本發(fā)明涉及到檢測領(lǐng)域，特別涉及到一種動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法。
背景技術(shù)：
：我國農(nóng)業(yè)部在2003年(265)號公告中明文規(guī)定，不得使用列為禁用的獸藥。但事實(shí)上，養(yǎng)殖戶為了追求最大的經(jīng)濟(jì)效益，將禁用藥物當(dāng)作添加劑使用的現(xiàn)象相當(dāng)普遍，如飼料中添加鹽酸克侖特羅(瘦肉精)引起的豬肉中毒事件和運(yùn)動(dòng)員誤服興奮劑事件等。現(xiàn)有的動(dòng)物源食品中磺胺類，甲氧芐氨嘧啶，磺胺氯吡嗪，喹諾酮類和金剛烷胺獸藥殘留的國標(biāo)方法分別為：gb/t20759-2006，gb/t21316-2007，gb/t22951-2008，gb/t20366-2006，db212394-2014。以上五種傳統(tǒng)的測試方法需要依照標(biāo)準(zhǔn)方法分別采用了不同的前處理過程和不同檢測設(shè)備和條件，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，延長了測試周期，減低本企業(yè)在測試行業(yè)中的競爭力，對本企業(yè)的持續(xù)發(fā)展造成阻礙。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的主要目的為提供一種動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，以解決在同事測試多種獸藥殘留時(shí)耗時(shí)過長，測試步驟過多的問題。本發(fā)明提出一種動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，包括步驟：獲取指定質(zhì)量的樣品；將指定質(zhì)量的樣品與第一指定量的提取劑混合，得到混合液；將上述混合液進(jìn)行分離處理，得到分離液；對上述分離液進(jìn)行固相萃取處理并收集流出液；在指定溫度下對上述流出液進(jìn)行氮吹處理，加入定容劑進(jìn)行定容；過濾；檢測濾液中的獸藥含留量。進(jìn)一步地，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述將上述混合液進(jìn)行分離處理的步驟包括步驟，將上述混合液，進(jìn)行漩渦分散處理；進(jìn)行超聲提取，并持續(xù)第一指定時(shí)間；在指定轉(zhuǎn)速下進(jìn)行離心分離，并持續(xù)第二指定時(shí)間。進(jìn)一步地，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述指定轉(zhuǎn)速包括10000rpm-20000rpm之間。進(jìn)一步地，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述在指定溫度下進(jìn)行氮吹處理，加入定容劑進(jìn)行定容的步驟之前，還包括步驟：取第二指定量的上述流出液，并放入氮吹管中。進(jìn)一步地，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述過濾步驟為超濾。進(jìn)一步地，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述檢測濾液中的獸藥含留量的步驟包括：利用lc-ms/ms分析儀檢測濾液中的獸藥含留量。進(jìn)一步地，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述提取劑包括二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、二氯乙烷、氯乙烷、氯丙烷和氯丁烷中的一種，或水和乙腈的混合液。進(jìn)一步地，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述水和乙腈的混合液中水和乙腈的質(zhì)量比在1:1-10之間。進(jìn)一步地，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述定容劑包括甲醇、乙醇、丙醇、乙二醇和甘油中的一種與水的混合液。進(jìn)一步地，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述指定溫度包括15℃-55℃之間。本發(fā)明的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，與現(xiàn)有的檢測技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)主要體現(xiàn)在：解決傳統(tǒng)方法需要重復(fù)前處理的不必要操作，簡化了前處理的流程，減輕了相關(guān)人員的工作量，提高人員的效率；解決原有動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留測試重復(fù)儀器測定的狀況，提高了儀器的檢測效率；降低成本，比傳統(tǒng)方法節(jié)省5倍以上；減少有機(jī)溶劑的使用量，減少排放，有益環(huán)保。附圖說明圖1為本發(fā)明一實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的流程示意圖；圖2為本發(fā)明一實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的流程示意圖；圖3為本發(fā)明一具體實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的鹽酸克侖特羅(瘦肉精)含量示意圖；圖4為本發(fā)明一具體實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的沙丁胺醇含量示意圖；圖5為本發(fā)明一具體實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的環(huán)丙沙星含量示意圖；圖6為本發(fā)明一具體實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的恩諾沙星含量示意圖；圖7為本發(fā)明一具體實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的伊諾沙星含量示意圖；圖8為本發(fā)明一具體實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的洛美沙星含量示意圖；圖9為本發(fā)明一具體實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的諾氟沙星含量示意圖；圖10為本發(fā)明一具體實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的氧氟沙星含量示意圖；圖11為本發(fā)明一具體實(shí)施例的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法的培氟沙星含量示意圖。