本發(fā)明涉及一種中藥蜜炙飲片的專屬性鑒別方法，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

臨床上，中藥材必須經(jīng)炮制加工成飲片方能入藥，“修合雖無人見，存心自有天知”是古代樸素的制藥理念，因此，炮制是關(guān)系中藥藥效的主要因素。中藥經(jīng)炮制后功效和藥性都發(fā)生了改變，如甘草生清熟補，大黃生峻熟緩、烏頭生毒熟減等，但由于歷史與現(xiàn)實的種種原因，多數(shù)中藥飲片的質(zhì)量評價標準，未能將生品和炮制品區(qū)分開來，更甚者，生品和炮制品評價標準均是“同藥材”。而在各炮制方法中，中藥蜜炙技術(shù)由于加工過程采用文火加熱，炮制溫度低，因此用于表征藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的化學成分變化很不明顯，如將中藥蜜炙飲片和生品飲片區(qū)分開來尤其困難。

此外，目前市場上蜂蜜摻假現(xiàn)象嚴重，無良商家為降低生產(chǎn)成本，常常采用果葡糖漿代替蜂蜜作為輔料進行蜜炙加工，另有部分為增加甜度還會添加蔗糖。對于蜂蜜，明·《本草綱目》記載“生涼熟溫”，《本草通玄》提到“蜜制潤其燥”?？梢姺涿郾旧砭哂幸欢ǖ难a益和潤肺作用?，F(xiàn)代研究及臨床應(yīng)用也表明蜂蜜具有補中益氣、潤肺止咳等作用，因此輔料蜂蜜的加入對于對于蜜炙發(fā)揮“增強止咳”和“增強補益作用”可起到協(xié)同作用。而以果葡糖漿代替蜂蜜作為蜜炙用輔料肯定不能達到中藥蜜炙應(yīng)有的目的。果葡糖漿雖為無色，但因甘草本身在加熱過程中色澤會加深，而且果葡糖漿也具黏性，因此用肉眼與真正的蜜炙加工品難辨真?zhèn)巍Ｈ绾螌⒍邊^(qū)分開來對于控制和保證市場上蜜炙飲片質(zhì)量來說也是急需解決的關(guān)鍵問題。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用薄層層析的方法建立了一種蜜炙飲片的專屬性鑒別方法，本發(fā)明可通過圖譜行為的不同達到區(qū)分炙品和生品以及偽蜜炙品的目的。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

供試品溶液制備方法如下：取生品飲片和蜜炙飲片粗粉各0.5g，精密加入60%-75%濃度的乙醇溶液5ml，超聲處理10min，濾過，濾液置5ml量瓶中，加同樣濃度乙醇至刻度，搖勻即得。

蜂蜜對照溶液的制備：取蜂蜜0.5g，置25ml量瓶中，加60%-75%濃度乙醇溶液溶解，并稀釋至刻度，混勻，作為蜂蜜對照溶液。

對照品溶液的制備：取葡萄糖、果糖、蔗糖對照品各適量，加60%-75％乙醇溶液制成每1ml含葡萄糖、果糖和蔗糖各10mg的溶液，作為對照品溶液。

薄層層析：照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液各3-5μl、蜂蜜對照溶液3-5μl和對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠g（0.3m磷酸二氫鈉水溶液浸泡，0.4cm）薄層板上，以正丁醇∶甲醇∶丙酮∶水（10∶4∶8∶2.5）為展開劑，40℃展開，展距14cm，取出，晾干，噴以二苯胺－苯胺－磷酸－丙酮顯色劑，105℃加熱至顯色清晰，日光下檢視。

判斷方法：蜜炙品與生品相比，標記1處葡萄糖和果糖斑點大小和顏色較生品明顯變大和加深。標記2處可見炙品較生品明顯增加淺藍色斑點，該斑點為蜂蜜特有，可與生甘草和果糖、葡萄糖以及蔗糖的斑點明顯區(qū)分開來，薄層層析圖如圖1所示。

此方法可明顯區(qū)別生、蜜炙飲片，并用于蜜炙飲片的專屬性鑒別。解決了長期以來蜜炙飲片難以鑒別的難題。本方法還能夠簡單、快速的將蜂蜜與葡萄糖、果糖和蔗糖區(qū)分開來，以及可明顯區(qū)分蜜炙正品與用添加蔗糖的果葡糖漿代替蜂蜜制備的偽蜜炙品。

