本發(fā)明屬于分析化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及種提升煙氣感官得分的香氣成分的檢測及判定方法。

背景技術(shù)：

酚類化合物是卷煙煙氣中一類重要物質(zhì)，與煙草的感官品質(zhì)密切相關(guān)，有些具有特定的香氣，有些則使煙氣增加奇異的味道，且不易被其他致香劑所減輕。酚類物質(zhì)在煙氣中有兩面性，一方面，低級(jí)酚如：苯酚、苯二酚、甲基苯酚等都有特殊的刺激性氣味，尤其對(duì)眼睛、呼吸道粘膜、皮膚等有強(qiáng)烈的刺激和腐蝕作用。另一方面，也認(rèn)為酚類物質(zhì)對(duì)煙草香氣也有好的影響，如：對(duì)甲基苯酚具澀味、2,6-二甲基苯酚具甜味、4-乙基愈創(chuàng)木酚具甜和香草味、丁子香酚具芳香和沉悶的味，以及苯酚具甜味和藥物氣味等。具有強(qiáng)烈的酚類如丁香酚、2-甲氧基-4-甲基-苯酚等，已作為香精中的重要配方之一。

5-甲基愈創(chuàng)木酚為葉片狀晶體，存在于香料煙煙葉、主流煙氣中，可用作香料原料。因此，研究吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量，尋找吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量與感官評(píng)價(jià)結(jié)果的關(guān)系對(duì)卷煙產(chǎn)品開發(fā)及維護(hù)具有重要的意義。

測定不同基質(zhì)、樣品中酚類物質(zhì)已有大量報(bào)道，前處理技術(shù)有液-液萃取、柱層析、衍生化等，前處理過程復(fù)雜繁瑣，且易造成酚類物質(zhì)的損失或受氧化變質(zhì)；酚類物質(zhì)常用的測定方法有氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、高效液相色譜法，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定酚類物質(zhì)易氧化或受熱分解，通常需要進(jìn)行衍生化處理，操作十分繁瑣，影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，常規(guī)的高效液相色譜法測定時(shí)，分離時(shí)間長，且前處理過程繁瑣。目前未見唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚測定方法的報(bào)道，唾液中的5-甲基愈創(chuàng)木酚含量低，因此，需要開發(fā)一種簡單快速、高靈敏度、定量準(zhǔn)確的唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的測定方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供了一種提升煙氣感官得分的香氣成分5-甲基愈創(chuàng)木酚的檢測及判定方法，用于唾液中提升煙氣感官得分的香氣成分5-甲基愈創(chuàng)木酚的檢測及判定，具有快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

一種提升煙氣感官得分的香氣成分5-甲基愈創(chuàng)木酚的檢測方法按以下進(jìn)行：用唾液收集管收集吸煙者唾液1~2ml，離心后，取0.5~1ml上層清液經(jīng)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀分析，根據(jù)組分峰面積定量，檢測5-甲基愈創(chuàng)木酚含量；

所述的液相色譜條件如下：色譜柱選用watersacquityuplchsst3柱(1.8μm，2.1×100mm)或等效柱，流動(dòng)相選用乙腈/0.5-1.0%的乙酸水溶液=15/85，柱溫30-39℃，流速0.1-0.6ml/min，進(jìn)樣量1~5μl。

所述的質(zhì)譜條件如下：離子源：電噴霧電離源（esi），掃描方式：正離子掃描，檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（mrm），電噴霧電壓：4000~4500v，離子源溫度：400~550℃，輔助氣gas1壓力：0.215~0.306mpa，輔助氣gas2壓力：0.325~0.416mpa；選擇離子監(jiān)測模式，離子選擇參數(shù)：5-甲基愈創(chuàng)木酚定量離子對(duì)為123.1/95.2，dp電壓為13~20v，ce電壓為9~13v，cxp電壓為1.1~1.3v；定性離子對(duì)為138.2/67.1，dp電壓為16~22v，ce電壓為13~18v，cxp電壓為1.3~1.5v。

一種提升煙氣感官得分的香氣成分5-甲基愈創(chuàng)木酚的判定方法：用相關(guān)性分析方法，分析吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量與感官評(píng)價(jià)結(jié)果的關(guān)系；用逐步回歸分析法分析吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量與感官得分之間的關(guān)系。

本發(fā)明的有益效果如下：

（1）、處理步驟簡單，只需樣品捕集、離心后即可進(jìn)樣分析，樣品中待測組分損失較少；

（2）、選擇性好，該方法采用串聯(lián)質(zhì)譜定量，減少了干擾離子，樣品分析選擇性得到了提高。

（3）、用唾液收集管收集1~2ml唾液易于保存和進(jìn)行前處理，液相色譜條件使5-甲基愈創(chuàng)木酚色譜峰保持最佳峰型且保證雜質(zhì)峰干擾最小，質(zhì)譜條件使5-甲基愈創(chuàng)木酚檢測的靈敏度達(dá)到最佳。

附圖說明

圖1為唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚與感官合計(jì)得分的回歸圖。

圖2是實(shí)施例1測定5-甲基愈創(chuàng)木酚的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜色譜圖（其中，保留時(shí)間為4.94min的色譜峰代表5-甲基愈創(chuàng)木酚）。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是對(duì)本發(fā)明一部分實(shí)例，而不是全部的實(shí)例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有付出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

實(shí)施例1

用唾液收集管收集吸煙者唾液2ml，離心后，取1ml上層清液經(jīng)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀分析，根據(jù)組分峰面積定量（外標(biāo)法定量），檢測5-甲基愈創(chuàng)木酚含量。

所述的液相色譜條件如下：色譜柱選用watersacquityuplchsst3柱(1.8μm，2.1×100mm)或等效柱，流動(dòng)相選用乙腈/0.5%的乙酸水溶液=15/85，柱溫39℃，流速0.6ml/min，進(jìn)樣量5μl。

所述的質(zhì)譜條件如下：離子源：電噴霧電離源（esi），掃描方式：正離子掃描，檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（mrm），電噴霧電壓：4500v，離子源溫度：550℃，輔助氣gas1壓力：0.306mpa，輔助氣gas2壓力：0.416mpa；選擇離子監(jiān)測模式，離子選擇參數(shù)：5-甲基愈創(chuàng)木酚定量離子對(duì)為123.1/95.2，dp電壓為20v，ce電壓為13v，cxp電壓為1.3v；定性離子對(duì)為138.2/67.1，dp電壓為22v，ce電壓為18v，cxp電壓為1.5v。

提升煙氣感官得分的香氣成分5-甲基愈創(chuàng)木酚的判定方法，用相關(guān)性分析方法，分析吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量與感官評(píng)價(jià)結(jié)果的關(guān)系；用逐步回歸分析法分析吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量與感官得分之間的關(guān)系。

按照上述方法，同一樣品5次平行測定，5-甲基愈創(chuàng)木酚含量的平均值為0.0110mg/l，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.35%。如表1所示。

表1卷煙樣品吸食者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚含量檢測結(jié)果

實(shí)施例2

用唾液收集管收集吸煙者唾液1ml，離心后，取0.5ml上層清液經(jīng)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀分析，根據(jù)組分峰面積定量（外標(biāo)法定量），檢測5-甲基愈創(chuàng)木酚含量。

所述的液相色譜條件如下：色譜柱選用watersacquityuplchsst3柱(1.8μm，2.1×100mm)或等效柱，流動(dòng)相選用乙腈/1.0%的乙酸水溶液=15/85，柱溫30℃，流速0.1ml/min，進(jìn)樣量1μl。

所述的質(zhì)譜條件如下：離子源：電噴霧電離源（esi），掃描方式：正離子掃描，檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（mrm），電噴霧電壓：4000v，離子源溫度：400℃，輔助氣gas1壓力：0.215mpa，輔助氣gas2壓力：0.325mpa；選擇離子監(jiān)測模式，離子選擇參數(shù)：5-甲基愈創(chuàng)木酚定量離子對(duì)為123.1/95.2，dp電壓為13v，ce電壓為9v，cxp電壓為1.1v；定性離子對(duì)為138.2/67.1，dp電壓為16v，ce電壓為13v，cxp電壓為1.3v。

提升煙氣感官得分的香氣成分5-甲基愈創(chuàng)木酚的判定方法：：用相關(guān)性分析方法，分析吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量與感官評(píng)價(jià)結(jié)果的關(guān)系；用逐步回歸分析法分析吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量與感官得分之間的關(guān)系。

按照上述方法，選擇5個(gè)樣品，每個(gè)樣品平行測定5次，每個(gè)樣品中5-甲基愈創(chuàng)木酚5次測定的平均含量和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果如表2所示。

表2不同卷煙樣品吸食者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚含量檢測結(jié)果

組織7名相關(guān)人員對(duì)樣品進(jìn)行感官評(píng)析，取7名人員評(píng)價(jià)的平均值，結(jié)果如下表3所示。

表3感官評(píng)價(jià)結(jié)果

用相關(guān)性分析方法，分析吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量與感官評(píng)價(jià)結(jié)果的關(guān)系，結(jié)果如表4所示，5-甲基愈創(chuàng)木酚與感官合計(jì)得分呈現(xiàn)顯著性(p<0.05)高度(|ρ|>0.7)正相關(guān)關(guān)系，說明隨著唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚含量的增加，感官合計(jì)得分會(huì)呈現(xiàn)隨之升高的趨勢(shì)。

表4唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚與感官得分的相關(guān)系數(shù)信息

用逐步回歸分析法分析吸煙者唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚的含量與感官合計(jì)得分之間的關(guān)系，得到的回歸模型r²為0.8343，模型p<0.05，即發(fā)現(xiàn)5-甲基愈創(chuàng)木酚的變化對(duì)感官合計(jì)得分具有顯著的貢獻(xiàn)，結(jié)果如表5和圖1所示。

表5唾液中5-甲基愈創(chuàng)木酚與感官得分的逐步回歸分析信息