本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)、功能特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn)將結(jié)合實(shí)施例，參照附圖做進(jìn)一步說明。具體實(shí)施方式下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明的一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。另外，在本發(fā)明中涉及“第一”、“第二”等的描述僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示其相對重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隱含地包括至少一個(gè)該特征。另外，各個(gè)實(shí)施例之間的技術(shù)方案可以相互結(jié)合，但是必須是以本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)為基礎(chǔ)，當(dāng)技術(shù)方案的結(jié)合出現(xiàn)相互矛盾或無法實(shí)現(xiàn)時(shí)應(yīng)當(dāng)認(rèn)為這種技術(shù)方案的結(jié)合不存在，也不在本發(fā)明要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。參照圖1，在本發(fā)明實(shí)施例中，本發(fā)明提供一種動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，包括步驟：s1、獲取指定質(zhì)量的樣品；s2、將指定質(zhì)量的樣品與第一指定量的提取劑混合，得到混合液；s3、將上述混合液進(jìn)行分離處理，得到分離液；s4、對上述分離液進(jìn)行固相萃取處理并收集流出液；s5、在指定溫度下對上述流出液進(jìn)行氮吹處理，加入定容劑進(jìn)行定容；s6、過濾；s7、檢測濾液中的獸藥含留量。上述步驟s1，為取樣步驟，一般為從目標(biāo)物中提取少量目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行檢測的重要步驟之一，其具有在不影響目標(biāo)物的主要性質(zhì)的前提下，獲得目標(biāo)物進(jìn)行測試得到各項(xiàng)數(shù)據(jù)的有效途徑之一，被測物提取量需足夠進(jìn)行3-5次測試，取樣時(shí)對被測物的取樣區(qū)域選擇過程要求具有隨機(jī)性，不可在選擇過程中摻雜主觀性選擇，在本發(fā)明實(shí)施例中，取樣重量一般為0.5g-10g，優(yōu)選為3g-6g。上述步驟s2-s6，為預(yù)處理步驟，一般為對目標(biāo)物的在進(jìn)行有效工序前的除雜提純等目的的步驟，在某些特殊實(shí)驗(yàn)中預(yù)處理步驟還包括改變物質(zhì)性質(zhì)等目的。上述步驟s3，為檢測步驟，一般為對進(jìn)行上述取樣和預(yù)處理步驟后的目標(biāo)物進(jìn)行指定的實(shí)驗(yàn)或檢測步驟，一般獲得直接數(shù)據(jù)或間接數(shù)據(jù)，其中，直接數(shù)據(jù)即為改數(shù)據(jù)直接為檢測目標(biāo)數(shù)值或結(jié)果的數(shù)據(jù)；間接數(shù)據(jù)為需通過對應(yīng)的計(jì)算、替換或?qū)Ρ群蟛诺玫侥繕?biāo)數(shù)值或結(jié)果的數(shù)據(jù)，檢測結(jié)果一般根據(jù)檢測設(shè)備、環(huán)境、預(yù)處理步驟和輔助品的偏差存在偏差值，其中預(yù)處理和輔助品差異在制定檢測標(biāo)準(zhǔn)后，可以相應(yīng)的有效避免其所帶來的誤差幅度。如上述步驟s1，獲取指定質(zhì)量的樣品，一般為1g-10g，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為3g-6g，一般獲取時(shí)在待測物上進(jìn)行隨機(jī)取點(diǎn)獲取樣品。如上述步驟s2，將指定質(zhì)量的樣品與第一指定量的提取劑混合，得到混合液，其中，上述樣品的指定質(zhì)量一般為一般為1g-10g，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為3g-6g；緩慢將指定質(zhì)量的樣品與第一指定量的提取劑混合，在混合過程中可進(jìn)行適當(dāng)?shù)臄嚢杌驌u晃，其中，上述提取劑一般為二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、二氯乙烷、氯乙烷、氯丙烷和氯丁烷中的一種，或水和乙腈的混合液，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選使用水和乙腈的混合液，且上述水和乙腈的混合液的混合質(zhì)量比例一般為1：10，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為1:2-6之間，上述指定量一般為5.00ml-40.00ml之間，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為7ml-15ml之間，其中，在混合后在本發(fā)明實(shí)施例中，一般還會將樣品與上述提取劑混合液進(jìn)行漩渦分散處理，其中，上述旋渦分散處理過程一般持續(xù)1-20分鐘，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為持續(xù)3-5分鐘；在進(jìn)行旋渦分散后，在本發(fā)明實(shí)施例中，一般還會進(jìn)行超聲提取處理，并持續(xù)一定時(shí)間，其中，在上述超聲波提取過程中，上述超聲波提取器提供的超聲波頻率一般在20khz-80khz之間，優(yōu)選的超聲波頻率在20khz-50khz之間，在超聲波功率一般在100w-800w之間，優(yōu)選的超聲波功率在100w-500w之間，上述超聲波提取過程所持續(xù)時(shí)間一般在1-20分鐘之間，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為1-10分鐘。