附圖說明

圖1為甘草的生、蜜炙品的薄層層析圖；其中，1生甘草；2-11炙甘草（生甘草的十批蜜炙中試產(chǎn)品）；12蜂蜜；13葡萄糖；14果糖；15蔗糖；

圖2為甘草的生、蜜炙品的薄層層析圖；其中，1、3、5、7為不同批次的市售生甘草飲片；2、4、6、8分別為上述四批（1、3、5和7號）生甘草的蜜炙加工品；9蜂蜜；10為用添加了蔗糖的果葡糖漿制備的偽品炙甘草飲片；

圖3為黃芪的生、蜜炙品的薄層層析圖；其中，1-10炙黃芪（生黃芪的十批蜜炙中試產(chǎn)品）；13生黃芪；11蜂蜜；12從上至下依次為果糖、葡萄糖和蔗糖；

圖4為前胡的生、蜜炙品的薄層層析圖；其中，1生前胡；2-11蜜前胡（生前胡的十批蜜炙中試產(chǎn)品）；12蜂蜜；13從上至下為果糖、葡萄糖和蔗糖；

圖5為麻黃的生、蜜炙品的薄層層析圖；其中，1生麻黃；2-11十批蜜麻黃（生麻黃的十批蜜炙中試產(chǎn)品）；12蜂蜜；13從上至下為果糖、葡萄糖和蔗糖；

圖6為百部的生、蜜炙品的薄層層析圖；其中，1生百部；2-11十批蜜百部（生麻黃的十批蜜炙中試產(chǎn)品）；12蜂蜜；13從上至下為果糖、葡萄糖和蔗糖。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的說明。

實施例1

供試品溶液制備方法如下：取甘草飲片（炙甘草飲片、果葡糖漿制備的炙甘草飲片）粗粉各0.5g，精密加入60%-75%濃度的乙醇溶液5ml，超聲處理10min，濾過，濾液置5ml量瓶中，加同樣濃度乙醇至刻度，搖勻即得。

蜂蜜對照溶液的制備：取蜂蜜0.5g，置25ml量瓶中，加60%-75%濃度乙醇溶液溶解，并稀釋至刻度，混勻，作為蜂蜜對照溶液。

對照品溶液的制備：取葡萄糖、果糖、蔗糖對照品各適量，加60%-75％乙醇溶液制成每1ml含葡萄糖、果糖和蔗糖各10mg的溶液，作為對照品溶液。

薄層層析：照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液各3-5μl、蜂蜜對照溶液3-5μl和對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠g（0.3m磷酸二氫鈉水溶液浸泡，0.4cm）薄層板上，以正丁醇∶甲醇∶丙酮∶水（10∶4∶8∶2.5）為展開劑，40℃展開，展距14cm，取出，晾干，噴以二苯胺－苯胺－磷酸－丙酮顯色劑，105℃加熱至顯色清晰，日光下檢視。

判斷方法：蜜炙品與生品相比，標記1處葡萄糖和果糖斑點大小和顏色較生品明顯變大和加深。標記2處可見炙品較生品明顯增加淺藍色斑點，該斑點為蜂蜜特有，可與生甘草和果糖、葡萄糖以及蔗糖的斑點明顯區(qū)分開來，薄層層析圖如圖1和圖2所示。

實施例2

供試品溶液制備方法如下：取黃芪飲片和蜜炙飲片粗粉各0.5g，精密加入60%-75%濃度的乙醇溶液5ml，超聲處理10min，濾過，濾液置5ml量瓶中，加同樣濃度乙醇至刻度，搖勻即得。

蜂蜜對照溶液的制備：取蜂蜜0.5g，置25ml量瓶中，加60%-75%濃度乙醇溶液溶解，并稀釋至刻度，混勻，作為蜂蜜對照溶液。

對照品溶液的制備：取葡萄糖、果糖、蔗糖對照品各適量，加60%-75％乙醇溶液制成每1ml含葡萄糖、果糖和蔗糖各10mg的溶液，作為對照品溶液。

薄層層析：照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液各3-5μl、蜂蜜對照溶液3-5μl和對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠g（0.3m磷酸二氫鈉水溶液浸泡，0.4cm）薄層板上，以正丁醇∶甲醇∶丙酮∶水（10∶4∶8∶2.5）為展開劑，40℃展開，展距14cm，取出，晾干，噴以二苯胺－苯胺－磷酸－丙酮顯色劑，105℃加熱至顯色清晰，日光下檢視。

