問題，本發(fā)明采用如下的技術方案：一種獨一味泡騰片hplc指紋圖譜的建立方法,其特征在于：取獨一味泡騰片研細，稱取0.2-1.0g，精密稱定至于平底燒瓶中，加入40％-80％甲醇15-45ml，稱定重量，超聲5-30min，放冷，用40％-80％甲醇補足減失重量。搖勻，過濾，臨用前用微孔濾膜過濾；照高效液相色譜法建立指紋圖譜；所述高效液相色譜法的色譜條件為：odsc18(5um，4.6*250mm)；流動相a為乙腈；流動相b為水；柱溫：20-30℃；流速：0.8-1.2ml/min；檢測波長：220-250nm；洗脫程序為梯度洗脫程序。本發(fā)明如上所述最佳的，一種獨一味泡騰片hplc指紋圖譜的建立方法：(a)供試品溶液制備：精密稱取獨一味泡騰片粉末0.5g，置平底燒杯中，加入70％甲醇25ml，稱定重量，超聲處理10分鐘，用70％甲醇補足減失重量，臨用前用微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；(b)對照品溶液的配制：精密稱取山梔苷甲酯，8-o-乙酰山梔苷甲酯，木犀草苷這三種對照品適量，加甲醇分別制成每1ml含0.04mg/ml、0.04mg/ml、0.10mg/ml的混合對照品溶液。(c)色譜條件：色譜柱：odsc18(5um，4.6*250mm)；流動相a為乙腈；流動相b為水；柱溫：25℃；流速：1ml/min；檢測波長：238nm；洗脫程序為梯度洗脫程序；(d)測定：吸取對照品和供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，得到獨一味泡騰片的指紋圖譜；所述微孔濾膜是用0.45μm的微孔濾膜；所述梯度洗脫程序的體積比濃度為：洗脫時間流動相a的比例流動相b的比例0min5％95％5min5％95％15min12％88％30min17％83％50min17％83％所述獨一味泡騰片圖譜中有10個特征共有峰，圖譜總長度為50min。使用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》2004年a版相似度軟件，進行相似度評價，其相似度應大于0.9。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果是：a、將前述方法建立的獨一味泡騰片指紋圖譜與相應的對照譜進行相似度評價，其相似度大于0.900，能有效的表征產(chǎn)品質(zhì)量，更有利于監(jiān)控產(chǎn)量質(zhì)量；b、本發(fā)明采用高效液相建立標準指紋圖譜，通過多指標成分控制產(chǎn)品質(zhì)量，能更好的保證產(chǎn)品質(zhì)量的長期穩(wěn)定性，進而保障產(chǎn)品療效的安全性和有效性；c、本發(fā)明具有快捷、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性強及使用范圍廣等優(yōu)點，有利于全方位的控制獨一味泡騰片的質(zhì)量穩(wěn)定性；附圖說明圖1為10批獨一味泡騰片指紋圖譜疊加圖圖2為獨一味泡騰片對照指紋圖譜圖具體實施方式實施例1儀器：waters高效液相色譜儀(waters2695分離單元，waters2996二極管陣列檢測器，empower色譜工作站)；試劑：甲醇分析純上海振興化工一廠乙腈色譜純山東禹王實業(yè)有限公司化工分公司對照品：山梔苷甲酯對照品批號：111873-201103-o-乙酰山梔苷甲酯對照品批號：111872-201102木犀草苷對照品批號：111720-201408上述購自中國藥品食品檢定研究院樣品：由山東綠因藥業(yè)有限公司提供(a)供試品溶液制備：稱取獨一味泡騰片粉末0.5g，置平底燒杯中，加入70％甲醇25ml，稱定重量，超聲處理10分鐘，用70％甲醇補足減失重量，臨用前用微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；(b)對照品溶液的配制：精密稱取山梔苷甲酯，8-o-乙酰山梔苷甲酯，木犀草苷這三種對照品適量，加甲醇分別制成每1ml含0.04mg/ml、0.04mg/ml、0.10mg/ml的混合對照品溶液。(c)色譜條件：色譜柱：odsc18(5um，4.6*250mm)；流動相a為乙腈；流動相b為水；柱溫：25℃；流速：1ml/min；檢測波長：238nm；洗脫程序為梯度洗脫程序；梯度洗脫程序的體積比濃度為：(d)測定：吸取對照品和供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，得到獨一味泡騰片的指紋圖譜；精密度試驗按“供試品溶液制備”方法制備1份供試品溶液，連續(xù)進樣5次。將色譜數(shù)據(jù)導入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》2004年a版相似度軟件，進行相似度評價。相似度評價結(jié)果如下：進樣次12345相似度0.9990.9990.9991.0000.999重現(xiàn)性試驗按“供試品溶液制備”方法制備6份供試品溶液，依法測定。將色譜數(shù)據(jù)導入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》2004年a版相似度軟件，進行相似度評價。相似度評價結(jié)果如下：進樣次123456相似度0.9980.9970.9970.9981.0000.999溶液穩(wěn)定性試驗重現(xiàn)性試驗按“供試品溶液制備”方法制備1份供試品溶液，分別于0、2、4、8、12、24小時后進樣，記錄色譜圖。將色譜數(shù)據(jù)導入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》2004年a版相似度軟件，進行相似度評價。相似度評價結(jié)果如下：進樣時間0h2h4h8h12h24h相似度1.0000.9991.0000.9991.0001.000采用實施例1所述方法測定10個批次獨一味泡騰片(批號為：130301、120501、120503、120601、120602、120701、120702、120801、120802、120901)，得到10個批次獨一味泡騰片指紋圖譜。將10批次獨一味泡騰片色譜數(shù)據(jù)導入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》2004年a版相似度軟件，進行相似度評價，相似度研究結(jié)果如下：批次1303011205011205033120601120602120701120702120801120802120901相似度0.9840.9890.9980.9860.9280.9320.9880.990.9870.991應當說明的是，雖然本發(fā)明以較佳實施例如上，但其并非用以限定本發(fā)明，任何熟習此項技藝者，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當前第1頁12