如上述步驟s3，將上述混合液進(jìn)行分離處理，得到分離液，上述分離處理中，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選使用離心分離機(jī)進(jìn)行上述分離處理過程，其中，在該過程中上述離心分離機(jī)的轉(zhuǎn)速一般為10000rpm-20000rpm之間，其中，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為10000rpm-15000rpm之間；上述離心分離機(jī)的運(yùn)作時(shí)間一般在1-20分鐘之間，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為1-10分鐘。如上述步驟s4，對上述分離液進(jìn)行固相萃取處理并收集流出液，其中，在上述萃取處理過程中，使用固相萃取柱進(jìn)行，固相萃取柱(英文,簡稱specolumn，或solidphaseextractioncartridges，簡稱specartridges)是從層析柱發(fā)展而來的一種用于萃取、分離、濃縮的樣品前處理裝置。主要應(yīng)用于各種食品、農(nóng)畜產(chǎn)品、環(huán)境樣品以及生物樣品中目標(biāo)化合物的樣品前處理。固相萃取技術(shù)已經(jīng)被廣泛地使用在許多國標(biāo)(gb/t)以及行業(yè)分析標(biāo)準(zhǔn)中。spe技術(shù)基于液-固相色譜理論，采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對樣品進(jìn)行富集、分離、凈化，是一種包括液相和固相物理萃取過程；也可以將其近似地看作一種簡單的色譜過程。spe是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品溶液通過吸附劑，保留其中被測物質(zhì)，再選用適當(dāng)強(qiáng)度溶劑沖去雜質(zhì)，然后用少量溶劑迅速洗脫被測物質(zhì)，從而達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質(zhì)，而讓被測物質(zhì)流出；或同時(shí)吸附雜質(zhì)和被測物質(zhì)，再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測物質(zhì)。如上述步驟s5，在指定溫度下，取一定量的上述流出液進(jìn)行氮吹處理，氮吹后加入定容劑進(jìn)行定容，其中，上述指定溫度括15℃-55℃之間，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為20℃-50℃之間，提取上述流出液的量一般在1ml-10ml之間，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為3ml-6ml之間，上述氮吹處理過程一般持續(xù)至上述流出液體積下降至2ml以下，優(yōu)選下降至1ml以下，上述定容劑一般包括水和甲醇的混合液、甲醇、乙醇、丙醇、乙二醇、純凈水和甘油中的一種，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選使用水和甲醇的混合液；上述水和甲醇的混合液的混合質(zhì)量比例一般為1：10，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為1:2-6之間，上述定容體積一般為1ml-3ml，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為1ml-1.5ml。如上述步驟s6，過濾，在本發(fā)明實(shí)施例中，上述過濾過程優(yōu)選為超濾，其中，在發(fā)明實(shí)施例中，所使用的超濾膜優(yōu)選為孔徑為0.22μm的親水ptfe超濾膜。如上述步驟s7，檢測濾液中的獸藥含留量，在上述檢測濾液中的獸藥含留量的步驟中，一般利用gc-ms(氣相色譜-質(zhì)譜)分析儀、lc-ms(液相色譜-質(zhì)譜)分析儀或lc-ms/ms(液相二級質(zhì)譜)分析儀檢測濾液中的獸藥含留量，在發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選使用lc-ms/ms分析儀檢測。在本實(shí)施例中，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述將上述混合液進(jìn)行分離處理的步驟包括步驟，s31、將上述混合液，進(jìn)行漩渦分散處理；s32、進(jìn)行超聲提取，并持續(xù)第一指定時(shí)間；s33、在指定轉(zhuǎn)速下進(jìn)行離心分離，并持續(xù)第二指定時(shí)間。如上述步驟s31，將上述混合液，進(jìn)行漩渦分散處理，將樣品與上述提取劑混合液進(jìn)行漩渦分散處理，其中，上述旋渦分散處理過程一般持續(xù)1-20分鐘，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為持續(xù)。如上述步驟s32，進(jìn)行超聲提取，并持續(xù)第一指定時(shí)間，其中，在上述超聲波提取過程中，上述超聲波提取器提供的超聲波頻率一般在20khz-80khz之間，優(yōu)選的超聲波頻率在20khz-50khz之間，在超聲波功率一般在100w-800w之間，優(yōu)選的超聲波功率在100w-500w之間，上述第一指定時(shí)間一般在1-20分鐘之間，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為1-10分鐘。