判斷方法：同實施例1，薄層層析圖如圖3所示。

實施例3

供試品溶液制備方法如下：取前胡飲片和蜜炙飲片粗粉各0.5g，精密加入60%-75%濃度的乙醇溶液5ml，超聲處理10min，濾過，濾液置5ml量瓶中，加同樣濃度乙醇至刻度，搖勻即得。

蜂蜜對照溶液的制備：取蜂蜜0.5g，置25ml量瓶中，加60%-75%濃度乙醇溶液溶解，并稀釋至刻度，混勻，作為蜂蜜對照溶液。

對照品溶液的制備：取葡萄糖、果糖、蔗糖對照品各適量，加60%-75％乙醇溶液制成每1ml含葡萄糖、果糖和蔗糖各10mg的溶液，作為對照品溶液。

薄層層析：照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液各3-5μl、蜂蜜對照溶液3-5μl和對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠g（0.3m磷酸二氫鈉水溶液浸泡，0.4cm）薄層板上，以正丁醇∶甲醇∶丙酮∶水（10∶4∶8∶2.5）為展開劑，40℃展開，展距14cm，取出，晾干，噴以二苯胺－苯胺－磷酸－丙酮顯色劑，105℃加熱至顯色清晰，日光下檢視。

判斷方法：同實施例1，薄層層析圖如圖4所示。

實施例4

供試品溶液制備方法如下：取麻黃飲片和蜜炙飲片粗粉各0.5g，精密加入60%-75%濃度的乙醇溶液5ml，超聲處理10min，濾過，濾液置5ml量瓶中，加同樣濃度乙醇至刻度，搖勻即得。

蜂蜜對照溶液的制備：取蜂蜜0.5g，置25ml量瓶中，加60%-75%濃度乙醇溶液溶解，并稀釋至刻度，混勻，作為蜂蜜對照溶液。

對照品溶液的制備：取葡萄糖、果糖、蔗糖對照品各適量，加60%-75％乙醇溶液制成每1ml含葡萄糖、果糖和蔗糖各10mg的溶液，作為對照品溶液。

薄層層析：照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液各3-5μl、蜂蜜對照溶液3-5μl和對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠g（0.3m磷酸二氫鈉水溶液浸泡，0.4cm）薄層板上，以正丁醇∶甲醇∶丙酮∶水（10∶4∶8∶2.5）為展開劑，40℃展開，展距14cm，取出，晾干，噴以二苯胺－苯胺－磷酸－丙酮顯色劑，105℃加熱至顯色清晰，日光下檢視。

判斷方法：同實施例1，薄層層析圖如圖5所示。

實施例5

供試品溶液制備方法如下：取百部飲片和蜜炙飲片粗粉各0.5g，精密加入60%-75%濃度的乙醇溶液5ml，超聲處理10min，濾過，濾液置5ml量瓶中，加同樣濃度乙醇至刻度，搖勻即得。

蜂蜜對照溶液的制備：取蜂蜜0.5g，置25ml量瓶中，加60%-75%濃度乙醇溶液溶解，并稀釋至刻度，混勻，作為蜂蜜對照溶液。

對照品溶液的制備：取葡萄糖、果糖、蔗糖對照品各適量，加60%-75％乙醇溶液制成每1ml含葡萄糖、果糖和蔗糖各10mg的溶液，作為對照品溶液。

薄層層析：照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液各3-5μl、蜂蜜對照溶液3-5μl和對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠g（0.3m磷酸二氫鈉水溶液浸泡，0.4cm）薄層板上，以正丁醇∶甲醇∶丙酮∶水（10∶4∶8∶2.5）為展開劑，40℃展開，展距14cm，取出，晾干，噴以二苯胺－苯胺－磷酸－丙酮顯色劑，105℃加熱至顯色清晰，日光下檢視。

判斷方法：同實施例1，薄層層析圖如圖6所示。

由以上實施例及薄層層析圖可以看出，本發(fā)明提供的鑒別方法對各藥材的生品及蜜炙品可以很容易的鑒別各中藥材的生品、蜜炙品及偽蜜炙品，可以用于中藥材的生品、蜜炙品及偽蜜炙品的鑒別判斷。