本申請(qǐng)涉及分析儀器領(lǐng)域,特別涉及一種毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置。
背景技術(shù):
高效毛細(xì)管電泳是近年來發(fā)展最快的分析方法之一,具有分離效率高,分離速度快和樣品用量少等優(yōu)點(diǎn),在生命科學(xué)、藥物分析和環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用。由于hpce的有效體積和進(jìn)樣量小,對(duì)檢測(cè)器有特別高的要求,故檢測(cè)器是hpce發(fā)展的關(guān)鍵領(lǐng)域,其必須具有靈敏和響應(yīng)迅速的性能。目前應(yīng)用較多的檢測(cè)方法有紫外吸收、電化學(xué)、質(zhì)譜和熒光檢測(cè)等方法。熒光檢測(cè)作為一種高靈敏度、高選擇性的技術(shù),在微量和痕量樣品檢測(cè)中應(yīng)用非常廣泛,但現(xiàn)有檢測(cè)裝置結(jié)構(gòu)復(fù)雜、體積較大、成本較高、熒光收集效率有限。故此需要提出改進(jìn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的在于提供一種毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置,以克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足。
為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
本申請(qǐng)實(shí)施例公開了一種毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置,
包括毛細(xì)管電泳分離單元、光源發(fā)射單元、毛細(xì)管固定單元、熒光檢測(cè)單元、信號(hào)轉(zhuǎn)換器及數(shù)據(jù)處理單元;
所述毛細(xì)管電泳分離單元包括一毛細(xì)管、兩緩沖液瓶及一高壓電源,所述毛細(xì)管兩端分別連接于兩所述緩沖液瓶,所述高壓電源正負(fù)極分別連接正極鉑絲和負(fù)極鉑絲,所述正極鉑絲和負(fù)極鉑絲分別連接于兩所述緩沖液瓶;
所述光源發(fā)射單元組成包括激光光源、第一濾光片、二向色鏡及聚焦透鏡,所述激光光源與所述第一濾光片、二向色鏡依次共軸排列于同一行,連接所述負(fù)極鉑絲的緩沖液瓶與所述聚焦透鏡縱向垂直排列,所述二向色鏡一端向靠近所述激光光源的一側(cè)傾斜,所述二向色鏡與所述激光光源的發(fā)光方向呈45°夾角;
所述毛細(xì)管固定單元設(shè)置于所述負(fù)極鉑絲的正上方,所述毛細(xì)管可拆裝固定于所述毛細(xì)管固定單元,所述毛細(xì)管固定單元與所述聚焦透鏡、二向色鏡及熒光檢測(cè)單元依次共軸排列于同一列;
所述熒光檢測(cè)單元包括熒光探測(cè)元件和第二濾光片,所述第二濾光片和熒光探測(cè)元件依次設(shè)置于所述二向色鏡背離聚焦透鏡的一側(cè),所述第二濾光片和熒光探測(cè)元件與二向色鏡、聚焦透鏡共軸設(shè)置于同一列,所述熒光檢測(cè)單元與所述激光光源發(fā)光方向呈90°角垂直設(shè)置;
所述熒光探測(cè)元件連接于所述信號(hào)轉(zhuǎn)換器的信號(hào)輸入端,所述信號(hào)轉(zhuǎn)換器的信號(hào)輸出端連接于數(shù)據(jù)處理單元。
優(yōu)選的,在上述的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置中,所述毛細(xì)管為石英毛細(xì)管。
優(yōu)選的,在上述的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置中,所述高壓電源為可調(diào)穩(wěn)壓穩(wěn)流的高壓電源。
優(yōu)選的,在上述的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置中,所述緩沖液瓶?jī)?nèi)設(shè)有緩沖液。
優(yōu)選的,在上述的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置中,連接所述正極鉑絲的緩沖液瓶上方設(shè)有絕緣板,所述正極鉑絲和毛細(xì)管穿過所述絕緣板。
優(yōu)選的,在上述的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置中,該毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置還包括沖洗裝置。
優(yōu)選的,在上述的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置中,所述激光光源選用發(fā)光二極管。
優(yōu)選的,在上述的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置中,所述毛細(xì)管固定單元包括底板和壓板,所述底板和壓板通過螺絲可拆裝固定,所述壓板中心設(shè)有通孔,所述通孔正對(duì)所述二向色鏡中心,所述底板和壓板靠近所述毛細(xì)管的側(cè)面分別設(shè)有緩沖墊。
優(yōu)選的,在上述的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置中,所述熒光探測(cè)元件選用光電倍增管。
優(yōu)選的,在上述的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置中,所述光源發(fā)射單元、毛細(xì)管固定單元及熒光檢測(cè)單元設(shè)置于暗盒內(nèi)。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:該毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置操作簡(jiǎn)單,同時(shí)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、占用空間小,另外該裝置的零部件都為常用件,降低制造成本,最為重要的是具有高效快速分離和高靈敏檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)。
附圖說明
為了更清楚地說明本申請(qǐng)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案,下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹,顯而易見地,下面描述中的附圖僅僅是本申請(qǐng)中記載的一些實(shí)施例,對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講,在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下,還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
圖1所示為本發(fā)明具體實(shí)施例中毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2所示為本發(fā)明具體實(shí)施例中毛細(xì)管固定單元的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施方式
下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖,對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)的描述,顯然,所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例?;诒景l(fā)明中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所獲得的所有其他實(shí)施例,都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
參圖1和圖2所示,本實(shí)施例中的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置,包括毛細(xì)管電泳分離單元10、光源發(fā)射單元20、毛細(xì)管固定單元30、熒光檢測(cè)單元40、信號(hào)轉(zhuǎn)換器50及數(shù)據(jù)處理單元60;
毛細(xì)管電泳分離單元10包括一毛細(xì)管11、兩緩沖液瓶12及一高壓電源13,毛細(xì)管11兩端分別連接于兩緩沖液瓶12,高壓電源13正負(fù)極分別連接正極鉑絲14和負(fù)極鉑絲15,正極鉑絲14和負(fù)極鉑絲15分別連接于兩緩沖液瓶12;
光源發(fā)射單元20組成包括激光光源21、第一濾光片22、二向色鏡23及聚焦透鏡24,激光光源21與第一濾光片22、二向色鏡23依次共軸排列于同一行,連接負(fù)極鉑絲15的緩沖液瓶12與聚焦透鏡24縱向垂直排列,二向色鏡23一端向靠近激光光源21的一側(cè)傾斜,二向色鏡23與激光光源21的發(fā)射方向呈45°夾角;
毛細(xì)管固定單元30設(shè)置于負(fù)極鉑絲15的正上方,毛細(xì)管11可拆裝固定于毛細(xì)管固定單元30,毛細(xì)管固定單元30與聚焦透鏡24、二向色鏡23及熒光檢測(cè)單元40依次共軸排列于同一列;
熒光檢測(cè)單元40包括熒光探測(cè)元件41和第二濾光片42,第二濾光片42和熒光探測(cè)元件41依次設(shè)置于二向色鏡23背離聚焦透鏡24的一側(cè),第二濾光片42和熒光探測(cè)元件41與二向色鏡23、聚焦透鏡24共軸設(shè)置于同一列,熒光檢測(cè)單元40與激光光源21發(fā)光方向呈90°角垂直設(shè)置;
熒光探測(cè)元件41連接于信號(hào)轉(zhuǎn)換器50的信號(hào)輸入端,信號(hào)轉(zhuǎn)換器50的信號(hào)輸出端連接于數(shù)據(jù)處理單元60。
該技術(shù)方案中,高壓電源13正、負(fù)極可通過電纜引出,然后將正極鉑絲14和負(fù)極鉑絲15分別與對(duì)應(yīng)電纜連接,本毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置操作簡(jiǎn)單,同時(shí)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、占用空間小,另外該裝置的零部件都為常用件,降低制造成本,最為重要的是具有高效快速分離和高靈敏檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)。
進(jìn)一步地,毛細(xì)管11為石英毛細(xì)管。
該技術(shù)方案中,毛細(xì)管11為石英毛細(xì)管,石英為絕緣材質(zhì),同時(shí)石英毛細(xì)管具有高分離效率和分析速度,另外還具有柱容量小的優(yōu)勢(shì)。
進(jìn)一步地,高壓電源13為可調(diào)穩(wěn)壓穩(wěn)流的高壓電源。
該技術(shù)方案中,高壓電源13為可調(diào)穩(wěn)壓穩(wěn)流的高壓電源,通過改變高壓電源13輸出的電壓極性,可實(shí)現(xiàn)毛細(xì)管電泳的正、負(fù)分離模式。
進(jìn)一步地,緩沖液瓶12內(nèi)設(shè)有緩沖液,緩沖液可以是磷酸鹽緩沖液。
該技術(shù)方案中,緩沖液瓶12內(nèi)設(shè)有緩沖液,緩沖液可以是磷酸鹽緩沖液,還可以選用硼砂緩沖液等,緩沖液瓶12可直接放置,也可放置于專門的放置工裝等,放置工裝根據(jù)實(shí)際需要是多種多樣的。
進(jìn)一步地,正極鉑絲14的緩沖液瓶上方設(shè)有絕緣板16,正極鉑絲14和毛細(xì)管11穿過絕緣板16。
該技術(shù)方案中,正極鉑絲14的緩沖液瓶上方設(shè)有絕緣板16,正極鉑絲14和毛細(xì)管11穿過絕緣板16,以避免電泳過程中正極放電引發(fā)危險(xiǎn)。
進(jìn)一步地,該毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置還包括沖洗裝置。
該技術(shù)方案中,該毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置還包括沖洗裝置,可以直接選用現(xiàn)有的沖洗裝置,也可以直接使用注射器沖洗等沖洗裝置。
進(jìn)一步地,激光光源21選用發(fā)光二極管。
該技術(shù)方案中,激光光源21選用發(fā)光二極管,降低制造成本。
進(jìn)一步地,毛細(xì)管固定單元30包括底板31和壓板32,底板31和壓板32通過螺絲33可拆裝固定,壓板32中心設(shè)有通孔,通孔正對(duì)二向色鏡23中心,底板31和壓板32靠近毛細(xì)管11的側(cè)面分別設(shè)有緩沖墊。
該技術(shù)方案中,毛細(xì)管固定單元30包括底板31和壓板32,底板31和壓板32通過螺絲33可拆裝固定,壓板32中心設(shè)有通孔,通孔正對(duì)二向色鏡23中心,底板31和壓板32靠近毛細(xì)管11的側(cè)面分別設(shè)有緩沖墊,固定毛細(xì)管11的同時(shí)又避免損傷毛細(xì)管11。
進(jìn)一步地,熒光探測(cè)元件41選用光電倍增管。
該技術(shù)方案中,熒光探測(cè)元件41選用光電倍增管,擴(kuò)大檢測(cè)范圍,可以適應(yīng)各濃度生物樣品的分離檢測(cè)。
進(jìn)一步地,光源發(fā)射單元20、毛細(xì)管固定單元30及熒光檢測(cè)單元40設(shè)置于暗盒內(nèi)。
該技術(shù)方案中,光源發(fā)射單元20、毛細(xì)管固定單元30及熒光檢測(cè)單元40設(shè)置于暗盒內(nèi),從而有效地避免激光光源21所發(fā)出的光散射和外界雜散光對(duì)弱熒光的檢測(cè)所造成的干擾,顯著提高檢測(cè)的靈敏度。
檢測(cè)之前,讓帶有熒光物質(zhì)的樣品進(jìn)入毛細(xì)管,然后將毛細(xì)管的一端穿過絕緣板后插入緩沖液中,同時(shí)將毛細(xì)管的另一端插入另一緩沖液中,通過毛細(xì)管固定單元將毛細(xì)管完全固定,高壓電源提供高電壓,樣品內(nèi)的熒光物質(zhì)經(jīng)毛細(xì)管電泳分離到達(dá)壓板通孔處時(shí),激光光源發(fā)射出來的激光經(jīng)過第一濾光片過濾后到達(dá)二向色鏡,折射至聚焦透鏡后順利聚焦在通孔內(nèi),熒光物受聚焦的激光激發(fā)后發(fā)射出的熒光沿著聚焦透鏡直接通過二向色鏡,經(jīng)第二濾光片處理后被熒光探測(cè)元件采集,發(fā)射出的熒光經(jīng)光學(xué)元件處理后經(jīng)過信號(hào)轉(zhuǎn)換器記錄在數(shù)據(jù)處理單元中,進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和處理。
綜上所述,本新型毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)裝置操作簡(jiǎn)單,同時(shí)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、占用空間小,另外該裝置的零部件都為常用件,降低制造成本,最為重要的是具有高效快速分離和高靈敏檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)。
需要說明的是,在本文中,諸如第一和第二等之類的關(guān)系術(shù)語僅僅用來將一個(gè)實(shí)體或者操作與另一個(gè)實(shí)體或操作區(qū)分開來,而不一定要求或者暗示這些實(shí)體或操作之間存在任何這種實(shí)際的關(guān)系或者順序。而且,術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含,從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設(shè)備不僅包括那些要素,而且還包括沒有明確列出的其他要素,或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下,由語句“包括一個(gè)……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素。
以上所述僅是本申請(qǐng)的具體實(shí)施方式,應(yīng)當(dāng)指出,對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說,在不脫離本申請(qǐng)?jiān)淼那疤嵯?,還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾,這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本申請(qǐng)的保護(hù)范圍。