如上述步驟s33，在指定轉(zhuǎn)速下進(jìn)行離心分離，并持續(xù)第二指定時(shí)間，上述離心分離步驟中，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選使用離心分離機(jī)進(jìn)行上述分離處理過程，其中，在上述離心分離過程中上述離心分離機(jī)的轉(zhuǎn)速一般為10000rpm-20000rpm之間，其中，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為10000rpm-15000rpm之間；上述第二指定時(shí)間一般在1-20分鐘之間，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為1-10分鐘。在本實(shí)施例中，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述指定轉(zhuǎn)速包括10000rpm-20000rpm之間。在本實(shí)施例中，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述在指定溫度下進(jìn)行氮吹處理，加入定容劑進(jìn)行定容的步驟之前，還包括步驟：s8、取第二指定量的上述流出液，并放入氮吹管中。如上述步驟s8，取第二指定量的上述流出液，并放入氮吹管中，其中，上述第二指定量一般為1ml-10ml之間，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為3ml-6ml之間，上述氮吹管優(yōu)選為玻璃氮吹管。在本實(shí)施例中，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述過濾步驟為超濾，其中，在發(fā)明實(shí)施例中，所使用的超濾膜優(yōu)選為孔徑為0.22μm的親水ptfe超濾膜。在本實(shí)施例中，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述檢測濾液中的獸藥含留量的步驟包括：s71、利用lc-ms/ms分析儀檢測濾液中的獸藥含留量。如上述步驟s71，利用gc-ms分析儀、lc-ms分析儀或lc-ms/ms分析儀檢測濾液中的獸藥含留量，在發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選使用lc-ms/ms檢測，其中，檢測條件在本發(fā)明實(shí)施例中優(yōu)選為：離子源：esi檢測方式：mrm離子源溫度：150℃電噴霧電壓：2.0kv脫溶劑氣流量：1000l/hr色譜柱：c18柱(poroshell100mm×4.6mm，4μm)或相當(dāng)者柱溫：30℃流速：0.3ml/min進(jìn)樣量：10μl流動(dòng)相：a為0.5％的甲酸水、b為含0.5％的甲酸乙腈梯度洗脫程序：時(shí)間(min)a％b％0.0090103.0090103.1060406.0060406.10010010.00010010.00901018.009010表1在本實(shí)施例中，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上上述提取劑包括二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、二氯乙烷、氯乙烷、氯丙烷和氯丁烷中的一種，或水和乙腈的混合液，其中，在發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選使用水和乙腈的混合液。在本實(shí)施例中，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述水和乙腈混合液中水和乙腈的質(zhì)量比在1:1-10之間，其中，在發(fā)明實(shí)施例中，水和乙腈的質(zhì)量比優(yōu)選1:2-6之間。在本實(shí)施例中，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述定容劑包括甲醇、乙醇、丙醇、乙二醇和甘油中的一種與水的混合液，其中，在發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選使用水和甲醇的混合液，且上述水和甲醇的混合液中水和甲醇的質(zhì)量比在1:1-10之間，其中，在發(fā)明實(shí)施例中，水和甲醇的質(zhì)量比優(yōu)選1:2-6之間。在本實(shí)施例中，上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法，上述第二指定溫度包括15℃-55℃之間，在本發(fā)明實(shí)施例中，優(yōu)選為30℃-45℃之間。參照圖3-11，在以具體實(shí)施例中，使用上述的動(dòng)物源食品中多種獸藥殘留量的檢測方法對已通過加標(biāo)(加標(biāo)量1ng/ml)的對動(dòng)物源食品進(jìn)行測試，加標(biāo)物為鹽酸克侖特羅(瘦肉精)；沙丁胺醇；環(huán)丙沙星；恩諾沙星；伊諾沙星；洛美沙星；諾氟沙星；氧氟沙星；培氟沙星。在上述檢測方法過程中，檢測儀器工作條件為：離子源：esi檢測方式：mrm離子源溫度：150℃電噴霧電壓：2.0kv脫溶劑氣流量：1000l/hr色譜柱：c18柱(poroshell150mm×4.6mm，4μm)或相當(dāng)者柱溫：30℃流速：0.3ml/min進(jìn)樣量：10μl流動(dòng)相：a為0.5％的甲酸水、b為含0.5％的甲酸乙腈梯度洗脫程序：時(shí)間(min)a％b％0.0090103.0090103.1060406.0060406.10010010.00010010.00901018.009010表2從檢測結(jié)果可以看出上述鹽酸克侖特羅(瘦肉精)；沙丁胺醇；環(huán)丙沙星；恩諾沙星；伊諾沙星；洛美沙星；諾氟沙星；氧氟沙星；培氟沙星的回收率均在60％-120％之內(nèi)，回收率良好。以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書及附圖內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)的
技術(shù)領(lǐng)域：
，均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁12