本發(fā)明涉及一種酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：人們擅長利用色素改善食品的感官品質(zhì)，鮮艷的色澤不僅賦予人視覺的愉悅感，還可增進(jìn)食欲，然而某些非食用色素卻因其價格低廉、著色力強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點開始流入食品生產(chǎn)線，近年來，食品安全問題風(fēng)波不斷，化學(xué)添加劑超標(biāo)或者質(zhì)量等問題的頻頻發(fā)生，造成了重大人身傷亡和財產(chǎn)損失，危害了人們的身心健康，使得食品安全問題愈加成為了全社會關(guān)注的熱點，因此，防止食品污染，控制食品質(zhì)量是預(yù)防疾病、保障人民身體健康的重要措施。對于某個樣品中某種物質(zhì)含量的檢測多需要標(biāo)準(zhǔn)品作為對照，目前我國也已經(jīng)研制出用于檢測食品色素類(如日落黃、莧菜紅、檸檬黃、胭脂紅、誘惑紅)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，然而，酸性橙ⅱ違禁著色劑的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制還處于空白階段。國內(nèi)食品檢測行業(yè)大都使用國外的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)品，這些標(biāo)準(zhǔn)品不僅價格昂貴，采購周期長，而且大都不具溯源性，無法有效實現(xiàn)對檢測方法的驗證和檢測結(jié)果的仲裁。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問題，提供一種酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備方法。本發(fā)明的第二個目的是提供上述制備方法獲得的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。本發(fā)明的第三個目的是提供一種可用于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的酸性橙ⅱ溶液。本發(fā)明的第四個目的是提供一種上述方法獲得的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制體系。本發(fā)明的第五個目的是提供上述方法獲得的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的應(yīng)用。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)的：一種酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備方法，以體積比為2～3：1的乙醇-水溶液作為溶劑溶解原料酸性橙ⅱ，加熱80℃～100℃使其溶解后，分次加入體積比為1：1的乙醇-水溶液，同時不斷攪拌，持續(xù)保溫在95℃～105℃，熱過濾后，將濾液冷卻室溫，隨后放置4℃的條件下進(jìn)行重結(jié)晶，結(jié)晶體過濾后，置于105℃條件下干燥，經(jīng)研磨過篩，混勻、干燥后即得酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。本發(fā)明的研究路線為：提純或合成對人體有重要危害的食品色素，研制純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)溶液。采用色譜法對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的純度和含量進(jìn)行定值。在測量中，所有使用的儀器、器皿均校準(zhǔn)，保證測量每個環(huán)節(jié)都可以不間斷的溯源到國際單位制。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)通常要求高純度，其組成和化學(xué)式高度一致且化學(xué)穩(wěn)定，由于對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的這種嚴(yán)格要求，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備一般需要在高度受控的條件下制造，以達(dá)到這種高純度，并盡可能的避免所含雜質(zhì)對后續(xù)測定的影響，因此標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備(包括提純步驟)要比常規(guī)化學(xué)試劑的制備要復(fù)雜的多，本發(fā)明針對酸性橙ⅱ的物理和化學(xué)性質(zhì)，研究出酸性橙ⅱ的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備方法，該方法制備得到的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的純度高，且化學(xué)、物理性質(zhì)穩(wěn)定。在一些實施方式中，上述制備方法中溶解原料酸性橙ⅱ時，乙醇-水溶液的體積比為3：1。在一些實施方式中，上述制備方法中，持續(xù)保溫的時間為0.3h～0.5h。在一些實施方式中，上述制備方法中，重結(jié)晶的時間為8h～12h。本發(fā)明還提供一種可用于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的酸性橙ⅱ溶液，是由上述任一種制備方法獲得的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制得。本發(fā)明還提供一種由上述制備方法獲得的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制體系，其特征在于，包括標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的均勻性檢驗、穩(wěn)定性檢驗、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值、定值數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析和不確定度分析的過程。在一些實施方式中，穩(wěn)定性檢驗分長期穩(wěn)定性檢驗和短期穩(wěn)定性檢驗，所述長期穩(wěn)定性檢驗是檢驗酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在儲存條件下為期30個月的穩(wěn)定性；所述短期穩(wěn)定性是檢驗酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在溫度為55℃～65℃的運輸條件下為期一周的穩(wěn)定性。在一些實施方式中，不確定度分析包括定值實驗引入的不確定度、酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不均勻產(chǎn)生的不確定度和酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不穩(wěn)定產(chǎn)生的不確定度；所述定值實驗引入的不確定度是由聯(lián)合定值產(chǎn)生的不確定度及水分和殘渣實驗引入的不確定度。作為一種優(yōu)選的實施方式，該研制體系包括：(1)均勻性檢驗：對于有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來說，保證物質(zhì)的均勻性是非常重要的。為確保質(zhì)量，提高效率，避免浪費，成批制備的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物在分裝成小包裝前一般要進(jìn)行均勻性初檢。均勻性初檢的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是：抽取單元數(shù)、取樣部位、測量方法、最小取樣量。隨機(jī)抽取一定數(shù)量的樣品，采用精密度高的試驗方法進(jìn)行測定，通過統(tǒng)計學(xué)方法分析確定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是否均勻。(2)穩(wěn)定性檢驗：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性是指被定值的特性量隨時間變化的情況，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性受物理、化學(xué)和保存條件等因素的影響。穩(wěn)定性考察需定期進(jìn)行待定特性量值的穩(wěn)定性檢驗，時間間隔一般按照“先密后疏”的原則安排。酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性分長期穩(wěn)定性和短期穩(wěn)定性兩部分。長期穩(wěn)定性是儲存條件下進(jìn)行為期30個月的穩(wěn)定性實驗，短期穩(wěn)定性是模擬南方高溫(55℃～65℃)運輸條件下為期一周的穩(wěn)定性考察。(3)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值：定值測量是給標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)賦值的過程，也是標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定過程中的一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)。根據(jù)酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的理化性質(zhì)和分析方法，選取8家實驗室聯(lián)合定值的方法，對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值，并對8家實驗室的數(shù)據(jù)采用狄克遜準(zhǔn)則和格拉布斯準(zhǔn)則對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行可疑值分析。(4)定值數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析：采用統(tǒng)計學(xué)的方法對測量數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，若檢驗結(jié)果認(rèn)為有顯著性差異，則檢查測量方法、測量條件及操作過程，并重新進(jìn)行測定。數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析分別采用了方差分析、回歸分析、狄克遜準(zhǔn)則和格拉布斯準(zhǔn)則可疑值分析法等。(5)不確定度分析：根據(jù)《jjg1006-94一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范》和iso導(dǎo)則35的規(guī)定對研究過程中產(chǎn)生的不確定度，進(jìn)行不確定度分析，完成相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度報告。不確定度來源主要有：第一部分是定值實驗引入的不確定度；第二部分是樣品(即酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))不均勻產(chǎn)生的不確定度；第三部分是樣品(即酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))不穩(wěn)定產(chǎn)生的不確定度。定值實驗引入的不確定度，即由聯(lián)合定值產(chǎn)生的不確定度及水分和殘渣實驗引入的不確定度。本發(fā)明還提供上述制備方法獲得的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的應(yīng)用。本發(fā)明還提供上述制備方法獲得的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在檢測酸性橙ⅱ中的應(yīng)用。具體的可以是利用本發(fā)明所述方法制備得到的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檢測食品、藥品或化妝品等體系中的酸性橙ⅱ。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明以重結(jié)晶的方法提純獲得酸性橙ⅱ的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，并對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行定值，即首次以國際計量等效一致的技術(shù)研制了酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其獲得的酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度為1％；該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制免于國內(nèi)檢測技術(shù)人員向國外進(jìn)口酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)品所帶來的價格高和采購周期長的問題，且可用于檢測食品或化妝品或藥物等體系中酸性橙ⅱ的加入量，從而保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性。利用本發(fā)明方法制備得到的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制出標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)體系，填補(bǔ)國內(nèi)空白，建立測量過程的量值傳遞體系，為食品安全檢測和監(jiān)督管理提供重要的技術(shù)支撐。附圖說明圖1為本發(fā)明實施方式中食品中色素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制路線圖；圖2為制備得到的酸性橙ⅱ的液相色譜圖；圖3為制備得到的酸性橙ii純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的紅外譜圖；圖4為sdbs圖庫中查找的酸性橙ii標(biāo)準(zhǔn)紅外譜圖；圖5為制備得到的酸性橙ii的高分辨率質(zhì)譜圖；圖6為酸性橙ii的質(zhì)譜檢索結(jié)果。具體實施方式下面結(jié)合說明書附圖和具體實施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下例實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照本領(lǐng)域常規(guī)條件或按照制造廠商建議的條件。除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的意義相同。實施例1酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備：以乙醇-水(體積比為3：1)溶液為溶劑，在電熱板上加熱到80℃使其溶解后，再分次加入乙醇-水溶液，每次添加時乙醇和水的體積比為1：1，并不斷攪拌，保溫20min，熱過濾，冷卻至室溫，4℃的條件下重結(jié)晶8h，過濾后干燥，經(jīng)研磨過篩，混勻后即得候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。一、候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的純度采用液相色譜面積歸一化法對候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)主成分進(jìn)行純度分析，液相色譜圖如圖2所示，結(jié)果表明：酸性橙ⅱ的純度為99.6％。同時也對酸性橙ⅱ的水分和殘渣進(jìn)行了分析，通過測試得到水分和殘渣分別為0.19％、0.23％。因液相色譜法法定值酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)要考慮樣品水分和殘渣的影響，因而該方法定值的純度：二、候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)鑒定將純化后酸性橙ⅱ純度物質(zhì)進(jìn)行紅外分析、高分辨率質(zhì)譜等實驗。得到紅外譜圖(圖3)與標(biāo)準(zhǔn)紅外譜圖(圖4)，高分辨率質(zhì)譜(圖5)與檢索結(jié)果(圖6)，由對比圖得出結(jié)論：純化后的酸性橙ⅱ純度物質(zhì)紅外譜圖與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對比一致，判斷主成分為酸性橙ⅱ；高分辨率質(zhì)譜檢索匹配度為94.81％，證明純度物質(zhì)確為酸性橙ⅱ。三、候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值實驗(1)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值除了發(fā)明人對所對制備得到的候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行定值，還選擇能力相當(dāng)?shù)膶嶒炇覅f(xié)助定值，每家實驗室儀器使用前均通過法定計量機(jī)構(gòu)檢定合格，各個實驗室從全部樣品中隨機(jī)抽取3個包裝，從每瓶中任意取出1～3個子樣，用色譜級甲醇當(dāng)溶劑配制測試液，使用液相色譜法測量酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。8家實驗室定值的實驗結(jié)果列于表1中。表1酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)聯(lián)合定值結(jié)果采用拉依達(dá)準(zhǔn)則分析上述數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)無可疑數(shù)據(jù)。因此，采用8家實驗室的總平均值作為聯(lián)合定值的結(jié)果?？偲骄等缦拢何覀儾捎玫铱诉d準(zhǔn)則和格拉布斯準(zhǔn)則對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行可疑值分析，未發(fā)現(xiàn)可疑值。具體分析過程如下：1.采用狄克遜(dixon)準(zhǔn)則根據(jù)表1數(shù)據(jù)，按從小到大排列：99.12<99.42<99.55<99.59<99.61<99.62<99.91<99.95因n＝8，則r8＜r1，r1＜d(a,n)，查表得d(a,n)＝0.608說明該組數(shù)據(jù)無異常值。2.采用格拉布斯準(zhǔn)則判別算數(shù)平均值：計算實驗標(biāo)準(zhǔn)偏差：s＝0.263計算各殘差為：-0.01，-0.48，0.01，0.35，-0.05，0.31，-0.18，查格拉布斯準(zhǔn)則臨界值：g(0.05，8)＝2.032因此，說明無異常值。(2)均勻性檢驗參照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范，分別從已經(jīng)分裝好并編上號碼的酸性橙ⅱ純度樣品中按照頭尾、中間編號各隨機(jī)抽取15瓶樣品。準(zhǔn)確稱量抽取的樣品約10mg，配制成溶液，采用液相色譜-面積歸一化法，具體條件：采用液相色譜dad檢測器，色譜柱為c18(5.0μm，4.6mm*250mm)柱或同類柱子，甲醇和0.02mol/l的乙酸銨為流動相，配比為85：15，流速為1.0ml/min，檢測波長為485nm。測定純度，每瓶樣品平行進(jìn)樣3次，每次測量的平均值作為均勻性評價的結(jié)果，然后對其進(jìn)行方差分析。所用儀器和量具，先都進(jìn)行檢定，確認(rèn)儀器處在正常的工作狀態(tài)，并保證儀器和量具測量的溯源性。表2酸性橙ⅱ的均勻性檢驗結(jié)果表3酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均勻性結(jié)果方差分析由表中數(shù)據(jù)可得：fα(ν1,ν2)＝2.037,α＝0.05f<fα表明樣品間不存在明顯差異。方法測量的標(biāo)準(zhǔn)偏差：從計算可以看出：酸性橙ⅱ純度樣品測量結(jié)果的統(tǒng)計量f值小于均勻性檢驗臨界值fα：2.037，證明該酸性橙ⅱ純度樣品是均勻的。(3)穩(wěn)定性檢驗標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性是指被定值的特性量隨時間變化的情況，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性受物理、化學(xué)和保存條件等因素的影響。需要用精密度高的分析方法對其進(jìn)行長時間的定期考察來確定相對的穩(wěn)定期限。本項目依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范，本著前緊后疏的原則，對酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)穩(wěn)定性進(jìn)行了長期穩(wěn)定性和短期穩(wěn)定性考察。考察穩(wěn)定性采用液相色譜法，應(yīng)用面積歸一化法，在不同的時間間隔內(nèi)進(jìn)行比對測量。短期穩(wěn)定性是指在運輸條件下標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在運輸過程中的穩(wěn)定性。為了考察運輸條件對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性影響，并綜合考慮到南方的高溫天氣，我們模擬了運輸條件，隨機(jī)抽取6瓶樣品，分別置于運輸條件下((60±5)℃))(培養(yǎng)箱中)和常規(guī)儲存條件下((4±1)℃)保存一個星期，對比兩種不同條件對其穩(wěn)定性影響(以測量溫度60℃為例)。通過長期穩(wěn)定性和短期穩(wěn)定性實驗，考察酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性狀態(tài)，數(shù)據(jù)及分析結(jié)果列于表4～7。表4酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)長期穩(wěn)定性實驗數(shù)據(jù)表5酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)長期穩(wěn)定性實驗數(shù)據(jù)方差分析結(jié)果自由度ssmsf值sig.f回歸分析19.43e-069.43e-060.0010.989殘差50.2380.048總計60.238表6酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)長期穩(wěn)定性實驗數(shù)據(jù)的回歸分析結(jié)果由于沒有一種物理/化學(xué)模型能夠真實地描述該候選標(biāo)準(zhǔn)樣品的降解機(jī)理，故采用直線作為經(jīng)驗?zāi)Ｐ?，以x代表時間，以y代表酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的值，擬合成一條直線，則直線的斜率為：式中：截距由下式計算：直線上的點的標(biāo)準(zhǔn)偏差由下式計算：取其平方根s＝0.2182％，斜率的不確定度為：自由度f＝n-2＝4和p＝0.95(95％置信水平)的t分布因子等于2.78。由于|b1|＜t0.95,n-2·s(b1)，故斜率是不顯著的。因而未觀測到不穩(wěn)定性，即表明在30個月內(nèi)，該回歸是不顯著的(sig.f＝0.3567>0.05)，即酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值沒有發(fā)生明顯的趨勢性變化，這說明我們所采取的儲存條件有效地保證了酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量值的穩(wěn)定性。表7酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)短期穩(wěn)定性實驗數(shù)據(jù)(60℃)日期常規(guī)儲存條件下運輸條件下2015.7.2399.5999.562015.7.2499.6499.682015.7.2599.6899.702015.7.2699.5899.512015.7.2999.6199.57sig.f0.860.64對兩種條件下的測量數(shù)據(jù)進(jìn)行同樣的統(tǒng)計分析，發(fā)現(xiàn)兩種條件下標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量值沒有發(fā)生顯著變化。通過長期穩(wěn)定性和短期穩(wěn)定性考察，在穩(wěn)定期為30個月內(nèi)，酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)穩(wěn)定性良好，量值沒有發(fā)生明顯變化，本發(fā)明制備得到的候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在儲存條件和運輸條件下很好地保證了穩(wěn)定性。(4)不確定度分析根據(jù)《jjg1006-94一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范》和iso導(dǎo)則35的規(guī)定對研究過程中產(chǎn)生的不確定度，進(jìn)行不確定度分析，完成相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度報告。不確定度來源主要有：第一部分是定值實驗引入的不確定度；第二部分是樣品(即酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))不均勻產(chǎn)生的不確定度；第三部分是樣品(即酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))不穩(wěn)定產(chǎn)生的不確定度。定值實驗引入的不確定度，即由聯(lián)合定值產(chǎn)生的不確定度及水分和殘渣實驗引入的不確定度。4.1定值實驗引入的不確定度，即由聯(lián)合定值產(chǎn)生的不確定度及水分和殘渣實驗引入的不確定度4.1.1聯(lián)合定值引入的不確定度(u聯(lián)合)根據(jù)iso導(dǎo)則35，多家實驗室協(xié)作定值的不確定度可采用方差分析來進(jìn)行估算。定值結(jié)果單因素方差分析得到的結(jié)果列于表8和表9。表8由表1的數(shù)據(jù)得到的單因素方差分析結(jié)果組觀測數(shù)求和平均方差實驗室13298.7899.591.23e-03實驗室23297.3599.120.016實驗室33298.8399.610.017實驗室43299.8699.953.33e-05實驗室53298.6499.550.011實驗室63299.7399.911e-04實驗室73298.2699.420.019實驗室83298.8699.621.3e-04表9由表1的數(shù)據(jù)得到的單因素方差分析結(jié)果差異源ssdfmsfp-valuefcrit組間1.47170.21025.881.38e-072.657組內(nèi)0.130160.008總計1.60023總平均值的不確定度如下計算：4.1.2水分測試引入的不確定度根據(jù)水分測量的數(shù)據(jù)，測定的r＝0.13％，n＝6(查表c＝2.53)，采用極差法計算水分引入的不確定度分量為：4.1.3殘渣測試引入的不確定度(u殘渣)根據(jù)殘渣測量的數(shù)據(jù)，測定的r＝0.15％，n＝6(查表c＝2.53)，采用極差法計算殘渣引入的不確定度分量為：u殘渣＝r/c＝0.06％4.1.4定值引入總的不確定度(u定值)4.2均勻性產(chǎn)生的標(biāo)準(zhǔn)不確定度(ubb)均勻性采用酸性橙ⅱ的純度為比較參數(shù)(數(shù)據(jù)見表2)由均勻性部分計算結(jié)果可知，樣品瓶間不均勻性所產(chǎn)生的標(biāo)準(zhǔn)偏差必須并入到總的不確定度中。因此，樣品間不均勻的標(biāo)準(zhǔn)偏差：ubb≈0.0673％4.3穩(wěn)定性引入的不確定度(uits)根據(jù)酸性橙ⅱ長期穩(wěn)定性的實驗數(shù)據(jù)(表4及回歸方差結(jié)果(表5、6)可知分由穩(wěn)定性結(jié)果分析可知，有效期t＝30個月的長期穩(wěn)定性的不確定度貢獻(xiàn)即為：uits＝sb·t＝8.1×10-3×30＝0.243％4.4標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)總的不確定度擴(kuò)展不確定度：u95＝k×u總＝2×0.282％＝0.56％≈1.0％酸性橙ⅱ純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值結(jié)果為:w＝(99.2±1.0)％，k＝2。其結(jié)果表明：本實施例制備得到的候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定為1％。實施例2酸性橙ⅱ標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備：以乙醇-水(體積比為3：1)溶液為溶劑，在電熱板上加熱到90℃使其溶解后，再分次加入乙醇-水溶液，每次添加時乙醇和水的體積比為1：1，并不斷攪拌，保溫30min，熱過濾，4℃的條件下重結(jié)晶12h，過濾后干燥，經(jīng)研磨過篩，混勻后即得候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。以上所述的僅是本發(fā)明的一些實施方式。對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明創(chuàng)造構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁12